Name: transverse sectioning of mature rice (oryza sativa l.) kernels for scanning electron microscopy imaging using pipette tips as immobilization support
Uploaded: 2022-01-25T13:00:00
Duration: 5 min 22 s
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लेखकों को उनके Phenom ProX डेस्कटॉप SEM साधन के उपयोग के लिए अनुसंधान के लिए सिस्टम (SFR Corp.) के लिए आभारी हैं, साथ ही साथ मारिया Pilarinos (अनुसंधान के लिए प्रणाली (SFR) कॉर्प) और Chloë वैन Oostende-Triplet (सेल जीव विज्ञान और छवि अधिग्रहण कोर सुविधा, चिकित्सा के संकाय, ओटावा विश्वविद्यालय) द्वारा प्रदान की गई तकनीकी सहायता के लिए आभारी हैं। वित्तपोषण ओंटारियो सरकार के आर्थिक विकास, नौकरी सृजन और व्यापार मंत्रालय, और प्रोटीन ईजी कॉर्प से कम कार्बन इनोवेशन फंड (LCIF) द्वारा प्रदान किया गया था।

1. अनुप्रस्थ चावल अनुभाग की तैयारी
<ol><li>डी-भूसी सूखी, बरकरार गुठली जैसा कि चित्र 1Aमें दिखाया गया है।<ol>
<li>दो फ्लैट रबर स्टॉपर के बीच गुठली को पीसकर भूसी और डीहुल चावल की गुठली को ढीला करें। यदि आवश्यक हो तो पैनिकल से भूसी हुई चावल की गुठली को हटा दें।</li>
		<li>एक कार्य बेंच पर एक फ्लैट रबर स्टॉपर पर एक एकल कर्नेल रखें(चित्रा 1 बी)। सुनिश्चित करें कि यह स्टॉपर स्थिर रहता है।</li>
		<li>पर्याप्त दबाव(चित्रा 1डी) का उपयोग करके कर्नेल को पहले रबर स्टॉपर के खिलाफ घुमाकर इसे घुमाकर एब्राड करने के लिए एक दूसरे फ्लैट रबर स्टॉपर(चित्रा 1 सी)का उपयोग करें। कर्नेल से भूसी निकालें, ध्यान रखें कि एंडोस्पर्म को चकनाचूर न करें। ठीक संदंश का उपयोग करके किसी भी शेष भूसी को हटा दें। एक डी-भूसी हुई कर्नेल को चित्र 1Eमें दिखाया गया है।</li>
	</ol>
</li>
	<li>ठीक संदंश का उपयोग करते हुए, एक प्लास्टिक पिपेट टिप (250 μL आकार, एक बीज / टिप) में एक व्यक्तिगत भूसी हुई कर्नेल डालें(चित्रा 1 एफ)। सुनिश्चित करें कि कर्नेल का भ्रूण अंत पिपेट टिप(चित्रा 1 जी)के (शंक्वाकार) छोर की ओर सामना कर रहा है। नोट: कर्नेल को इस तरह से सम्मिलित करना यह सुनिश्चित करता है कि कर्नेल पिपेट टिप में जितना संभव हो सके उतना snugly फिट होगा क्योंकि कर्नेल अपने समीपस्थ अंत की ओर संकीर्ण है।</li>
	<li>कर्नेल को पिपेट टिप में मजबूर करने के लिए एक दूसरा 250 μL पिपेट टिप डालें और सेक्शनिंग के दौरान कर्नेल को स्थिर रखने के लिए, कर्नेल को नुकसान पहुंचाने या दूसरे पिपेट टिप को मोड़ने के लिए ध्यान न रखें(चित्रा 1 एच)। उचित 'दूरबीन' संयोजन चित्र 1Iमें दर्शाया गया है।</li>
	<li>एक काम बेंच पर पिपेट टिप असेंबलिंग फ्लैट रखें और हाथ से जगह में पकड़ें(चित्रा 1 जे)। दूसरे हाथ के साथ, कर्नेल के केंद्र के माध्यम से स्लाइस करने के लिए एक तेज स्केलपेल ब्लेड (नंबर 20) का उपयोग करें और पिपेट टिप के अंत को काट दें(चित्रा 1K)। स्कैल्पल का उपयोग करके चावल कर्नेल के 1 मिमी मोटे वर्गों को काट दिया जाताहै (चित्रा 1 एल)। नोट: कर्नेल अनुभाग कसकर प्लास्टिक के एक annulus के भीतर संलग्न है(चित्रा 1M). तीन उदाहरण जीनोटाइप के लिए माध्य अनुभाग मोटाई तालिका 1में पाई जाती है। 1 मिमी की तुलना में काफी पतले खंड चकनाचूर या उखड़ जाएंगे। यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि कर्नेल के किस हिस्से से प्रत्येक खंड की उत्पत्ति होती है यदि यह प्रयोग तुलना के लिए चावल की कई किस्मों पर किया जा रहा है, क्योंकि स्टार्च आकृति विज्ञान एंडोस्पर्म11में भिन्न होता है।</li>
</ol>2. अनुप्रस्थ चावल वर्गों की परावर्तित प्रकाश माइक्रोस्कोपी
<ol><li>भारी गेज काले कागज के एक काले टुकड़े पर अनुप्रस्थ चावल वर्गों (खंड 1 में तैयार) रखने के लिए ठीक संदंश का उपयोग करें।</li>
	<li>तिरछी रोशनी के लिए घुड़सवार goosenecks के साथ एक stereomicroscope का उपयोग कर निप्पॉनबेयर के अनुप्रस्थ वर्गों की प्रकाश छवियों को प्राप्त करें, जैसा कि चित्र 1एन-एसमें दिखाया गया है।</li>
	<li>कम से कम 10x आवर्धन के तहत एंडोस्पर्म आकृति विज्ञान का निरीक्षण करें। नोट: कोई भी एपिलाइट स्रोत उज्ज्वल क्षेत्र माइक्रोस्कोपी के लिए बेहतर है क्योंकि इस तकनीक का उपयोग करके प्राप्त अनुभाग प्रकाश के माध्यम से गुजरने के लिए पर्याप्त पतले नहीं हैं।</li>
</ol>3. अनुप्रस्थ चावल वर्गों के स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी
<ol><li>एक एल्यूमीनियम स्टब करने के लिए अटक एक कार्बन डिस्क पर नमूनों जगह और एक चार्ज कमी नमूना धारक पर जगह. SEM के वैक्यूम उपकरण में प्रवेश करने से प्लास्टिक को रोकने के लिए ठीक संदंश का उपयोग करके पिपेट टिप माउंट से प्लास्टिक की अंगूठी को हटा दें। नोट: एंडोस्पर्म कोशिकाओं, SGs, और subgranules की छवियाँ एक डेस्कटॉप SEM मशीन का उपयोग करके प्राप्त की जाती हैं, जिसके लिए नमूनों को sputter लेपित होने की आवश्यकता नहीं होती है।</li>
	<li>10 kV पर एक उच्च संवेदनशीलता बहु मोड backscatter इलेक्ट्रॉन (बीएसई) डिटेक्टर का उपयोग कर छवियों को प्राप्त करें।</li>
</ol>

<ol>
	<li>James, M. G., Denyer, K., Myers, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Starch+synthesis+in+the+cereal+endosperm.">Starch synthesis in the cereal endosperm.</a> Current Opinion in Plant Biology. 6 (3), 215-222 (2003).</li><li>Shapter, F. M., Henry, R. J., Lee, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endosperm+and+starch+granule+morphology+in+wild+cereal+relatives.">Endosperm and starch granule morphology in wild cereal relatives.</a> Plant Genetic Resources. 6 (2), 85-97 (2008).</li><li>Ashida, K., Iida, S., Yasui, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological,+physical,+and+chemical+properties+of+grain+and+flour+from+chalky+rice+mutants.">Morphological, physical, and chemical properties of grain and flour from chalky rice mutants.</a> Cereal Chemistry. 86 (2), 225-231 (2009).</li><li>Matsushima, R., Maekawa, M., Fujita, N., Sakamoto, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid,+direct+observation+method+to+isolate+mutants+with+defects+in+starch+grain+morphology+in+rice.">A rapid, direct observation method to isolate mutants with defects in starch grain morphology in rice.</a> Plant and Cell Physiology. 51 (5), 728-741 (2010).</li><li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+stable+QTLs+causing+chalk+in+rice+grains+in+nine+environments.">Identification of stable QTLs causing chalk in rice grains in nine environments.</a> Theoretical and Applied Genetics. 129 (1), 141-153 (2016).</li><li>Nagato, K., Ebata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+high+temperature+during+ripening+period+on+the+development+and+the+quality+of+rice+kernels.">Effects of high temperature during ripening period on the development and the quality of rice kernels.</a> Japanese Journal of Crop Science. 34 (1), 59-66 (1965).</li><li>Zhao, X., Fitzgerald, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Climate+change:+implications+for+the+yield+of+edible+rice.">Climate change: implications for the yield of edible rice.</a> PLoS One. 8 (6), 66218 (2013).</li><li>Zhao, Z. K., Mu, T. H., Zhang, M., Richel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+high+hydrostatic+pressure+and+microbial+transglutaminase+treatment+on+structure+and+gelation+properties+of+sweet+potato+protein.">Effects of high hydrostatic pressure and microbial transglutaminase treatment on structure and gelation properties of sweet potato protein.</a> LWT - Food Science and Technology. 115, 108436 (2019).</li><li>Feiz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Puroindolines+co-localize+to+the+starch+granule+surface+and+increase+seed+bound+polar+lipid+content.">Puroindolines co-localize to the starch granule surface and increase seed bound polar lipid content.</a> Journal of Cereal Science. 50 (1), 91-98 (2009).</li><li>Zhao, L., Pan, T., Guo, D., Wei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+and+rapid+method+for+preparing+the+whole+section+of+starchy+seed+to+investigate+the+morphology+and+distribution+of+starch+in+different+regions+of+seed.">A simple and rapid method for preparing the whole section of starchy seed to investigate the morphology and distribution of starch in different regions of seed.</a> Plant Methods. 14 (1), 16 (2018).</li><li>Zhao, L., Pan, T., Cai, C., Wang, J., Wei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+whole+sections+of+mature+cereal+seeds+to+visualize+the+morphology+of+endosperm+cell+and+starch+and+the+distribution+of+storage+protein.">Application of whole sections of mature cereal seeds to visualize the morphology of endosperm cell and starch and the distribution of storage protein.</a> Journal of Cereal Science. 71, 19-27 (2016).</li><li>Li, C., Dong, S., Li, G., Yuan, G., Dong, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breeding+and+application+of+the+new+combination+of+hybrid+rice+"Xieyou+7954".">Breeding and application of the new combination of hybrid rice "Xieyou 7954".</a> Journal of Zhejiang University (Agriculture and Life Sciences). 19 (3), 179-181 (2002).</li><li>Shu, X., Jia, L., Ye, H., Li, C., Wu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Slow+digestion+properties+of+rice+different+in+resistant+starch.">Slow digestion properties of rice different in resistant starch.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 57 (16), 7552-7559 (2009).</li><li>Zhou, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+roles+of+soluble+starch+synthase+SSIIIa+and+granule-bound+starch+synthase+Waxy+in+synthesizing+resistant+starch+in+rice.">Critical roles of soluble starch synthase SSIIIa and granule-bound starch synthase Waxy in synthesizing resistant starch in rice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 113 (45), 12844-12849 (2016).</li><li>Yang, C. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Starch+properties+of+mutant+rice+high+in+resistant+starch.">Starch properties of mutant rice high in resistant starch.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 54, 523-528 (2006).</li><li>Zhou, Y., Zou, Y., Jiang, Y., Li, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+methods+for+resistance+starch+content+of+Yi-Tang+rice+and+optimization+of+pretreatment.">Detection methods for resistance starch content of Yi-Tang rice and optimization of pretreatment.</a> Food Science and Biotechnology. 36, 416-419 (2017).</li><li>Cheng, X., Sardana, R., Kaplan, H., Altosaar, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Agrobacterium-transformed+rice+plants+expressing+synthetic+cryIA(b)+and+cryIA(c)+genes+are+highly+toxic+to+striped+stem+borer+and+yellow+stem+borer.">Agrobacterium-transformed rice plants expressing synthetic cryIA(b) and cryIA(c) genes are highly toxic to striped stem borer and yellow stem borer.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 95 (6), 2767-2772 (1998).</li><li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+detection+of+P-35S+and+T-nos+in+genetically+modified+organisms+by+recombinase+polymerase+amplification+combined+with+a+lateral+flow+strip.">Rapid detection of P-35S and T-nos in genetically modified organisms by recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow strip.</a> Food Control. 107, 106775 (2020).</li><li>Shu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+rice+plants+with+a+synthetic+cry1Ab+gene+from+Bacillus+thuringiensis+were+highly+resistant+to+eight+lepidopteran+rice+pest+species.">Transgenic rice plants with a synthetic cry1Ab gene from Bacillus thuringiensis were highly resistant to eight lepidopteran rice pest species.</a> Molecular Breeding. 6 (4), 433-439 (2000).</li><li>Lisle, A. J., Martin, M., Fitzgerald, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chalky+and+translucent+rice+grains+differ+in+starch+composition+and+structure+and+cooking+properties.">Chalky and translucent rice grains differ in starch composition and structure and cooking properties.</a> Cereal Chemistry. 77 (5), 627-632 (2000).</li><li>Chen, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+development+of+starch+granules+and+the+regulation+of+starch+biosynthesis+in+Brachypodium+distachyon:+comparison+with+common+wheat+and+Aegilops+peregrina.">Dynamic development of starch granules and the regulation of starch biosynthesis in Brachypodium distachyon: comparison with common wheat and Aegilops peregrina.</a> BMC Plant Biology. 14 (1), 198 (2014).</li><li>Giroux, M. J., Morris, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wheat+grain+hardness+results+from+highly+conserved+mutations+in+the+friabilin+components+puroindoline+a+and+b.">Wheat grain hardness results from highly conserved mutations in the friabilin components puroindoline a and b.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 95 (11), 6262-6266 (1998).</li><li>Matsushima, R., Hisano, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+amyloplasts+in+the+developing+endosperm+of+barley+and+rice.">Imaging amyloplasts in the developing endosperm of barley and rice.</a> Scientific Reports. 9, 3745 (2019).</li><li>Matsushima, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloplast-localized+SUBSTANDARD+STARCH+GRAIN4+protein+influences+the+size+of+starch+grains+in+rice+endosperm.">Amyloplast-localized SUBSTANDARD STARCH GRAIN4 protein influences the size of starch grains in rice endosperm.</a> Plant Physiology. 164 (2), 623-636 (2014).</li><li>Monjardino, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+flange+and+reticulate+wall+ingrowths+in+maize+(Zea+mays+L.)+endosperm+transfer+cells.">Development of flange and reticulate wall ingrowths in maize (Zea mays L.) endosperm transfer cells.</a> Protoplasma. 250 (2), 495-503 (2013).</li><li>Tizro, P., Choi, C., Khanlou, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+preparation+for+transmission+electron+microscopy.">Sample preparation for transmission electron microscopy.</a> Methods in Molecular Biology. 1897, 417-424 (2019).</li><li>Liu, Q. H., Zhou, X. B., Yang, L. Q., Li, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chalkiness+on+cooking,+eating+and+nutritional+qualities+of+rice+in+two+indica+varieties.">Effects of chalkiness on cooking, eating and nutritional qualities of rice in two indica varieties.</a> Rice Science. 16 (2), 161-164 (2009).</li><li>Morita, S., Wada, H., Matsue, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Countermeasures+for+heat+damage+in+rice+grain+quality+under+climate+change.">Countermeasures for heat damage in rice grain quality under climate change.</a> Plant Production Science. 19 (1), 1-11 (2016).</li></ol>

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।

यहां प्रस्तुत तकनीक डेस्कटॉप एसईएम विज़ुअलाइज़ेशन के लिए अनुप्रस्थ चावल क्रॉस सेक्शन तैयार करने की दिशा में एक तेज़, सरल और उत्सुक दृष्टिकोण का प्रतिनिधित्व करती है। यह सेक्शनिंग तकनीक एंडोस्पर्म संरचना, एंडोस्पर्म सेल आकार, आकार और पैटर्न, यौगिक दानों और स्टार्च आकृति विज्ञान के तेजी से अवलोकन के लिए अनुमति देती है। एंडोस्पर्म फेनोटाइपिंग और जर्मप्लाज्म स्क्रीनिंग के प्रयोजनों के लिए, चावलकर्नेल4,23,24के पूरे क्रॉस सेक्शन को प्राप्त करना महत्वपूर्ण है। एंडोस्पर्म को उखड़ने या चकनाचूर करने के लिए मजबूर करने से स्केलपेल ब्लेड के दबाव को रोकने के लिए पिपेट टिप के भीतर पूरी तरह से कर्नेल को सम्मिलित करना सर्वोपरि है। बशर्ते 'दूरबीन' संयोजन ठीक से बनाया गया है, नमूनों को 15 सेकंड के भीतर विज़ुअलाइज़ेशन के लिए तैयार किया जा सकता है(तालिका 2)एक विशिष्ट प्रयोगशाला सेटिंग में पहले से ही हाथ में सामग्री को नियोजित करना। यह तकनीक किसी भी अंडाकार बीज के क्रॉस-सेक्शनिंग पर लागू होती है जो इसके सबसे व्यापक बिंदु पर लगभग चार मिलीमीटर व्यास में होती है। मॉडल घास Brachypodium distachyon (चित्रा S2A)के बीज इसी तरह से विभाजित किया जा सकता है, लेकिन annulus के भीतर संलग्न नहीं रहते हैं। बड़े बीज, जैसे गेहूं, आसानी से फ्रैक्चर और सेक्शनिंग(चित्रा S2B)करते समय देखभाल की आवश्यकता होती है।
हालांकि, यहां प्रस्तुत तकनीक की कई सीमाएं हैं। इस तकनीक का उपयोग करके प्राप्त अनुभाग प्रकाश के गुजरने के लिए पर्याप्त पतले नहीं हैं, जो उज्ज्वल क्षेत्र (चावल कर्नेल अनुभागों25के लिए 500 μm अधिकतम नमूना मोटाई) और ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (TEM) (500 एनएम अधिकतम नमूना मोटाई26) जैसे संचारित-प्रकाश आधारित माइक्रोस्कोपिक दृष्टिकोणों के लिए इस तकनीक के उपयोग को प्रतिबंधित करता है। ). सेक्शनिंग 'मैट्रिक्स' के रूप में एक पिपेट टिप का उपयोग भी बीज के आकार को सीमित करता है जिसे इस तकनीक का उपयोग करके विभाजित किया जा सकता है। चावल से अत्यधिक असमान प्रजातियों के लिए इस तकनीक को अनुकूलित करने के लिए आगे की समस्या निवारण की आवश्यकता होगी, और 'मैट्रिक्स' का आकार खरीद के लिए उपलब्ध पिपेट युक्तियों के आकार से सीमित है।
एक और विशिष्ट लाभ जो यह तकनीक प्रदान करती है वह नमूनों की गुणवत्ता है जिसे चॉकी फेनोटाइप चावल की गुठली से उत्पादित किया जा सकता है। यह ध्यान देने योग्य है कि यहां तक कि मात्सुशिमा अध्ययन ने स्वीकार किया कि चॉकीफेनोटाइप्स 4के लिए उस विशेष विधि का उपयोग करके क्रॉस सेक्शन प्राप्त करना मुश्किल था, जैसा कि तुलना के उद्देश्य से इस अध्ययन में दोहराया गया था(चित्रा 1 एस)। उनके मामले में, रासायनिक रूप से उनके चॉकी चावल के नमूनों को ठीक करना और उन्हें सेक्शनिंग के लिए राल में एम्बेड करना आवश्यक हो गया। नई तकनीक, डेस्कटॉप एसईएम इमेजिंग के साथ संयोजन के रूप में, शोधकर्ता को आसानी से स्थिरीकरण समर्थन के बिना अधिक स्थिरता के साथ माइक्रोस्कोपी के लिए चावल की गुठली के अनुप्रस्थ वर्गों को तैयार करने की अनुमति देती है(तालिका 3)।
Phenomics और metabolomics के नए युग में, बीज में स्टार्च के कार्य और महत्व को बेहतर ढंग से समझने के लिए म्यूटाजेनाइज्ड लाइनों और ट्रांसपोसन-टैग किए गए पुस्तकालयों की निगरानी करना महत्वपूर्ण है। इसके अतिरिक्त, अंतर्राष्ट्रीय चावल जीनबैंक में 130,000 से अधिक चावल परिग्रहण27हैं। यहां प्रस्तुत एक तेजी से बीज फेनोटाइपिंग तकनीक की तरह एक पोषण गुणवत्ता के लिए वर्गीकरण और नमूनाकरण में तेजीलाएगी। अंत में, यह तकनीक जलवायु परिवर्तन के प्रभावों के अतिक्रमण के प्रकाश में उपयोगी हो सकती है। अनाज भरने के दौरान मौसमी उच्च तापमान के तनाव को पहले से ही चॉकनेस6के एक प्रमुख कारण के रूप में पहचाना जा चुका था, लेकिन हाल के अध्ययनों ने चावल की पैदावार7,29की बढ़ती चॉकनेस में बढ़ते वैश्विक तापमान को शामिल किया है। इस तरह के त्वरित एंडोस्पर्म फेनोटाइपिंग वैश्विक तापमान में वृद्धि के प्रभाव की एक व्यापक कृषि छवि प्रदान करने में मदद कर सकते हैं।

स्टार्च ग्रैन्यूल्स (एसजी) पौधे की प्रजातियों के आधार पर विभिन्न आकारिकी प्रदर्शित करते हैं, विशेष रूप से पोएसी परिवार1,2के एंडोस्पर्म में। एंडोस्पर्म फेनोटाइपिंग का उपयोग स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपिक विश्लेषण का उपयोग करके एसजी फेनोटाइप के आधार पर जीनोटाइप को वर्गीकृत करने के लिए किया जा सकता है। एसजी को कर्नेल को टुकड़ा करने और एंडोस्पर्म सेल की दीवारों को दूर करने के द्वारा स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (एसईएम) का उपयोग करके कल्पना की जा सकतीहै।
इस तकनीक का उद्देश्य आसानी से तेजी से SEM विश्लेषण के लिए पूरी तरह से अनुप्रस्थ चावल कर्नेल वर्गों को तैयार करना है। इस तकनीक का विकास एक तेजी से क्रॉस सेक्शनिंग दृष्टिकोण की आवश्यकता से प्रेरित था जिससे नमूने न्यूनतम उपकरणों का उपयोग करके विज़ुअलाइज़ेशन से तुरंत पहले SEM माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार किए जाते हैं।
इस तकनीक में पूरी तरह से स्थिरीकरण के लिए पिपेट टिप में भूसी हुई चावल कर्नेल का सम्मिलन शामिल है। यह विशेष रूप से महत्वपूर्ण है जब क्रॉस-सेक्शनिंग चॉकी चावल कर्नेल फेनोटाइप, जो फ्रिएबल होते हैं और दबाव3के तहत आसानी से उखड़ जाते हैं। चॉकनेस चावल में एक अवांछनीय गुणवत्ता है क्योंकि यह कर्नेल की उपस्थिति को प्रभावित करता है और चमकाने और मिलिंग के दौरान कर्नेल को आसानी से तोड़ने का कारण बनता है3. चॉकनेस कर्नेल के एक क्रॉस-सेक्शन में एक अपारदर्शी क्षेत्र के रूप में प्रस्तुत करता है जिसे नग्न आंखों से देखा जा सकता है; माइक्रोस्कोपिक स्तर पर, चॉकनेस को छोटे, ढीले पैक स्टार्च दानों की विशेषता है। चॉकीनेस के कारण आनुवांशिक4,5 या पर्यावरणीय 6,7हो सकते हैं .
पैराफिन मोम या एक अन्य ठोस मैट्रिक्स 4 ,8,9,10में नमूने को एम्बेड करने के बाद पारंपरिक रूप से रासायनिक निर्धारण विधियों और सेक्शनिंग का उपयोग करके अनाज बीज क्रॉस सेक्शन तैयार किए गए हैं . 2010 में, मात्सुशिमा विधि को जटिल और समय लेने वाले चावल कर्नेल नमूनातैयारीसे बचने के तरीके के रूप में पेश किया गया था। इस विधि में एक कटा हुआ पिपेट टिप में भूसीदार चावल कर्नेल का सम्मिलन शामिल था। टिप को एक ब्लॉक ट्रिमर द्वारा स्थिर रखा जाता है, और पतले, आंशिक एंडोस्पर्म वर्गों को हाथ से आयोजित रेजर ब्लेड का उपयोग करके काटा जाता है। 2016 में विकसित एक और तेजी से तकनीक ने विभिन्न प्रकार के सूखे बीजों के पतले पूरे विभाजन के लिए अनुमति दी, जिसमें चाकी किस्में10शामिल हैं। इन विधियों ने यहां प्रस्तुत तेजी से तकनीक के विकास को प्रेरित किया।
यह नई तकनीक उन शोधकर्ताओं के लिए उपयुक्त है जो एसईएम का उपयोग करके एंडोस्पर्म फेनोटाइपिंग और स्टार्च आकृति विज्ञान विश्लेषण के लिए चावल की गुठली के बरकरार अनुप्रस्थ क्रॉस सेक्शन प्राप्त करना चाहते हैं।
यह प्रोटोकॉल कई उल्लेखनीय संशोधनों के साथ मात्सुशिमा कटे हुए पिपेट टिप विधि4के अनुकूलन का प्रतिनिधित्व करता है: (1) कर्नेल तकनीक के किसी भी बिंदु पर आत्मसात नहीं किए जाते हैं; (2) अनुभागों को तैयार करने के लिए न तो एक ब्लॉक ट्रिमर और न ही एक अल्ट्रामाइक्रोबियलोम की आवश्यकता होती है। एक जंगली प्रकार 'पारभासी' cultivar(Oryza sativa L. ssp. japonica cv. Nipponbare) और निप्पॉनबेरे(ssg1, घटिया स्टार्च अनाज1)4 की एक उत्परिवर्तित 'चॉकी' लाइन की जांच इस अध्ययन में की गई थी। इन दो cultivars को यहां विश्लेषण के लिए चुना गया था ताकि पारभासी और चॉकी-प्रकार के चावल वर्गों के प्रसंस्करण में तकनीकी और दृश्य अंतर प्रदर्शित किया जा सके।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>JMP 15</td>
			<td>SAS</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leit Adhesive Carbon Tabs 12 mm (Pack of 100)</td>
			<td>Agar Scientific</td>
			<td>AGG3347N</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenom Pro Desktop SEM</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>PHENOM-PRO</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Tips RC UNV 250 &#181;L</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>17001116</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SEM Pin Stub &#216;12.7 Diameter Top, Standard Pin, Aluminium</td>
			<td>Micro to Nano</td>
			<td>10-002012-50</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Microdissecting Fine Tips Thumb Forceps, Fine Tips, 12.7 cm</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>3120019</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Scalpel Blade No. 20, Sterile, 4.5 cm</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>28618256</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Stainless-Steel Scalpel Blade Handle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>5334</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss V20 Discovery Stereomicroscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

transverse sectioning of mature rice (oryza sativa l.) kernels for scanning electron microscopy imaging using pipette tips as immobilization support

स्टार्च ग्रैन्यूल्स (एसजी) पौधे की प्रजातियों के आधार पर विभिन्न आकारिकी प्रदर्शित करते हैं, विशेष रूप से पोएसी परिवार के एंडोस्पर्म में। एंडोस्पर्म फेनोटाइपिंग का उपयोग स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपिक (एसईएम) विश्लेषण का उपयोग करके एसजी मोर्फोटाइप के आधार पर जीनोटाइप को वर्गीकृत करने के लिए किया जा सकता है। एसजी को कर्नेल (पेरिकार्प, एल्यूरोन परतों, और एंडोस्पर्म) के माध्यम से स्लाइसिंग करके और ऑर्गेनेलर सामग्री को उजागर करके एसईएम का उपयोग करके कल्पना की जा सकती है। वर्तमान विधियों के लिए चावल कर्नेल को प्लास्टिक राल में एम्बेडेड करने की आवश्यकता होती है और एक माइक्रोटोम का उपयोग करके विभाजित किया जाता है या एक कटे हुए पिपेट टिप में एम्बेडेड किया जाता है और रेजर ब्लेड का उपयोग करके हाथ से विभाजित किया जाता है। पूर्व विधि के लिए विशेष उपकरणों की आवश्यकता होती है और यह समय लेने वाली होती है, जबकि उत्तरार्द्ध चावल जीनोटाइप के आधार पर समस्याओं का एक नया मेजबान पेश करता है। चॉकी चावल की किस्में, विशेष रूप से, उनके एंडोस्पर्म ऊतक की friable प्रकृति के कारण इस प्रकार के सेक्शनिंग के लिए एक समस्या पैदा करती हैं। यहां प्रस्तुत माइक्रोस्कोपी के लिए पारभासी और चॉकी चावल कर्नेल वर्गों को तैयार करने के लिए एक तकनीक है, जिसमें केवल पिपेट टिप्स और एक स्केलपेल ब्लेड की आवश्यकता होती है। एक पिपेट टिप की सीमाओं के भीतर वर्गों को तैयार करना चावल कर्नेल एंडोस्पर्म को टूटने से रोकता है (पारभासी या 'विट्रियस' फेनोटाइप के लिए) और ढहने (चॉकी फेनोटाइप के लिए)। इस तकनीक का उपयोग करते हुए, एंडोस्पर्म सेल पैटर्निंग और बरकरार एसजी की संरचना को देखा जा सकता है।

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Transverse Sectioning of Mature Rice Oryza sativa L. Kernels for Scanning Electron Microscopy Imaging Using Pipette Tips as Immobilization Support

यह प्रोटोकॉल स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके एंडोस्पर्म और स्टार्च ग्रेन्युल आकृति विज्ञान के विश्लेषण के लिए अनाज के बीज (जैसे, चावल) के अनुप्रस्थ वर्गों की तैयारी के लिए अनुमति देता है।

परिपक्व चावल के अनुप्रस्थ विभाजन(Oryza sativa एल.) स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी इमेजिंग के लिए कर्नेल्स स्थिरीकरण समर्थन के रूप में पिपेट युक्तियाँ का उपयोग कर

Starch granules (SGs) exhibit different morphologies depending on the plant species, especially in the endosperm of the Poaceae family. Endosperm ...

यह प्रोटोकॉल बीजों को बरकरार रखने की अनुमति देता है ताकि वे उखड़ न जाएं, किसी भी बीज में स्टार्च दानों के विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति दें जो पिपेट टिप में फिट हो सकते हैं। निंदनीय प्लास्टिक शंकु सूखे ऊतकों और अंगों की मूल संरचना का समर्थन करता है, इसलिए यह सस्ता और आसान कई गुना कई गुना कई नमूनों को कम समय में संसाधित करने की अनुमति देता है। यहां फोरेंसिक माइक्रोस्कोपी लाभ से आगे बढ़ने के लिए, प्रतिरोधी स्टार्च, कुछ ऐसा जो हम सभी की तलाश में हैं, उस कच्चे स्टार्च, एमाइलोलिसिस, ग्लाइसेमिक इंडेक्स और ग्लूकोज स्पाइक्स के लिए एंजाइमों की पहुंच, ये आज दुनिया भर में टाइप 2 मधुमेह से लड़ने के लिए बेहतर चावल की किस्मों के प्रजनन के लिए मुख्य पैरामीटर हैं।और अब यह एक बहुत खुशी के लिए डॉ कियाह बार्टन आप के लिए परिचय है. Dr.Barton हमारी प्रयोगशाला से है और वह आपको यह दिखाने के लिए संकाय कोर इमेजिंग सुविधा का उपयोग करेगी कि इस तकनीक को कैसे तैनात किया जाता है। सूखी गुठली को डी-हुस्किंग करके शुरू करें।एक काम बेंच पर एक फ्लैट रबर स्टॉपर पर एक एकल कर्नेल रखें, और सुनिश्चित करें कि यह स्टॉपर स्थिर रहता है। पहले रबर स्टॉपर के खिलाफ घुमाकर कर्नेल को एब्राड करने के लिए एक दूसरे फ्लैट रबर स्टॉपर का उपयोग करें, फिर कर्नेल से भूसी को हटा दें, ध्यान रखें कि एंडोस्पर्म को चकनाचूर न करें और न ही दो रबर बंग के बीच बीज को बहुत आक्रामक रूप से पीसें। ठीक संदंश का उपयोग कर किसी भी शेष भूसी को हटा दें और एक प्लास्टिक 250 माइक्रोलीटर पिपेट टिप में एक व्यक्तिगत भूसी कर्नेल डालें।सुनिश्चित करें कि कर्नेल का भ्रूण अंत पिपेट टिप के शंक्वाकार अंत की ओर सामना कर रहा है। कर्नेल को पहले पिपेट टिप में मजबूर करने के लिए एक दूसरा 250 माइक्रोलीटर पिपेट टिप डालें और सेक्शनिंग के दौरान कर्नेल को स्थिर रखने के लिए, कर्नेल को नुकसान पहुंचाने या दूसरे पिपेट टिप को मोड़ने का ध्यान न रखें। एक workbench पर पिपेट टिप असेंबलिंग फ्लैट बिछाएं और इसे हाथ से जगह में पकड़ो।दूसरे हाथ के साथ, कर्नेल के केंद्र के माध्यम से स्लाइस करने के लिए एक तेज स्केलपेल ब्लेड का उपयोग करें, पिपेट टिप के अंत को काट दें। असेंबली के माध्यम से नीचे की ओर स्लाइस करें और फिर स्केलपेल ब्लेड को लंबवत रूप से उन्मुख करें ताकि हाथ अनुभाग के दो नए उजागर चेहरे समानांतर हों। फिर चावल की गिरी के एक मिलीमीटर मोटे वर्गों को काटने के लिए स्केलपेल का उपयोग करें।परावर्तित प्रकाश माइक्रोस्कोपी करने के लिए, भारी गेज काले कागज के एक टुकड़े पर अनुप्रस्थ चावल वर्गों को रखें। कम से कम 10 गुना आवर्धन का उपयोग करके तिरछी रोशनी के लिए घुड़सवार goosenecks के साथ एक स्टीरियो माइक्रोस्कोप का उपयोग करके अनुप्रस्थ वर्गों की प्रकाश छवियों को प्राप्त करें। जंगली प्रकार के निप्पॉनबेरे और एसएसजी 1 वर्गों की जांच 260 बार, 920 बार और 4, 200 गुना आवर्धन के तहत की गई थी।जब ठीक से तैयार किया जाता है, तो चावल के खंड लगभग 0.9 मिलीमीटर मोटे होते थे, जिसमें एंडोस्पर्म और बरकरार पेरिकार्प और एल्यूरोन परतों के न्यूनतम टूटने के साथ होता था। यह तकनीक पूरे एंडोस्पर्म सेल, यौगिक स्टार्च दानों और व्यक्तिगत उप-कणिकाओं का निरीक्षण करने के लिए पर्याप्त गुणवत्ता वाले वर्गों की तैयारी के लिए अनुमति देती है। पारभासी कर्नेल उत्पादक, जैसे कि जंगली-प्रकार प्रतिरोधी स्टार्च हाइब्रिड लाइन, झेहुई 7954 और कोबाल्ट उत्पन्न उत्परिवर्ती RS111, कसकर पैक किए गए पॉलीहेड्रल स्टार्च ग्रैन्यूल्स का उत्पादन करते हैं, जो सामान्य चावल एंडोस्पर्म फेनोटाइप है।चॉकी कर्नेल उत्पादकों, वाणिज्यिक विविधता ये तांग और RS4 की SEM छवियों ने स्टार्च दानों को प्रदर्शित किया जो गोल और ढीले पैक किए गए थे। जंगली प्रकार Xiushiu 11 और इसके उत्परिवर्ती KMD1, जो Cry1Ab जीन कीट शिकार को बाधित करने के लिए व्यक्त किया था पारभासी प्रतिरोधी स्टार्च लाइनों के समान वर्गों और endosperm morphotypes था। इस तकनीक को अन्य प्रजातियों के बीजों पर लागू किया जा सकता है।मॉडल मोनोकोट, ब्रैकीपोडियम डिस्टाचियोन, बहुत कठिन बीज पैदा करता है, लेकिन एक बरकरार अनुप्रस्थ खंड प्राप्त करना अभी भी संभव था। बरकरार अनुप्रस्थ वर्गों को नरम, सफेद सर्दियों के गेहूं से भी उत्पादित किया गया था। जैविक संरचनाओं के अंदर देखने के लिए यह तेजी से, सस्ती स्क्रीनिंग विधि कीट पैरों, लोकस बीन पेड़ स्पाइक्स, नागफनी, मछली रीढ़, या फोरेंसिक माइक्रोस्कोपी के किसी भी क्षेत्र पर लागू की जा सकती है जो इस नमूना समर्थन सेटअप से लाभ उठा सकती है।इस प्रोटोकॉल को करने के बाद, इलेक्ट्रोमाइक्रोस्कोपी के लिए स्पुटर कोटिंग, विशिष्ट फ्लोरोसेंट रंजक के साथ धुंधला, और उत्परिवर्ती जई और जौ लाइनों में बीटा ग्लूकन सेल की दीवार की मोटाई के लिए दाग करने के लिए कैलकैफ्लोर का आवेदन तेजी से फेनोटाइप स्क्रीनिंग के साथ पौधे प्रजनन के पास पहुंचने के कुछ त्वरित तरीके हैं।

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Transverse Sectioning of Mature Rice (Oryza sativa L.) Kernels for Scanning Electron Microscopy Imaging Using Pipette Tips as Immobilization Support

Analyzing Dynamic Protein Complexes Assembled On and Released From Biolayer Interferometry Biosensor Using Mass Spectrometry and Electron Microscopy

गतिशील प्रोटीन परिसरों का विश्लेषण पर इकट्ठे हुए और बायोमास स्पेक्ट्रोमेट्री और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग कर परत Interferometry से जारी

In vivo, proteins are often part of large macromolecular complexes where binding specificity and dynamics ultimately dictate functional outputs. In this ...

Analysis of &#946;-Amyloid-induced Abnormalities on Fibrin Clot Structure by Spectroscopy and Scanning Electron Microscopy

Analysis of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-Amyloid-induced Abnormalities on Fibrin Clot Structure by Spectroscopy and Scanning Electron Microscopy

स्पेक्ट्रोस्कोपी और स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा फाइब्रिन थक्का संरचना पर β-Amyloid-प्रेरित विषमता का विश्लेषण

This article presents methods for generating in vitro fibrin clots and analyzing the effect of beta-amyloid (A&#946;) protein on clot formation and ...

Probing The Structure And Dynamics Of Nucleosomes Using Atomic Force Microscopy Imaging

संरचना और Nucleosomes की गतिशीलता परमाणु शक्ति माइक्रोस्कोपी इमेजिंग का उपयोग कर की जांच

Chromatin, which is a long chain of nucleosome subunits, is a dynamic system that allows for such critical processes as DNA replication and transcription ...

Production of Dynein and Kinesin Motor Ensembles on DNA Origami Nanostructures for Single Molecule Observation

एकल अणु अवलोकन के लिए डीएनए Origami Nanostructures पर Dynein और Kinesin मोटर एनसेंबल्स का उत्पादन

Cytoskeletal motors are responsible for a wide variety of functions in eukaryotic cells, including mitosis, cargo transport, cellular motility, and ...

Improved UPLC-UV Method for the Quantification of Vitamin C in Lettuce Varieties (Lactuca sativa L.) and Crop Wild Relatives (Lactuca spp.)

Improved UPLC-UV Method for the Quantification of Vitamin C in Lettuce Varieties Lactuca sativa L. and Crop Wild Relatives Lactuca spp.

सलाद पत्ता किस्मों(लैक्टुका सतीवा एल) और क्रॉप वाइल्ड रिश्तेदारों(लैक्टुका स्पीप) में विटामिन सी के परिमाणीकरण के लिए यूपीएलसी-यूवी विधि में सुधार हुआ।

Vitamins, especially vitamin C, are important micronutrients found in fruits and vegetables. Vitamin C is also a major contributor to their antioxidant ...

Preparation of Sample Support Films in Transmission Electron Microscopy using a Support Floatation Block

एक समर्थन फ्लोटेशन ब्लॉक का उपयोग करके ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी में नमूना समर्थन फिल्मों की तैयारी

Structure determination by cryo-electron microscopy (cryo-EM) has rapidly grown in the last decade; however, sample preparation remains a significant ...

Preparing Lamellae from Vitreous Biological Samples Using a Dual-Beam Scanning Electron Microscope for Cryo-Electron Tomography

क्रायो-इलेक्ट्रॉन टोमोग्राफी के लिए दोहरी-बीम स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप का उपयोग करके विट्रियस जैविक नमूनों से लैमेला तैयार करना

Presented here is a protocol for preparing cryo-lamellae from plunge-frozen grids of Plasmodium falciparum-infected&#160;human erythrocytes, which could ...

Single Particle Cryo-Electron Microscopy: From Sample to Structure

एकल कण क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी: नमूना से संरचना तक

Cryo-electron microscopy (cryoEM) is a powerful technique for structure determination of macromolecular complexes, via single particle analysis (SPA). The ...

Manual Blot-and-Plunge Freezing of Biological Specimens for Single-Particle Cryogenic Electron Microscopy

मैनुअल धब्बा-और-डुबकी एकल कण क्रायोजेनिक इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए जैविक नमूनों की ठंड

Imaging biological specimens with electrons for high-resolution structure determination by single-particle cryogenic electron microscopy (cryoEM) requires ...

Micropatterning Transmission Electron Microscopy Grids to Direct Cell Positioning within Whole-Cell Cryo-Electron Tomography Workflows

Micropatterning ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी ग्रिड पूरे सेल क्रायो-इलेक्ट्रॉन टोमोग्राफी वर्कफ़्लो के भीतर प्रत्यक्ष सेल पोजिशनिंग के लिए

Whole-cell cryo-electron tomography (cryo-ET) is a powerful technology that is used to produce nanometer-level resolution structures of macromolecules ...