Name: imaging and analysis of oil red o-stained whole aorta lesions in an aneurysm hyperlipidemia mouse model
Uploaded: 2022-05-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Imaging and Analysis of Oil Red O-Stained Whole Aorta Lesions in an Aneurysm Hyperlipidemia Mouse Model at JoVE.com

Diese Arbeit wurde zum Teil durch einen Joint Biology Consortium Microgrant unterstützt, der im Rahmen des NIH-Zuschusses P30AR070253 (P.-Y.C.) und HL135582 (M.S.) bereitgestellt wurde. Wir danken R. Webber und L. Coon für die Aufrechterhaltung der in dieser Studie verwendeten Mäuse.

mT/mG (Lagernummer 007676) und Apoe-/- (Lagernummer 002052) Mäuse wurden vom Jackson Laboratory gekauft. Myh11-CreERT2-Mäuse waren ein Geschenk von Stefan Offermanns (erhältlich im Jackson Laboratory als Lagernummer 019079). Tgfbr2fl/fl-Mäuse wurden von Harold L. Moses (Vanderbilt University) gewonnen. Alle Tierverfahren wurden unter Verwendung von Protokollen durchgeführt, die vom Yale University Institutional Animal Care and Use Committee genehmigt wurden.
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	<li>Lusis, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerosis.">Atherosclerosis.</a> Nature. 407, 233-241 (2000).</li><li>Emini Veseli, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+atherosclerosis.">Animal models of atherosclerosis.</a> European Journal of Pharmacology. 816, 3-13 (2017).</li><li>Plump, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+hypercholesterolemia+and+atherosclerosis+in+apolipoprotein+E-deficient+mice+created+by+homologous+recombination+in+ES+cells.">Severe hypercholesterolemia and atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice created by homologous recombination in ES cells.</a> Cell. 71, 343-353 (1992).</li><li>Zhang, S. H., Reddick, R. L., Piedrahita, J. A., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hypercholesterolemia+and+arterial+lesions+in+mice+lacking+apolipoprotein+E.">Spontaneous hypercholesterolemia and arterial lesions in mice lacking apolipoprotein E.</a> Science. 258, 468-471 (1992).</li><li>Ishibashi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypercholesterolemia+in+low+density+lipoprotein+receptor+knockout+mice+and+its+reversal+by+adenovirus-mediated+gene+delivery.">Hypercholesterolemia in low density lipoprotein receptor knockout mice and its reversal by adenovirus-mediated gene delivery.</a> Journal of Clinical Investigation. 92, 883-893 (1993).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-deficient+mice+develop+lesions+of+all+phases+of+atherosclerosis+throughout+the+arterial+tree.">ApoE-deficient mice develop lesions of all phases of atherosclerosis throughout the arterial tree.</a> Arteriosclerosis Thrombosis. 14, 133-140 (1994).</li><li>Chen, P. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smooth+muscle+cell+reprogramming+in+aortic+aneurysms.">Smooth muscle cell reprogramming in aortic aneurysms.</a> Cell Stem Cell. 26, 542-557 (2020).</li><li>Andres-Manzano, M. J., Andres, V., Dorado, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oil+Red+O+and+Hematoxylin+and+Eosin+Staining+for+Quantification+of+Atherosclerosis+Burden+in+Mouse+Aorta+and+Aortic+Root.">Oil Red O and Hematoxylin and Eosin Staining for Quantification of Atherosclerosis Burden in Mouse Aorta and Aortic Root.</a> Methods in Molecular Biology. 1339, 85-99 (2015).</li><li>Chen, P. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+TGF-beta+signalling+drives+vascular+inflammation+and+atherosclerosis.">Endothelial TGF-beta signalling drives vascular inflammation and atherosclerosis.</a> Nature Metabolism. 1, 912-926 (2019).</li><li>Mehlem, A., Hagberg, C. E., Muhl, L., Eriksson, U., Falkevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+neutral+lipids+by+oil+red+O+for+analyzing+the+metabolic+status+in+health+and+disease.">Imaging of neutral lipids by oil red O for analyzing the metabolic status in health and disease.</a> Nature Protocols. 8, 1149-1154 (2013).</li><li>Ferruzzi, J., Madziva, D., Caulk, A. W., Tellides, G., Humphrey, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compromised+mechanical+homeostasis+in+arterial+aging+and+associated+cardiovascular+consequences.">Compromised mechanical homeostasis in arterial aging and associated cardiovascular consequences.</a> Biomechanics and Modeling Mechanobiology. 17, 1281-1295 (2018).</li></ol>

Apolipoprotein E (Apoe) und Low Density Lipoprotein Rezeptor (Ldlr) defiziente Mäuse sind nützlich für die Untersuchung der Entwicklung und Behandlung von Atherosklerose. Forscher können die Auswirkungen von Genetik und therapeutischen Manipulationen auf die Initiierung, Progression und Regression von Atherosklerose-bedingten Krankheiten unter Verwendung der Öl-Rot-O-Färbung der gesamten Aorta bewerten9. Aorta Oil Red O Färbung und Läsionsquantifizierung ist der Goldstand...

Koronare Herzkrankheit, eine der Haupttodesursachen in den USA, wird in der Regel durch Atherosklerose verursacht, ein Prozess, der zur Bildung von Plaque in den Arterienwänden führt1. Hyperlipidämie-anfällige Apoe- und Ldlr-defiziente Mäuse sind von zentraler Bedeutung für die Untersuchung von Atherosklerose und ihren Komplikationen und die Entwicklung von Therapien2,3,4,5. Die Quantifizierung atherosklerotischer Läsionen aus einer En-face-Aorta ist eine wichtige Endpunktanalyse zur Bewertung der Auswirkungen genetischer Manipulation in verschiedenen Zelltypen. Es hilft auch, neuartige Therapien zu untersuchen, die die Initiierung, Progression und Regression atherosklerotischer Erkrankungen beeinflussen sollen. Atherosklerotische Läsionen können sich überall in der Aorta und ihren Ästen bilden (d. h. brachiozephalis, Halsschlagadern und Subclavia-Arterien in der Brust sowie Nieren-, gemeinsame Becken- und Oberschenkelarterien unterhalb des Zwerchfells)6. Eine umfassende Bewertung der Atherosklerosebelastung und eine geeignete Therapie erfordern eine Beurteilung der Krankheitslast an verschiedenen Orten, eine Herausforderung, die oft übersehen wird.
Dieses Protokoll beschreibt, wie eine umfassende Analyse von atherosklerotischen Läsionen, beginnend mit einer ungeöffneten ganzen Aorta und bis zur Vorbereitung des Gesichts, in einer einzigen Maus durchgeführt wird. Die ungeöffnete Färbung der gesamten Aorta Oil Red O ermöglicht eine schnelle, qualitative Beurteilung von lipidbeladenen Plaques in der gesamten Aorta und ihren Ästen, während die Flächenvorbereitung eine quantitative Beurteilung der atherosklerotischen Läsionsverteilung in der Mausaorta ermöglicht.
Die Technik verwendet 8 Wochen alte Mäuse mit einer glatten Muskelzell-spezifischen TGFβR2-Deletion auf dem Apoe-/- hyperlipidämischen Hintergrund (MYH11-CreERT2; Tgfbr2f/f;mT/mGf/f; Apoe-/-; im Folgenden als TGFβR2iSMC-Apoe-Mäuse bezeichnet) und Littermate Apoe-/- Kontrollen (MYH11-CreERT2;mT/mGf/f; Apoe-/-; im Folgenden als Apoe-/- Mäuse bezeichnet). Die Tiere werden 16 Wochen lang mit einer cholesterinreichen fettreichen Diät (HCHFD) als Studienmaterial gehalten7. Am Ende der Studie werden die ungeöffneten ganzen Aorten gefärbt und (einschließlich aller Hauptzweige) mit Oil Red O zur qualitativen Beurteilung von lipidbeladenen Plaques abgebildet. Die Aorten werden durch En-Face-Vorbereitung aufgeschnitten und alle atherosklerotischen Läsionen werden abgebildet und quantifiziert. Dieses Protokoll kann verwendet werden, um die atherosklerotische Läsionsentwicklung in Apoe-/- oder Ldlr-/- Hyperlipidämie-Mäusemodellen zu untersuchen und auf allgemeine aortabezogene vaskuläre Biologieanwendungen auszudehnen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 mL Eppendorf tube</td>
			<td>DENVILLE</td>
			<td>C2170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>302995</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16% Formaldehyde</td>
			<td>Polysciences</td>
			<td>18814-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>RC2546.70-5</td>
			<td>To clean the dissection tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black dissection wax</td>
			<td>CR Scientific</td>
			<td>C3541</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8267</td>
			<td>Solvent for Tamoxifen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNeasy Blood &#38; Tissue kit</td>
			<td>QIAGEN</td>
			<td>69506</td>
			<td>To isolate DNA from mouse ear</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Phosphate-buffered saline (1X DPBS), pH 7.4</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14059-11</td>
			<td>To cut the mouse skin and open the ribcage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand Economy Plain Glass Microscope Slides</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-550-A3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High cholesterol high fat diet</td>
			<td>Research Diets</td>
			<td>D12108</td>
			<td>To induce atherosclerosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging software</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td>Image J</td>
			<td>Aortic lesion quantification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>JT9079-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>06-666A</td>
			<td>To clean the glass microscope slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>McPherson-Vannas Micro Dissecting Spring Scissors</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5602</td>
			<td>To separate the heart and the aorta and to cut open the aorta and aorta branches</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope control software</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>DP Controller</td>
			<td>For aorta imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minutien pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26002-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle-25G</td>
			<td>BD</td>
			<td>305124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NonWoven Sponge</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>94442000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oil Red O</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>O-0625</td>
			<td>To stain the atherosclerosis lesions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pall Acrodisc Sterile Syringe Filters with Super Membrane</td>
			<td>VWR</td>
			<td>28143-312</td>
			<td>To filter working Oil Red O solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15021-15</td>
			<td>To dissect and clean the aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical software</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td>Prism 8</td>
			<td>Statical analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ1000</td>
			<td>For aorta dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZX16</td>
			<td>For aorta imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T5648</td>
			<td>To induce Cre-loxP recombination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek O.C.T Compound, Sakura Finetek</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25608-930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezer Style 4</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>0302-4-PO</td>
			<td>To cut the mouse skin and open the ribcage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezer Style 5</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>0302-5-PO</td>
			<td>To dissect and clean the aorta</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

imaging and analysis of oil red o-stained whole aorta lesions in an aneurysm hyperlipidemia mouse model

Apolipoprotein E (Apoe)- oder Low Density Lipoprotein Receptor (Ldlr)-defiziente hyperlipidämische Mäuse sind die beiden am häufigsten verwendeten Modelle für die Atheroskleroseforschung. Sie werden verwendet, um den Einfluss verschiedener genetischer Faktoren und verschiedener Zelltypen auf die atherosklerotische Läsionsbildung zu untersuchen und die Entwicklung neuer Therapien zu testen. Isolierung, Exzision der gesamten Aorta und Quantifizierung von Oil Red O-gefärbten atherosklerotischen Läsionen sind grundlegende morphometrische Methoden zur Bewertung der atherosklerotischen Belastung. Das Ziel dieses Protokolls ist es, eine optimierte, schrittweise chirurgische Methode zu beschreiben, um atherosklerotische Läsionen in Mausaorten mit Oil Red O zu sezieren, zu fixieren, zu isolieren, zu färben, abzubilden und zu analysieren. Da sich atherosklerotische Läsionen überall im gesamten Aortenbaum bilden können, hat diese gesamte Aorta-Öl-Rot-O-Färbemethode den Vorteil, dass lipidbeladene Plaques in der gesamten Aorta und allen Zweigen in einer einzigen Maus bewertet werden. Zusätzlich zur Öl-Rot-O-Färbung können frisch isolierte ganze Aorten für eine Vielzahl von In-vitro- und In-vivo-Experimenten und Zellisolierungen verwendet werden.

In diesem Protokoll wurden atherosklerotische Läsionen in TGFβR2iSMC-Apoe-Mäusen nach 4 Monaten mit einer HCHF-Diät analysiert7. Neben einer ausgedehnten Atherosklerose entwickelten diese Mäuse, wie bereits berichtet, sowohl thorakale als auch abdominale Aortenaneurysmen. Im Vergleich zu Apoe-/- Mäusen zeigten die Aortenwände der TGFβR2iSMC-Apoe-Mäuse eine schwere Atherosklerose, was die Sezierung der Läsionen erschwerte (Abbildung <str...

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Imaging and Analysis of Oil Red O-Stained Whole Aorta Lesions in an Aneurysm Hyperlipidemia Mouse Model

Dieses Protokoll bietet eine Schritt-für-Schritt-Anleitung zur Analyse der atherosklerotischen Belastung bei Mäusen. Ermittler können dieses Protokoll verwenden, um die Häufigkeit, den Ort und die Größe von atherosklerotischen Läsionen bei verschiedenen Tieren zu vergleichen.

Bildgebung und Analyse von ölrot-o-gefärbten ganzen Aortenläsionen in einem Aneurysma-Hyperlipidämie-Mausmodell

Apolipoprotein E (Apoe)- or low density lipoprotein receptor (Ldlr)-deficient hyperlipidemic mice are the two most commonly used models for ...

Die Quantifizierung atherosklerotischer Läsionen in apoE und anderen Arten von hyperlipidämischen Mäusen ist der Schlüssel zur Beurteilung verschiedener genetischer Faktoren und neuer Therapien. Unser Protokoll bietet Schritt-für-Schritt-Anleitungen für die Analyse der atherosklerotischen Belastung in qualitativer und quantitativer Weise in einer einzigen Maus. 16 Wochen nach der Induktion von Atherosklerose, bevor Sie das Herz durchbluten, laden Sie eine 10-Milliliter-Spritze mit 10 Millilitern DPBS und befestigen Sie eine 25-Gauge-Nadel.Heben Sie die Bauchhaut der experimentellen Maus mit einer Pinzette an und schneiden Sie mit einer feinen Schere die Haut von der Bauchbasis bis zur Halsspitze. Öffnen Sie die Bauchdecke unterhalb des Brustkorbs und heben Sie mit der Pinzette das Brustbein an, um Zugang zum Zwerchfell zu erhalten. Schneiden Sie die Membran ab und schneiden Sie den Brustkorb weg, um die Brusthöhle freizulegen.Als nächstes machen Sie einen kleinen Schnitt in den rechten Vorhof des Herzens und injizieren Sie langsam das gesamte Volumen von DPBS in die apikale linke ventrikuläre Punktion. Die Leber und die Niere färben sich hellbraun. Wenn die gesamte Kochsalzlösung durchblutet wurde, verwenden Sie einen Vliesschwamm, um die Brusthöhle von Fremdblut und -flüssigkeit zu reinigen.Nachdem die Brusthöhle abgewischt wurde, entfernen Sie die nicht-experimentellen Organe und schneiden Sie das Schlüsselbein mit einer Pinzette und einer feinen Schere ab. Legen Sie die Maus unter ein Stereomikroskop und verwenden Sie die Pinzette und die Federschere, um die Aorta zu sezieren. Wenn die Aorta isoliert wurde, bedecken Sie das Gewebe mit einem salzhaltigen Vliesschwamm und sezieren Sie die Aortenzweige, einschließlich der brachiozephalen, Carotis-, Subclavien-, Nieren-, Becken- und Oberschenkelarterien.Wenn alle Arterien, die sich von der Aorta verzweigen, isoliert wurden, verwenden Sie eine Pinzette und eine Federschere, um das zufällige Fett- und Bindegewebe um die Aorta- und Aortenäste herum sorgfältig zu sezieren und zu entfernen. Eine erfolgreiche Isolierung von Aorta und Aortenzweigen erfordert Übung und Geduld. Um den Gefäßbaum zu fixieren, laden Sie zuerst eine 10-Milliliter-Spritze mit 4% Formaldehyd in 1X DPBS und befestigen Sie eine 25-Gauge-Nadel.Denken Sie daran, immer 4% Formaldehyd in einem Abzug zuzubereiten. Führen Sie die Nadel in die apikale linksventrikuläre Punktion ein und injizieren Sie langsam das gesamte Volumen des Fixiermittels. Reinigen Sie die Brusthöhle von Fremdflüssigkeiten mit einem Vliesschwamm wie demonstriert und verwenden Sie eine Pinzette und eine Mikrosezierungs-Federschere, um das Herz von der Aorta zu trennen.Wenn die Gewebe getrennt wurden, isolieren und entfernen Sie die Aorta und ihr Hauptgefäß von einem Millimeter über der Halsschlagader bis zum Ende der Oberschenkelarterie und legen Sie das Gefäß in einen Behälter aus DPBS. Für die Öl-Rot-O-Färbung der ungeöffneten ganzen Aorta verwenden Sie Minutien-Stifte, um das Gefäß auf einer Wachs-Petrischale zu befestigen und das Gefäß mit frischem DPBS abzuspülen. Gießen Sie 25 Milliliter frische 0,45 Mikrometer porengefilterte Oil Red O-Lösung in die Schale für einen 60-minütigen Fleck bei Raumtemperatur.Tauchen Sie das Gewebe mit 60% Isopropanol für eine 20-minütige Wäsche bei Raumtemperatur ein. Am Ende der Inkubation spülen Sie das Gefäß dreimal mit frischem destilliertem Wasser für fünf Minuten pro Waschgang aus und stellen Sie das Gericht unter das Seziermikroskop. Verwenden Sie eine Pinzette und eine Federschere zum sanften Reinigen des gesamten perivaskulären Fettgewebes um die Aorta herum, um eine falsche Färbung von Oil Red O zu vermeiden, und übertragen Sie das Gefäß auf einen sauberen Glasmikroskop-Objektträger.Oil Red O markiert die lipidreiche Plaque rot, so dass die nicht plaquehaltigen Bereiche blass sind. Erfassen Sie dann digitale hochauflösende Mikroaufnahmen mit einem Lichtmikroskop, das mit einer Kamera ausgestattet ist, und speichern Sie die Bilder vorzugsweise im getaggten Bilddateiformat. Zur gegenüberliegenden Montage der Aortengewebeprobe das Gefäß in eine Wachs-Petrischale geben und das Gewebe mit frischem DPBS bedecken.Durchtrennen Sie die Halsschlagadern und Subclaviararterien des Aortenbogens und der Beckenarterien in der Bauchaorta ein bis zwei Millimeter nach den Bifurkationen. Durchtrennen Sie die Nierenarterien. Als nächstes verwenden Sie eine mikrosezierende Federschere, um die Aortenvorbereitung entlang der inneren Krümmung und der Beckenarterien längs zu öffnen und die drei Zweige des Aortenbogens entlang der größeren Krümmung bis zum Basisniveau der inneren Krümmung zu schneiden.Verwenden Sie dann Minutien-Pins, um die Aorta flach gegen die Schale zu befestigen, ohne sich mit der Lumenseite nach oben zu dehnen, und bedecken Sie das Gewebe mit frischem DPBS. Im Vergleich zu Apolipoprotein E-Knockout-Mäusen zeigen die Aortenwände der glatten Muskelzelle TGF-beta-R2 Knockout-Apolipoprotein E-Mäuse eine schwere Atherosklerose, die es schwierig macht, die Läsionen zu sezieren. Zudem sind die Aneurysmen unterhalb der suprarenalen Aorta besonders ausgedehnt und erinnern stark an fortgeschrittene menschliche Aortenaneurysmen.Hier ist ein repräsentatives Bild einer ungeöffneten Aorta von einer cholesterinreichen, fettreichen, mit Diät gefütterten TGF-beta-R2-Knockout-Apolipoprotein-E-Maus gezeigt, die mit Oil Red O gefärbt ist. Die Maus entwickelte sowohl ein aufsteigendes als auch ein abdominales Aortenaneurysma mit beschleunigter atherosklerotischer Läsionsbildung, die in den brachiocephalischen, Carotis-, Subclavium-, Becken-, Femoral- und Nierenarterien beobachtet wurde. Diese en face Oil Red O Färbung von TGF-beta-R2 Knockout Apolipoprotein E Mausgewebe zeigt eine schwere aneurysmatische Vergrößerung und deutliche Verlängerung der gesamten Aorta im Vergleich zur Apolipoprotein E Knockout Mausgruppe.Es ist wichtig, in der Lage zu sein, mit Oil Red O gefärbte Plaques von falschem Hintergrund zu unterscheiden Oil Red O gefärbtes perivaskuläres Fettgewebe. Atherosklerose-Plaques sind dreidimensionale Phänomene. Nach der Quantifizierung der 2D-Läsion der Aorten im Gesicht empfehlen wir eine Plaque-Set-Analyse wie Aortenwurzeln und die Arteria brachiocephalica.Dieses Protokoll kann auch verwendet werden, um zu entscheiden, ob ein bestimmter genetischer Faktor, eine Intervention oder eine Behandlung das Fortschreiten oder die Regression der Atherosklerose in diesen Modellen beeinflusst.

Research

JoVE Journal

Medicine

Monitoring Tumor Metastases and Osteolytic Lesions with Bioluminescence and Micro CT Imaging

Überwachung Tumormetastasen und Osteolysen mit Biolumineszenz und Micro-CT Imaging

Following intracardiac delivery of MDA-MB-231-luc-D3H2LN cells to Nu/Nu mice, systemic metastases developed in the injected animals. Bioluminescence ...

Forschung

Medizin

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Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Quantitative Analysis and Characterization of Atherosclerotic Lesions in the Murine Aortic Sinus

Atherosclerosis is a disease of the large arteries and a major underlying cause of myocardial infarction and stroke. Several different mouse models have ...

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

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An Orthotopic Glioblastoma Mouse Model Maintaining Brain Parenchymal Physical Constraints and Suitable for Intravital Two-photon Microscopy

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