Name: paper-based preconcentration and isolation of microvesicles and exosomes
Uploaded: 2020-04-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Paper-Based Preconcentration and Isolation of Microvesicles and Exosomes at JoVE.com

מחקר זה היה נתמך על ידי הקרן הלאומית למחקר של קוריאה, גרנט NRF-2018R1D1A09084044. י. ה. לי היה נתמך על ידי מלגת מחקר מאוניברסיטת Kwangwoon בשנת 2019. הייארין קים נתמכת על-ידי תוכנית הפיתוח של מומחי התעשייה של המשרד הקוריאני למסחר, תעשייה ואנרגיה (MOTIE), מופעל על ידי מכון קוריאה לקידום טכנולוגיה (KIAT) (לא. P0002397, תוכנית HRD להתכנסות תעשייתית של התקנים חכמים לבישים).

1. ייצור התקנים
<ol><li>הגדר את האזור שיודפס על נייר באמצעות תוכנת מדפסת (טבלת חומרים). הערה: העיצוב כולל 12 שכבות בדוגמת שעווה שבהן הקטרים של האזורים העגולים מעוגלים בהדרגה ממרחק של 5 מ"מ עד 2 מ"מ (איור 1A).</li>
	<li>הדפס שעווה הידרופובי על האזורים המיועדים משני צידי הנייר ה?...

<ol>
	<li>Edgar, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Q+&amp;+A:+What+are+exosomes,+exactly.">Q &amp; A: What are exosomes, exactly.</a> BMC Biology. 14 (1), 1-7 (2016).</li><li>Contreras-Naranjo, J. C., Wu, H. J., Ugaz, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidics+for+exosome+isolation+and+analysis:+Enabling+liquid+biopsy+for+personalized+medicine.">Microfluidics for exosome isolation and analysis: Enabling liquid biopsy for personalized medicine.</a> Lab on a Chip. 17 (21), 3558-3577 (2017).</li><li>Simons, M., Raposo, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exosomes+-+vesicular+carriers+for+intercellular+communication.">Exosomes - vesicular carriers for intercellular communication.</a> Current Opinion in Cell Biology. 21 (4), 575-581 (2009).</li><li>St&#229;hl, A. L., Johansson, K., Mossberg, M., Kahn, R., Karpman, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exosomes+and+microvesicles+in+normal+physiology,+pathophysiology,+and+renal+diseases.">Exosomes and microvesicles in normal physiology, pathophysiology, and renal diseases.</a> Pediatric Nephrology. 34 (1), 11-30 (2019).</li><li>Chen, C., Lin, B. R., Hsu, M. Y., Cheng, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paper-based+devices+for+isolation+and+characterization+of+extracellular+vesicles.">Paper-based devices for isolation and characterization of extracellular vesicles.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52722 (2015).</li><li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origami-paper-based+device+for+microvesicle/exosome+preconcentration+and+isolation.">Origami-paper-based device for microvesicle/exosome preconcentration and isolation.</a> Lab on a Chip. 19 (23), 3917-3921 (2019).</li><li>Raposo, G., Stoorvogel, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles:+Exosomes,+microvesicles,+and+friends.">Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and friends.</a> Journal of Cell Biology. 200 (4), 373-383 (2013).</li><li>Lee, Y., El Andaloussi, S., Wood, M. J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exosomes+and+microvesicles:+Extracellular+vesicles+for+genetic+information+transfer+and+gene+therapy.">Exosomes and microvesicles: Extracellular vesicles for genetic information transfer and gene therapy.</a> Human Molecular Genetics. 21, 125-134 (2012).</li><li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Field-Free+Isolation+of+Exosomes+from+Extracellular+Vesicles+by+Microfluidic+Viscoelastic+Flows.">Field-Free Isolation of Exosomes from Extracellular Vesicles by Microfluidic Viscoelastic Flows.</a> ACS Nano. 11 (7), 6968-6976 (2017).</li><li>Marczak, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+isolation+and+preconcentration+of+exosomes+by+ion+concentration+polarization.">Simultaneous isolation and preconcentration of exosomes by ion concentration polarization.</a> Electrophoresis. 39 (15), 2029-2038 (2018).</li><li>Livshts, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+exosomes+by+differential+centrifugation:+Theoretical+analysis+of+a+commonly+used+protocol.">Isolation of exosomes by differential centrifugation: Theoretical analysis of a commonly used protocol.</a> Scientific Reports. 5, 1-14 (2015).</li><li>Chiriac&#242;, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lab-on-chip+for+exosomes+and+microvesicles+detection+and+characterization.">Lab-on-chip for exosomes and microvesicles detection and characterization.</a> Sensors. 18 (10), 3175 (2018).</li><li>Lobb, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+exosome+isolation+protocol+for+cell+culture+supernatant+and+human+plasma.">Optimized exosome isolation protocol for cell culture supernatant and human plasma.</a> Journal of Extracellular Vesicles. 4 (1), 1-11 (2015).</li><li>Taylor, D. D., Shah, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+of+isolating+extracellular+vesicles+impact+down-stream+analyses+of+their+cargoes.">Methods of isolating extracellular vesicles impact down-stream analyses of their cargoes.</a> Methods. 87, 3-10 (2015).</li><li>Han, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrokinetic+size-based+spatial+separation+of+micro/nanospheres+using+paper-based+3d+origami+preconcentrator.">Electrokinetic size-based spatial separation of micro/nanospheres using paper-based 3d origami preconcentrator.</a> Analytical Chemistry. 91 (16), 10744-10749 (2019).</li><li>Yeh, S. H., Chou, K. H., Yang, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+pre-concentration+with+high+enrichment+factors+at+a+fixed+location+in+paper-based+microfluidic+devices.">Sample pre-concentration with high enrichment factors at a fixed location in paper-based microfluidic devices.</a> Lab on a Chip. 16 (5), 925-931 (2016).</li></ol>

למרות Exo-PAD שימש בהצלחה עבור העשרה ובידוד של מיקרושלפוחיות ו אקסוזומים, מספר נקודות קריטיות צריך להיחשב בזהירות: 1) הדגירה של התנור זמן וטמפרטורה במהלך הכנת המכשיר, 2) זמן עיבוד, 3) יישום של מתח עם מספרי שכבות משתנות, שטח לדוגמה קטרים, ו 4) הישימות
זמן הדגירה והטמפרטורה הניתנים בפ...

שלפוחיות ואקסוזומים הן ממברנות קטנים מדידת מדידה 0.2-1 מיקרומטר ו 30-200 ננומטר, בהתאמה. הם מופרשים לתוך סביבת החילוץ על ידי כמה סוגי תאים שונים1,2,3,4,5. הם מכילים מידע תא הורים בצורה של תת קבוצות של DNA, mrna, mirna, חלבונים, ושומנים, ולזרום ברחבי הגוף באמצעות נוזלי גוף שונים כגון סרום, פלזמה, שתן, נוזל שדרתי, נוזל שפיר, ורוק6,7,8,9. לכן, טכניקות לבידוד יעיל של מיקרושלפוחיות ואקסוזומים מנוזלים ביולוגיים יכולים לספק הזדמנויות נרחבות בתחומים של אבחון, פרוגנוזה, ניטור בזמן אמת של מחלות, כמו גם בפיתוח של therapeutics חדש.
עם זאת, שיטת הבידוד המקובלת למיקרו-שלפוחית ואקסוזומים המבוססת על הארכה היא זמן רב וגורמת לאובדן וזיהום משמעותיים של המדגם. זה בגלל שהוא כרוך מספר pipetting מסורבלת וטעינה שלבים ומהשליך של ריאגנטים שונים עם חוזר ונשנה5,6,10,11,12. יתר על כן, את המתח להטות גבוה הנגרמת על ידי מעקב (~ 100,000 x g) יכול לגרום לפירוק הפיזי של מיקרושלפוחיות ו אקסוזומים, מניב שיעורי התאוששות גרועה (5-כ 23%)6,13,14. לכן, יש לפתח טכניקת בידוד יעילה ובעלת משקל למיקרו-שלפוחיות ואקסוזומים כדי להפחית את הנזק וההפסד, ובכך להשיג שיעורי התאוששות גבוהים יותר.
התקן המבוסס על נייר אוריגמי (Exo-PAD) פותח לבידוד פשוט, עדין ויעיל מאוד של מיקרושלפוחיות ואקסוזומים6. העיצוב של ה-Exo-PAD הוא נייר רב-מקופל, עם שטחים לדוגמה המחוברים באופן סדרתי היורדים בהדרגה בקוטר. טכניקת ההפולריזציה (הקאמרי), שהיא תופעה ננו-אלקטרוקינטית הטעונה בbiomolecules, משולבת בעיצוב ייחודי זה. השימוש ב-Exo-PAD הביא להעשרת העשרה של המיקרושלפוחיות ואקסוזומים בשכבות מסוימות ובבידוד שלהם על ידי התפתחות המכשיר. מאמר זה מתאר את ה-Exo-PAD בפירוט, החל מייצור ההתקן ומהפעולה הכוללת לניתוח השימוש בו, כדי להמחיש את השיטה ולהציג את תוצאות הנציגים6.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1356px;" width="1355">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:397px;">Ag/AgCl electrodes</td>
			<td style="width:207px;">A-M Systems, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">531500</td>
			<td style="width:633px;">0.15&#34; diameter</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Albumin from Bovine Serum (BSA), Alexa Fluor 594 conjugate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A13101</td>
			<td>BSA conjugated with Alexa Fluor 594 (Ex/Em: 590/617 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Carbonate-Bicarbonate Buffer</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C3041-50CAP</td>
			<td>Carbonate buffer</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">CorelDraw software (Coral Co., Canada)</td>
			<td>Corel Corporation</td>
			<td></td>
			<td>Printer software to define wax printing region</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ColorQube 8870</td>
			<td>Xerox Corporation</td>
			<td></td>
			<td>Wax printer</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Chromatography paper grade 1</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>3001-861</td>
			<td>Cellulose paper, dimension: 20 * 20 cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fluorescent-labeled exosome standards</td>
			<td>HansaBioMed Life Sciences, Ltd.</td>
			<td>HBM-F-PEP-100</td>
			<td>Exosome labeled with FITC (Ex/Em: 490/520 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Keithley 2410 current/voltage source-meter</td>
			<td>Keithley Instruments, Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Current&#8211;voltage source measurement system</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Nafion perfluorinated resin solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>31175-20-9</td>
			<td>Permselective membrane, 20 wt.% in the mixture of lower aliphatic alcohols and water; contains 34% water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NanoSight LM10</td>
			<td>NanoSight Technology</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Nanoparticle tracking analysis (NTA) machine</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate-buffered saline (PBS, pH7.4)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10010001</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

paper-based preconcentration and isolation of microvesicles and exosomes

שלפוחיות ואקסוזומים הן קרומי שלפוחיות קטנות שפורסמו לסביבת החילוץ והופץ ברחבי הגוף. מכיוון שהם מכילים שונים תא הורים biomolecules כגון DNA, mRNA, miRNA, חלבונים, ושומנים, שלהם העשרה ובידוד הם צעדים קריטיים לניצול שלהם כמו סמנים פוטנציאליים יישומים קליניים. עם זאת, שיטות בידוד קונבנציונאלי (למשל, הטיות) גורמות לאובדן משמעותי ונזק למיקרושלפוחיות ואקסוזומים. שיטות אלה דורשות גם שלבים חוזרים ונשנים מרובים של העברת החומרים, טעינה, ובזבוז של ריאגנטים. מאמר זה מתאר שיטה מפורטת לעיצוב התקן המבוסס על נייר אוריגמי (Exo-PAD) המיועדת להעשרה ולבידוד יעילים של מיקרושלפוחיות ואקסוזומים באופן פשוט. העיצוב הייחודי של ה-Exo-PAD, המורכב משכבות רב-אקורדיון הכוללות שכבות משולבות משולבות עם שטחים לדוגמה מתכנסת, משולבים עם טכניקת הקיטוב של ריכוז היונים, ובכך מאפשרת לעשרת העשרה של המיקרושלפוחיות והאקסוזומים על שכבות ספציפיות. כמו-כן, המיקרושלפוחיות והאקסוזומים המועשרת מבודדים על-ידי התגלגלות בפשטות של ה-Exo-PAD.

זמן הפעולה חייב להיות מיטבי כדי להשיג את התשואה המקסימלית של המיקרושלפוחיות והאקסוזומים המועשרת. לא מספיק זמן אינו מאפשר העברה מספקת של המיקרו-שלפוחית והאקסוזומים, אשר מפחית את ההעשרה, בעוד זמן מופרז מתדרדר המיקוד המרחבי ולכן מפזר את המיקרושלפוחיות ואקסוזומים. לפיכך, באמצעות שלב האופטימ...

Watch this Scientific Journal Video about Paper-Based Preconcentration and Isolation of Microvesicles and Exosomes at JoVE.com

Paper-Based Preconcentration and Isolation of Microvesicles and Exosomes

מוצג פרוטוקול להמציא מכשיר מבוסס נייר להעשרת האפקטיבית והבידוד של המיקרושלפוחיות ואקסוזומים.

ריכוז מבוסס נייר ובידוד של מיקרושלפוחיות ואקסוזומים

Microvesicles and exosomes are small membranous vesicles released to the extracellular environment and circulated throughout the body. Because they ...

בפרוטוקול זה, אנו מתארים שיטה פשוטה לייצור מכשיר מבוסס נייר בשם XO Pad, המיועד להעשרה יעילה בבידוד של וריקולים חוץ-תאיים. ה- XO Pad הוא מכשיר פשוט שיכול לרכז ולבודד קדם-תאיים ללא שימוש בכימיקלים או במכונות עבודה, תוך הצגת שיעורי התאוששות גבוהים יותר מאשר שיטות קונבנציונליות. התחל בהגדרת האזור להדפסה באמצעות תוכנת מדפסת.העיצוב צריך להיות 12 שכבות בדוגמת שעווה שבו קטרים של אזורי מדגם עגולים בהדרגה צר מחמישה עד שני מילימטרים. לאחר מכן, להדפיס שעווה הידרופובית על האזורים המיועדים משני צידי נייר תאית. מניחים את הנייר המודפס שעווה בתנור מעבדה במשך 80 שניות ב 120 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן לחתוך את הנייר המודפס שעווה עם חותך כדי להפוך התקנים בודדים XO Pad.זרוק חמישה ושני microliters של קרום סלקטיבי פרם על אזורי המדגם ברוב השכבות השמאלית וי הימנית ביותר, בהתאמה. מניחים את השכבות מקודדות עם קרום סלקטיבי סלם על צלחת חמה ב 70 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות כדי להתאדות את הממס. לאחר מכן לאטום את המשטח החיצוני ביותר של השכבה מצופה מול פתרון החיץ עם סרט רגיש ללחץ, עוזב חור קטן.מקפלים את התקן XO Pad הלוך ושוב לאורך הקווים הלבנים כדי לחבר את כל אזורי המדגם. פיפטה 15 מיקרוליטרים של מיקרובסיקל מדגם exosome באזורים מדגם מתכנס לחכות כמה שניות כדי להבטיח הרטבה מלאה. מניחים שני תאים אקריליים בשני הקצוות של כרית ה- XO ומהדקים אותו בצורה מאובטחת עם קליפי קלסר קטנים כדי למנוע את ההתגלות.מלאו את התאים ב-110 מיקרוליטרים של 0.1X PBS והכניסו שתי אלקטרודות כסף. לאחר מכן השתמש במערכת מדידת מקור מתח זרם כדי להחיל 30 וולט על האלקטרודות במשך 20 דקות. כדי לבודד את המיקרוווסיקים והאקסוזומים המועשרים, הפרד את כרית ה- XO המקופלת מהתאיים האקריליים ופרש את המכשיר כדי לבודד את החלקיקים המועשרים מהשכבות האחרות.אגרוף את אזורי המדגם בשכבות שמונה ותשע שבו microvesicles ו exosomes מועשרים לניתוח במורד הזרם. בדיקה של נדידת זמן-לשגות של מיקרואורגניזמים ואקסוזומים בעלי תווית פלואורסצנטית בוצעה על מנת לייעל את זמן הפעולה להתאוששות מרבית של החלקיקים המועשרים. התעצמויות הפלואורסצנטיות בכל אזורי המדגם כומתו באמצעות תוכנת ImageJ.לפני תהליך ההעשרה, מיקרואורגניזמים ואקסוזומים פוזרו בכל אזורי המדגם עם ירידה הדרגתית בעוצמה. לאחר 10 דקות של עיבוד, החלקיקים היגרו אלקטרו-קינטית ותקע טרום ריכוז מיידי הופיע בשכבה שבע. כשהגיע הזמן ל-20 דקות, מיקרואורגניזמים ואקסוזומים התמקדו מאוד בשכבות 8 ו-9 והועשרו פי חמישה על סמך התעצמות הפלואורסצנטיות.שלמות המיקרואורגניזמים והאקסוזומים המועשרים בשכבה 8 נחקרה עם SEM. באופן משמעותי יותר חלקיקים שאינם פגומים נצפו לאחר תהליך ההעשרה. כמו כן נותחה התפלגות הגודל של המיקרואורגניזמים והאקסוזומים המועשרים.לאחר מכן, הריכוז בפועל של המיקרואורגניזמים המועשרים והאקסוזומים באזורי המדגם בשכבות 6, 8 ו-10 נותח. בשכבה 8, המיקרואורגניזמים והאקסוזומים התרכזו מראש בגורם של 5.58, אך בשכבות האחרות לא נצפה ריכוז מקדים מורגש. כדי להבטיח את יכולת ההתרבות של הליך זה, פעל במדויק את הפרוטוקול עבור זמן הדגירה בתנור וטמפרטורה במהלך אימות המכשיר וזמן הפעולה של המכשיר מכיוון ואלהים הם התנאים הממוטבים.ניתן להשתמש ב- XO Pad גם כדי להפריד ולבודד קבוצה חוץ-תאית מדגימות עשירות בחלבון, כגון סרום או פלזמה, באמצעות מאגר פחמתי. פרוטוקול זה יכול לספק כלי הכנה יעיל ופשוט, עם יכולות טרום ריכוז ובודד הנדרשות למחקר קליני, כגון אבחון, אספקת תרופות, אימונותרפיה וטיפולים אחרים.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Identification of Plant Ice-binding Proteins Through Assessment of Ice-recrystallization Inhibition and Isolation Using Ice-affinity Purification

זיהוי של הצמח קרח מחייב חלבונים באמצעות הערכה של עיכוב קרח-recrystallization ובידוד באמצעות טיהור קרח-זיקה

Ice-binding proteins (IBPs) belong to a family of stress-induced proteins that are synthesized by certain organisms exposed to subzero temperatures. In ...

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

בידוד, מדידות הנשימה של המיטוכונדריה מ תודרנית לבנה

Mitochondria are essential organelles involved in numerous metabolic pathways in plants, most notably the production of adenosine triphosphate (ATP) from ...

Protein Digestion, Ultrafiltration, and Size Exclusion Chromatography to Optimize the Isolation of Exosomes from Human Blood Plasma and Serum

עיכול חלבון אולטראפילטרציה, גודל אי-הכללה של כרומטוגרפיה כדי למטב את ניתוקה של Exosomes פלזמה דם אנושי, סרום

Exosomes, a type of nanovesicle released from all cell types, can be isolated from any bodily fluid. The contents of exosomes, including proteins and ...

Rapid Isolation of the Mitoribosome from HEK Cells

בידוד מהיר של Mitoribosome מתאי HEK

The human mitochondria possess a dedicated set of ribosomes (mitoribosomes) that translate 13 essential protein components of the oxidative ...

Detection and Isolation of Apoptotic Bodies to High Purity

זיהוי ובידוד של מוות לגופים טוהר גבוהה

Apoptotic bodies (ApoBDs), microvesicles and exosomes are the key members of the extracellular vesicle family, with ApoBDs being one of the largest type. ...

Isolation of Physiologically Active Thylakoids and Their Use in Energy-Dependent Protein Transport Assays

בידוד של פעיל מבחינה פיזיולוגית Thylakoids, השימוש בהם במסגרת מבחני תחבורה אנרגיה תלוית חלבון

Chloroplasts are the organelles in green plants responsible for carrying out numerous essential metabolic pathways, most notably photosynthesis. Within ...

Isolation of Glomeruli and In Vivo Labeling of Glomerular Cell Surface Proteins

Isolation of Glomeruli and In Vivo Labeling of Glomerular Cell Surface Proteins

בידוד של Glomeruli, In Vivo תיוג של חלבונים פני שטח התא Glomerular

Proteinuria results from the disruption of the glomerular filter that is composed of the fenestrated endothelium, glomerular basement membrane, and ...

Looking Outwards: Isolation of Cyanobacterial Released Carbohydrate Polymers and Proteins

מבט כלפי חוץ: בידוד של Cyanobacterial שוחרר פולימרים פחמימות וחלבונים

Cyanobacteria can actively secrete a wide range of biomolecules into the extracellular environment, such as heteropolysaccharides and proteins. The ...

Isolation and Analysis of Plasma Lipoproteins by Ultracentrifugation

בידוד וניתוח של ליפופרוטאינים פלזמה על ידי Ultracentrifugation

Analysis of plasma lipoproteins and apolipoproteins is an essential part for the diagnosis of dyslipidemia and studies of lipid metabolism and ...

Isolation of Active Caenorhabditis elegans Nuclear Extract and Reconstitution for In Vitro Transcription

Isolation of Active Caenorhabditis elegans Nuclear Extract and Reconstitution for In Vitro Transcription

בידוד של תמצית גרעינית פעילה של Caenorhabditis elegans ו reconstitution עבור תמלול במבחנה

Caenorhabditis elegans has been an important model system for biological research since it was introduced in 1963. However, C. elegans has not been fully ...