Name: preparation of mesh-shaped engineered cardiac tissues derived from human ips cells for in vivo myocardial repair
Uploaded: 2020-06-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Mesh-Shaped Engineered Cardiac Tissues Derived from Human iPS Cells for In Vivo Myocardial Repair at JoVE.com

이 작품은 루이스빌 대학의 코세어 자선 소아 심장 연구 프로그램과 RIKEN 생물 시스템 역학 연구 센터의 오르가노이드 프로젝트에 의해 재정적으로 지원되었습니다. 당사의 출판된 프로토콜에 사용된 HiPSCs는 일본 교토교대학교 iPS 세포 연구 및 응용 센터에서 제공되었습니다.

1. hiPSC 및 심혈관 차별화의 유지 보수
<ol><li>인간 기본 섬유아세포 성장인자(hbFGF)를 가진 마우스 배아 섬유아세포(MEF-CM)로부터 추출한 조건부 배지에서 얇은 코트 지하 막 매트릭스(성장인자 감소, 1:60희석)에대한 hiPSCs를 확장 및 유지한다. 참고: hiPSC(4-계수(10월 4일, 삭스2, Klf4 및 c-Myc) 라인: 201B6)를 사용했습니다. 각 세포주에 대한 적절한 농도에서 hbFGF를 추가합니다. 라미닌-...

<ol>
	<li>Sanganalmath, S. K., Bolli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+therapy+for+heart+failure:+A+comprehensive+overview+of+experimental+and+clinical+studies,+current+challenges,+and+future+directions.">Cell therapy for heart failure: A comprehensive overview of experimental and clinical studies, current challenges, and future directions.</a> Circulation Research. 113, 810-834 (2013).</li><li>Fisher, S. A., Doree, C., Mathur, A., Martin-Rendon, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meta-Analysis+of+Cell+Therapy+Trials+for+Patients+With+Heart+Failure.">Meta-Analysis of Cell Therapy Trials for Patients With Heart Failure.</a> Circulation Research. 116, 1361-1377 (2015).</li><li>Menasch&#233;, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+embryonic+stem+cell-derived+cardiac+progenitors+for+severe+heart+failure+treatment:+first+clinical+case+report:+Figure+1.">Human embryonic stem cell-derived cardiac progenitors for severe heart failure treatment: first clinical case report: Figure 1.</a> European Heart Journal. 36, 2011-2017 (2015).</li><li>Masumoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+iPS+cell-engineered+cardiac+tissue+sheets+with+cardiomyocytes+and+vascular+cells+for+cardiac+regeneration.">Human iPS cell-engineered cardiac tissue sheets with cardiomyocytes and vascular cells for cardiac regeneration.</a> Scientific Reports. 4, 6716 (2014).</li><li>Masumoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+myocardial+regenerative+potential+of+three-dimensional+engineered+cardiac+tissues+composed+of+multiple+human+iPS+cell-derived+cardiovascular+cell+lineages.">The myocardial regenerative potential of three-dimensional engineered cardiac tissues composed of multiple human iPS cell-derived cardiovascular cell lineages.</a> Scientific Reports. 6, 29933 (2016).</li><li>Zimmermann, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+heart+tissue+grafts+improve+systolic+and+diastolic+function+in+infarcted+rat+hearts.">Engineered heart tissue grafts improve systolic and diastolic function in infarcted rat hearts.</a> Nature Medicine. 12, 452-458 (2006).</li><li>Fujimoto, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+fetal+cardiac+graft+preserves+its+cardiomyocyte+proliferation+within+postinfarcted+myocardium+and+sustains+cardiac+function.">Engineered fetal cardiac graft preserves its cardiomyocyte proliferation within postinfarcted myocardium and sustains cardiac function.</a> Tissue engineering. Part A. 17, 585-596 (2011).</li><li>Lancaster, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+treatment+for+heart+failure:+cell-based+therapy+with+engineered+tissue.">Surgical treatment for heart failure: cell-based therapy with engineered tissue.</a> Vessel Plus. 2019, (2019).</li><li>Bian, W., Liau, B., Badie, N., Bursac, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesoscopic+hydrogel+molding+to+control+the+3D+geometry+of+bioartificial+muscle+tissues.">Mesoscopic hydrogel molding to control the 3D geometry of bioartificial muscle tissues.</a> Nature protocols. 4, 1522-1534 (2009).</li><li>Zhang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-engineered+cardiac+patch+for+advanced+functional+maturation+of+human+ESC-derived+cardiomyocytes.">Tissue-engineered cardiac patch for advanced functional maturation of human ESC-derived cardiomyocytes.</a> Biomaterials. 34, 5813-5820 (2013).</li><li>Christoforou, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cell-derived+cardiac+progenitors+differentiate+to+cardiomyocytes+and+form+biosynthetic+tissues.">Induced pluripotent stem cell-derived cardiac progenitors differentiate to cardiomyocytes and form biosynthetic tissues.</a> PloS one. 8, 65963 (2013).</li><li>Nakane, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Cell+Composition+and+Geometry+on+Human+Induced+Pluripotent+Stem+Cells-Derived+Engineered+Cardiac+Tissue.">Impact of Cell Composition and Geometry on Human Induced Pluripotent Stem Cells-Derived Engineered Cardiac Tissue.</a> Scientific Reports. 7, 45641 (2017).</li><li>Kowalski, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+Cardiomyocyte+Alignment+from+Three-Dimensional+(3D)+Confocal+Microscopy+of+Engineered+Tissue.">Quantification of Cardiomyocyte Alignment from Three-Dimensional (3D) Confocal Microscopy of Engineered Tissue.</a> Microscopy and Microanalysis. 1, (2017).</li></ol>

선형 형식의 조사를 마친 후 hiPSC 파생 ECT5는ET 내 혈관 세포의 체외 확장을 용이하게 하고 ECT와 수령인 심근 사이 생체 혈관 커플링을 용이하게 하기 위해 hiPSC 유래 C, EC 및 MC를 혼합하는 프로토콜을 조정했습니다.
더 크고 이식형 메쉬 ECT 형상의 생성을 용이하게 하기 위해 얇은 PDMS 시트를 사용하여 엇갈린 위치에 배치된 로딩 포스트로 3D 금형을 설계했습니...

수많은 전임상 연구및 임상시험은심장1, 2,23에실패한 세포 기반 심장 재생 요법의효율을 확인했습니다. 다양한 세포 유형 중, 인간 유도 만능 줄기 세포 (hiPSCs)는 그들의 증식 능력, 다양한 심장 혈관계보4,5및 동종성을 생성 할 수있는 잠재력에 의해 유망한 세포 소스입니다. 또한, 조직 공학 기술은 손상된 심장,,5,6,7,8에수백만 개의 세포를 옮길 수 있게 하였다.7
이전에는 3D 생체 인공 조직에 대한 시판 가능한 배양 시스템을 사용하여 hiPSC 유래 심장 혈관 혈통으로부터 3차원(3D) 선형 엔지니어링 심장 조직(ECT)의생성을보고하였다5,7. 우리는 ECT 내심근세포와 벽화 세포의 공존이 구조적 및 전기생리조직 성숙을 촉진한다는 것을 발견했습니다. 더욱이, 우리는 심장 기능을 향상시키고, 심근을 재생하며, 혈관신생을 향상시키기 위하여 면역내성 쥐 심근 경색 모형에 이식된 hiPSC-ECTs의 치료 잠재력을 검증했습니다5. 그러나, 이 방법에 의해 생성된 선형 ECT는 1mm by 10mm 실린더였고, 따라서 더 큰 동물 또는 임상적 사용을 가진 전임상 연구에서 이식에 적합하지 않았다.
쥐 골격 근막세포와 심근세포9,인간 ESC 유래 심근세포10 및 마우스 iPSCs11을사용하여 다공성 엔지니어링 조직 형성을 생성하는 조직 금형의 성공적인 사용에 기초하여, 폴리디메틸실록산(PDMS)을 사용하여 확장 가능한 hiPSC 유래 더 큰 이식형 조직을 생성하는 프로토콜을 개발했습니다. 우리는 가장 효과적인 금형 특성을 결정하기 위해 금형 형상의 범위를 평가했다. 여러 번들 및 접합을 갖춘 메쉬 모양의 ECT는 모공이나 접합이 부족한 일반 시트 또는 선형 형식에 비해 세포 생존가능성, 조직 기능 및 확장성면에서 뛰어난 특성을 보였습니다. 우리는 쥐 심근 경색 모델에 메쉬 모양의 ECT를 이식하고 이식 된 원통형 ETs12와유사한 치료 효과를 확인하였다. 여기서는 hiPSC 유래 메시 모양ECT를 생성하는 프로토콜을 설명합니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Dishes 100x20 mm style</td>
			<td>Falcon/ Thomas scientific</td>
			<td>9380C51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwell Plates For Cell Culture 6well 50/CS</td>
			<td>Falcon / Thomas scientific</td>
			<td>6902A01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>761036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accumax</td>
			<td>Innovative Cell Technologies</td>
			<td>AM-105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BMP4, recombinant (10&#181;g)</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>RSD-314-BP-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen, Type I solution from rat tail</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C3867</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Growth factor-reduced Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human VEGF (165) IS, premium grade</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-109-385</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F-127, 0.2 &#181;m filtered (10% Solution in Water)</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>P-6866</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human bFGF</td>
			<td>WAKO</td>
			<td>060-04543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Human/Mouse/Rat ActivinA (50&#181;g)</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>338-AC-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rh Wnt-3a (10&#181;g)</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>5036-WN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versene solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15040066</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture medium and supplements</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x MEM</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 Mercaptro Ethanol</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>M6250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 supplement minus insulin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A1895601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM, high glucose</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11965084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (500ml)</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (500ml)</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 1x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin (5000 U/mL)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070-063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI1640 medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21870092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;MEM</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11900024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flowcytometry</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-TRA-1-60, FITC, Clone: TRA-1-60, BD Biosciences</td>
			<td>BD / Fisher</td>
			<td>560380</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-Troponin T, Cardiac Isoform Ab-1, Clone: 13-11, Thermo Scientific Lab Vision</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>MS-295-P0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACS Clean Solution</td>
			<td>BD</td>
			<td>340345</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSFlow Sheath Fluid</td>
			<td>BD</td>
			<td>342003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSRinse Solution</td>
			<td>BD</td>
			<td>340346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Tube with Cell Strainer Cap (Case of 500)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (500ml)</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LIVE/DEAD Fixable Aqua Dead Cell Stain Kit, for 405 nm excitation</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>L34957</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDGFRb; anti-CD140b, R-PE, Clone: 28D4, BD Biosciences</td>
			<td>BD / Fisher</td>
			<td>558821</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saponin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>47306-50G-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VEcad-FITC; anti-CD144, FITC, Clone: 55-7H1, BD Biosciences</td>
			<td>BD / Fisher</td>
			<td>560411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zenon Alexa Fluor 488 Mouse IgG1 Labeling Kit</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>Z25002</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of mesh-shaped engineered cardiac tissues derived from human ips cells for in vivo myocardial repair

현재 프로토콜은 임상 사용의 목표를 향해 개발되는 인간 유도 만능 줄기 세포 (hiPSCs)에서 파생 된 심혈관 세포로 구성된 확장 가능한 메쉬 모양의 엔지니어링 심장 조직 (ECT)을 생성하는 방법을 설명합니다. HiPSC 유래 심근세포, 내피 세포 및 혈관 벽화 세포는 젤 매트릭스와 혼합한 다음 직사각형 내부 비틀거림 기둥을 가진 폴리디메틸실록산(PDMS) 조직 금형에 부어 넣습니다. 문화의 날14 ECT는 직경 0.5mm의 myofiber 번들로 1.5cm x 1.5cm 메쉬 구조로 성숙합니다. 심근세포는 각 번들의 긴 축에 정렬되어 동기적으로 자발적으로 이길 수 있습니다. 이 방법은 구조 성숙과 기능을 유지하면서 더 큰 (3.0cm x 3.0cm) 메쉬 ECT까지 확장 할 수 있습니다. 따라서, hiPSC 유래 심장 세포로부터 생성된 메쉬 형 ECT는 심장 재생 패러다임에 대해 가능할 수 있다.

그림 1A, B는 CM+EC 및 MC 프로토콜의 회로도를 나타낸다. MC 프로토콜에서 CM+EC 프로토콜 및 MC로부터 C와 IC를 유도한 후, 세포는 최종 MC 농도를 혼합하여 전체 셀의 10~20%를 나타냅니다. 2cm 폭의 티슈 몰드는 0.5mm 두께의 PDMS시트(도 2A,B)에서도면을 그리는 설계에 따라 제작된다. 600만 개의 CM+EC+MC 세포가 콜라겐 I와 결합되고, 매트릭?...

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Preparation of Mesh-Shaped Engineered Cardiac Tissues Derived from Human iPS Cells for In Vivo Myocardial Repair

본 프로토콜은 인간 유도만능 줄기 세포에서 유래한 심혈관 세포를 포함하는 메쉬 모양의 엔지니어링 된 심장 조직을 생성하여 심장 질환에 대한 세포 이식 요법의 조사를 허용합니다.

생체 내 심근 수리를 위한 인간 iPS 세포에서 파생된 메쉬 모양의 조작된 심장 조직의 준비

The current protocol describes methods to generate scalable, mesh-shaped engineered cardiac tissues (ECTs) composed of cardiovascular cells derived from ...

이 프로토콜은 인간 유도 된 신체 부위및 STEM 세포 유래 심장 세포에서 파생 된 메쉬 모양의 엔지니어링 심장 조직을 만드는 고귀하고 쉬운 방법을 설명합니다. 조직 기하학의 유연성과 보존 된 조직 기능의 확장성은이 기술의 주요 장점입니다. 이식된 메쉬 형상 ECT는 쥐 심근 경색 모델에서 심장 구조와 기능을 복원할 수 있습니다.심장 재생 치료에 사용하기위한 타당성을 확인. 이러한 기술은 일관된 결과를 위해 재현 가능한 인간 STEM 세포 처리 및 조직 배양 기술을 요구합니다. 경화 PDMS 시트를 적절한 크기로 절단하여 시트를 실리콘 접착제로 결합하여 21 by 20.5mm 직사각형 트레이를 7밀리미터 너비의 20.5mm 직사각형 트레이와 비틀거리는 위치에서 2.5밀리미터 높이의 직사각형 기둥을 제작할 수 있도록 합니다.두 줄의 게시물 사이의 수평 간격은 2.5 밀리미터여야 합니다. 1시간 동안 PBS에서 1%폴로사머 407로 금형을 코팅하기 전에 20분 동안 트레이를 섭씨 120도에서 자동 클럭입니다. 그런 다음 PBS로 금형을 철저히 헹구고 금형을 6웰 플레이트의 한 웰에 넣습니다.계보 분석을 위해 심근세포와 내피 및 혈관 벽화 세포 프로토콜의 세포를 결합합니다. 벽화 세포의 최종 농도가 10~20%로 총 세포수에서 6배 10~6개의 세포가 구성될 수 있도록 한다. 133 마이크로리터의 산 수용성 쥐 꼬리 콜라겐 타입 1용액과 알칼리 버퍼 17마이크로리터를 얼음 위에 10배 최소 필수 매체17마이크로리터에 혼합합니다.그런 다음 콜라겐 용액에 지하 멤브레인 매트릭스 67 마이크로리터를 추가합니다. 다음으로, 세포를 원심분리하고 태아 소 혈청과 항생제로 보충된 고혈당 덜벡코의 최소 필수 매체의 167마이크로리터에서 펠릿을 재중단합니다. 매트릭스 용액의 셀을 얼음에 섞습니다.그런 다음 400 마이크로리터의 셀 매트릭스 서스펜션을 폴로사머 407 코팅 PDMS 조직 금형에 조심스럽게 부어 줍니다. 표준 세포 배양 인큐베이터에서 세포 매트릭스 혼합물을 섭씨 37도, 이산화탄소 5%를 60분 동안 배양한다. 조직이 형성되면, ECT 배양 배지의 4 밀리리터로 금형을 조심스럽게 흡수하고 14 일 동안 세포 배양 배양 배양소로 플레이트를 반환합니다.ECT 이식 전에 미세 포셉을 살균하여 로딩 게시물에서 ECT를 조심스럽게 제거합니다. 조직 금형은 다양한 패턴, 포스트 길이 및 포스트 간격으로 제작되어 서로 다른 최종 ECT 형상을 생성할 수 있습니다. 이 분석을 위해 폭 이 2.5mm의 7밀리미터 길이의 금형이 사용되었습니다.Poloxamer 407은 금형에 대한 세포의 접착을 방지하고 14 일 만에 빠른 겔 다짐에 따라 특성 메쉬 구조의 형성을 가능하게합니다. 구조는 ECT가 금형에서 방출된 후에도 유지됩니다. 제조 된 조직 구조는 약 1.5 센티미터 폭과 0.5 밀리미터 두께입니다.그리고 메쉬의 각 번들의 폭은 평균 약 0.5 밀리미터입니다. 동일한 비틀거림 포스트 설계를 가진 4배 더 큰 금형으로부터 2,400만 개의 셀을 함유한 3센티미터 최종 폭 메쉬 ECT를 생성할 수 있다. 이 더 큰 메쉬 ECT는 금형에서 쉽게 제거할 수 있으며 더 작은 메시 ECT에 해당하는 로컬 힘 행위를 생성합니다.최종 겔의 결함감을 방지하기 위해 기포를 생성하지 않고 조직 몰드에 세포 매트릭스 혼합물을 고르게 붓는 것이 중요하다. 계약자의 기능적 특성화. 내장 된 시스템을 사용하여 네 번째 주파수 관계를 수행 할 수 있습니다.우리의 궁극적인 목표는 대규모 동물 전임상 연구를 활용하는 임상 치료법으로 ECT 패러다임을 번역하는 것입니다.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Construction of Defined Human Engineered Cardiac Tissues to Study Mechanisms of Cardiac Cell Therapy

정의 인간 공학 심장 조직의 건설 심장 세포 치료의 메커니즘을 연구하는

Human cardiac tissue engineering can fundamentally impact therapeutic discovery through the development of new species-specific screening systems that ...

연구

생체공학

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

심근 구조, 기능의 생체 양적 평가에서 관류 및 생존 능력은 심장 마이크로 컴퓨터 단층 촬영을 사용하여

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that ...

Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

의 응용 프로그램<em&gt; 생체</em&gt; 조직 평가를위한 쥐 앞정 전방의 기능 테스트는 골격근 수리 엔지니어링

Despite the regenerative capacity of skeletal muscle, permanent functional and/or cosmetic deficits (e.g., volumetric muscle loss (VML) resulting from ...

Automated Contraction Analysis of Human Engineered Heart Tissue for Cardiac Drug Safety Screening

Cardiac tissue engineering describes techniques to constitute three dimensional force-generating engineered tissues. For the implementation of these ...

Protocol for MicroRNA Transfer into Adult Bone Marrow-derived Hematopoietic Stem Cells to Enable Cell Engineering Combined with Magnetic Targeting

성인 골 수 유래 조 혈 줄기 세포로 세포 공학 자기 대상으로 함께 있도록 예측에 관한 전송을 위한 프로토콜

While CD133+ hematopoietic stem cells (SCs) have been proven to provide high potential in the field of regenerative medicine, their low retention rates ...

Fabrication of 3D Cardiac Microtissue Arrays using Human iPSC-Derived Cardiomyocytes, Cardiac Fibroblasts, and Endothelial Cells

인간 iPSC 유래 심근세포, 심장 섬유아세포 및 내피 세포를 사용하여 3D 심장 미세 조직 배열의 제조

Generation of human cardiomyocytes (CMs), cardiac fibroblasts (CFs), and endothelial cells (ECs) from induced pluripotent stem cells (iPSCs) has provided ...

Single-Cell Optical Action Potential Measurement in Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes

인간 유도 만능 줄기 세포 유래 심근 세포에서 단세포 광학 작용 잠재적 측정

Conventional intracellular microelectrode techniques to quantify cardiomyocyte electrophysiology are extremely complex, labor intensive, and typically ...

Cardiac Spheroids as in vitro Bioengineered Heart Tissues to Study Human Heart Pathophysiology

인간 심장 병리학을 연구하기 위하여 체외 생체 공학심장 조직에서와 같이 심장 스페로이드

Despite several advances in cardiac tissue engineering, one of the major challenges to overcome remains the generation of a fully functional vascular ...

Fibroblast Derived Human Engineered Connective Tissue for Screening Applications

섬유아세포, 선별 애플리케이션을 위한 인간 공학형 결합 조직

Fibroblasts are phenotypically highly dynamic cells, which quickly transdifferentiate into myofibroblasts in response to biochemical and biomechanical ...

Engineered Lung Tissues Prepared from Decellularized Lung Slices

탈세포화된 폐 조각으로 제조된 조작된 폐 조직

There is a need for improved 3-dimensional (3D) lung models that recapitulate the architectural and cellular complexity of the native lung alveolus ex ...