Name: applying a three-dimensional uniaxial mechanical stimulation bioreactor system to induce tenogenic differentiation of tendon-derived stem cells
Uploaded: 2020-08-01T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Applying a Three-dimensional Uniaxial Mechanical Stimulation Bioreactor System to Induce Tenogenic Differentiation of Tendon-Derived Stem Cells at JoVE.com

Het onderzoek werd uitgevoerd terwijl de auteur in ontvangst van "een Universiteit van West-Australië International Fee Scholarship en een University Postgraduate Award aan de Universiteit van West-Australië". Dit werk werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (81802214).

De beschreven methoden werden goedgekeurd en uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften van de University of Western Australia Animal Ethics Committee.
1. Isolatie van muizen-TDC's
<ol><li>Euthanaseer de 6-8 weken oude C57BL/6 muizen door cervicale dislocatie.</li>
	<li>Oogst patellar pezen24 en achillespezen25.</li>
	<li>Verteren pezen van een met 6 mL van het type I collagenase (3 mg/mL) voor 3 uur. OPMERKING: Aangez...

De pees is een mechanosensitive vezelig bindweefsel. Volgens eerder onderzoek kan overtollige mechanische belasting leiden tot osteogene differentiatie van peesstamcellen, terwijl onvoldoende belasting zou leiden tot een verstoorde collageenvezelstructuur tijdens peesdifferentiatie21.
Een gemeenschappelijke mening is dat de sleutel tot een ideale bioreactor de capaciteit is om de in vitro cellulaire micro-omgeving te simuleren die de cellen in vivo ondergaan. Daarom is ...

Tendinopathie is een van de gemeenschappelijke sportblessures. Het manifesteert zich voornamelijk door pijn, lokale zwelling, verminderde spierspanning in het getroffen gebied, en disfunctie. De incidentie van tendinopathie is hoog. De aanwezigheid van achilles tendinopathie komt het meest voor bij midden- en langeafstandslopers (tot 29%), terwijl de aanwezigheid van patellar tendinopathie ook hoog is bij volleyballers (45%), basketbal (32%), atletiek (23%), handbal (15%), en voetbal (13%)1,2,3,4,5. Echter, als gevolg van de beperkte zelfhelende vermogen van de pees, en het gebrek aan effectieve behandelingen, tendinopathie nog steeds van invloed op het leven van patiënten negatief6,7. Bovendien blijft de pathogenese van tendinopathie onduidelijk. Er zijn veel onderzoeken geweest naar de pathogenese, voornamelijk met inbegrip van "ontstekingstheorie", "degeneratietheorie", "overmatig gebruikstheorie", enzovoort8. Op dit moment, veel onderzoekers geloofden dat tendinopathie was te wijten aan de mislukte zelf-reparatie aan de micro-verwondingen veroorzaakt door overmatige mechanische belasting van de pees ervaringen9,10.
Tendon-afgeleide stamcellen (TSCs), als primaire voorloper cellen van peescellen, spelen een essentiële rol in zowel de ontwikkeling van tendinopathie en functionele en structurele restauratie na tendinopathie11,12,13. Er werd gemeld dat mechanische stressstimulatie de proliferatie en differentiatie van osteocyten, osteoblasten, gladde spiercellen, fibroblasten, mesenchymale stamcellen en andere krachtgevoelige cellen14,15,16,17,18kan veroorzaken . Daarom kunnen TSC's, als een van de mechanosensitive en multipotent cellen , eveneens worden gestimuleerd om te differentiëren door mechanische belasting19,20.
Verschillende mechanische belastingparameters (laadsterkte, laadfrequentie, laadtype en laadperiode) kunnen tdsc's er echter toe aanzetten zich te onderscheiden in verschillende cellen21. Een effectief en geldig mechanisch belastingregime is dus zeer belangrijk voor tenogenese. Bovendien zijn er verschillende soorten bioreactoren als stimulatiesystemen die momenteel worden gebruikt voor het leveren van mechanische belasting aan TSC's. De principes van elk soort bioreactor zijn verschillend, zodat zijn de mechanische ladingsparameters die aan verschillende bioreactoren overeenkomen ook verschillend. Daarom is er een eenvoudig, economisch en reproduceerbaar stimulatieprotocol in trek, inclusief het type bioreactor, het bijbehorende stimulatiemedium en het mechanische belastingregime.
Het onderhavige artikel beschrijft een methode op basis van een driedimensionaal (3D) uniaxial stretching systeem om de TSCs te stimuleren om zich te onderscheiden in peesachtig weefsel. Er zijn zeven stadia van het protocol: isolatie van muizen-TSCs, cultuur en uitbreiding van muizen-TSCs, voorbereiding van stimulatiecultuurmedium voor celbladvorming, celbladvorming door te kweken in stimulatiemedium, voorbereiding van 3D-peesstamcelconstructie, assemblage van het uniaxiale mechanische stimulatiecomplex en evaluatie van het mechanische gestimuleerde in vitrodonpees-achtige weefsel. De hele procedure duurt minder dan 3 weken om de 3D-celconstructie te verkrijgen, wat veel minder is dan sommige bestaande methoden22,23. Het huidige protocol is bewezen te kunnen tdc's te onderscheiden in peesweefsel, en het is betrouwbaarder dan de huidige veelgebruikte tweedimensionale (2D) stretching systeem21. De effectiviteit werd aangetoond door histologie. Kortom, het huidige protocol is eenvoudig, economisch, reproduceerbaar en geldig.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:860px;" width="860">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="156">
			<td height="156" style="height:156px;width:240px;">Ascorbic acid</td>
			<td style="width:213px;">Sigma-aldrich</td>
			<td style="width:119px;">PHR1008-2G</td>
			<td style="width:288px;"></td>
		</tr>
		<tr height="130">
			<td height="130" style="height:130px;">Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco&#228; by Life Technologies</td>
			<td align="right">1908361</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Histology processor</td>
			<td style="width:213px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">TP 1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Minimal Essential Medium (Alpha-MEM)</td>
			<td>Gibco&#228; by Life Technologies</td>
			<td align="right" style="width:119px;">2003802</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;width:240px;">Mouse Tendon Derived Stem Cell</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:288px;">Isolated from Achilles tendons of 6- to 8-wk-old C57BL/6 mice. Then digested with type I collagenase (3 mg/ml; MilliporeSigma, Burlington, MA, USA) for 3 h and passed through a 70 mmcell strainer to yield single-cell suspensions.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:213px;">Sigma-aldrich</td>
			<td style="width:119px;">441244</td>
			<td style="width:288px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Streptomycin and penicillin mixture</td>
			<td>Gibco&#228; by Life Technologies</td>
			<td align="right">15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="168">
			<td height="168" style="height:168px;width:240px;">Three-dimensional Uniaxial Mechanical Stimulation Bioreactor System</td>
			<td style="width:213px;">Centre of Orthopaedic Translational Research, Medical School, University of Western Australia</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:288px;">Available from the corresponding author upon request. Or make it according to our design* *Wang T, Lin Z, Day RE, et al. Programmable mechanical stimulation influences tendon homeostasis in a bioreactor system. Biotechnol Bioeng. 2013;110(5):1495&#8211;1507. doi:10.1002/bit.24809</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Trypsin</td>
			<td>Gibco&#228; by Life Technologies</td>
			<td style="width:119px;">1858331</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

applying a three-dimensional uniaxial mechanical stimulation bioreactor system to induce tenogenic differentiation of tendon-derived stem cells

Tendinopathie is een veel voorkomende chronische peesziekte met betrekking tot ontsteking en degeneratie in een orthopedisch gebied. Met een hoge morbiditeit, beperkte zelfherstellende capaciteit en, belangrijker nog, geen definitieve behandelingen, tendinopathie nog steeds van invloed op de kwaliteit van het leven van patiënten negatief. Pees-afgeleide stamcellen (TDC's), als primaire voorloper cellen van peescellen, spelen een essentiële rol in zowel de ontwikkeling van tendinopathie, en functionele en structurele restauratie na tendinopathie. Zo zou een methode die in vitro de in vivo differentiatie van TSCs in peescellen kan nabootsen nuttig zijn. Hier beschrijft het huidige protocol een methode op basis van een driedimensionaal (3D) uniaxial stretchingsysteem om de TSCs te stimuleren om zich te onderscheiden in peesachtige weefsels. Er zijn zeven stadia van het huidige protocol: isolatie van muizen-TSCs, cultuur en uitbreiding van muizen-TSCs, voorbereiding van stimulatiecultuurmedium voor celbladvorming, celbladvorming door culturing in stimulatiemedium, voorbereiding van 3D-peesstamcelconstructie, assemblage van het uniaxiale mechanische stimulatiecomplex en evaluatie van het mechanische gestimuleerde in vitropepeweefsel. De effectiviteit werd aangetoond door histologie. De hele procedure duurt minder dan 3 weken. Om extracellulaire matrixdepositie te bevorderen, werd 4,4 mg/mL ascorbinezuur gebruikt in het stimulatiecultuurmedium. Een gescheiden kamer met een lineaire motor zorgt voor nauwkeurige mechanische belasting en is draagbaar en gemakkelijk af te stellen, die wordt toegepast voor de bioreactor. Het laadregime in het huidige protocol was 6% spanning, 0,25 Hz, 8 uur, gevolgd door 16 uur rust gedurende 6 dagen. Dit protocol kan celdifferentiatie in de pees nabootsen, wat nuttig is voor het onderzoek van het pathologische proces van tendinopathie. Bovendien wordt het peesachtige weefsel mogelijk gebruikt om de genezing van pees bij peesletsel als een gemanipuleerde autologe graft te bevorderen. Kortom, het huidige protocol is eenvoudig, economisch, reproduceerbaar en geldig.

Vóór mechanische stimulatie werden TSC's tot 100% samenvloeiing in compleet medium en vertoonden ze een ongeorganiseerde ultrastructurele morfologie(figuur 2A). Na 6 dagen van uniaxiale stretching mechanische belasting, extracellulaire matrix (ECM) en cel uitlijningen waren goed georiënteerd (Figuur 2B). Cellen waren goed bevolkt en goed gehuld in ECM na mechanische belasting. Celmorfologie werd gepresenteerd om langwerpig te zijn en leek meer op normale peescel in vergelijking met di...

Watch this Scientific Journal Video about Applying a Three-dimensional Uniaxial Mechanical Stimulation Bioreactor System to Induce Tenogenic Differentiation of Tendon-Derived Stem Cells at JoVE.com

Applying a Three-dimensional Uniaxial Mechanical Stimulation Bioreactor System to Induce Tenogenic Differentiation of Tendon-Derived Stem Cells

Een driedimensionaal uniaxiale mechanische stimulatie bioreactorsysteem is een ideale bioreactor voor tenogeen-specifieke differentiatie van pees-afgeleide stamcellen en neo-peesvorming.

Toepassing van een drie-dimensionale uniaxiale mechanische stimulatie bioreactor systeem om tenogene differentiatie van pees-afgeleide stamcellen induceren

Tendinopathy is a common chronic tendon disease relating to inflammation and degeneration in an orthopaedic area. With high morbidity, limited ...

Verschillende mechanische belastingparameters kunnen pees-afgeleide STAMcellen veroorzaken die in verschillende cellen worden onderscheiden. We introduceren een gedetailleerd proces van de toepassing van deze driedimensionale uniaxiale mechanische stimulatie bioreactor systeem om tenogene differentiatie van pees-afgeleide STAM cellen induceren. Tendinopathie is een van de meest voorkomende sportblessures in de orthopedische afdeling.De aanwezigheid van achilles tendinopathie komt het meest voor met maximaal 29% voor midden-en lange afstand lopers, terwijl de aanwezigheid van patella tendinopathie is ook hoog in atleten van volleybal, basketbal, atletiek, handbal, en voetbal. Echter, als gevolg van de beperkte zelfhelende vermogen van pees en het gebrek aan effectieve behandeling, tendinopathie heeft nog steeds een aanzienlijk negatief effect op de kwaliteit van leven van patiënten. Pees afgeleide STAM cellen, bekend als TSCs als de belangrijke voorloper cellen van pezen cellen, spelen een belangrijke rol in de ontwikkeling van tendinopathie, evenals hun functionele en structurele restauratie na tendinopathie.Anders dan mechanische belastingparameters, zoals belastingsstress, laadfrequentie, laadtype en laadperiode, kunnen TDSC's zich in verschillende cellen onderscheiden. Dus, een effectieve en geldige mechanische belasting regime is zeer belangrijk voor pees genesis. Er zijn zeven stadia van het huidige protocol, met inbegrip van isolatie van muizen TSCs, cultuur en uitbreiding van muizen TSCs, voorbereiding van stimulatie cultuur medium voor cel bladvorming, cel bladvorming door culturing in stimulatie medium, voorbereiding van 3D pees STAMcel constructie, assemblage van de uniaxiale cellen stretching mechanische stimulatie complex, en evaluatie van de mechanische gestimuleerd in vitro pees-achtig weefsel.Isolatie van muizen TDC's. Gebruikt bij muizen die zes tot acht weken oude muizen door cervicale dislocatie. Oogst patellapezen en achillespezen.Verteren pees met zes milliliter Type 1 collagenase gedurende drie uur. Verzamel de cellen en cultuur het in volledige alfa-MEM met 10% van FBS en 1% van streptomycine en penicilline mengsel gedurende zeven dagen. TSCs identificeren met fluorescentie geactiveerde celsorling op stroomcytometrie, expressie van celoppervlakmarkeringen, waaronder CD44, CD90 en Sca-1.Gebrek aan de uitdrukking van CD34 en CD45. Doorgang en vriescellen. Doorgangscellen zullen worden gebruikt voor verdere stappen.Cultuur en uitbreiding van muizen TDC's. Neem de opgewarmde muizen pees STAM cellen. Voeg langzaam extra vier tot vijf milliliter van volledige alfa MEM.Breng het mengsel in een 15 milliliter centrifuge buis door een pipet. Herhoog met medium tot een totaal van acht milliliter door een pipet. Plaats de buis in centrifuge een goed evenwicht.Centrifugecellen op 347 g gedurende vijf minuten. Haal een buis uit de centrifuge. Controleer de pellet aan de onderkant.Decanteer het vrije medium. Opnieuw cellen voorzichtig opschorten in een tot twee milliliter compleet medium. Vermijd het maken van te veel bubbels.Breng opnieuw opgehangen cellen over naar een T75-kolf door een pipet. Gebruik een pipet om volledig alfa-MEM-medium aan de kolf toe te voegen om een totaal volume van 10 milliliter te bereiken met de uiteindelijke concentratie van 13.000 cellen per vierkante centimeter. Plaats de kolf in de couveuse en kweek deze op 37 graden met 5% kooldioxide.Verander het medium om de drie dagen. Observeer en monitor de cellen onder een microscoop bij het veranderen van het medium totdat cellen werden gekweekt tot 100% samenvloeiing. Voorbereiding van stimulatiecultuurmedium voor celbladvorming.Giet 15 milliliter complete alfa MEM medium in een 15 milliliter steriele buis. Voeg zes microliter ascorbinezuur in 15 milliliter medium aan de uiteindelijke concentratie van 4,4 microgram per milliliter. Meng zachtjes door op en neer te keren.Celbladvorming door te kweken in stimulatiemedium. Gooi niet-normaal volledig alfamemmedium voorzichtig weg. Raak de cellen aan de onderkant van de kolf niet aan.Voeg 10 milliliter stimulatie medium langzaam. Vermijd verstoring van de volledig samenvloeiende cellen. Kweek de cellen in stimulatiemedium gedurende negen dagen en verander het medium om de drie dagen om voldoende celblad te genereren bij 37 graden met 5% kooldioxide.Voorbereiding van 3D pees STAMcelconstructie. Haal de kolf uit de couveuse. Gooi het stimulatiemedium volledig weg.Was de monolaag celplaat met PBS door de kolf te wervelen. Gooi de PBS volledig weg. Gebruik een pipet om een milliliter, 0,25% trypsine toe te voegen aan de hoek van de kolf.Tik op de hoek van de kolf om het monolaagcelvel los te maken totdat de hoek van het celvel de onderkant van de kolf wast. Voeg onmiddellijk negen milliliter complete alpha MEM medium om de reactie van trypsinization te stoppen. Blijf de kolf wervelen om het monolaagcelvel volledig af te pellen.Giet het totaal om de cel vel hechten in petrischaal met medium. Gebruik een steriele pincet om een hoek van het celblad op te rapen en 15 keer met de klok mee te draaien. Pak een ander uiteinde van het celblad en draai 10 keer tegen de klok in om een peesachtige in vitro constructie te formuleren.Montage van het uniaxial-stretching mechanische stimulatiecomplex in uniek ontworpen bioreactor. Sluit de haken door de connector, dan aan te passen aan twee centimeter tussen twee haken. Wind de 3D TDC's voorzichtig drie keer op de demohaak aan elke haak.Zet de haken met celconstructie op de kamer van de bioreactor door de schroeven aan twee uiteinden aan te draaien. Vul de kamer met het complete alfa-MEM-medium. Sluit de versneller via de kabel aan op de kweekkamer.Snijd de haaks connector door steriele pincet. Schakel de vermogens- en kanaalcontroller in om een mechanische stimulatie te starten. Zet het deksel op de kamer, volg de indicator lichten, en zorg ervoor dat de bioreactor goed kan functioneren.Zet de bioreactor in de couveuse en onderwerp de 3D-cel constructie aan mechanische stretching. Het laadregime is 6%-stam, 0,25 Hertz-frequentie, acht uur gevolgd door 16 uur rust gedurende zes dagen. Evaluatie van het mechanische gestimuleerde in vitro peesachtig weefsel.maak de schroeven los door een schroevendraaier en haal de montage voorzichtig uit. Zet de pees-achtige weefsel in 4%PFA voor fixatie gedurende 15 minuten, Plaats de vaste pees-achtige weefsel in een biopsie cassette met biopsie van huisdieren. Proces om een monster te dehydrateren.En tot slot, evalueren door de ZvH histologische status. Herhaal het hele protocol en extract RNA uit de pees-achtige weefsel voor de evaluatie van de expressie van tenogene markers door qPCR. Vóór mechanische stimulatie zullen TSCs groeien tot 100% samenvloeiing in volledig medium en een ongeorganiseerde uiterlijke structurele morfologie weergeven.Na zes dagen zag je volgende stretching, mechanische belasting, extra cellulaire matrix, en de cel uitlijningen waren goed georiënteerd. Cellen waren goed bevolkt en goed gehuld in ECM na mechanische belasting. Celmorfologie werd gepresenteerd om te worden gevestigd en was meer vergelijkbaar met normale peescellen in vergelijking met degene met zonder stretching.Celdichtheid in celconstructie met belasting was hoger dan die zonder belasting. qPCR resultaten toonden aan dat de huidige zaken verhoogde de expressie van tenogene markers, met inbegrip van scleraxis, Mohawk, tenomodulin, en Type 1 collageen in vergelijking met degenen die door de genoemde cultuur. In termen van mechanische stimulatie bioreactor systeem, gescheiden kamer met lineaire motor werd gebruikt in ons huidige protocol.Omdat het nauwkeurige mechanische belasting kan bieden en het is draagbaar en gemakkelijk aan te passen in vergelijking met de manieren waarop de traditionele 2D-cellen blad en de biaxiale stretch, 3D-cel constructie is meer vergelijkbaar met de echte vorm van pees. En de uniaxiale rek is meer vergelijkbaar met de sterke punten kenmerken van peescellen. Dit biedt een theoretische basis van het gebruik van 3D uniaxiale uitgerekt systeem om de differentiatie van TDC's te stimuleren.Zo werd 2D-celblad uiteindelijk doorgestuurd naar een 3D-celconstructie en onderging het eenaxiale in het huidige protocol. Volgens ons bioreactorsysteem is ons laadregime 6%-stam, 0,25 Hertz-frequentie, acht uur gevolgd door 16 uur rust gedurende zes dagen. Ten slotte werd de effectiviteit van het protocol aangetoond door morfologie en het expressieniveau van tenogene markers.Het hele operatieproces is eenvoudig, maar de operator moet aandacht besteden om de omgeving van TDSC te allen tijde gesteriliseerd te houden. Er zijn vele toepassingen van ons protocol. Het proces van het stimuleren van TDC's om differentiatie in vivo na te bootsen is nuttig voor het onderzoek van pathologisch proces van tendinopathie.Bovendien biedt dit protocol een reproduceerbare methode voor gerichte differentiatie van TDC's in peesachtig weefsel. Dus het kan eenvoudig en effectief worden gebruikt voor potentiële gemanipuleerde peescultuur. Samengevat, het toepassen van een 3D uniaxiale mechanische stimulatie bioreactor systeem is eenvoudig, economisch, reproduceerbaar, en een geldige methode om tenogene differentiatie van TSCs induceren.Ons protocol geeft het hele proces in detail.

Research

JoVE Journal

Medicine

Utilizing Transcranial Magnetic Stimulation to Study the Human Neuromuscular System

Gebruik te maken van Transcranial Magnetic Stimulation aan de Human neuromusculaire systeem Study

Transcranial magnetic stimulation (TMS) has been in use for more than 20 years 1, and has grown exponentially in popularity over the past decade.  While ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolatie, karakterisering en vergelijkende differentiatie van humane Dental Pulp stamcellen uit permanente tanden met behulp van twee verschillende methoden

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Utilizing Repetitive Transcranial Magnetic Stimulation to Improve Language Function in Stroke Patients with Chronic Non-fluent Aphasia

Gebruik makend van Repetitieve transcraniële magnetische stimulatie om Taal-functie van CVA patiënten te verbeteren met chronische niet-vloeiende afasie

Transcranial magnetic stimulation (TMS) has been shown to significantly improve language function in patients with non-fluent aphasia1. In this ...

A Three-dimensional Tissue Culture Model to Study Primary Human Bone Marrow and its Malignancies

Een Drie-dimensionale Tissue Culture Model om te studeren Primary humaan beenmerg en zijn Malignancies

Tissue culture has been an invaluable tool to study many aspects of cell function, from normal development to disease. Conventional cell culture methods ...

Three Dimensional Cultures: A Tool To Study Normal Acinar Architecture vs. Malignant Transformation Of Breast Cells

Drie dimensionaal culturen: Een hulpmiddel om te studeren Normaal Acinaire Architectuur versus maligne transformatie van cellen borst

Invasive breast carcinomas are a group of malignant epithelial tumors characterized by the invasion of adjacent tissues and propensity to metastasize. The ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

Kwantificering van de Breast Cancer Cell Invasiviteit met een drie-dimensionale (3D) Model

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

Driedimensionale (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Studeren alvleesklier- Stamcel Kenmerken voor het ontwikkelen van nieuwe behandelingsstrategieën

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Three-dimensional Alginate-bead Culture of Human Pituitary Adenoma Cells

Driedimensionale alginaat-bead cultuur van de mens hypofyseadenoom Cells

A three-dimensional culture method is described in which primary pituitary adenoma cells are grown in alginate beads. Alginate is a polymer derived from ...

A Simple Mechanical Procedure to Create Limbal Stem Cell Deficiency in Mouse

Een eenvoudige mechanische Procedure aanmaken Limbale Stem Cell Deficiency in Mouse

Limbal stem cell deficiency (LSCD) is a state of malfunction or loss of limbal epithelial stem cells, after which the corneal epithelium is replaced with ...