Name: vascular casting of adult and early postnatal mouse lungs for micro-ct imaging
Uploaded: 2020-06-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging at JoVE.com

מחקר זה נתמך בחלקו על ידי תוכנית המחקר התוך-תוך-ממורלית של NHLBI (DIR HL-006247). ברצוננו להודות למתקן ההדמיה של עכבר NIH על הדרכה ברכישת תמונה וניתוח.

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ושימוש (ACUC) של המכון הלאומי לריאות ודם בלב.
1. הכנה
<ol><li>להזריק את העכבר תוך-אפרטינולי עם הפרין (1 יחידה / גרם משקל גוף העכבר) ולאפשר לו ambulate במשך 2 דקות.</li>
	<li>להמתת לחיות בתאדו-קומתי 2.</li>
	<li>מסדרים את העכ?...

שיטה זו, המבוצעת כראוי, מניבה תמונות מרשימות של רשתות עורקים ריאתיות, ומאפשרת השוואה וניסויים במודלים של מכרסמים. מספר צעדים קריטיים לאורך הדרך מבטיחים הצלחה. ראשית, על החוקרים לתפור את החיה בשלב ההכנה כדי למנוע מקרישי דם להיווצר בכלי הדם הריאות ותאי הלב. זה מאפשר את המעבר העורקי המלא של תר...

המוקד של טכניקה זו הוא הדמיה של ארכיטקטורת עורקים ריאתי באמצעות תרכובת פולימר מבוסס בעכברים. בעוד עבודה נרחבת בוצעה על מיטות כלי דם מערכתיות כגון מוח, לב, וכליה1,,2,,3,,4,,5 , פחות מידעזמיןלגבי הכנה ומילוי של רשת עורקים ריאתית. מטרת מחקר זה, אם כן, היא להרחיב עלעבודה קודמת 6,7,8ולספק התייחסות כתובהוחזותית מפורטת כי החוקרים יכולים בקלות לעקוב כדי לייצר תמונות ברזולוציה גבוהה של עץ עורקי הריאה.
בעוד שיטות רבות קיימות עבור תיוג והדמיה כלי דם ריאות, כגון הדמיית תהודה מגנטית, אקוקרדיוגרפיה, או ANgiography CT9,10, רבים של שיטות אלה להיכשל למלא כראוי ו / או ללכוד את כלי קטן, הגבלת היקף מה ניתן ללמוד. שיטות כגון מקטעים טוריים ושחזור מספקים רזולוציה גבוהה אך הם זמן / עבודהאינטנסיבית 11,12,13. שלמות הרקמה הרכה שמסביב נפגעת בליהוק קורוזיהמסורתי 10,,13,,14,,15,,16. אפילו גיל וגודל בעלי חיים הופכים לגורמים כאשר מנסים להציג צנתר או, הרזולוציה היא חסרה. טכניקת הזרקת פולימר, מצד שני, ממלאת עורקים לרמת ניים ובשילוב עם μCT, מאפשרת רזולוציה שאין שני לה5. דגימות מריאות העכבר צעיר כמו יום לאחר הלידה 14 כבר יצוק בהצלחה8 ומעובד בעניין של שעות. אלה ניתן לסרוק מחדש ללא הגבלת זמן, או אפילו נשלח למיקרוסקופי הכנה היסטולוגית / אלקטרונים (EM) מבלי להתפשר על הרקמה הרכה הקיימת17. המגבלות העיקריות לשיטה זו הן העלות מראש של ציוד/תוכנה CT, אתגרים עם ניטור מדויק של לחץ תוך-וסקולרי, ועם חוסר היכולת לרכוש נתונים באופן אורכי באותה חיה.
נייר זה מתבסס על עבודה קיימת כדי לייעל עוד יותר את טכניקת הזרקת עורק הריאה ולדחוף את הגבולות הקשורים לגיל/גודל עד ליום שלאחר הלידה 1 (P1) כדי להניב תוצאות מרשימות. זה שימושי ביותר עבור צוותים שרוצים ללמוד רשתות כלי דם עורקיים. בהתאם לכך, אנו מספקים הדרכה חדשה למיקום/ייצוב של צנתר, שליטה מוגברת על קצב מילוי/נפח, ומדגישים חסרונות בולטים להצלחה מוגברת בליהוק. לאחר מכן ניתן להשתמש בשחקנים כתוצאה מכך לאפיון עתידי וניתוח מורפורולוגי. אולי חשוב מכך, זוהי ההדגמה החזותית הראשונה, למיטב ידיעתנו, שהולכת את המשתמש בהליך המורכב הזה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:829px;" width="828">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">1cc syringe</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">309659</td>
			<td style="width:346px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">20ml Glass Scintillation Vials</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td>03-340-25P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">30G Needle</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">50mL conical tubes</td>
			<td style="width:135px;">Cornin</td>
			<td style="width:117px;">352098</td>
			<td>For sample Storage and scanning</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">60cc syringe</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">7-0 silk suture</td>
			<td style="width:135px;">Teleflex</td>
			<td style="width:117px;">103-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Analyze 12.0 Software</td>
			<td style="width:135px;">AnalyzeDirect Inc.</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Primary Software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Amira 6.7 Software</td>
			<td style="width:135px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Alternative Sofware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">CeramaCut Scissors 9cm</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">14958-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ceramic Coated Curved Forceps</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11272-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">CO2 Tank</td>
			<td style="width:135px;">Robert&#39;s Oxygen Co.</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dual syringe pump</td>
			<td style="width:135px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:117px;">EW-74900-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dumont Mini-Forceps</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11200-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ethanol</td>
			<td style="width:135px;">Pharmco</td>
			<td style="width:117px;">111000200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Formalin</td>
			<td style="width:135px;">Sigma - Life Sciences</td>
			<td style="width:117px;">HT501128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Gauze</td>
			<td style="width:135px;">Covidien</td>
			<td style="width:117px;">441215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:22px;width:231px;">Hemostat</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">13013-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:231px;">Heparin (1000USP Units/ml)</td>
			<td style="width:135px;">Hospira</td>
			<td style="width:117px;">NDC 0409-2720-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:231px;">Horos Software</td>
			<td style="width:135px;">Horos Project</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Alternative Sofware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">induction chamber</td>
			<td style="width:135px;">n/a</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Kimwipe</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">06-666</td>
			<td>fiber optic cleaning wipe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Labelling Tape</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">15966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Magnetic Base</td>
			<td style="width:135px;">Kanetec</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Micro-CT system</td>
			<td style="width:135px;">SkyScan&#160;</td>
			<td style="width:117px;">1172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Microfil (Polymer Compound)</td>
			<td style="width:135px;">Flowech Inc.</td>
			<td style="width:117px;">Kit B - MV-122</td>
			<td>8 oz. of MV compound; 8 oz. of diluent; MV-Curing Agent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:135px;">Stoelting</td>
			<td style="width:117px;">56131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Monoject 1/2 ml Insulin Syringe</td>
			<td style="width:135px;">Covidien</td>
			<td style="width:117px;">1188528012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Octagon Forceps Straight Teeth</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11042-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Parafilm</td>
			<td style="width:135px;">Bemis company, Inc.</td>
			<td style="width:117px;">#PM999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">PE-10 tubing</td>
			<td style="width:135px;">Instech</td>
			<td style="width:117px;">BTPE-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Phospahte buffered Saline</td>
			<td style="width:135px;">BioRad</td>
			<td style="width:117px;">#161-0780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ring Stand</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">S13747</td>
			<td>Height 24in.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Sodium Nitroprusside</td>
			<td style="width:135px;">sigma</td>
			<td style="width:117px;">71778-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Steel Plate</td>
			<td style="width:135px;">N/A</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>16 x 16 in. area, 1/16 in thick</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:231px;">Straight Spring Scissors</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">SURFLO 24G Teflon I.V. Catheter</td>
			<td style="width:135px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:117px;">360103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Surgical Board</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td>12-587-20</td>
			<td>This is a converted slide holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Universal 3-prong clamp</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">S24280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Winged Inf. Set 25X3/4, 12&#34; Tubing</td>
			<td style="width:135px;">Nipro</td>
			<td style="width:117px;">PR25G19</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Zeiss Stemi-508 Dissection Scope</td>
			<td style="width:135px;">Zeiss</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

vascular casting of adult and early postnatal mouse lungs for micro-ct imaging

כלי דם יוצרים רשתות מורכבות בחלל תלת מימדי. כתוצאה מכך, קשה להעריך חזותית כיצד רשתות כלי דם אינטראקציה ולהתנהג על ידי התבוננות על פני השטח של רקמה. שיטה זו מספקת אמצעי לדמיין את ארכיטקטורת כלי הדם התלת מימדית המורכבת של הריאה.
כדי להשיג זאת, צנתר מוכנס לתוך עורק הריאה ואת כלי הדם הוא שטף בו זמנית של דם ומורחב כימית כדי להגביל את ההתנגדות. הריאות מתנפחות לאחר מכן דרך קנה הנשימה בלחץ סטנדרטי, תרכובת הפולימר חדורת לתוך מיטת כלי הדם בקצב זרימה סטנדרטי. לאחר כל רשת העורקים מתמלאת ומותר לרפא, כלי הדם של הריאות עשוי להיות חזותי ישירות או בתמונה על סורק מיקרו CT (μCT).
כאשר מבוצע בהצלחה, אפשר להעריך את רשת עורקים ריאתי בעכברים החל בגילים שלאחר הלידה מוקדם למבוגרים. בנוסף, בעוד הפגינו במיטת עורקים ריאתי, שיטה זו יכולה להיות מיושמת על כל מיטה כלי דם עם מיקום צנתר אופטימיזציה ונקודות קצה.

צוות שחקנים מוצלח יציג מילוי אחיד של כל רשת עורקי הריאות. אנו מדגימים זאת בעכברים C57Bl/6J הנעים בגיל: P90 יום לאחר הלידה (איור 4A), P30 (איור 4B), P7 (איור 4C), ו P1 (איור 4D). על ידי שליטה בקצב הזרימה וניטור חזותי של המילוי בז...

Watch this Scientific Journal Video about Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging at JoVE.com

Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging

המטרה של טכניקה זו היא הדמיה ex vivo של רשתות עורקים ריאתיים של עכברים פוסט לידתיים ומבוגרים מוקדם באמצעות אינפלציה ריאות והזרקה של תרכובת פולימר אטומה רדיו באמצעות עורק הריאה. יישומים פוטנציאליים עבור רקמות יצוקות נדונים גם.

יציקת כלי דם של ריאות עכבר מבוגר ומוקדם לאחר הלידה עבור הדמיית מיקרו-CT

Blood vessels form intricate networks in 3-dimensional space. Consequently, it is difficult to visually appreciate how vascular networks interact and ...

פרוטוקול זה נותן הדרכה מדויקת, צעד אחר צעד, ליציקת כלי הדם העורקיים הריאה בעכברים בוגרים ותחילת לידה. טכניקה זו מאפשרת למשתמשים ללהק באופן מלא את כל רשת כלי הדם להדמיה במגוון שיטות, כולל מיקרו-CT, תוך שמירה על שלמות הרקמות הרכות. טכניקה זו שימושית במיוחד להתבוננות במורפולוגיה ואדריכלות של כלי דם ריאתי, אך ניתן להתאים אותה בקלות לפילוח של מיטות כלי דם אחרות.כמו ניתוחים וניתוחים רבים, אין תחליף למעשה לדמיין הליך, והצופים עשויים להפיק תועלת מלראות כמה מהתמרונים המאתגרים יותר מבוצעים. לאחר תהליך xiphoid נחשף, בעדינות לתפוס ולרומם את כלוב הצלעות. בזהירות לעשות חתך בסרעפת חשופה עכשיו, שקוף למחצה.הריאות יתמוטטו בעליל, ויתרחקו מהסרעפת. לאחר חשיפת הריאה וקנה הנשימה, חוט 15 ס"מ של צינורות PE10 על הרכזת של מחט 30-מד. ולצרף יחידה זו למזרק מיליליטר אחד, המכיל 10 עד 4 טוחן של נתרן nitroprusside, ב PBS.קדם את הבוכנה כדי להפוך את הצינורות עד שכל האוויר כבר מטוהר. כחלופה יעילה לטקסט, לחדור את פסוק הלב בצד אחד, ולהעביר את קצות מדפים מעוגלים דרך השריר, ואת הצד השני של הרקמה. לתפוס קצה אחד של אורך 10 ס"מ של משי 7-0, ולמשוך כשני סנטימטרים דרך הרקמה.לאחר קשירת התפר, השתמש בשמונה ס"מ הנותרים של תפר כדי למשוך את הלב באופן סיבתי. ותדביק את קצה התפר ללוח הניתוחים. וו את קצות מדפים מעוגלים תחת הן את העורקים העולים ואת תא המטען של עורק הריאה.ולמשוך אורך של 3 ס"מ של משי 7-0 בחזרה דרך הפתח כדי ליצור תפר רופף חד פעמי. השתמש במספריים כדי לבצע חתך של 1-2 מ"מ לכיוון עלות הלב, חדירה החדר הימני דק הקירות. והכניסו את הצינורות ההפוכים לחדר הימני, והתקדמו בעדינות את הקטטר לתוך תא המטען הדק למחצה של עורק התריאה.ודא חזותית כי הקטטר לא התקדם לענפי הריאה השמאליים או הימניים, ואינו עולה על נקודת ענף עורק הריאה. מדביקים את החלק הדיסטלי של הצינור ללוח הניתוחי, ומהדקים בעדינות את התפר הרופף סביב שני הכלים הגדולים. חותכים את חתיכת התפר באורך שמונה ס"מ כדי להחזיר את הלב למצב מנוחה טבעי.ולגזור את הנביאה השמאלית של הלב כדי לאפשר לתוספות לצאת מהסקגולטורה. לאחר מכן, השתמש במשאבת מזרק, כדי להחדיר את הנתרן nitroprusside בקצב זרימה של 0.5 מיליליטר / דקה הן לשטוף את הדם, כדי להחדיר את כלי הדם באופן מקסימלי, עד perfusate פועל ברור. כדי לבנות את יחידת אינפלציית הריאות, לחתוך את קטטר פלסטיק גמיש 24-מד תוך וריד מהאמבטיה ולהתחבר המחט של ערכת עירוי פרפר.צרף יחידה זו ל stopcock, ולצרף את stopcock למזרק פתוח 50 מיליליטר. לאחר טעינת המזרק עם פורמלין ו priming קטטר, עם stopcock סגור, למקם את המזרק בעמדת טבעת, עד לנקודה שבה המניסקוס הוא 20 ס"מ מעל קנה הנשימה. מניחים שני תפרים רופפים, שניים עד ארבעה מילימטרים זה מזה, נחותים מהסחוס העריסה, ולהשתמש במספריים כדי לבצע חתך קטן ברצועה cricothyroid, מעולה על התפרים.מכניסים את הקטטר לתוך הפתח, ומקדמות את הקצה מעבר לשני התפרים הרופפים. הדק את התפרים סביב קנה הנשימה, ולפתוח את stopcock כדי לאפשר את הפורמלין להיכנס לריאות על ידי כוח הכבידה. חכה חמש דקות עד שהריאות יתנפחו לגמרי.אם הריאות נצמדות לכלוב הצלעות במהלך האינפלציה, השתמש במטסים קהים כדי לתפוס את החלק החיצוני של כלוב הצלעות, והזז את הצלעות לכל הכיוונים כדי לסייע בהפצת האונות מבלי ליצור מגע ישיר עם הריאות. לאחר חמש דקות, לסגת קטטר מאחורי התפר הראשון ligate. ואז לסגת קטטר מאחורי התפר השני ligate.הריאות צריכות כעת להיות מנופחות במצב סגור, בלחץ. כדי להטיל את כלי הדם, לטעון מיליליטר אחד של פתרון 8-1-1 של חומר ריפוי פולימרי diluent לתוך מזרק מיליליטר אחד. ולהכניס בזהירות את הבוכנה.עם המזרק הפוך, לדכא את הבוכנה כדי להסיר את האוויר, ולאפשר היווצרות של מניסקוס בקצה המזרק. הסר את מזרק nitroprusside נתרן מהרכזת של המחט, ולטפטף תוספת PBS לתוך הרכזת, כדי ליצור מניסקוס. הצטרפו למזרק הפולימר-תרכובת לרכזת, והתחל את העירוי ב-0.02 מילימטרים לדקה.לפקח על התרכובת כפי שהוא נע בחופשיות דרך צינורות, ונוי על נפח המזרק כפי שהוא נכנס תא המטען של עורק הריאה. המשיכו בשפע עד שכל האונות יתמלאו לחלוטין, עד לכלי הקטן ביותר. עצור את המשאבה, ושוב, שים לב לנפח המזרק.מכסים את הריאות עם ניגוב ניקוי סיבים אופטיים, ולהחיל בנדיבות PBS. אפשר לדגימה לשבת באין מפריע במשך 30 עד 40 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר תרכובת הפולימר נרפא והוקשח, לנתק את הגפיים ואת החצי התחתון של העכבר.ומקום את הראש ואת בית החזה לתוך חרוט 50 מיליליטר מלא 10% פורמלין במאגר, לילה. למחרת בבוקר, לתפוס את קנה הנשימה להפריד בעדינות את הלב ואת יחידת הריאות מכלוב הצלעות הנותרים ואת בית החזה. מניחים את בלוק הרקמות שנקטפו בבקבוקון נבל מלא פורמלין.גבס מוצלח יגרום למילוי אחיד של כל רשת עורקי הריאה. אם יש נזק לדרכי הנשימה של הריאה או הריאות, דליפות קטנות ימנעו מהריאות להחזיק בלחץ. מילוי מטושטש או לא שלם יכול לנבוע מנעל אוויר כתוצאה מהכנסת האוויר למערכת כלי הדם באמצעות הקטטר, חסימת זרימת במורד הזרם של המתחם.Underfilling מתרחשת כאשר תרכובת קטנה מדי הוא הציג לתוך כלי הדם. לחלופין, מילוי יתר, או החדרת יותר מדי תרכובת פולימר מהר מדי, יכול לגרום לקרע עורקי, או, בדרך כלל, מעבר ורדם. קידום הקטטר רחוק מדי במורד תא המטען הריאה יכול לגרום לקצה להיתקע לענף עורק ריאתי אחד, ליצור חוסר איזון בזרימה, ולגרום לצד אחד להתמלא מהר יותר מהשני.ביצועים זהירים של הטכניקה כפי שהוכח, באמצעות ניטור ישיר המתאים של נקודות קצה כלי דם דיסטליים, שיעורי עירוי סטנדרטי יכול לגרום למילוי אופטימלי של כלי דם ריאתי. יתר על כן, התאמת טכניקה זו כלי הדם המערכתיים יכול להניב תוצאות חיוביות באותה מידה במיטות כלי דם אחרים. לאחר הליהוק, ניתן לעבד דגימות לסריקת טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת.לעיבוד שלאחר עיבוד, חבילת תוכנה מסחרית יכולה לשמש ליצירת עיבוד נפח תלת-ממדי של עץ כלי הדם הריאה. כאשר מנסים טכניקה זו בפעם הראשונה, להיות זהיר במיוחד סביב הריאות שביר, ואת עורק הריאה. והכי חשוב, הימנע החדרת אוויר לתוך מעגל כלי הדם.לאחר גבס מוצלח, ניתן לסרוק דגימה באמצעות מיקרו-CT, ו ניתן לחקור שאלות הקשורות למורפומטריה ואדריכלות של כלי הדם.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Organotypic Slice Cultures for Studies of Postnatal Neurogenesis

תרבויות Organotypic Slice ללימודים של אחרי לידה נוירוגנזה

Here we describe a technique for studying hippocampal postnatal neurogenesis in the rodent brain using the organotypic slice culture technique. This ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

שיטות להעברת לוקליזציה דווקא של תאים או DNA לPostimplantation המוקדם עכבר עוברים

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Assessment of Maternal Vascular Remodeling During Pregnancy in the Mouse Uterus

הערכה של כלי דם אימהי שיפוץ במהלך ההריון ברחם העכבר

The placenta mediates the exchange of factors such as gases and nutrients between mother and fetus and has specific demands for supply of blood from the ...

Loss- and Gain-of-function Approach to Investigate Early Cell Fate Determinants in Preimplantation Mouse Embryos

Loss- ו-של-פונקצית רווח גישה לחקר תא מוקדם קובעי גורל preimplantation עכבר עובר

 Gene silencing and overexpression techniques are instrumental for the identification of genes involved in embryonic development. Direct target gene ...

Imaging Cleared Embryonic and Postnatal Hearts at Single-cell Resolution

הדמיה הותרה עוברית ולבבות אחרי לידה ברזולוצית תא בודד

Single clonal tracing and analysis at the whole-heart level can determine cardiac progenitor cell behavior and differentiation during cardiac development, ...

Analysis of Retinoic Acid-induced Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Two and Three-dimensional Embryoid Bodies

ניתוח של החומצה הרטינואית המושרה בידול עצבית של תאי גזע עובריים עכבר בשניים ובשלושה-ממדי גופים Embryoid

Mouse embryonic stem cells (ESCs) isolated from the inner mass of the blastocyst (typically at day E3.5), can be used as in vitro model system for ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

הדמיה חיה של עכבר משניים פיוז &#39;ן

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

שימוש הרומן של בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה תלת מימדי אפיון בתחילת ההריון העכבר

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Visualization of Cellular Electrical Activity in Zebrafish Early Embryos and Tumors

ויזואליזציה של הפעילות החשמלית הסלולר עוברי מוקדם דג זברה, גידולים

Bioelectricity, endogenous electrical signaling mediated by ion channels and pumps located on the cell membrane, plays important roles in signaling ...