Name: measurement of insulin- and contraction-stimulated glucose uptake in isolated and incubated mature skeletal muscle from mice
Uploaded: 2021-05-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Insulin- and Contraction-Stimulated Glucose Uptake in Isolated and Incubated Mature Skeletal Muscle from Mice at JoVE.com

Эта работа была поддержана грантами Датского совета по независимым исследованиям - медицинским наукам (FSS8020-00288B) и Фонда Ново Нордиск (NNF160C0023046). Эта работа также была поддержана исследовательским грантом Расмусу Кьёбстеду от Датской диабетической академии, который финансируется Фондом Ново Нордиск, номер гранта NNF17SA0031406. Авторы хотели бы поблагодарить Карину Олсен, Бетину Болмгрен и Ирен Бех Нильсен (Департамент питания, физических упражнений и спорта, факультет естественных наук Копенгагенского университета) за их квалифицированную техническую помощь.

Процедуры с участием исследуемых животных должны выполняться в соответствии с соответствующими руководящими принципами и местным законодательством. Все эксперименты на животных, использованные для этого исследования, соответствовали Европейской конвенции о защите позвоночных жив?...

Интактная регуляция поглощения глюкозы в скелетных мышцах важна для сохранения общего состояния здоровья1. Таким образом, исследование поглощения глюкозы в мышцах часто служит первичным показанием при оценке различных вмешательств, изменяющих здоровье. Здесь мы описыва?...

Скелетные мышцы обладают способностью извлекать большое количество глюкозы из внеклеточного пространства в ответ на инсулин и физические упражнения. Это помогает поддерживать гомеостаз глюкозы во всем организме и обеспечивает снабжение глюкозой во времена высокой потребности в энергии. Поскольку было показано, что неповрежденная регуляция поглощения глюкозы скелетными мышцами важна для общего состояния здоровья и физической работоспособности 1,2, измерения поглощения глюкозы в мышцах во время различных состояний получили большое внимание. У людей и животных гиперинсулинемически-эугликемический зажим использовался в качестве метода золотого стандарта для оценки чувствительности к инсулину in vivo 3,4. В отличие от результатов, полученных в результате перорального теста на толерантность к глюкозе, метод гиперинсулинемико-эугликемического зажима не требует интактной желудочно-кишечной функции или секреции инсулина из поджелудочной железы и, таким образом, позволяет сравнивать реакции инсулина между субъектами, у которых наблюдаются различия в желудочно-кишечной и / или панкреатической функции. Измерения поглощения мышечной глюкозы in vivo во время физических упражнений у людей часто проводились с 1960-х годов5. Сначала с использованием методов артериовенозного баланса6, а затем с использованием позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) в сочетании с позитроном, излучающим аналог глюкозы, например, 18F-фтор-дезокси-глюкоза7. У грызунов мышечное поглощение глюкозы in vivo, стимулируемое физическими упражнениями, обычно осуществляется путем использования радиоактивных или стабильных аналогов глюкозы, меченных изотопами 8,9,10.
Дополнительным методом к измерениям поглощения глюкозы в мышцах in vivo является выделение и инкубация мелких мышц у грызунов и последующее измерение поглощения глюкозы с использованием радиоактивных или стабильных аналогов глюкозы, меченных изотопами 11,12,13. Этот метод позволяет точно и надежно количественно оценить скорость поглощения глюкозы в зрелых скелетных мышцах и может быть выполнен в присутствии различных концентраций инсулина и во время сокращения, вызванного электрической стимуляцией. Что еще более важно, измерения поглощения глюкозы в изолированных и инкубированных скелетных мышцах имеют значение при исследовании мышечного метаболического фенотипа мышей, которые подверглись различным вмешательствам (например, питание, физическая активность, инфекция, терапия). Изолированная модель скелетных мышц также является подходящим инструментом для фармакологического тестирования соединений, которые могут влиять на поглощение глюкозы как таковое и/или изменять чувствительность к инсулину12,14. Таким образом, эффективность соединений, предназначенных для регулирования метаболизма глюкозы в мышцах, может быть проверена и оценена в строго контролируемой среде перед последующим тестированием in vivo на доклинических моделях животных.
При некоторых условиях метаболическая жизнеспособность может представлять проблему в изолированной и инкубированной системе моделирования скелетных мышц. Действительно, отсутствие кровеносной системы в инкубируемых мышцах влечет за собой то, что доставка субстратов (например, кислорода и питательных веществ) полностью зависит от простой диффузии между мышечными волокнами и окружающей средой. В связи с этим важно, чтобы инкубированные мышцы были маленькими и тонкими и, таким образом, представляли собой меньший барьер для диффузии кислорода во время инкубации15. Особенно при длительных инкубациях в течение нескольких часов могут развиваться гипоксические состояния из-за недостаточного поступления кислорода, что приводит к истощению мышечной энергии15. Хотя ранее сообщалось о различных маркерах метаболической жизнеспособности в инкубированных мышцах крыс наряду с идентификацией важных переменных, которые помогают поддерживать жизнеспособность мышц крыс15, всесторонняя оценка метаболической жизнеспособности в небольших инкубированных мышцах мыши по-прежнему оправдана. Следовательно, в настоящее время содержание гликогена в основном используется в качестве маркера метаболической жизнеспособности в инкубированных скелетных мышцах мыши16,17.
Здесь мы описываем подробный протокол измерения базального, инсулино- и стимулируемого сокращением поглощения глюкозы в изолированных и инкубированных камбаловидных мышцах и мышцах EDL у мышей с использованием радиомаркированных [3H]2-дезокси-D-глюкозы и [14C]маннитола в качестве внеклеточного маркера. В настоящем исследовании поглощение глюкозы измеряли в течение 10-минутного периода, и метод представлен с использованием субмаксимально и максимально эффективных концентраций инсулина, а также одного протокола сокращения. Однако протоколы, описанные в настоящем описании, могут быть легко модифицированы в отношении времени инкубации, дозировки инсулина и протокола электрической стимуляции. Кроме того, мы предоставляем тщательную характеристику различных маркеров метаболической жизнеспособности в инкубированных камбаловидных и EDL мышцах мыши. Результаты показывают, что добавки глюкозы в инкубационный буфер необходимы для сохранения метаболической жизнеспособности мышц, инкубированных в течение 1 часа.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>[14C]D-mannitol</td>
			<td>American Radiolabeled Chemicals, Inc.</td>
			<td>ARC 0127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[3H]2-deoxy-D-glucose&#160;</td>
			<td>American Radiolabeled Chemicals, Inc.</td>
			<td>ART 0103A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Deoxy-D-glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D8375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 USP non-sterile surgical nylon suture</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>51-7698</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptavidin/HRP (Conjugate)</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>P0397</td>
			<td>Used to detect ACC protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Akt2 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>3063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AMPK&#945;2 antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>SC-19131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aprotinin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A1153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>benzamidine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B6505</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1020831000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calibration kit (force)</td>
			<td>Danish Myo Technology A/S</td>
			<td>300041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemiluminescence</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>WBLUF0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Glucose</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1084180100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Mannitol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M4125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data collection program</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>LabVIEW software version 7.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis tubing</td>
			<td>Visking</td>
			<td>DTV.12000.09 Size No.9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital imaging system</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>ChemiDoc MP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma EDS</td>
			<td>E9884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E4378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical Pulse Stimulator</td>
			<td>Digitimer</td>
			<td>D330 MultiStim System</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H7637</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IGEPAL CA-630&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I8896</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Novo Nordisk</td>
			<td>Actrapid, 100 IE/mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1049361000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Merck</td>
			<td>104873025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>leupeptin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L2884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1058860500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Muscle Strip Myograph System</td>
			<td>Danish Myo Technology A/S</td>
			<td>Model 820MS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na-Orthovanadate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S6508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na-Pyrophosphate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>221368</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na-Pyruvate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P2256</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Merck</td>
			<td>106041000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S1504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>VWR</td>
			<td>27778260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pACC Ser212 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>3661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pAkt Thr308 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>9275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pAMPK Thr172 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>2531</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phenylmethylsulfonylfluoride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platinum electrodes</td>
			<td>Danish Myo Technology A/S</td>
			<td>300145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pTBC1D4 Ser588 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>8730</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scintillation counter</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>Tri-Carb-2910TR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scintillation fluid&#160;</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>6013329</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical analyses software</td>
			<td>Systat</td>
			<td>SigmaPlot version 14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TBC1D4 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab189890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TissueLyser II&#160;</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>85300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water</td>
			<td>Merck</td>
			<td>Milli-Q Reference A+ System</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-glycerophosphate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G9422</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurement of insulin- and contraction-stimulated glucose uptake in isolated and incubated mature skeletal muscle from mice

Скелетные мышцы представляют собой инсулиночувствительную ткань и обычно поглощают большую часть глюкозы, которая поступает в кровь после еды. Кроме того, сообщалось, что скелетные мышцы могут увеличить извлечение глюкозы из крови до 50 раз во время физических упражнений по сравнению с условиями покоя. Увеличение поглощения глюкозы мышцами во время физических упражнений и стимуляции инсулина зависит от транслокации транспортера глюкозы 4 (GLUT4) из внутриклеточных компартментов к мембране поверхности мышечных клеток, а также фосфорилирования глюкозы в глюкозо-6-фосфат гексокиназой II. Выделение и инкубация мышц мыши, таких как m. soleus и m. extensor digitorum longus (EDL), является подходящей моделью ex vivo для изучения влияния инсулина и электрически индуцированного сокращения (модель для физических упражнений) на поглощение глюкозы в зрелых скелетных мышцах. Таким образом, модель ex vivo позволяет оценить чувствительность мышц к инсулину и позволяет сопоставить выработку мышечной силы во время сокращения, обеспечивая равномерный набор мышечных волокон при измерениях поглощения глюкозы мышцами. Кроме того, описанная модель подходит для фармакологического тестирования соединений, которые могут оказывать влияние на чувствительность мышц к инсулину или могут быть полезны при попытке очертить регуляторную сложность поглощения глюкозы скелетными мышцами.
Здесь мы описываем и предоставляем подробный протокол о том, как измерить поглощение глюкозы, стимулируемое инсулином и сокращением, в изолированных и инкубированных препаратах камбалы и EDL у мышей с использованием радиомаркированных [3H]2-дезокси-D-глюкозы и [14C]маннитола в качестве внеклеточного маркера. Это позволяет точно оценить поглощение глюкозы в зрелых скелетных мышцах при отсутствии смешанных факторов, которые могут мешать интактной животной модели. Кроме того, мы предоставляем информацию о метаболической жизнеспособности инкубированных скелетных мышц мыши, предполагая, что применяемый метод обладает некоторыми предостережениями при определенных условиях при изучении энергетического обмена мышц.

Как показано на рисунке 2, показатели поглощения базальной глюкозы были одинаковыми между изолированной камбалой и мышцами EDL у самок мышей. Об этом также сообщалось несколько раз до 12,13,19,20.<sup class=...

Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Insulin- and Contraction-Stimulated Glucose Uptake in Isolated and Incubated Mature Skeletal Muscle from Mice at JoVE.com

Measurement of Insulin- and Contraction-Stimulated Glucose Uptake in Isolated and Incubated Mature Skeletal Muscle from Mice

Интактная регуляция поглощения глюкозы мышцами важна для поддержания гомеостаза глюкозы во всем организме. В этом протоколе представлена оценка поглощения глюкозы инсулином и сокращением в изолированных и инкубированных зрелых скелетных мышцах при описании влияния различных физиологических вмешательств на метаболизм глюкозы во всем организме.

Измерение поглощения глюкозы инсулином и сокращением в изолированных и инкубированных зрелых скелетных мышцах мышей

Skeletal muscle is an insulin-responsive tissue and typically takes up most of the glucose that enters the blood after a meal. Moreover, it has been ...

Модель ex vivo является полезным методом оценки влияния различных физиологических вмешательств и фармакологических соединений и поглощения глюкозы мышцами. Этот метод позволяет точно оценить поглощение глюкозы в изолированных скелетных мышцах мыши при отсутствии смешанных факторов, которые могут мешать интактной модели животных. Прежде чем начать эксперимент, включите интегрированную систему биографии мышечной полосы и разогрейте камеры до 30 градусов по Цельсию.Откройте программное обеспечение для сбора данных и откалибруйте принудительные преобразователи для обеспечения сопоставимости между наборами данных. Добавьте четыре миллилитра предварительно нагретой базальной инкубационной среды 30 градусов цельсия в каждую инкубационную камеру и убедитесь, что среда непрерывно насыщается кислородом 95% кислорода и 5% углекислого газа. Поместите мышь в положение лежа на лотке для рассечения и подтвердите отсутствие реакции на педальный рефлекс.Затем прижмите одну переднюю лапу иглой. Используйте ножницы, чтобы удалить кожу с голени, пока не будут видны ахиллово сухожилие и коленный сустав. Для рассечения камбаловидной мышцы прикрепите одну шовную петлю диаметром 0,4 сантиметра, подготовленную из 16-сантиметрового нерассасывающегося хирургического нейлонового куска шва, к ахиллову сухожилию и закрепите щипцы к ахиллову сухожилию дистально к петле.Отрежьте, чтобы освободить камбаловидные и икроножные мышцы от лапы и осторожно проведите щипцами по мыши, чтобы обнажить камбаловидную мышцу. Зажмите щипцы и поместите вторую шовную петлю вокруг проксимального сухожилия камбаловидной мышцы. Отрежьте проксимальное сухожилие и рассекните камбалу, включая две прикрепленные шовные петли, свободные от икроножной мышцы.После сбора используйте петли, чтобы быстро прикрепить камбаловидную мышцу к соответствующим крючкам в одной из инкубационных камер. Используйте щипцы для удаления фасции, покрывающей переднюю мышцу большеберцовой кости. Дистальные сухожилия большеберцовой передней или EDL мышц должны быть прозрачными белыми, видимыми и отделенными друг от друга.Отрежьте дистиллированное сухожилие передней мышцы большеберцовой кости и рассекните мышцу. Используйте щипцы, чтобы мягко освободить мышцу EDL из окружающих тканей, оставив мышцу нетронутой, не разрезая сухожилия. Поместите отдельные шовные петли вокруг дистилляционных и проксимальных сухожилий EDL.Когда петли будут размещены, отрежьте сухожилия, чтобы освободить мышцу EDL с прикрепленными шовными петлями и быстро прикрепите петли к крючкам во второй инкубационной камере. Затем отрегулируйте напряжение каждой мышцы в состоянии покоя примерно до пяти миллиньютонов и позвольте мышцам уравновеситься в среде в течение не менее 10 минут перед началом эксперимента. Чтобы измерить стимулированное инсулином поглощение глюкозы, замените базальную инкубационную среду в камерах инкубационной средой без инсулина, субмаксимально эффективной концентрацией инсулина или максимально эффективной концентрацией инсулина для 20-минутной инкубации.В конце периода стимуляции заменить инкубационную среду инкубационной средой поглощения глюкозы, содержащей одинаковую концентрацию инсулина, в течение 10 минут инкубации. В конце инкубации поглощения глюкозы осторожно вынимают мышцы из инкубационных камер и промывают образцы в ледяной базальной инкубационной среде. После умывания быстро высушите мышцы на фильтровальной бумаге и заморозьте ткань без шовных петель в жидком азоте.Затем соберите 100 микролитров инкубационной среды поглощения глюкозы из каждой камеры для хранения 20 градусов цельсия и анализа поглощения глюкозы в мышцах. Чтобы измерить сокращение, стимулируемое поглощением глюкозы, поместите платиновые электроды в центре и по обе стороны мышц в инкубационных камерах и инициируйте сокращение мышц сразу после замены базальной инкубационной среды инкубационной средой инкубационной среды поглощения глюкозы. Запишите вынужденную выработку из каждой инкубированной мышцы.Через 10 минут осторожно соберите и заморозьте мышцы, как показано, сохраняя 100 микролитровых аликвот инкубационной среды поглощения глюкозы из каждой камеры для анализа поглощения глюкозы мышцами, как показано. Чтобы определить миоцеллюлярную сигнализацию с помощью анализа вестерн-блоттинга в том же наборе мышечных образцов, гомогенизируйте каждый замороженный образец мышцы в 400 микролитрах буфера гомогенизации ледяного холода и вращайте конец образца за концом в течение одного часа при четырех градусах Цельсия. Затем соберите ликат путем центробежной обработки и измерьте количество интересующего белка в каждом образце поддона в соответствии со стандартными протоколами анализа вестерн-блоттинга.Чтобы измерить поглощение глюкозы в каждом образце, добавляют 150 микролитров супернатанта из каждого образца и 25 микролитров инкубационной среды поглощения глюкозы из соответствующих инкубационных камер для разделения жидких сцинтилляционных флаконов, содержащих три миллилитра жидкой сцинтилляционной жидкости на флакон. Затем загрузите флаконы на жидкостный сцинтилляционный счетчик и измерьте радиоактивность двух дезоксиглюкоз и маннитола в соответствии с рекомендациями производителя. В этом репрезентативном анализе показатели поглощения базальной глюкозы были сходны между камбаловидными и ЭДЛ-мышцами, выделенными у самок мышей.Поглощение глюкозы увеличивалось в камбаловидных и ЭДЛ-мышцах в ответ как на субмаксимально, так и на максимально эффективные концентрации инсулина. Кроме того, как субмаксимальное, так и максимальное поглощение глюкозы, стимулируемое инсулином, было значительно выше в камбаловидной мышце. Напротив, поглощение глюкозы, вызванное сокращением, было значительно выше в EDL по сравнению с камбаловидной мышцей.Здесь может наблюдаться максимальная мышечная сила, вырабатываемая в камбаловидных мышцах и мышцах ЭДЛ в течение 10-минутного периода стимуляции. Как и ожидалось, мышца EDL генерировала больше силы в течение начальной части периода стимуляции, за которой следовало быстрое снижение позже в период стимуляции. Субмаксимальные и максимальные концентрации инсулина индуцировали увеличение фосфорилирования Akt треонина 308 и TBC1D4 серина 588, в то время как сокращение индуцировало увеличение фосфорилирования ampk альфа-треонина 172 и серина ACC 212.Ни инсулин, ни сокращение не привели к изменению общего содержания белка. Прежде чем пытаться измерить поглощение глюкозы в изолированных мышцах мыши, жизненно важно тщательно практиковать рассечение камбалы и мышц EDL. После оценки поглощения глюкозы мышцами оставшийся лизат мышечного белка может быть использован для дополнительного биохимического анализа, который может прояснить наблюдаемые изменения в скорости поглощения глюкозы.

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Micro-circulation Measurement in Skeletal Muscle by Intra-vital Microscopy

В естественных условиях микро-циркуляции Измерение в скелетной мышце путем Intra-жизненно микроскопии

BACKGROUND: Regulatory factors and detailed physiology of in vivo microcirculation have remained not fully clarified after many different modalities of ...

Adult and Embryonic Skeletal Muscle Microexplant Culture and Isolation of Skeletal Muscle Stem Cells

Взрослые и эмбриональные скелетных мышц Microexplant культуры и выделение скелетных мышц стволовых клеток

Cultured embryonic and adult skeletal muscle cells have a number of different uses. The micro-dissected explants technique described in this chapter is a ...

Mitochondrial Isolation from Skeletal Muscle

Митохондриальная Изоляция от скелетных мышц

Mitochondria are organelles controlling the life and death of the cell. They participate in key metabolic reactions, synthesize most of the ATP, and ...

Purification of Progenitors from Skeletal Muscle

Очистка прародителей из скелетных мышц

Skeletal muscle contains multiple progenitor populations of distinct embryonic origins and developmental potential. Myogenic progenitors, usually residing ...

Fluorescence-based Measurement of Store-operated Calcium Entry in Live Cells: from Cultured Cancer Cell to Skeletal Muscle Fiber

Флуоресценции на основе измерения магазин управлением поступления кальция в живых клетках: от искусственного раковых клеток в скелетных мышечных волокон

Store operated Ca2+ entry (SOCE), earlier termed capacitative Ca2+ entry, is a tightly regulated mechanism for influx of extracellular Ca2+ into cells to ...

Ex Vivo Assessment of Contractility, Fatigability and Alternans in Isolated Skeletal Muscles

Ex Vivo Assessment of Contractility, Fatigability and Alternans in Isolated Skeletal Muscles

Ex Vivo оценке сократимости, утомляемость и аНегпапз в изолированных скелетных мышц

 
Described here is a method to measure contractility of isolated skeletal muscles. Parameters such as muscle force, muscle power, contractile kinetics, ...

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

Выделение и культура Индивидуальные мышечных волокон и их сателлитные клетки от взрослых скелетных мышц

Muscle  regeneration in the adult is performed by resident stem cells called satellite  cells. Satellite cells are defined by  their position between the ...

Assessment of Calcium Sparks in Intact Skeletal Muscle Fibers

Оценка кальция Sparks в малонарушенных скелетных мышечных волокон

Maintaining homeostatic Ca2+ signaling is a fundamental physiological process in living cells. Ca2+ sparks are the elementary units of Ca2+ signaling in ...

Isolation of Blood-vessel-derived Multipotent Precursors from Human Skeletal Muscle

Выделение кровеносных сосудов, полученных мультипотентные прекурсоров от человека скелетных мышц

Since the discovery of mesenchymal stem/stromal cells (MSCs), the native identity and localization&#160;of MSCs have been obscured by their retrospective ...

Measurement of Smooth Muscle Function in the Isolated Tissue Bath-applications to Pharmacology Research

Измерение гладких мышцах функции в выделенную ткань баня приложений к фармакологии исследований

Isolated tissue bath assays are a classical pharmacological tool for evaluating concentration-response relationships in a myriad of contractile tissues.  ...