Name: double direct injection of blood into the cisterna magna as a model of subarachnoid hemorrhage
Uploaded: 2020-08-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage at JoVE.com

हम प्राइमेसेन प्लेटफॉर्म (नॉर्मंडी रूएन विश्वविद्यालय, फ्रांस) को इमेजिंग उपकरण और श्री अरनॉड अरेबो, श्रीमती जूली मौकोटेल और श्रीमती मार्टिन डबोइस, पशु आवास और देखभाल के लिए धन्यवाद देते हैं। हम प्रोटोकॉल के वीडियो टेप के लिए उसकी आवाज उधार देने के लिए श्रीमती Celeste निकोला शुक्रिया अदा करते हैं । इस काम को एफआरएम, नॉर्मंडी रूएन विश्वविद्यालय और इनसेर्म के तत्वावधान में सीनरी नॉरमैंडी परिपक्वता कार्यक्रम, प्रियतम एवीसी द्वारा समर्थित किया गया था। नॉरमैंडी क्षेत्र और यूरोपीय संघ (3R परियोजना) । यूरोप यूरोपीय क्षेत्रीय विकास कोष (ERDF) के साथ Normandy में शामिल हो जाता है ।

सभी प्रक्रियाओं को फ्रांसीसी नैतिक समिति और यूरोपीय संसद के निर्देश 2010/63/यूरोपीय संघ और वैज्ञानिक प्रयोजनों के लिए इस्तेमाल जानवरों की सुरक्षा के लिए परिषद के दिशा निर्देशों के अनुसार एच कास्टेल की द?...

साह के क्षेत्र में अनुसंधान की तीव्रता और पिछले बीस वर्षों में एंडोवैस्कुलर और औषधीय उपचार विकल्पों जैसी चिकित्सीय रणनीतियों के विकास के बावजूद, मृत्यु दर अस्पताल में प्रवेश के पहले सप्ताह के भीतर अ?...

सबराचनॉय नकसीर (एसएएच) सभी स्ट्रोक के मामलों का 5% तक खाता है और प्रति वर्ष 100,000 प्रति 7.2 से 9 रोगियों की घटना के साथ एक अपेक्षाकृत सामान्य विकृति का गठन करता है, जिसमें अध्ययन1,,2,3के आधार पर20%-60%की मृत्यु दर होती है। तीव्र चरण में, मृत्यु दर रक्तस्राव, पुनर्बंद, सेरेब्रल वासोस्पास्म (सीवीएस) और/या चिकित्सा जटिलताओं की गंभीरता के कारण होती है4। जीवित बचे लोगों में, प्रारंभिक मस्तिष्क चोट (ईबीआई) रक्तस्राव के परेंचिमल विस्तार और इंट्राक्रैनियल दबाव में अचानक वृद्धि के साथ जुड़ी हुई है, जिसके परिणामस्वरूप प्राथमिक मस्तिष्क इस्केमिया5 और लगभग 10%-15% मामलों में तत्काल मृत्यु हो सकती है6। साह के प्रारंभिक "तीव्र" चरण के बाद, पूर्वानुमान "माध्यमिक" या विलंबित सेरेब्रल इस्केमिया (डीसीआई) की घटना पर निर्भर करता है, जो सेरेब्रल कंप्यूटेड टोमोग्राफी द्वारा लगभग 40% रोगियों में पता चला, और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई)7, 8,के बाद रोगियों के80%तक। अधिकांश एसएडी रोगियों में एन्यूरिज्म टूटने के बाद 4 से 21 दिनों के बीच होने वाले सीवीएस के अलावा, डीसीआई 9 के परिणामस्वरूप माइक्रोथ्रोम्बोसिसगठन के माध्यम से बहुफैक्टोरल डिफ्यूज मस्तिष्क घाव, सेरेब्रल परफ्यूजन, न्यूरोइंफ्लैमेशन, और कॉर्टिकल फैलने वाले अवसाद (सीएसडी)10,11,,,12, 13,13हो सकते हैं। यह 30% SAH बचे लोगों को प्रभावित करता है और दृश्य स्मृति, मौखिक स्मृति, प्रतिक्रिया समय, और कार्यकारी, विसुओस्पाटियल और भाषा कार्यों सहित संज्ञानात्मक कार्यों को प्रभावित करता है14 दैनिक जीवन15ख़राब । सीवीएस और/या एसएएपी रोगियों में खराब संज्ञानात्मक परिणामों को रोकने के लिए वर्तमान मानक उपचार सीए2 + सिग्नलिंग और वासोकॉन्स्रिक्शन की रुकावट पर आधारित हैं, जो सीए2 + चैनल अवरोधकों का उपयोग करके निमोडिपाइन के रूप में करते हैं । हालांकि, हाल ही में वासोकोंस्ट्रिशन को लक्षित करने वाले नैदानिक परीक्षणों से रोगी के न्यूरोलॉजिकल परिणाम और सीवीएस16की रोकथाम के बीच वियोजन का पता चला, जो साह-दीर्घकालिक परिणामों में शामिल अधिक जटिल रोगविज्ञानी तंत्र का सुझाव देता है। इसलिए, मूल चिकित्सीय हस्तक्षेपों का परीक्षण करने के लिए साह के साथ पैथोलॉजिकल घटनाओं की संख्या और वैध और मानकीकृत पशु मॉडलों के विकास की अधिक समझ के लिए एक चिकित्सा की आवश्यकता है।
मनुष्यों में साह के लिए ज्यादातर जिम्मेदार एक इंट्राक्रैनियल एन्यूरिज्म का टूटना प्रीक्लिनिकल पशु मॉडल में नकल करना मुश्किल है। वर्तमान में, एन्यूरिज्म टूटना और साह स्थिति का अंतरिम रूप से परीक्षण मध्य मस्तिष्क धमनी (एंडोवैस्कुलर पंचर मॉडल) के छिद्र द्वारा किया जा सकता है जो चूहों17, 18,18में सीवीएस और सेंसिवोमोटोर डिस्फंक्शन के लिए जिम्मेदार है। रक्तस्राव की शुरुआत और इस मॉडल में रक्त के प्रसार पर किसी भी संभावित नियंत्रण की कमी के कारण, एंडोवैस्कुलर टूटना के बिना साह मॉडल उत्पन्न करने के लिए कृंतक में अन्य तरीके विकसित किए गए हैं। अधिक सटीक रूप से, वे मैग्ना सिस्टर्ना19 में एक या डबल इंजेक्शन या प्रीचियामैटिक सिस्टर्न20में एक इंजेक्शन के माध्यम से सबराचनॉइड अंतरिक्ष में धमनी रक्त के प्रत्यक्ष प्रशासन से मिलकर बनता है। एंडोवैस्कुलर टूटना के बिना इन माउस मॉडल का मुख्य लाभ सर्जिकल प्रक्रिया और इंजेक्शन रक्त नमूने की गुणवत्ता और मात्रा को पुन: पेश करने की संभावना है। विशेष रूप से एंडोवैस्कुलर छिद्र द्वारा मॉडल पर इस मॉडल का एक और लाभ जानवर की सामान्य भलाई का संरक्षण है। तथ्य की बात के रूप में, यह सर्जरी कैरोटिड दीवार टूटने के लिए आवश्यक की तुलना में कम आक्रामक और तकनीकी रूप से कम चुनौतीपूर्ण है। इस अंतिम मॉडल में, जानवर को अंतर्तुब किया जाना चाहिए और यांत्रिक रूप से हवादार होना पड़ता है, जबकि बाहरी कैरोटिड धमनी में मोनोफिलामेंट डाला जाता है, और आंतरिक कैरोटिड धमनी में उन्नत होता है। यह संभावना तार पथ से पोत बाधा के कारण क्षणिक इस्केमिया की ओर जाता है । नतीजतन, सर्जरी से जुड़े सह-रुग्णता (मरणासन्न राज्य, महत्वपूर्ण दर्द और मृत्यु) एंडोवैस्कुलर छिद्र मॉडल की तुलना में डबल इंजेक्शन मॉडल में कम महत्वपूर्ण है। एक अधिक सुसंगत साह होने के अलावा, डबल डायरेक्ट इंजेक्शन विधि अनुसंधान और परीक्षण में पशु कल्याण का अनुपालन करती है (संज्ञाहरण के तहत कम समय, सर्जरी और संकट में ऊतक व्यवधान से दर्द) और प्रोटोकॉल अध्ययन और कार्मिक प्रशिक्षण के लिए उपयोग किए जाने वाले जानवरों की न्यूनतम कुल संख्या की ओर जाता है।
इसके अलावा, यह ट्रांसजेनिक चूहों के लिए एक ही प्रोटोकॉल के कार्यान्वयन की अनुमति देता है, जिससे साह की अनुकूलित रोग समझ और संभावित चिकित्सीय यौगिकों के तुलनात्मक परीक्षण की संभावना होती है। यहां, हम 6-8 सप्ताह पुराने पुरुष C57Bl/6J चूहों में सिस्टर्ना मैग्ना में ऑटोलॉगस धमनी रक्त के एक डबल दैनिक दैनिक इंजेक्शन द्वारा सबराचनॉयड हेमरेज (SAH) का एक मानकीकृत माउस मॉडल प्रस्तुत करते हैं। इस मॉडल का मुख्य लाभ एंडोवैस्कुलर छिद्र मॉडल की तुलना में रक्तस्राव की मात्रा का नियंत्रण है, और इंट्राक्रैनियल दबाव21की भारी वृद्धि के बिना रक्तस्राव घटना को मजबूत करना है। हाल ही में, सिस्टर्ना मैग्ना में रक्त के डबल डायरेक्ट इंजेक्शन को चूहों में प्रायोगिक और शारीरिक मुद्दों पर अच्छी तरह से वर्णित किया गया है। दरअसल, हमने हाल ही में बड़ी मस्तिष्क धमनियों (बेसिलर (बीए), मध्य (एमसीए) और पूर्वकाल (एसीए) सेरेब्रल धमनियों), सेरेब्रोवैस्कुलर फाइब्रिन जमाव और सेल एपोप्टोसिस के 3 दिन (D3) से 10 (D10) के सीवीएस का प्रदर्शन किया, पैरावैस्कुलर सेरेब्रोस्पाइनल द्रव के परिसंचरण दोषों के साथ परिवर्तित सेन्सिवोमोटोटर और चूहों में संज्ञानात्मक कार्य 10 दिन के बाद इस मॉडल में साह22। इस प्रकार, यह इस मॉडल को अल्पकालिक और लंबे समय तक चलने वाली घटनाओं के बाद साह के लिए महारत हासिल, मान्य और विशेषता बनाता है। यह आदर्श नए लक्ष्यों की संभावित पहचान के लिए और साह से जुड़े जटिलताओं के खिलाफ शक्तिशाली और कुशल चिकित्सीय रणनीतियों पर अध्ययन के लिए उपयुक्त होना चाहिए ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:776px;" width="775">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">absorbable hemostat</td>
			<td style="width:201px;">Ethicon</td>
			<td style="width:161px;">Surgicel</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">absorbable suturing thread</td>
			<td style="width:201px;">Ethicon</td>
			<td style="width:161px;">Vicryl 5.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">auto-regulated electric blanket</td>
			<td style="width:201px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">50-7087-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">bluetack for capillary fixation</td>
			<td style="width:201px;">UHU</td>
			<td style="width:161px;">Patafix</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">electronic balance</td>
			<td style="width:201px;">Denver Instrument</td>
			<td style="width:161px;">MXX-2001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">glass capillaries</td>
			<td style="width:201px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">GC150F-15</td>
			<td style="width:167px;">inner diameter 0.86 mm 
			outer diameter 1.5 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">isoflurane vaporizer</td>
			<td style="width:201px;">Phymep</td>
			<td style="width:161px;">V100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">micropipette puller</td>
			<td style="width:201px;">Sutter Instrument Company</td>
			<td style="width:161px;">P-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">needle 26 G</td>
			<td style="width:201px;">BD microbalance</td>
			<td style="width:161px;">300300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">non absorbable suturing thread</td>
			<td style="width:201px;">Peters surgical</td>
			<td style="width:161px;">Filapeau 4.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">stereotaxic frame</td>
			<td style="width:201px;">David Kopf instruments</td>
			<td style="width:161px;">Model 902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">surgical equipment</td>
			<td style="width:201px;">Kent scientific</td>
			<td style="width:161px;">clamp, microscissors, thin scissors</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">syringe 20 mL TERUMO</td>
			<td style="width:201px;">Thermofisher</td>
			<td>11866071</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

double direct injection of blood into the cisterna magna as a model of subarachnoid hemorrhage

स्ट्रोक में, सेरेब्रल धमनी एन्यूरिज्म के टूटने के लिए लगातार सबराचनॉय नकसीर (एसएएच) 5-9% का प्रतिनिधित्व करता है लेकिन न्यूरोलॉजिकल परिणाम के मामले में एक महत्वपूर्ण रुग्णता के साथ कुल स्ट्रोक से संबंधित मृत्यु दर के लगभग 30% के लिए जिम्मेदार है। एक विलंबित सेरेब्रल वासोसेम (सीवीएस) अक्सर विलंबित सेरेब्रल इस्केमिया के सहयोग से हो सकता है। एसएएच के विभिन्न पशु मॉडलों का उपयोग अब कैस्टर्ना मैग्ना या यहां तक कि प्रीचियामैटिक साइटर्न में रक्त के एंडोवैस्कुलर छिद्र और सीधे इंजेक्शन सहित किया जा रहा है, प्रत्येक अलग फायदे और नुकसान का प्रदर्शन करते हैं। इस लेख में, सिस्टर्ना मैग्ना में ऑटोलॉगस पूरे रक्त की निर्धारित मात्रा के डबल प्रत्यक्ष इंजेक्शन द्वारा एसएए का एक मानकीकृत माउस मॉडल प्रस्तुत किया गया है। संक्षेप में, चूहों को तौला गया और फिर आइसोफ्लुने में साँस लेने से एनेस्थेटाइज्ड किया गया। फिर, जानवर को 37 डिग्री सेल्सियस के गुदा तापमान को बनाए रखने के लिए एक गर्म कंबल पर एक झुका हुआ स्थिति में रखा गया था और लगभग 30 डिग्री के ग्रीवा मोड़ के साथ एक स्टीरियोटैक्टिक फ्रेम में तैनात किया गया था। एक बार जगह में, एक ही उम्र और लिंग (C57Bl/6J) के एक और माउस के कैरोटिड धमनी से लिया समरूप धमनी रक्त से भरा एक लम्बी ग्लास माइक्रोपिपेट की नोक एक माइक्रोमैनिपलेटर के माध्यम से अटलांटो-occipital झिल्ली के साथ संपर्क में एक सही कोण पर तैनात किया गया था । फिर सिस्टर्ना मैग्ना में 60 माइक्रोन रक्त इंजेक्ट किया गया और इसके बाद 2 मिनट तक जानवर के 30 डिग्री नीचे झुकाव के बाद। सिस्टर्ना मैग्ना में 30 माइक्रोनल रक्त का दूसरा जलसेक पहले एक के बाद 24 घंटे किया गया था। प्रत्येक जानवर का व्यक्तिगत अनुवर्ती दैनिक (वजन और कल्याण का सावधानीपूर्वक मूल्यांकन) किया जाता है। यह प्रक्रिया रक्त के एक अनुमानित और अत्यधिक प्रजनन योग्य वितरण की अनुमति देती है, जिसके साथ इंट्राक्रैनियल दबाव ऊंचाई होती है जिसे कृत्रिम मस्तिष्क रीढ़ की हड्डी के तरल पदार्थ (सीएसएफ) के समकक्ष इंजेक्शन द्वारा नकल की जा सकती है, और कम मृत्यु दर को उत्प्रेरित करने वाले एसएए के हल्के-मॉडल के लिए एक तीव्र का प्रतिनिधित्व करता है।

प्रायोगिक समयरेखा, प्रक्रिया, अनुवर्ती और मृत्यु दर चित्रा 1A और चित्रा 1B रक्त के डबल इंट्रासिस्टरल इंजेक्शन द्वारा एसएए मॉडल प्रोटोकॉल को संक्षेप में प्रस्तुत करता है। ?...

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Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

हमने इस प्रोटोकॉल में सिस्टर्ना मैग्ना में ऑटोलॉगस पूरे रक्त के डबल इंजेक्शन द्वारा एक मानकीकृत सबराचनॉइड हेमरेज (एसएएच) माउस मॉडल का वर्णन किया है। डबल इंजेक्शन प्रक्रिया के मानकीकरण की उच्च डिग्री मृत्यु दर के बारे में सापेक्ष सुरक्षा के साथ एसएए के एक मध्यम से तीव्र मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है।

सबराचनॉइड हेमरेज के मॉडल के रूप में सिस्टर्ना मैग्ना में रक्त का डबल डायरेक्ट इंजेक्शन

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

ऑटोलॉगस रक्त चूहे में स्वतःस्फूर्त intracerebral नकसीर मॉडल इंजेक्शन

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

Cannula Implantation into the Cisterna Magna of Rodents

कुतर के Cisterna Magna में प्रवेशनी आरोपण

Cisterna magna cannulation (CMc) is a straightforward procedure that enables direct access to the cerebrospinal fluid (CSF) without operative damage to ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

अवजालतनिका नकसीर के एक Murine मॉडल में सेरेब्रल Vasospasm के ठहराव के लिए एक Volumetric विधि

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

In Vivo Direct Reprogramming of Resident Glial Cells into Interneurons by Intracerebral Injection of Viral Vectors

वायरल वेक्टर्स के इंट्रासेरेब्रल इंजेक्शन द्वारा इंटरन्यूरॉन्स में निवासी ग्लिल सेल के विवो डायरेक्ट रीप्रोग्रामिंग में

Converting resident glia in the brain into functional and subtype-specific neurons in vivo provides a step forward towards the development of alternative ...

Massive Pontine Hemorrhage by Dual Injection of Autologous Blood

ऑटोलोगस रक्त के दोहरे इंजेक्शन द्वारा बड़े पैमाने पर पोंटिन हेमरेज

We provide a protocol to establish a massive pontine hemorrhage model in a rat. Rats weighing about 250 grams were used in this study. One hundred ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

उच्च आवृत्ति ट्रांसक्रैनियल डुप्लेक्स अल्ट्रासाउंड के साथ सुबाराक्नॉइड हेमरेज के मुरीन मॉडल में सेरेब्रल वासोस्पास्म का विश्लेषण

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

एक चूहे के मॉडल में प्रायोगिक सबरैक्नॉइड रक्तस्राव को प्रेरित करने के लिए ऑटोलॉगस रक्त का प्री-चियास्मेटिक, एकल इंजेक्शन

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Direct Cannula Implantation in the Cisterna Magna of Pigs

सूअरों के टंकी मैग्ना में प्रत्यक्ष कैनुला आरोपण

The glymphatic system is a waste clearance system in the brain that relies on the flow of cerebrospinal fluid (CSF) in astrocyte-bound perivascular spaces ...

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) के साथ संयुक्त Subarachnoid रक्तस्राव के लिए एंडोवैस्कुलर छिद्र मॉडल

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...

Stereotaxic Surgical Approach to Microinject the Caudal Brainstem and Upper Cervical Spinal Cord via the Cisterna Magna in Mice

Stereotaxic Surgical Approach to Microinject the Caudal Brainstem and Upper Cervical Spinal Cord via the Cisterna Magna in Mice

स्टीरियोटैक्सिक सर्जिकल दृष्टिकोण माइक्रोइंजेक्ट करने के लिए पुच्छल ब्रेनस्टेम और ऊपरी ग्रीवा रीढ़ की हड्डी चूहों में टंकी मैग्ना के माध्यम से

Stereotaxic surgery to target brain sites in mice is commonly guided by skull landmarks. Access is then obtained via burr holes drilled through the skull. ...