Name: paper-based preconcentration and isolation of microvesicles and exosomes
Uploaded: 2020-04-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Paper-Based Preconcentration and Isolation of Microvesicles and Exosomes at JoVE.com

Denne studien ble støttet av National Research Foundation of Korea, Grant NRF-2018R1D1A1A09084044. J. H. Lee ble støttet av et forskningsstipend fra Kwangwoon University i 2019. Hyerin Kim ble støttet av "Competency Development Program for Industry Specialists" av det koreanske handels-, industri- og energidepartementet (MOTIE), drevet av Korea Institute for Advancement of Technology (KIAT) (Nr. P0002397, HRD-program for industriell konvergens av bærbare smarte enheter).

1. Enhetsfabrikasjon
<ol><li>Definer området som skal skrives ut på papir ved hjelp av skriverprogramvare (Tabell over materialer). MERK: Designet har 12 voksmønstrede lag der diameterene på de sirkulære prøveområdene gradvis smalner fra 5 mm til 2 mm (Figur 1A).</li>
	<li>Skriv ut hydrofob voks på de angitte områdene på begge sider av cellulosepapiret (Tabell over materialer) ved hjelp av en kommersiell voksskriver ( Tabell overmateri...

<ol>
	<li>Edgar, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Q+&amp;+A:+What+are+exosomes,+exactly.">Q &amp; A: What are exosomes, exactly.</a> BMC Biology. 14 (1), 1-7 (2016).</li><li>Contreras-Naranjo, J. C., Wu, H. J., Ugaz, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidics+for+exosome+isolation+and+analysis:+Enabling+liquid+biopsy+for+personalized+medicine.">Microfluidics for exosome isolation and analysis: Enabling liquid biopsy for personalized medicine.</a> Lab on a Chip. 17 (21), 3558-3577 (2017).</li><li>Simons, M., Raposo, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exosomes+-+vesicular+carriers+for+intercellular+communication.">Exosomes - vesicular carriers for intercellular communication.</a> Current Opinion in Cell Biology. 21 (4), 575-581 (2009).</li><li>St&#229;hl, A. L., Johansson, K., Mossberg, M., Kahn, R., Karpman, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exosomes+and+microvesicles+in+normal+physiology,+pathophysiology,+and+renal+diseases.">Exosomes and microvesicles in normal physiology, pathophysiology, and renal diseases.</a> Pediatric Nephrology. 34 (1), 11-30 (2019).</li><li>Chen, C., Lin, B. R., Hsu, M. Y., Cheng, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paper-based+devices+for+isolation+and+characterization+of+extracellular+vesicles.">Paper-based devices for isolation and characterization of extracellular vesicles.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52722 (2015).</li><li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origami-paper-based+device+for+microvesicle/exosome+preconcentration+and+isolation.">Origami-paper-based device for microvesicle/exosome preconcentration and isolation.</a> Lab on a Chip. 19 (23), 3917-3921 (2019).</li><li>Raposo, G., Stoorvogel, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+vesicles:+Exosomes,+microvesicles,+and+friends.">Extracellular vesicles: Exosomes, microvesicles, and friends.</a> Journal of Cell Biology. 200 (4), 373-383 (2013).</li><li>Lee, Y., El Andaloussi, S., Wood, M. J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exosomes+and+microvesicles:+Extracellular+vesicles+for+genetic+information+transfer+and+gene+therapy.">Exosomes and microvesicles: Extracellular vesicles for genetic information transfer and gene therapy.</a> Human Molecular Genetics. 21, 125-134 (2012).</li><li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Field-Free+Isolation+of+Exosomes+from+Extracellular+Vesicles+by+Microfluidic+Viscoelastic+Flows.">Field-Free Isolation of Exosomes from Extracellular Vesicles by Microfluidic Viscoelastic Flows.</a> ACS Nano. 11 (7), 6968-6976 (2017).</li><li>Marczak, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+isolation+and+preconcentration+of+exosomes+by+ion+concentration+polarization.">Simultaneous isolation and preconcentration of exosomes by ion concentration polarization.</a> Electrophoresis. 39 (15), 2029-2038 (2018).</li><li>Livshts, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+exosomes+by+differential+centrifugation:+Theoretical+analysis+of+a+commonly+used+protocol.">Isolation of exosomes by differential centrifugation: Theoretical analysis of a commonly used protocol.</a> Scientific Reports. 5, 1-14 (2015).</li><li>Chiriac&#242;, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lab-on-chip+for+exosomes+and+microvesicles+detection+and+characterization.">Lab-on-chip for exosomes and microvesicles detection and characterization.</a> Sensors. 18 (10), 3175 (2018).</li><li>Lobb, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+exosome+isolation+protocol+for+cell+culture+supernatant+and+human+plasma.">Optimized exosome isolation protocol for cell culture supernatant and human plasma.</a> Journal of Extracellular Vesicles. 4 (1), 1-11 (2015).</li><li>Taylor, D. D., Shah, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+of+isolating+extracellular+vesicles+impact+down-stream+analyses+of+their+cargoes.">Methods of isolating extracellular vesicles impact down-stream analyses of their cargoes.</a> Methods. 87, 3-10 (2015).</li><li>Han, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrokinetic+size-based+spatial+separation+of+micro/nanospheres+using+paper-based+3d+origami+preconcentrator.">Electrokinetic size-based spatial separation of micro/nanospheres using paper-based 3d origami preconcentrator.</a> Analytical Chemistry. 91 (16), 10744-10749 (2019).</li><li>Yeh, S. H., Chou, K. H., Yang, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+pre-concentration+with+high+enrichment+factors+at+a+fixed+location+in+paper-based+microfluidic+devices.">Sample pre-concentration with high enrichment factors at a fixed location in paper-based microfluidic devices.</a> Lab on a Chip. 16 (5), 925-931 (2016).</li></ol>

Selv om Exo-PAD ble brukt med hell for berikelse og isolering av mikroveskler og eksosomer, bør flere kritiske punkter vurderes nøye: 1) ovnsinkubasjonstiden og temperaturen under fremstillingen av enheten, 2) behandlingstid, 3) påføring av spenning med varierende lagtall og prøveområdediametere, og 4) anvendelighet til kliniske prøver.
Inkubasjonstiden og temperaturen som er gitt i protokollen er optimaliserte forhold for å fremstille en pålitelig enhet. Lengre inkubasjonstider eller...

Mikrokjøretøy og eksosomer er små membran vesikler som måler henholdsvis 0,2-1 μm og 30-200 nm. De utskilles i det ekstracellulære miljøet av flere forskjellige celletyper1,,2,,3,,4,5. De inneholder foreldrecelleinformasjon i form av undergrupper av DNA, mRNA, miRNA, proteiner og lipider, og sirkulerer i hele kroppen via ulike kroppsvæsker som serum, plasma, urin, cerebrospinalvæske, fostervann og spytt6,7,8,9. Dermed kan teknikker for effektiv isolering av mikrovesikler og eksosomer fra biologiske væsker gi omfattende muligheter innen diagnose, prognose og sanntidsovervåking av sykdom, samt i utviklingen av nye terapeutiske midler.
Den konvensjonelle isolasjonsmetoden for mikroveskler og eksosomer basert på ultracentrifugering er imidlertid ekstremt tidkrevende og forårsaker betydelig tap og forurensning av prøven. Dette er fordi det innebærer flere tungvint pipettering og lasting trinn og kassering av ulike reagenser med gjentatt ultracentrifugation5,6,10,11,12. Videre kan det høye skjærstresset forårsaket av ultracentrifugation (~ 100.000 x g)forårsake fysisk lysis av mikroveskler og eksosomer, noe som gir dårlig utvinning (5-23%)6,13,14. Derfor må en svært effektiv, diskret isolasjonsteknikk for mikroveskler og eksosomer utvikles for å redusere skade og tap, og dermed oppnå høyere utvinningsgrad.
En origami-papirbasert enhet (Exo-PAD) ble utviklet for enklere, mildere og svært effektiv isolering av mikroveskler og eksosomer6. Utformingen av Exo-PAD er et papir med flerefold med seriellede prøveområder som gradvis reduseres i diameter. Ionkonsentrasjonspolariseringsteknikken (ICP), som er et nanoelektrokinetisk fenomen som prekonstruerer ladede biomolekyler, ble integrert med denne unike designen. Bruk av Exo-PAD resulterte i femdoble berikelse av mikrovesiklene og eksosomene i bestemte lag og deres isolasjon ved ganske enkelt å utfolde enheten. Denne artikkelen beskriver Exo-PAD i detalj, fra den generelle enheten fabrikasjon og drift til analyse av bruken, for å illustrere metoden og vise representative resultater6.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1356px;" width="1355">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:397px;">Ag/AgCl electrodes</td>
			<td style="width:207px;">A-M Systems, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">531500</td>
			<td style="width:633px;">0.15&#34; diameter</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Albumin from Bovine Serum (BSA), Alexa Fluor 594 conjugate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A13101</td>
			<td>BSA conjugated with Alexa Fluor 594 (Ex/Em: 590/617 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Carbonate-Bicarbonate Buffer</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C3041-50CAP</td>
			<td>Carbonate buffer</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">CorelDraw software (Coral Co., Canada)</td>
			<td>Corel Corporation</td>
			<td></td>
			<td>Printer software to define wax printing region</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ColorQube 8870</td>
			<td>Xerox Corporation</td>
			<td></td>
			<td>Wax printer</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Chromatography paper grade 1</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>3001-861</td>
			<td>Cellulose paper, dimension: 20 * 20 cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fluorescent-labeled exosome standards</td>
			<td>HansaBioMed Life Sciences, Ltd.</td>
			<td>HBM-F-PEP-100</td>
			<td>Exosome labeled with FITC (Ex/Em: 490/520 nm)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Keithley 2410 current/voltage source-meter</td>
			<td>Keithley Instruments, Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Current&#8211;voltage source measurement system</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Nafion perfluorinated resin solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>31175-20-9</td>
			<td>Permselective membrane, 20 wt.% in the mixture of lower aliphatic alcohols and water; contains 34% water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NanoSight LM10</td>
			<td>NanoSight Technology</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Nanoparticle tracking analysis (NTA) machine</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate-buffered saline (PBS, pH7.4)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10010001</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

paper-based preconcentration and isolation of microvesicles and exosomes

Mikrokjøretøy og eksosomer er små membranøse vesikler som frigjøres til det ekstracellulære miljøet og sirkuleres i hele kroppen. Fordi de inneholder ulike foreldrecelleavledede biomolekyler som DNA, mRNA, miRNA, proteiner og lipider, er deres berikelse og isolasjon kritiske skritt for deres utnyttelse som potensielle biomarkører for kliniske applikasjoner. Konvensjonelle isolasjonsmetoder (f.eks. ultracentrifugation) forårsaker imidlertid betydelig tap og skade på mikroveskler og eksosomer. Disse metodene krever også flere repeterende trinn av ultracentrifugation, lasting, og sløse av reagenser. Denne artikkelen beskriver en detaljert metode for å fremstille en origami-papirbasert enhet (Exo-PAD) designet for effektiv berikelse og isolering av mikroveskler og eksosomer på en enkel måte. Den unike utformingen av Exo-PAD, som består av trekkspilllignende flerfoldede lag med konvergerende prøveområder, er integrert med ionkonsentrasjonspolariseringsteknikken, og muliggjør dermed femdoblet berikelse av mikrovesiklene og eksosomene på bestemte lag. I tillegg isoleres de berikede mikrovesiklene og eksosomene ved ganske enkelt å utfolde Exo-PAD.

Driftstiden må optimaliseres for å oppnå maksimal utvinningsutbytte av de berikede mikrovesiklene og eksosomene. Utilstrekkelig tid tillater ikke tilstrekkelig migrering av mikrovesiklene og eksosomene, noe som reduserer berikelsen, mens overdreven tid forverrer den romlige fokuseringen og sprer dermed mikrovesiklene og eksosomene. Dermed, gjennom tiden optimalisering trinn, maksimal preconcentration faktor av mikrovesicles og eksosomer og den endelige plasseringen der mikrovesicles og eksosomer er mest beriket kan id...

Watch this Scientific Journal Video about Paper-Based Preconcentration and Isolation of Microvesicles and Exosomes at JoVE.com

Paper-Based Preconcentration and Isolation of Microvesicles and Exosomes

Presentert er en protokoll for å fremstille en papirbasert enhet for effektiv berikelse og isolering av mikroveskler og eksosomer.

Papirbasert preconcentration og isolering av mikrovesicles og exosomer

Microvesicles and exosomes are small membranous vesicles released to the extracellular environment and circulated throughout the body. Because they ...

I denne protokollen beskriver vi en enkel metode for å fremstille en papirbasert enhet kalt XO Pad, som er designet for effektiv berikelse i isolasjon av ekstracellulære vesikler. XO Pad er en enkel enhet som kan pre-konsentrere og isolere ekstracellulær vesikkel uten bruk av kjemikalier eller arbeidsmaskiner, samtidig som den viser høyere utvinningshastighet enn konvensjonelle metoder. Begynn med å definere området som skal skrives ut med skriverprogramvaren.Designet skal ha 12 voksmønstrede lag der diameteren på de sirkulære prøveområdene gradvis smalner fra fem til to millimeter. Deretter skriver du ut hydrofob voks på de angitte områdene på begge sider av cellulosepapiret. Legg det vokstrydede papiret i en laboratorieovn i 80 sekunder ved 120 grader Celsius, og klipp deretter det voksskrevne papiret med en kutter for å lage individuelle XO Pad-enheter.Slipp en fem og to mikroliter perm selektiv membran på prøveområdene i venstre mest og høyre de fleste lag, henholdsvis. Plasser lagene kodet med perm selektiv membran på en kokeplate ved 70 grader Celsius i 30 minutter for å fordampe oppløsningsvæsken. Tet deretter den ytterste overflaten av det belagte laget mot bufferløsningen med trykkfølsom tape, og etterlater et lite hull.Brett XO Pad-enheten frem og tilbake langs de hvite linjene for å konvergerende koble alle prøveområder. Pipette 15 mikroliter av mikrovesicleen og eksosomprøven i konvergerende prøveområder og vent noen sekunder for å sikre fullstendig fukting. Plasser to akrylkamre i begge ender av XO Pad og klem den godt fast med små bindemiddelklemmer for å hindre utfoldelse.Fyll kamrene med 110 mikroliter på 0,1 X PBS og sett inn to sølvelektroder. Bruk deretter et strømspenningskildemålingssystem til å påføre 30 volt på elektrodene i 20 minutter. For å isolere de berikede mikrovesiklene og eksosomer, skille den brettede XO Pad fra akrylkamrene og utfolde enheten for å isolere de berikede partiklene fra de andre lagene.Punch ut prøveområdene i lag åtte og ni hvor mikrovesiklene og eksosomer er beriket for nedstrøms analyse. En tidsforløp migrasjon analyse av fluorescerende merkede mikrovesikler og eksosomer ble utført for å optimalisere driftstiden for maksimal gjenoppretting av berikede partikler. Fluorescensintensitetene i alle prøveområder ble kvantifisert med ImageJ-programvare.Før berikelsesprosessen ble mikrovesikler og eksosomer spredt i alle prøveområder med en gradvis reduksjon i intensiteten. Etter 10 minutters behandling migrerte partiklene elektro-kinetisk og en umiddelbar pre-konsentrasjonsplugg dukket opp på lag syv. Da tiden nådde 20 minutter, var mikrovesiklene og eksosomer sterkt fokusert på lag åtte og ni og beriket fem ganger basert på fluorescensintensitetene.Integriteten til de berikede mikrovesiklene og eksosomer i lag åtte ble undersøkt med SEM. Signifikant flere ikke-skadede partikler ble observert etter berikelsesprosessen. Størrelsesfordelingen av de berikede mikrovesiklene og eksosomer ble også analysert.Deretter ble den faktiske konsentrasjonen av de berikede mikrovesiklene og eksosomer på prøveområdene i lag seks, åtte og 10 analysert. I lag åtte var mikrovesiklene og eksosomer prekonsentrert av en faktor på 5,58, men ingen merkbar pre-konsentrasjon ble observert i de andre lagene. For å sikre reproduserbarheten av denne prosedyren, fulgte nettopp protokollen for ovnsinkubasjonstid og temperatur under enhetsverifisering og enhetsdriftstid fordi de er de optimaliserte forholdene.XO Pad kan også brukes til å skille og isolere ekstracellulær vesikkel fra proteinrike prøver, som serum eller plasma, ved hjelp av karbonatbuffer. Denne protokollen kan gi et effektivt, enkelt forberedelsesverktøy, med sine pre-konsentrerende og isolerende evner som kreves for klinisk forskning, for eksempel diagnose, legemiddellevering, immunterapi og andre terapeutiske midler.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Identification of Plant Ice-binding Proteins Through Assessment of Ice-recrystallization Inhibition and Isolation Using Ice-affinity Purification

Identifisering av Plant is-bindende proteiner ved å bedømme is-rekrystallisasjon inhibering og isolering ved bruk av is-affinitetsrensing

Ice-binding proteins (IBPs) belong to a family of stress-induced proteins that are synthesized by certain organisms exposed to subzero temperatures. In ...

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Isolasjon og respiratoriske målinger av mitokondrier fra Arabidopsis thaliana

Mitochondria are essential organelles involved in numerous metabolic pathways in plants, most notably the production of adenosine triphosphate (ATP) from ...

Protein Digestion, Ultrafiltration, and Size Exclusion Chromatography to Optimize the Isolation of Exosomes from Human Blood Plasma and Serum

Protein fordøyelse, ultrafiltrasjon og størrelse utelukkelse kromatografi å optimalisere isolering av Exosomes fra menneskelig blod Plasma og Serum

Exosomes, a type of nanovesicle released from all cell types, can be isolated from any bodily fluid. The contents of exosomes, including proteins and ...

Rapid Isolation of the Mitoribosome from HEK Cells

Rask isolering av Mitoribosome fra HEK celler

The human mitochondria possess a dedicated set of ribosomes (mitoribosomes) that translate 13 essential protein components of the oxidative ...

Detection and Isolation of Apoptotic Bodies to High Purity

Gjenkjennings- og isolering av apoptotisk organer til høy renhet

Apoptotic bodies (ApoBDs), microvesicles and exosomes are the key members of the extracellular vesicle family, with ApoBDs being one of the largest type. ...

Isolation of Physiologically Active Thylakoids and Their Use in Energy-Dependent Protein Transport Assays

Isolering av fysiologisk aktiv Thylakoids og deres bruk i energi avhengig av Protein Transport analyser

Chloroplasts are the organelles in green plants responsible for carrying out numerous essential metabolic pathways, most notably photosynthesis. Within ...

Isolation of Glomeruli and In Vivo Labeling of Glomerular Cell Surface Proteins

Isolation of Glomeruli and In Vivo Labeling of Glomerular Cell Surface Proteins

Isolasjonen av Glomeruli og i Vivo merking av Glomerular celle overflaten proteiner

Proteinuria results from the disruption of the glomerular filter that is composed of the fenestrated endothelium, glomerular basement membrane, and ...

Looking Outwards: Isolation of Cyanobacterial Released Carbohydrate Polymers and Proteins

Looking utover: isolering av Cyanobacterial Released karbohydrater polymerer og proteiner

Cyanobacteria can actively secrete a wide range of biomolecules into the extracellular environment, such as heteropolysaccharides and proteins. The ...

Isolation and Analysis of Plasma Lipoproteins by Ultracentrifugation

Isolasjon og analyse av plasmalipoproteiner ved ultracentrifugation

Analysis of plasma lipoproteins and apolipoproteins is an essential part for the diagnosis of dyslipidemia and studies of lipid metabolism and ...

Isolation of Active Caenorhabditis elegans Nuclear Extract and Reconstitution for In Vitro Transcription

Isolation of Active Caenorhabditis elegans Nuclear Extract and Reconstitution for In Vitro Transcription

Isolering av aktiv caenorhabditt elegans kjernefysisk ekstrakt og rekonstituering for in vitro transkripsjon

Caenorhabditis elegans has been an important model system for biological research since it was introduced in 1963. However, C. elegans has not been fully ...