Name: vascular casting of adult and early postnatal mouse lungs for micro-ct imaging
Uploaded: 2020-06-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging at JoVE.com

Bu araştırma kısmen NHLBI İntramural Araştırma Programı (DIR HL-006247) tarafından desteklenmiştir. Görüntü edinimi ve analizinde rehberlik için NIH Mouse Görüntüleme Tesisi'ne teşekkür ederiz.

Burada açıklanan tüm yöntemler Ulusal Kalp Akciğer ve Kan Enstitüsü Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (ACUC) tarafından onaylanmıştır.
1. Hazırlık
<ol><li>Fareyi intraperitoneally heparin (1 birim/g fare vücut ağırlığı) ile enjekte edin ve 2 dakika boyunca ambulamasını bekleyin.</li>
	<li>Co2 odasında hayvan ötenazi.</li>
	<li>Bir cerrahi tahta üzerinde bir supine pozisyonda fare düzenleyin ve bant ile tahtaya dört uzuvları güvenli. İnce dis...

Düzgün bir şekilde yürütülen bu yöntem, pulmoner arterağlarının çarpıcı görüntülerini vererek kemirgen modellerinde karşılaştırma ve deney emaresi sağlar. Yol boyunca birkaç kritik adım başarıyı sağlar. İlk olarak, müfettişler akciğer vaskülatür ve kalp odalarında oluşan kan pıhtıları önlemek için hazırlık aşamasında hayvan heparinize gerekir. Bu polimer bileşiğin tam arteriyel transit sağlar. İkinci olarak, diyafram delinme ve göğüs kafesi çıkarmadan, yanlışlıkla h...

Bu tekniğin odak noktası farelerde polimer bazlı bir bileşik kullanılarak pulmoner arter mimarisinin görselleştirilmesidir. Beyin, kalp ve böbrek1,2,,3,4,5gibi sistemik vasküler yataklarda kapsamlı çalışmalar yapılırken, pulmoner arter ağının hazırlanması ve doldurulması ile ilgili daha az bilgi mevcuttur. Bu çalışmanın amacı, bu nedenle, önceki çalışma6üzerine genişletmek için,7,8 ve araştırmacılar kolayca pulmoner arter ağacının yüksek çözünürlüklü görüntüleri üretmek için takip edebilirsiniz ayrıntılı bir yazılı ve görsel referans sağlamaktır.
Manyetik rezonans görüntüleme, ekokardiyografi veya BT anjiyografi9,,10gibi akciğer vaskülatürünün etiketlenmesi ve görüntülenmesi için çok sayıda yöntem mevcut olmakla birlikte, bu yöntemlerin çoğu küçük damarları yeterince doldurup/veya yakalayamamaktadır, incelenebilenin kapsamını sınırlandırmaktadır. Seri kesit ve rekonstrüksiyon gibi yöntemler yüksek çözünürlük sağlar, ancak zaman/emek yoğun11,12,13. Çevreleyen yumuşak doku bütünlüğü geleneksel korozyon döküm10,13,,14,15,16tehlikeye girer. Hatta hayvan yaşı ve boyutu bir kateter tanıtmak için çalışırken faktörler haline ya da, çözünürlük eksiktir. Polimer enjeksiyon tekniği, diğer taraftan, kapiller seviyesine arterler doldurur ve μCT ile kombine edildiğinde, benzersiz çözünürlüksağlar 5. Doğum sonrası 14.8 Bunlar süresiz olarak yeniden taranabilir, hatta mevcut yumuşak doku17ödün vermeden histolojik hazırlık / elektron mikroskobu (EM) için gönderilebilir. Bu yöntemin ana sınırlamaları CT ekipman / yazılım ön maliyet, doğru intravasküler basınç izleme ile zorluklar, ve aynı hayvan uzunlamasına veri elde etmek için yetersizlik vardır.
Bu makale, pulmoner arter enjeksiyon tekniğini daha da optimize etmek ve yaş/boyutla ilgili sınırları doğum sonrası 1 (P1) gününe kadar itmek ve çarpıcı sonuçlar elde etmek için mevcut çalışmalara dayanmaktadır. Arteriyel damar ağlarını incelemek isteyen ekipler için en yararlıdır. Buna göre, kateter yerleştirme/stabilizasyonu, dolgu hızı/hacmi üzerinde daha fazla kontrol sağlamakta ve artan döküm başarısı için önemli tuzakları vurgulamaktadırk. Elde çıkan dökümler daha sonra gelecekteki karakterizasyon ve morfolojik analiz için kullanılabilir. Belki de daha da önemlisi, bu ilk görsel gösteri, bizim bilgimize göre, bu karmaşık prosedür ile kullanıcı yürür.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:829px;" width="828">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">1cc syringe</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">309659</td>
			<td style="width:346px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">20ml Glass Scintillation Vials</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td>03-340-25P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">30G Needle</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">50mL conical tubes</td>
			<td style="width:135px;">Cornin</td>
			<td style="width:117px;">352098</td>
			<td>For sample Storage and scanning</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">60cc syringe</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">7-0 silk suture</td>
			<td style="width:135px;">Teleflex</td>
			<td style="width:117px;">103-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Analyze 12.0 Software</td>
			<td style="width:135px;">AnalyzeDirect Inc.</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Primary Software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Amira 6.7 Software</td>
			<td style="width:135px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Alternative Sofware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">CeramaCut Scissors 9cm</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">14958-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ceramic Coated Curved Forceps</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11272-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">CO2 Tank</td>
			<td style="width:135px;">Robert&#39;s Oxygen Co.</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dual syringe pump</td>
			<td style="width:135px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:117px;">EW-74900-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dumont Mini-Forceps</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11200-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ethanol</td>
			<td style="width:135px;">Pharmco</td>
			<td style="width:117px;">111000200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Formalin</td>
			<td style="width:135px;">Sigma - Life Sciences</td>
			<td style="width:117px;">HT501128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Gauze</td>
			<td style="width:135px;">Covidien</td>
			<td style="width:117px;">441215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:22px;width:231px;">Hemostat</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">13013-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:231px;">Heparin (1000USP Units/ml)</td>
			<td style="width:135px;">Hospira</td>
			<td style="width:117px;">NDC 0409-2720-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:231px;">Horos Software</td>
			<td style="width:135px;">Horos Project</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Alternative Sofware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">induction chamber</td>
			<td style="width:135px;">n/a</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Kimwipe</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">06-666</td>
			<td>fiber optic cleaning wipe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Labelling Tape</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">15966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Magnetic Base</td>
			<td style="width:135px;">Kanetec</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Micro-CT system</td>
			<td style="width:135px;">SkyScan&#160;</td>
			<td style="width:117px;">1172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Microfil (Polymer Compound)</td>
			<td style="width:135px;">Flowech Inc.</td>
			<td style="width:117px;">Kit B - MV-122</td>
			<td>8 oz. of MV compound; 8 oz. of diluent; MV-Curing Agent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:135px;">Stoelting</td>
			<td style="width:117px;">56131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Monoject 1/2 ml Insulin Syringe</td>
			<td style="width:135px;">Covidien</td>
			<td style="width:117px;">1188528012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Octagon Forceps Straight Teeth</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11042-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Parafilm</td>
			<td style="width:135px;">Bemis company, Inc.</td>
			<td style="width:117px;">#PM999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">PE-10 tubing</td>
			<td style="width:135px;">Instech</td>
			<td style="width:117px;">BTPE-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Phospahte buffered Saline</td>
			<td style="width:135px;">BioRad</td>
			<td style="width:117px;">#161-0780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ring Stand</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">S13747</td>
			<td>Height 24in.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Sodium Nitroprusside</td>
			<td style="width:135px;">sigma</td>
			<td style="width:117px;">71778-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Steel Plate</td>
			<td style="width:135px;">N/A</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>16 x 16 in. area, 1/16 in thick</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:231px;">Straight Spring Scissors</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">SURFLO 24G Teflon I.V. Catheter</td>
			<td style="width:135px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:117px;">360103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Surgical Board</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td>12-587-20</td>
			<td>This is a converted slide holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Universal 3-prong clamp</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">S24280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Winged Inf. Set 25X3/4, 12&#34; Tubing</td>
			<td style="width:135px;">Nipro</td>
			<td style="width:117px;">PR25G19</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Zeiss Stemi-508 Dissection Scope</td>
			<td style="width:135px;">Zeiss</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

vascular casting of adult and early postnatal mouse lungs for micro-ct imaging

Kan damarları 3 boyutlu uzayda karmaşık ağlar oluştururlar. Sonuç olarak, vasküler ağların bir dokunun yüzeyini gözlemleyerek nasıl etkileştiğini ve nasıl etkileştiğini görsel olarak anlamak zordur. Bu yöntem akciğerin karmaşık 3 boyutlu vasküler mimarisini görselleştirmek için bir araç sağlar.
Bunu başarmak için pulmoner artere bir kateter yerleştirilir ve vaskülatür aynı anda kandan atılır ve direnci sınırlamak için kimyasal olarak genişlenir. Akciğerler daha sonra standart bir basınçta trakea ile şişirilir ve polimer bileşik standart bir akış hızında vasküler yatağa aşılanır. Tüm arteriyel ağ doldurulduktan ve tedavisine izin verildikten sonra, akciğer vaskülatürü doğrudan görüntülenebilir veya mikro-CT (μCT) tarayıcıda görüntülenebilir.
Başarılı bir şekilde yapıldığında, erken doğum sonrası yaşlardan erişkinlere kadar farelerde pulmoner arteriyel ağ takdir edebilirsiniz. Ayrıca pulmoner arter yatağında gösterildiği gibi, bu yöntem optimize edilmiş kateter yerleşimi ve uç noktaları ile herhangi bir vasküler yatak uygulanabilir.

Başarılı bir döküm tüm pulmoner arter ağının düzgün dolgu sergileyecek. Bunu yaşolarak değişen C57Bl/6J farelerde gösteriyoruz: Doğum sonrası gün P90 (Şekil 4A), P30 (Şekil 4B), P7 (Şekil 4C), P1(Şekil 4D). Akış hızının kontrol edilerek ve dolgunun gerçek zamanlı olarak görsel olarak izlenmesi yle, en distal vaskülatürün güvenilir uç no...

Watch this Scientific Journal Video about Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging at JoVE.com

Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging

Bu tekniğin amacı, erken postnatal ve erişkin farelerin pulmoner arter ağlarının akciğer şişmesi yoluyla ex vivo görselleştirilmesi ve pulmoner arter yoluyla radyoopak polimer bazlı bileşiğin enjeksiyonudur. Döküm dokular için potansiyel uygulamalar da tartışılmıştır.

Mikro-BT Görüntüleme için Erişkin ve Erken Postnatal Fare Akciğerlerinin Vasküler Döküm

Blood vessels form intricate networks in 3-dimensional space. Consequently, it is difficult to visually appreciate how vascular networks interact and ...

Bu protokol, hem erişkin hem de erken doğum sonrası farelerde pulmoner arteriyel vaskülatür inat için hassas, adım adım rehberlik sağlar. Bu teknik, kullanıcıların yumuşak doku bütünlüğünü korurken mikro-BT de dahil olmak üzere çeşitli yöntemlerle tüm vasküler ağı görselleştirme için tam olarak atmalarını sağlar. Bu teknik özellikle pulmoner-vasküler morfoloji ve mimari bakmak için yararlıdır, ancak kolayca diğer vasküler yatak hedefleme için adapte edilebilir.Birçok ameliyat ve diseksiyon gibi, aslında bir prosedür görselleştirme nin yerini hiçbir şey tutamaz ve izleyiciler daha zorlu manevraların gerçekleştirildiğini görmekten fayda lanabilirler. Ksifoid işlemi ortaya çıktıktan sonra, göğüs kafesini hafifçe kavrayın ve yükseltin. Dikkatlice şimdi maruz, yarı saydam diyafram bir kesi yapmak.Akciğerler gözle görülür bir şekilde çökecek ve diyaframdan uzaklaşacak. Akciğer ve trakea açığa sonra, iplik 15 santimetre PE10 boru 30-gauge iğne nin merkezine. Ve bu üniteyi PBS'deki 4 azı lı sodyum nitroprusside'a 10 tane içeren bir mililitrelik şırıngaya bağla.Tüm hava temizlenmeden önce tüpü asal hale getirmek için pistonu ilerletin. Metne etkili bir alternatif olarak, bir tarafta kalbin apeks nüfuz ve kas yoluyla eğri forseps uçlarını geçmek, ve dokunun diğer tarafında dışarı. 7-0 ipek 10 santimetre uzunluğunda bir ucunu kavramak ve doku üzerinden yaklaşık iki santimetre çekin.Dikiş ten sonra, caudally kalp çekmek için dikiş kalan sekiz santimetre kullanın. Dikişin ucunu da cerrahi tahtaya bantla. Kanca yükselen aort ve pulmoner arter gövde altında kavisli forseps ipuçları.Ve tek atışgevşek dikiş oluşturmak için açılış yoluyla 7-0 ipek üç santimetre uzunluğunda geri çekin. İnce duvarlı sağ ventrikül nüfuz, kalbin apeks doğru bir-iki milimetrelik kesi yapmak için makas kullanın. Ve astarlı tüpü sağ ventriküle tanıtıp kateteri hafifçe yarı saydam, ince duvarlı pulmoner arter gövdesine doğru ilerletin.Kateterin sol veya sağ pulmoner dallara ilerlemediğini ve pulmoner arter dal noktasına girmediğini görsel olarak doğrulayın. Cerrahi tahtaya tüpün distal kısmını bantlayın ve her iki büyük damarın etrafındaki gevşek sütürü hafifçe sıkın. Kalbi doğal bir istirahat pozisyonuna döndürmek için sekiz santimetrelik sütür parçasını kesin.Ve perfusate vaskülatür çıkmak için izin vermek için kalbin sol kahin klip. Sonra, bir şırınga pompası kullanın, bir 0.5 ml / dk akış hızı hem kan floş için sodyum nitroprusside aşılamak için, ve maksimum vaskülatür dilate, perfusat ekadar açık çalışır. Akciğer şişirme ünitesini oluşturmak için esnek plastik 24-gauge intravenöz kateteri bir küvetten kesin ve kelebek infüzyon seti iğnesine bağlayın.Bu üniteyi stopcock'a takın ve stopcock'u 50 mililitrelik açık bir şırıngaya takın. Şırıngayı formalin ile yükledikten ve kateteri astarladıktan sonra, stopcock kapalıyken, şırıngayı bir halka standında, menisküsün trakeanın 20 santimetre yukarısında olduğu noktaya yerleştirin. Iki gevşek dikiş yerleştirin, iki ila dört milimetre arayla, krikoid kıkırdak aşağı, ve krikotiroid ligament küçük bir kesi yapmak için makas kullanın, dikişüstün.Kateteri açıklığa takın ve ucu iki gevşek sütürden öteye doğru ilerletin. Nefes borusu çevresindeki dikişleri sıkın ve formalinin yer çekimi ile akciğerlere girmesini sağlamak için stopcock'u açın. Akciğerlerin tamamen şişmesi için beş dakika bekleyin.Akciğerler enflasyon sırasında göğüs kafesine yapışırsa, göğüs kafesinin dışını kavramak için künt uçlu çerpler kullanın ve akciğerlerle doğrudan temas etmeden lobların serbest çıkmasına yardımcı olmak için kaburgaları her yöne doğru hareket ettirin. Beş dakika sonra, ilk dikiş ve ligate arkasında kateteri geri çek. Sonra ikinci dikiş arkasında kateteri geri ve ligate.Akciğerler artık kapalı ve basınçlı bir şekilde şişirilmeli. Vaskülatür döküm için, bir mililitre polimer dilüent kür ajan 8-1-1 çözeltisi bir mililitre yük bir mililitre şırınga içine. Ve dikkatlice piston takın.Şırınga ters çevrilmiş, havakaldırmak için piston depress, ve şırınga ucunda bir menisküs oluşumunu sağlamak için. İğnenin göbeğinden sodyum nitroprusside şırınga çıkarın ve bir menisküs oluşturmak için, hub içine ek PBS damla. Polimer-bileşik şırınganın hub'ına katılın ve infüzyonu dakikada 0,02 milimetreden başlatın.Pulmoner arter gövdesine girerken şırınga hacmini belirterek, tüpün içinden serbestçe geçerken bileşiği izleyin. Tüm loblar tamamen dolana kadar profüzyon devam edin, aşağı küçük damar. Pompayı durdurun ve bir kez daha şırınga hacmine dikkat edin.Bir fiber optik temizleme mendil ile akciğerleri kaplayın ve liberal PBS uygulayın. Numunenin oda sıcaklığında 30 ila 40 dakika bozulmadan oturmasına izin verin. Polimer bileşik tedavi ve sertleştirilmiş sonra, uzuvları ve farenin alt yarısı kesin.Ve baş ve toraks 50 mililitrekonik dolu içine yerleştirin 10% tamponlu formalin, bir gecede. Ertesi sabah, yavaşça kalan göğüs kafesi ve toraks kalp ve akciğer birimi ayırmak için nefes trakea kavramak. Hasat edilen doku bloğunu formalin dolu bir ışıltı lı şişeye yerleştirin.Başarılı bir döküm tüm pulmoner arter ağının tek tip dolum neden olacaktır. Akciğer veya akciğer hava yollarında hasar varsa, küçük sızıntılar basınç tutan akciğerleri önleyecektir. Yamalı veya eksik dolum, kateter aracılığıyla damar sistemine giren havanın, bileşiğin aşağı akışını engellemesi sonucu bir hava kilidinden kaynaklanabilir.Underfilling çok az bileşik vaskülatür içine tanıtıldı oluşur. Alternatif olarak, aşırı doldurma, ya da çok hızlı bir şekilde çok fazla polimer bileşik tanıtılması, arteriyel rüptürneden olabilir, ya da, daha yaygın olarak, venöz transit. Kateteri pulmoner gövdeden çok aşağıya doğru ilerletmek ucun bir pulmoner arter dalına girmesine neden olabilir, akışta bir dengesizlik oluşturabilir ve bir tarafın diğerinden daha hızlı dolmasına neden olabilir.Tekniğin gösterildiği gibi dikkatli bir şekilde ifa edilebildiği gibi, distal vaskülatür uç noktalarının uygun doğrudan izlenmesi ve standart infüzyon oranları pulmoner vaskülatüroptimal dolgu ile sonuçlanabilir. Ayrıca, sistemik vaskülatür bu tekniğiadapte diğer vasküler yatakeşit olumlu sonuçlar verebilir. Dökümden sonra, numuneler mikro bilgisayarlı tomografi taraması için işlenebilir.Post-processing için, ticari bir yazılım paketi pulmoner vasküler ağaç bir 3D hacim render oluşturmak için kullanılabilir. Bu tekniği ilk kez denerken, özellikle kırılgan akciğerler ve pulmoner arter çevresinde dikkatli olun. En önemlisi, vasküler devre içine hava girmesini önlemek.Başarılı bir döküm sonrasında, bir örnek mikro-BT ile taranabilir ve vasküler morfometri ve mimari içeren sorular araştırılabilir.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Organotypic Slice Cultures for Studies of Postnatal Neurogenesis

POSTNATAL nöron Çalışmaları için organotipik Dilim Kültürler

Here we describe a technique for studying hippocampal postnatal neurogenesis in the rodent brain using the organotypic slice culture technique. This ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

Erken Postimplantation Fare Embriyolar içine Hücreleri veya DNA Kesinlikle lokalize Transferi Yöntemleri

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Assessment of Maternal Vascular Remodeling During Pregnancy in the Mouse Uterus

Fare Uterus içinde Gebelikte maternal Vasküler Yaptırma Değerlendirilmesi

The placenta mediates the exchange of factors such as gases and nutrients between mother and fetus and has specific demands for supply of blood from the ...

Loss- and Gain-of-function Approach to Investigate Early Cell Fate Determinants in Preimplantation Mouse Embryos

Preimplantasyon Fare Embriyolar Erken Hücre Kader Belirleyicileri Araştırma kaybı: ve Kazanç fonksiyon-Yaklaşımı

 Gene silencing and overexpression techniques are instrumental for the identification of genes involved in embryonic development. Direct target gene ...

Imaging Cleared Embryonic and Postnatal Hearts at Single-cell Resolution

Görüntüleme Tek hücreli Çözünürlük embriyonik ve Postnatal Kalpleri Temizlendi

Single clonal tracing and analysis at the whole-heart level can determine cardiac progenitor cell behavior and differentiation during cardiac development, ...

Analysis of Retinoic Acid-induced Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Two and Three-dimensional Embryoid Bodies

İki ve Üç boyutlu Embriyoid Oluşumu Fare Embriyonik Kök Hücreler Retinoik Asit kaynaklı sinir Farklılaşma analizi

Mouse embryonic stem cells (ESCs) isolated from the inner mass of the blastocyst (typically at day E3.5), can be used as in vitro model system for ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

Fare İkincil Palin Füzyonunun Canlı Görüntüsü

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

Üç boyutlu yüksek frekanslı Ultrasonografi romanı kullanımı için fare erken gebelik karakterizasyonu

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Visualization of Cellular Electrical Activity in Zebrafish Early Embryos and Tumors

Zebra balığı erken embriyo ve tümör hücresel elektrik aktivitesinin görselleştirme

Bioelectricity, endogenous electrical signaling mediated by ion channels and pumps located on the cell membrane, plays important roles in signaling ...