Name: culture of neurospheres derived from the neurogenic niches in adult prairie voles
Uploaded: 2020-06-10T14:45:00
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この研究は、CONACYT 252756および253631の助成金によって支えられた。ウナム-ダパ-パピット IN202818 および IN203518;INPER 2018-1-163、およびNIH P51OD11132。デイジー・ガスカ、カルロス・ロザーノ、マルティン・ガルシア、アレハンドラ・カスティーリャ、ニディア・ヘルナンデス、ジェシカ・ノリス、スサナ・カストロの技術支援に感謝します。

この研究は、ニューロバイオロジー研究所、メキシコ、メキシコ国立大学、国立副正書デペリナトリシア研究所(2018-1-163)の研究倫理委員会によって承認されました。動物の繁殖、ケア、人道的エンドポイントは、メキシコ保健事務局の「レイ・ジェネラル・デ・サルド・アン・マテリア・デ・インベスティガシオン・パラ・ラ・サルード」(健康研究一般健康法)に基づいてメキシコ公式スタ?...

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	<li>Portillo, W., Paredes, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motivational+Drive+in+Non-copulating+and+Socially+Monogamous+Mammals.">Motivational Drive in Non-copulating and Socially Monogamous Mammals.</a> Frontiers Behavioral Neuroscience. 13, 238 (2019).</li><li>Walum, H., Young, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neural+mechanisms+and+circuitry+of+the+pair+bond.">The neural mechanisms and circuitry of the pair bond.</a> Nature Reviews Neurosciences. 19 (11), 643-654 (2018).</li><li>Gobrogge, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex,+drugs,+and+violence:+neuromodulation+of+attachment+and+conflict+in+voles.">Sex, drugs, and violence: neuromodulation of attachment and conflict in voles.</a> Current Topics Behavioral Neurosciences. 17, 229-264 (2014).</li><li>Perkeybile, A. M., Bales, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intergenerational+transmission+of+sociality:+the+role+of+parents+in+shaping+social+behavior+in+monogamous+and+non-monogamous+species.">Intergenerational transmission of sociality: the role of parents in shaping social behavior in monogamous and non-monogamous species.</a> Journal of Experimental Biology. 220, 114-123 (2017).</li><li>McGraw, L. A., Young, L. 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G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pup+exposure+elicits+hippocampal+cell+proliferation+in+the+prairie+vole.">Pup exposure elicits hippocampal cell proliferation in the prairie vole.</a> Behavioral Brain Research. 187 (1), 9-16 (2008).</li><li>Wojtowicz, J. M., Kee, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BrdU+assay+for+neurogenesis+in+rodents.">BrdU assay for neurogenesis in rodents.</a> Nature Protocols. 1 (3), 1399-1405 (2006).</li><li>Eack, S. 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E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+comparison+of+social+cognitive+performance+in+autism+spectrum+disorder+and+schizophrenia.">Comprehensive comparison of social cognitive performance in autism spectrum disorder and schizophrenia.</a> Psychological Medicine. , 1-9 (2019).</li><li>Yirmiya, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+between+the+arginine+vasopressin+1a+receptor+(AVPR1a)+gene+and+autism+in+a+family-based+study:+mediation+by+socialization+skills.">Association between the arginine vasopressin 1a receptor (AVPR1a) gene and autism in a family-based study: mediation by socialization skills.</a> Molecular Psychiatry. 11 (5), 488-494 (2006).</li><li>Montag, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+and+oxytocin+receptor+gene+polymorphisms+and+risk+for+schizophrenia:+a+case-control+study.">Oxytocin and oxytocin receptor gene polymorphisms and risk for schizophrenia: a case-control study.</a> The World Journal of Biological Psychiatry. 14 (7), 500-508 (2013).</li><li>Harony, H., Wagner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contribution+of+oxytocin+and+vasopressin+to+mammalian+social+behavior:+potential+role+in+autism+spectrum+disorder.">The contribution of oxytocin and vasopressin to mammalian social behavior: potential role in autism spectrum disorder.</a> Neurosignals. 18 (2), 82-97 (2010).</li><li>Bachner-Melman, R., Ebstein, R. 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神経幹細胞培養を得る段階は酵素溶液による消化期間であり、細胞の生存率を低下させる可能性があるため、30分を超えてはならない。神経球は、最初の培養後8〜10日で出現するはずです。12日目までに出現しない場合は、培養を捨てて実験を繰り返し、消化期間を短縮する。もう一つの問題は、脳組織をカバーする血管です。赤血球の過剰が神経球形成を妨げる可能性があるため、解剖中に...

クリセチダ科の一員である大草原のボレ(ミクロトゥス・オクロガスター)は、社会的に一夫一婦制で社交的な種として生命戦略が発展する小さな哺乳類です。男性と女性の両方が交配後または同棲の長い期間の後に永続的なペアの絆を確立し、巣を共有し、自分の領土を守り、子孫1、2、3、4のための二人の世話を表示することを特徴とする。このように、大草原のボレは、社会認知における社会性行動および障害の神経生物学的基礎を理解するための貴重なモデルである5。
成人の神経新生は、行動の変化につながる神経可塑性の最も重要なプロセスの一つです。例えば、我々の研究グループは、海馬の脳内胞領域(VZ)および樹状回(DG)における脳室領域(VZ)およびサブ顆粒帯における交配との社会的同居が、大草原の交配によって誘発される対結合の形成に役割を果たすことができることを示唆している男性のボルで報告した(未発表データ)。一方、新しいニューロンが生成され、統合された脳領域はよく知られているが、これらのプロセスに関与する分子および細胞機構は、脳モデル6全体の技術的な欠点のために未確定のままである。例えば、遺伝子発現および他の細胞活動を制御するシグナル伝達経路は、比較的短い活性化期間(ホスホプロテオームの検出)7を有する。代替モデルの1つは、成人神経新生に関与する分子成分を解明するために、単離された、培養された成体神経幹細胞または前駆細胞である。
成人哺乳類(マウス)脳からのインビトロ神経前駆体を維持するための最初のアプローチは、神経球のアッセイであり、これは、ニューロンを生成する多能性の可能性を維持する非接着条件下で成長する細胞凝集体であり、アストロサイト8、9、10であった。その開発の間に、前駆体だけが上皮成長因子(EGF)や線維芽細胞成長因子2(FGF2)などの有糸原物質に反応して神経球8、9、10を増殖させ、生成する選択プロセスがある。
我々の知る限りでは、大草原から成体神経前駆物質を得るためのプロトコルは文献に報告されていない。ここでは、神経球形成アッセイを通じて神経原性ニッチとそのインビトロ維持から神経前駆細胞を分離する培養条件を確立した。したがって、実験は、増殖、移動、分化および前駆体の神経幹細胞および前駆細胞の生存に関与する分子および細胞のメカニズムを同定するために設計されることができ、大草原の中でまだ知られていないプロセスである。さらに、VZおよびDGに由来する細胞の特性のインビトロの違いを解明することは、社会性行動および認知行動の変化に関連する神経可塑性における神経原性ニッチの役割に関する情報を提供し、性依存性依存性に依存する可能性のある社会的相互作用(自閉症スペクトラム障害および統合失調症)の欠損に関する情報を提供する可能性がある。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Antibodies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Antibody ID</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Nestin</td>
			<td>GeneTex</td>
			<td>GTX30671</td>
			<td>RRID:AB_625325</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Doublecortin</td>
			<td>MERCK</td>
			<td>AB2253</td>
			<td>RRID:AB_1586992</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Ki67</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab66155</td>
			<td>RRID:AB_1140752</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-MAP2</td>
			<td>GeneTex</td>
			<td>GTX50810</td>
			<td>RRID:AB_11170769</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-GFAP</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>G3893</td>
			<td>RRID:AB_477010</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat Anti-Mouse Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11029</td>
			<td>RRID:AB_2534088</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor 568</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11036</td>
			<td>RRID:AB_10563566</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat Anti-Guinea Pig Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11073</td>
			<td>RRID:AB_2534117</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic-Antimycotic</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>15240062</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27 supplement</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>17504044</td>
			<td>50X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase, Type IV</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>17104019</td>
			<td>Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>17105041</td>
			<td>Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12, HEPES</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>11330032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Powder, Cell Culture Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>35050061</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Powder, Cell Culture Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Laminin</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354232</td>
			<td>1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-2 supplement</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>17502048</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAHCO3</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Powder, Suitable for Cell Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>10010023</td>
			<td>1X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-ornithine hydrobromide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3655</td>
			<td>Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Human EGF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>AF-100-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Human FGF-basic</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>AF-100-18B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>StemPro Accutase Cell Dissociation Reagent</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific/Gibco</td>
			<td>A1110501</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well Clear Flat Bottom Ultra-Low Attachment Multiple Well Plates</td>
			<td>Corning/Costar</td>
			<td>3473</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well Clear TC-treated Multiple Well Plates</td>
			<td>Corning/Costar</td>
			<td>3526</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell Strainer</td>
			<td>Corning/Falcon</td>
			<td>352340</td>
			<td>Blue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bottle Top Vacuum Filter, 0.22 &#181;m pore</td>
			<td>Corning</td>
			<td>431118</td>
			<td>PES membrane, 45 mm diameter neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Pyrogenic Sterile Centrifuge Tube</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>with conical bottom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Pyrogenic sterile tips of 1,000 &#181;l, 200 &#181;l and 10 &#181;l.</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile cotton gauzes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile microcentrifuge tubes of 1.5 mL</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile serological pipettes of 5, 10 and 25 mL</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile surgical gloves</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Filters, 0.22 &#181;m pore</td>
			<td>Merk Millipore</td>
			<td>SLGPR33RB</td>
			<td>Polyethersulfone (PES) membrane, 33 mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment and surgical instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biological safety cabinet</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Motorized Pipet Filler/Dispenser</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri Dishes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blades</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless-steel Spatula</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

culture of neurospheres derived from the neurogenic niches in adult prairie voles

神経球は、神経幹細胞と前駆細胞を含む一次細胞凝集体である。これらの3D構造は、神経幹細胞の分化および増殖の可能性を決定し、時間をかけてアッセイできるよりも細胞株を生成するための優れたツールです。また、神経球は、様々な成長因子、ホルモン、神経伝達物質などの動的変化環境のモデリングを可能にするニッチ(インビトロ)を作成することができます。 マイクロタス・オクロガスター (大草原のボレ)は、社会性行動と社会的認知の神経生物学的基礎を理解するためのユニークなモデルです。しかし、これらの行動に関与する細胞機構は、よく知られていない。このプロトコルは、非接着条件下で培養される成体大草原の神経原性ニッチから神経前駆細胞を得て、神経球を生成することを目的としている。神経球の大きさと数は、領域(脳室内領域またはデンテート回)および大草原の性別に依存する。この方法は、インビトロにおける神経原性ニッチの性依存性に依存する違いを研究するための顕著なツールであり、ペアボンディングおよびバイペアペアケアなどの社会的行動に関連する神経可塑性の変化である。また、社会的相互作用(自閉症スペクトラム障害および統合失調症)の欠損を伴う認知状態を調べることができる。

神経球は、女性と男性の両方の成人大草原のVZとDGから分離された神経幹細胞から形成された。培養開始から約8~10日後、細胞は神経球を形成しているはずだ。なお、プレートには、一次培養物に破片が含まれていてもよい(図3A)。しかし、通路1では、培養は神経球のみで構成されるべきである(図3B)。
女性と男性の両方の雄VZお?...

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Culture of Neurospheres Derived from the Neurogenic Niches in Adult Prairie Voles

我々は、社会行動に関連する機能的プラスチック変化の一部となり得る神経原性ニッチ間の性依存性差を分析するために、大草原の渦の脳の脳下脳領域および脳内胞から神経前駆細胞を培養する条件を確立した。

成人大草原の神経起源ニッチ由来の神経球の培養

Neurospheres are primary cell aggregates that comprise neural stem cells and progenitor cells. These 3D structures are an excellent tool to determine the ...

この方法は、神経原性ニッチの性依存性に依存する違いを調査し、その神経可塑性を理解するのに役立ちます, 大草原の社会的相互作用を強調する変化.神経球のアッセイは、神経幹および前駆細胞の増殖および分化の可能性を決定するための優れたツールである。まず、氷に囲まれた表面にペトリ皿を置きます。皿に脳を堆積させ、冷たい洗浄液の20ミリリットルを加える。コロナ平面では、メスを使用して脳を2つの組織ブロックに分け、前部後軸のブレグマレベルで切断を行う。耳下皮領域、またはVZ、ロストラルブロックから組織、および歯状回、またはDG、尾骨ブロックから組織を抽出する。VZを解剖するには、デュモン鉗子で半球の1つを保持し、コーデートプタメンを並べた組織の下に第2鉗子の細かい先端を挿入する。組織を分離するために、側腹側軸に沿って鉗子を開き、冷たい洗浄液の2ミリリットルで遠心管にVZを集めます。2匹以上の動物の組織をプールしないでください。他の半球でマイクロディショ切を繰り返し、氷の上に組織とチューブを保存します。DGを解剖するには、メスを使用して尾大ブロックにコロナカットを行い、海馬の形成が観察される2つのスライスを得る。デュモン鉗子を使用してスライスの1つを保持し、DGとCA1の間に別の鉗子で水平に切り取ります。次いで、DGとCA3との間に垂直切開を行い、DGを分離する。最初のスライスの他の半球で解剖を繰り返し、2番目のスライスの両方の半球で解剖を繰り返します。遠心分離管に各ボレの4つのDG部分を集める。バイオセーフティキャビネット内に遠心管を入れ、組織断片が重力によって沈殿するまで約10分待ちます。次に、洗浄液を取り出し、各チューブに1ミリリットルの温かい酵素溶液を加えます。37度で10分間チューブをインキュベートします。組織断片を崩壊させるために、ピペットを1ミリリットルの先端で上下にピペットしますが、ピペットは30回以上しないでください。37°Cでインキュベーションを繰り返し、再び組織をピペットします。各チューブに9ミリリットルのN-2培地を加え、酵素処理を希釈し、チューブを200倍gで4分間遠心分離します。上清を捨て、細胞を10ミリリットルのN-2培地で洗浄し、遠心分離を繰り返します。各チューブから上澄み液を取り出し、VZ及びDGの細胞ペレットをそれぞれ2ミリリットル及び1ミリリットルのB-27培地に再懸濁する。各細胞懸濁液を40マイクロメートルの細胞ストレーナーでフィルターし、消化されていない組織を除去します。VZ用に2つのウェルを使用し、DGに1つのウェルを使用して、超低添付着24ウェルプレートで濾過された細胞を培養します。線維芽細胞増殖因子2の1ミリリットル当たり20ナノグラム、各ウェルに表皮成長因子の1ミリリットル当たり20ナノグラムを加え、その後、摂氏37度、5%の二酸化炭素、高湿度でプレートを48時間インキュベートする。インキュベーション後、培養培地の半分を取り除き、新鮮なB-27培地に置き換え、成長因子の二重濃度を補う。このプロセスを 3 日ごとに繰り返します。培養培地を変更する必要がない日には、1Xの最終濃度に成長因子を加える。神経球は、女性と男性の両方の成人大草原の脳室領域およびデンテート回から分離された神経幹細胞から形成された。一次培養では残骸があったが、最初の通過後に存在したのは神経球だけだった。より多くの神経球が、男性の脳室領域、または女性と男性の両方のデンテート回よりも女性の脳室領域から得られたもので、得られる神経球の数は増殖帯とボレ性に依存することを示唆している。神経球の直径は8日目、11日目、14日目に測定した。それは両方の神経領域の男性と女性のボルのために徐々に増加したが、男性の脳に由来する神経球は、女性の脳に由来するものと比較して小さかった。付着した神経球は、成長因子の存在下で6日目、または成長因子なしで15日目に特徴付けられる。6日目、未分化状態の下で、神経球由来細胞は神経前駆細胞のマーカーであるネスチンを発現した。また、ニューロン前駆体または未熟なニューロンの存在を示すダブルコルチン陽性細胞および増殖マーカーKi-67を同定することも可能であった。しかし、DCXによるKi-67の共局在化の欠如は、ポストミトティック神経芽細胞の存在を示唆した。15日目に、分化条件下で、グリア表現型を有する成熟したニューロンおよび細胞が発見され、単離された細胞の分化電位を示した。このプロトコルを試みるとき、 マイクロディショニングにおける以前の練習を認識し、持つことが神経原性ニッチから細胞だけを単離する基本であることに留意してください。このプロトコルに従って、実験は、増殖、分化および神経幹細胞および前駆細胞の生存に関与するメカニズムを同定するために設計することができ、大草原の中ではまだ知られていないプロセスである。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

胚の脊髄から交連ニューロンの解剖と文化

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Organotypic Culture of Full-thickness Adult Porcine Retina

全層の大人のブタの網膜の器官培養

There is a recognized demand for in vitro models that can replace or reduce animal experiments. Porcine retina has a similar neuronal structure to human ...

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

ヒト胎児脳から由来オリゴデンドロサイト前駆細胞培養システム

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

An In-vitro Preparation of Isolated Enteric Neurons and Glia from the Myenteric Plexus of the Adult Mouse

An In-vitro Preparation of Isolated Enteric Neurons and Glia from the Myenteric Plexus of the Adult Mouse

不定冠詞<em&gt;インビトロ</em成体マウスの筋層間神経叢から分離腸ニューロンとグリアの&gt;準備

The enteric nervous system is a vast network of neurons and glia running the length of the gastrointestinal tract that functionally controls ...

One Mouse, Two Cultures: Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Two Neurogenic Zones of Individual Mice

マウスを一回、二つの文化：個々のマウスの二つの神経原性のゾーンから成体神経幹細胞の単離および培養

The neurosphere assay and the adherent monolayer culture system are valuable tools to determine the potential (proliferation or differentiation) of adult ...

Lineage-reprogramming of Pericyte-derived Cells of the Adult Human Brain into Induced Neurons

誘導された神経細胞への成人の脳の周皮細胞由来細胞の系統の再プログラミング

Direct lineage-reprogramming of non-neuronal cells into induced neurons (iNs) may provide insights into the molecular mechanisms underlying neurogenesis ...

Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Mouse Subcallosal Zone

マウス梁下ゾーンから成体神経幹細胞の単離および培養

Adult neural stem cells (aNSCs) can be used for the regeneration of damaged brain tissue. NSCs have the potential for differentiation and proliferation ...

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

大人のホールマウントの準備のためのシンプルなワンステップ解剖プロトコル<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;ブレインズ

There is an increasing interest in using Drosophila to model human brain degenerative diseases, map neuronal circuitries in adult brains, and study the ...

Simple Generation of a High Yield Culture of Induced Neurons from Human Adult Skin Fibroblasts

ひと成人皮膚線維芽細胞から誘導される神経細胞の高収率文化の生成の単純です

Induced neurons (iNs), the product of somatic cells directly converted to neurons, are a way to obtain patient-derived neurons from tissue that is easily ...

Generation of Neurospheres from Mixed Primary Hippocampal and Cortical Neurons Isolated from E14-E16 Sprague Dawley Rat Embryo

E14-E16スプラーグドーリーラット胚から分離された混合原発海馬および皮質ニューロンからの神経球の生成

Primary neuron culture is an essential technique in the field of neuroscience. To gain deeper mechanistic insights into the brain, it is essential to have ...