Name: preparation of mesh-shaped engineered cardiac tissues derived from human ips cells for in vivo myocardial repair
Uploaded: 2020-06-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Mesh-Shaped Engineered Cardiac Tissues Derived from Human iPS Cells for In Vivo Myocardial Repair at JoVE.com

Este trabajo fue apoyado financieramente por el Programa de Investigación pediátrica del corazón de Kosair Charities en la Universidad de Louisville y el Proyecto Organoid en el CENTRO RIKEN para la Investigación de Dinámica de Biosistemas. HiPSCs utilizados en nuestros protocolos publicados fueron proporcionados por el Centro de Investigación y Aplicación de Células iPS, Universidad de Kioto, Kioto, Japón.

1. Mantenimiento de hiPSC y diferenciación cardiovascular
<ol><li>Ampliar y mantener hiPSCs en la matriz de membrana del sótano de capa delgada (factor de crecimiento reducido, 1:60 dilución) en medio condicionado extraído de fibroblastos embrionarios de ratón (MEF-CM) con factor de crecimiento de fibroblastos básico humano (hbFGF)4. NOTA: Utilizamos una línea hiPSCs (4 factores (Oct3/4, Sox2, Klf4 y c-Myc): 201B6). Agregue hbFGF a la concentración adecuada para cada línea celular. E...

<ol>
	<li>Sanganalmath, S. K., Bolli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+therapy+for+heart+failure:+A+comprehensive+overview+of+experimental+and+clinical+studies,+current+challenges,+and+future+directions.">Cell therapy for heart failure: A comprehensive overview of experimental and clinical studies, current challenges, and future directions.</a> Circulation Research. 113, 810-834 (2013).</li><li>Fisher, S. A., Doree, C., Mathur, A., Martin-Rendon, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meta-Analysis+of+Cell+Therapy+Trials+for+Patients+With+Heart+Failure.">Meta-Analysis of Cell Therapy Trials for Patients With Heart Failure.</a> Circulation Research. 116, 1361-1377 (2015).</li><li>Menasch&#233;, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+embryonic+stem+cell-derived+cardiac+progenitors+for+severe+heart+failure+treatment:+first+clinical+case+report:+Figure+1.">Human embryonic stem cell-derived cardiac progenitors for severe heart failure treatment: first clinical case report: Figure 1.</a> European Heart Journal. 36, 2011-2017 (2015).</li><li>Masumoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+iPS+cell-engineered+cardiac+tissue+sheets+with+cardiomyocytes+and+vascular+cells+for+cardiac+regeneration.">Human iPS cell-engineered cardiac tissue sheets with cardiomyocytes and vascular cells for cardiac regeneration.</a> Scientific Reports. 4, 6716 (2014).</li><li>Masumoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+myocardial+regenerative+potential+of+three-dimensional+engineered+cardiac+tissues+composed+of+multiple+human+iPS+cell-derived+cardiovascular+cell+lineages.">The myocardial regenerative potential of three-dimensional engineered cardiac tissues composed of multiple human iPS cell-derived cardiovascular cell lineages.</a> Scientific Reports. 6, 29933 (2016).</li><li>Zimmermann, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+heart+tissue+grafts+improve+systolic+and+diastolic+function+in+infarcted+rat+hearts.">Engineered heart tissue grafts improve systolic and diastolic function in infarcted rat hearts.</a> Nature Medicine. 12, 452-458 (2006).</li><li>Fujimoto, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+fetal+cardiac+graft+preserves+its+cardiomyocyte+proliferation+within+postinfarcted+myocardium+and+sustains+cardiac+function.">Engineered fetal cardiac graft preserves its cardiomyocyte proliferation within postinfarcted myocardium and sustains cardiac function.</a> Tissue engineering. Part A. 17, 585-596 (2011).</li><li>Lancaster, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+treatment+for+heart+failure:+cell-based+therapy+with+engineered+tissue.">Surgical treatment for heart failure: cell-based therapy with engineered tissue.</a> Vessel Plus. 2019, (2019).</li><li>Bian, W., Liau, B., Badie, N., Bursac, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesoscopic+hydrogel+molding+to+control+the+3D+geometry+of+bioartificial+muscle+tissues.">Mesoscopic hydrogel molding to control the 3D geometry of bioartificial muscle tissues.</a> Nature protocols. 4, 1522-1534 (2009).</li><li>Zhang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-engineered+cardiac+patch+for+advanced+functional+maturation+of+human+ESC-derived+cardiomyocytes.">Tissue-engineered cardiac patch for advanced functional maturation of human ESC-derived cardiomyocytes.</a> Biomaterials. 34, 5813-5820 (2013).</li><li>Christoforou, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cell-derived+cardiac+progenitors+differentiate+to+cardiomyocytes+and+form+biosynthetic+tissues.">Induced pluripotent stem cell-derived cardiac progenitors differentiate to cardiomyocytes and form biosynthetic tissues.</a> PloS one. 8, 65963 (2013).</li><li>Nakane, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Cell+Composition+and+Geometry+on+Human+Induced+Pluripotent+Stem+Cells-Derived+Engineered+Cardiac+Tissue.">Impact of Cell Composition and Geometry on Human Induced Pluripotent Stem Cells-Derived Engineered Cardiac Tissue.</a> Scientific Reports. 7, 45641 (2017).</li><li>Kowalski, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+Cardiomyocyte+Alignment+from+Three-Dimensional+(3D)+Confocal+Microscopy+of+Engineered+Tissue.">Quantification of Cardiomyocyte Alignment from Three-Dimensional (3D) Confocal Microscopy of Engineered Tissue.</a> Microscopy and Microanalysis. 1, (2017).</li></ol>

Tras la finalización de nuestra investigación de un formato lineal, derivado de hiPSC ECT5,adaptamos el protocolo para mezclar CM, EC y MC derivados de hiPSC para facilitar la expansión in vitro de las células vasculares dentro de las ECT y el posterior acoplamiento vascular in vivo entre las ECT y el miocardio receptor.
Para facilitar la generación de geometrías ECT de malla más grandes e implantables, utilizamos láminas delgadas de PDMS para diseñar los molde...

Numerosos estudios preclínicos y ensayos clínicos han confirmado la eficiencia de las terapias regenerativas cardíacas basadas en células para corazones en quiebra1,2,3. Entre varios tipos de células, las células madre pluripotentes inducidas por humanos (hiPSC) son fuentes celulares prometedoras en virtud de su capacidad proliferativa, potencial para generar varios linajes cardiovasculares4,,5,y alogenicidad. Además, las tecnologías de ingeniería de tejidos han hecho posible transferir millones de células a un corazón dañado5,,6,7,8.
Anteriormente, informamos de la generación de tejidos cardíacos de ingeniería lineal tridimensional (3D) (ECT) a partir de linajes cardiovasculares derivados de hiPSC utilizando un sistema de cultivo disponible comercialmente para tejidos bioartificiales 3D5,,7. Encontramos que la coexistencia de células endoteliales vasculares y células murales con cardiomiocitos dentro de la ECT facilitaba la maduración del tejido estructural y electrofisiológico. Además, validamos el potencial terapéutico de los hiPSC-ECT implantados en un modelo de infarto de miocardio de rata tolerante al inmunelí para mejorar la función cardíaca, regenerar el miocardio y mejorar la angiogénesis5. Sin embargo, los ECT lineales construidos por este método eran cilindros de 1 mm por 10 mm y, por lo tanto, no eran adecuados para la implantación en estudios preclínicos con animales más grandes o uso clínico.
Basándonos en el uso exitoso de moldes tisulares para generar la formación de tejidos de ingeniería porosa utilizando mioblastos esqueléticos de rata y cardiomiocitos9,cardiomiocitos humanos derivados de ESC10 y iPSCsde ratón 11,desarrollamos un protocolo para generar tejido implantable más grande derivado de hiPSC escalable utilizando moldes de polidimemetilsiloxano (PDMS). Evaluamos una gama de geometrías de moldes para determinar las características más efectivas del molde. Los ECT en forma de malla con múltiples haces y uniones presentaban excelentes características en viabilidad celular, función de tejido y escalabilidad en comparación con formatos lineales o de hojas lisas que carecía de poros o uniones. Implantamos el ECT en forma de malla en un modelo de infarto de miocardio de rata y confirmamos sus efectos terapéuticos similares a los ECT cilíndricos implantados12. Aquí describimos el protocolo para generar un ECT en forma de malla derivado de hiPSC.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Dishes 100x20 mm style</td>
			<td>Falcon/ Thomas scientific</td>
			<td>9380C51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwell Plates For Cell Culture 6well 50/CS</td>
			<td>Falcon / Thomas scientific</td>
			<td>6902A01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>761036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accumax</td>
			<td>Innovative Cell Technologies</td>
			<td>AM-105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BMP4, recombinant (10&#181;g)</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>RSD-314-BP-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen, Type I solution from rat tail</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C3867</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Growth factor-reduced Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human VEGF (165) IS, premium grade</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-109-385</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F-127, 0.2 &#181;m filtered (10% Solution in Water)</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>P-6866</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human bFGF</td>
			<td>WAKO</td>
			<td>060-04543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Human/Mouse/Rat ActivinA (50&#181;g)</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>338-AC-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rh Wnt-3a (10&#181;g)</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>5036-WN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versene solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15040066</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture medium and supplements</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x MEM</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 Mercaptro Ethanol</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>M6250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 supplement minus insulin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A1895601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM, high glucose</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11965084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (500ml)</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (500ml)</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 1x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin (5000 U/mL)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070-063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI1640 medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21870092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;MEM</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11900024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flowcytometry</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-TRA-1-60, FITC, Clone: TRA-1-60, BD Biosciences</td>
			<td>BD / Fisher</td>
			<td>560380</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-Troponin T, Cardiac Isoform Ab-1, Clone: 13-11, Thermo Scientific Lab Vision</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>MS-295-P0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACS Clean Solution</td>
			<td>BD</td>
			<td>340345</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSFlow Sheath Fluid</td>
			<td>BD</td>
			<td>342003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSRinse Solution</td>
			<td>BD</td>
			<td>340346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Tube with Cell Strainer Cap (Case of 500)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (500ml)</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LIVE/DEAD Fixable Aqua Dead Cell Stain Kit, for 405 nm excitation</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>L34957</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDGFRb; anti-CD140b, R-PE, Clone: 28D4, BD Biosciences</td>
			<td>BD / Fisher</td>
			<td>558821</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saponin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>47306-50G-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VEcad-FITC; anti-CD144, FITC, Clone: 55-7H1, BD Biosciences</td>
			<td>BD / Fisher</td>
			<td>560411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zenon Alexa Fluor 488 Mouse IgG1 Labeling Kit</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>Z25002</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of mesh-shaped engineered cardiac tissues derived from human ips cells for in vivo myocardial repair

El protocolo actual describe métodos para generar tejidos cardíacos (ECT) de ingeniería en forma de malla escalables compuestos por células cardiovasculares derivadas de células madre pluripotentes inducidas por humanos (hiPSC), que se desarrollan hacia el objetivo del uso clínico. Los cardiomiocitos derivados de HiPSC, las células endoteliales y las células murales vasculares se mezclan con matriz de gel y luego se vierten en un molde de tejido de polidimetilsiloxano (PDMS) con postes escalonados internos rectangulares. Por día de cultivo 14 ECT maduran en una estructura de malla de 1,5 cm x 1,5 cm con paquetes de miofibra de 0,5 mm de diámetro. Los cardiomiocitos se alinean con el eje largo de cada haz y golpean espontáneamente sincrónicamente. Este enfoque se puede escalar hasta un ECT de malla más grande (3,0 cm x 3,0 cm) conservando la maduración y función de construcción. Por lo tanto, los ECT en forma de malla generados a partir de células cardíacas derivadas de hiPSC pueden ser factibles para los paradigmas de regeneración cardíaca.

El cuadro 1A, B muestra los esquemas del protocolo CM+EC y MC. Después de inducir los CM y los FC del protocolo CM+EC y los MC del protocolo MC, las células se mezclan ajustando las concentraciones finales de MC para representar entre el 10 y el 20% del total de células. El molde de tejido de 2 cm de ancho se fabrica de acuerdo con el dibujo de diseño de una hoja PDMS de 0,5 mm de espesor(Figura 2A,B). Seis millones de célu...

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Preparation of Mesh-Shaped Engineered Cardiac Tissues Derived from Human iPS Cells for In Vivo Myocardial Repair

El presente protocolo genera tejidos cardíacos de ingeniería en forma de malla que contienen células cardiovasculares derivadas de células madre pluripotentes inducidas por el hombre para permitir la investigación de la terapia de implantación celular para enfermedades del corazón.

Preparación de tejidos cardíacos de ingeniería en forma de malla derivados de células iPS humanas para la reparación del miocardio In Vivo

The current protocol describes methods to generate scalable, mesh-shaped engineered cardiac tissues (ECTs) composed of cardiovascular cells derived from ...

Este protocolo describe un método noble y fácil para crear tejidos cardíacos de ingeniería en forma de malla derivados de partes corporales inducidas por el hombre y células cardíacas derivadas de células STEM. La flexibilidad de la geometría del tejido y la escalabilidad de la función de tejido preservado son las principales ventajas de esta técnica. Las ECT de forma de malla implantada pueden restaurar una estructura cardíaca y funcionar en un modelo de infarto de miocardio de rata.Confirmando su viabilidad para su uso en terapia regenerativa cardíaca. Estas técnicas requieren el procesamiento reproducible de células STEM humanas y las habilidades de cultivo de tejidos para obtener resultados consistentes. Comience cortando una hoja PDMS curada al tamaño adecuado para permitir que la hoja se una con adhesivo de silicona para fabricar una bandeja rectangular de 21 por 20,5 milímetros con siete milímetros de largo 0,5 milímetros de ancho y postes rectangulares de 2,5 milímetros de alto en posiciones escalonadas.El espaciado horizontal entre dos líneas de postes debe ser de 2,5 milímetros. Autoclave la bandeja a 120 grados Celsius durante 20 minutos antes de recubrir el molde con 1%Poloxamer 407 en PBS durante una hora. A continuación, enjuague bien el molde con PBS y coloque el molde en un pozo de una placa de seis pozos.Para el análisis de linaje, combine las células del cardiomiocitos más los protocolos de células murales endoteliales y vasculares. De modo que la concentración final de células murales es de 10 a 20% en un número de célula total de seis veces 10 a las seis celdas por construcción. Mezclar 133 microlitros de colágeno de cola de rata soluble en ácido tipo una solución y 17 microlitros de tamampón alcalés a 17 microlitros de 10X Mínimo Esencial Medio sobre hielo.A continuación, agregue 67 microlitros de matriz de membrana de sótano a la solución de colágeno. A continuación, centrifugar las células y resuspender el pellet en 167 microlitros de alto nivel de glucosa alta Dulbecco's Minimal Essential Medium complementado con suero bovino fetal y antibióticos. Mezclar las células en la solución de matriz en hielo.A continuación, vierta cuidadosamente 400 microlitros de la suspensión de la matriz celular en el poloxámero 407 recubierto de molde de tejido PDMS. Incubar la mezcla de matriz celular en una incubadora de cultivo celular estándar a 37 grados Celsius y 5% dióxido de carbono durante 60 minutos. Cuando el tejido se haya formado, remoje cuidadosamente el molde con cuatro mililitros de medio de cultivo de TEC y devuelva la placa a la incubadora de cultivo celular durante 14 días.Antes de la implantación de la TEC, esterilizaste fórceps finos para eliminar cuidadosamente la TEC de los postes de carga. Los moldes de tejido se pueden fabricar con varios patrones, longitudes de poste y espaciado posterior para generar diferentes geometrías de ECT finales. Para este análisis, se utilizó un molde con postes de siete milímetros de largo con intervalos de 2,5 milímetros de ancho.Poloxámero 407 evita la adhesión de las células al molde y permite la formación de una estructura de malla característica, después de una rápida compactación del gel en 14 días. La estructura se mantiene incluso después de que el ECT se libera del molde. La construcción del tejido fabricado tiene aproximadamente 1,5 centímetros de ancho y 0,5 milímetros de espesor.Y el ancho de cada paquete en la malla es de aproximadamente 0,5 milímetros de media. Es posible generar un ECT de malla de 3 centímetros de ancho final que contiene 24 millones de celdas de un molde cuatro veces más grande con el mismo diseño de poste escalonado. Este ECT de malla más grande también se puede quitar fácilmente del molde y genera un acto local de fuerza equivalente a la malla más pequeña ECT.Es importante verter la mezcla de matriz celular uniformemente en el molde de tejido sin generar burbujas para evitar que se sientan defectos en el gel final. Caracterización funcional del contratista. y las relaciones de cuarta frecuencia se pueden realizar utilizando sistemas incorporados.Nuestro objetivo final es la traducción de paradigmas DE TEC en terapias clínicas que utilizan grandes estudios preclínicos animales.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Construction of Defined Human Engineered Cardiac Tissues to Study Mechanisms of Cardiac Cell Therapy

Construcción de Engineered Definido Humanos cardíacos tejidos para estudiar los mecanismos de la terapia celular cardiaca

Human cardiac tissue engineering can fundamentally impact therapeutic discovery through the development of new species-specific screening systems that ...

Investigación

Bioingeniería

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

En Vivo evaluación cuantitativa de la estructura miocárdica, la función, perfusión y viabilidad Usando computarizada micro-tomografía cardiaca

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that ...

Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

Aplicaciones de la<em&gt; En Vivo</em&gt; Pruebas funcionales de la rata tibial anterior para la evaluación de la ingeniería tisular de reparación del músculo esquelético

Despite the regenerative capacity of skeletal muscle, permanent functional and/or cosmetic deficits (e.g., volumetric muscle loss (VML) resulting from ...

Automated Contraction Analysis of Human Engineered Heart Tissue for Cardiac Drug Safety Screening

Análisis automatizado contracción de ingeniería tisular para la Detección del Corazón Humano cardíaca Drug Safety

Cardiac tissue engineering describes techniques to constitute three dimensional force-generating engineered tissues. For the implementation of these ...

Protocol for MicroRNA Transfer into Adult Bone Marrow-derived Hematopoietic Stem Cells to Enable Cell Engineering Combined with Magnetic Targeting

Protocolo para la transferencia de microARN en médula ósea hematopoyéticas células madre adultas para permitir ingeniería celular combinado con orientación magnética

While CD133+ hematopoietic stem cells (SCs) have been proven to provide high potential in the field of regenerative medicine, their low retention rates ...

Fabrication of 3D Cardiac Microtissue Arrays using Human iPSC-Derived Cardiomyocytes, Cardiac Fibroblasts, and Endothelial Cells

Fabricación de matrices de microtejidos cardíacos 3D utilizando cardiomiocitos humanos derivados de iPSC, fibroblastos cardíacos y células endoteliales

Generation of human cardiomyocytes (CMs), cardiac fibroblasts (CFs), and endothelial cells (ECs) from induced pluripotent stem cells (iPSCs) has provided ...

Single-Cell Optical Action Potential Measurement in Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes

Medición del potencial de acción óptica unicelular en cardiomiocitos derivados de células madre pluripotentes inducidas por humanos

Conventional intracellular microelectrode techniques to quantify cardiomyocyte electrophysiology are extremely complex, labor intensive, and typically ...

Cardiac Spheroids as in vitro Bioengineered Heart Tissues to Study Human Heart Pathophysiology

Esferoides cardíacos como tejidos cardíacos bioingeniería in vitro para estudiar la fisiopatología cardíaca humana

Despite several advances in cardiac tissue engineering, one of the major challenges to overcome remains the generation of a fully functional vascular ...

Fibroblast Derived Human Engineered Connective Tissue for Screening Applications

Tejido conectivo de ingeniería humana derivado de fibroblastos para aplicaciones de detección

Fibroblasts are phenotypically highly dynamic cells, which quickly transdifferentiate into myofibroblasts in response to biochemical and biomechanical ...

Engineered Lung Tissues Prepared from Decellularized Lung Slices

Tejidos pulmonares diseñados preparados a partir de rodajas pulmonares descelularizadas

There is a need for improved 3-dimensional (3D) lung models that recapitulate the architectural and cellular complexity of the native lung alveolus ex ...