Name: modeling hepatitis b virus infection in non-hepatic 293t-ne-3nrs cells
Uploaded: 2020-06-05T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Hepatitis B Virus Infection in Non-Hepatic 293T-NE-3NRs Cells at JoVE.com

这项工作得到了中国国家自然科学基金（第81870432号和81570567至X.L.Z.）、国际青年科学家研究基金（第81571994号至P.N.S.）的支持（第81950410640号至W.I.）;李嘉诚汕头大学基金会（第1号）L1111 2008 至 P.N.S.）。我们感谢汕头大学医学院的林士丹教授提供有用的建议。

根据国家的生物安全指南，应在生物安全II（P2）或生物安全III（P3）实验室进行从 HepG2.2.15 细胞和 HBV 感染中采集超级纳的培养。应遵循实验室安全做法，以确保实验室人员的安全，在进行HBV实验之前，应接种所有疫苗并检测出HBsAbb阳性。在继续下一步之前，观察每个步骤的单元格状态。根据汕头大学医学院审查委员会的批准，使用人体血清样本。
1. HepG2.2.15 细胞培养
<p clas...

<ol>
	<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+hepatitis+report,+2017.">Global hepatitis report, 2017.</a> World Health Organization. , (2017).</li><li>Yoffe, B., Burns, D. K., Bhatt, H. S., Combes, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extrahepatic+hepatitis+B+virus+DNA+sequences+in+patients+with+acute+hepatitis+B+infection.">Extrahepatic hepatitis B virus DNA sequences in patients with acute hepatitis B infection.</a> Hepatology. 12, 187-192 (1990).</li><li>Mason, A., Wick, M., White, H., Perrillo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatitis+B+virus+replication+in+diverse+cell+types+during+chronic+hepatitis+B+virus+infection.">Hepatitis B virus replication in diverse cell types during chronic hepatitis B virus infection.</a> Hepatology. 18, 781-789 (1993).</li><li>Yan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sodium+taurocholate+cotransporting+polypeptide+is+a+functional+receptor+for+human+hepatitis+B+and+D+virus.">Sodium taurocholate cotransporting polypeptide is a functional receptor for human hepatitis B and D virus.</a> eLife. 1, 00049 (2012).</li><li>Tang, H., McLachlan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptional+regulation+of+hepatitis+B+virus+by+nuclear+hormone+receptors+is+a+critical+determinant+of+viral+tropism.">Transcriptional regulation of hepatitis B virus by nuclear hormone receptors is a critical determinant of viral tropism.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 98, 1841-1846 (2001).</li><li>Sells, M. A., Chen, M. L., Acs, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+hepatitis+B+virus+particles+in+Hep+G2+cells+transfected+with+cloned+hepatitis+B+virus+DNA.">Production of hepatitis B virus particles in Hep G2 cells transfected with cloned hepatitis B virus DNA.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 84, 1005-1009 (1987).</li><li>Sells, M. A., Zelent, A. Z., Shvartsman, M., Acs, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Replicative+intermediates+of+hepatitis+B+virus+in+HepG2+cells+that+produce+infectious+virions.">Replicative intermediates of hepatitis B virus in HepG2 cells that produce infectious virions.</a> Journal of Virology. 62, 2836-2844 (1988).</li><li>Watashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclosporin+A+and+its+analogs+inhibit+hepatitis+B+virus+entry+into+cultured+hepatocytes+through+targeting+a+membrane+transporter,+sodium+taurocholate+cotransporting+polypeptide+(NTCP).">Cyclosporin A and its analogs inhibit hepatitis B virus entry into cultured hepatocytes through targeting a membrane transporter, sodium taurocholate cotransporting polypeptide (NTCP).</a> Hepatology. 59, 1726-1737 (2014).</li><li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defined+host+factors+support+HBV+infection+in+non-hepatic+293T+cells.">Defined host factors support HBV infection in non-hepatic 293T cells.</a> Journal of Cell and Molecular Medicine. 24, 2507-2518 (2020).</li><li>Xia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+stem+cell-derived+hepatocytes+as+a+model+for+hepatitis+B+virus+infection,+spreading+and+virus-host+interactions.">Human stem cell-derived hepatocytes as a model for hepatitis B virus infection, spreading and virus-host interactions.</a> Journal of Hepatology. 66, 494-503 (2017).</li><li>Ortega-Prieto, A. M., Cherry, C., Gunn, H., Dorner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Model+Systems+for+Hepatitis+B+Virus+Research.">In Vivo Model Systems for Hepatitis B Virus Research.</a> ACS Infectious Diseases. 5, 688-702 (2019).</li><li>Liang, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatitis+B:+the+virus+and+disease.">Hepatitis B: the virus and disease.</a> Hepatology. 49, 13-21 (2009).</li><li>Nie, Y. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recapitulation+of+hepatitis+B+virus-host+interactions+in+liver+organoids+from+human+induced+pluripotent+stem+cells.">Recapitulation of hepatitis B virus-host interactions in liver organoids from human induced pluripotent stem cells.</a> EBioMedicine. 35, 114-123 (2018).</li><li>Nishinakamura, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+kidney+organoids:+progress+and+remaining+challenges.">Human kidney organoids: progress and remaining challenges.</a> Nature Reviews Nephrology. 15, 613-624 (2019).</li></ol>

在这里，我们介绍非肝293T-NE-3NR和基于肝瘤的HpG2-NE细胞的HBV感染方案。293T-NE-3NR 适用于高低 GEq 的 HBV 感染。在使用我们的协议时，需要考虑以下关键步骤。细胞状态是成功感染的重要因素。在HBV感染的初始阶段后，必须及时改变感染媒介。293T-NE-3NRs细胞在感染高病毒滴答声后通常很脆弱。因此，这些细胞必须轻轻清洗，以避免在感染24小时后分离细胞。在使用膜插入物进行培养时，我们必须确保?...

乙型肝炎影响20多亿人的生命，是公共卫生面临的主要威胁之一。全世界约有2.57亿人长期感染乙型肝炎病毒（HBV），给社会带来沉重负担。肝细胞不是受HBV感染的唯一细胞，非肝组织中的其他细胞，如肾脏和睾丸，也感染了这种病毒2,2，3。目前，HBV感染细胞模型仅限于人类肝细胞，只有很少的非肝细胞系模型。这妨碍了对乙肝病毒感染和非肝组织乙肝病毒相关病理学的研究。在这里，我们提出了在非肝293T细胞以及基于肝瘤的细胞中研究HBV感染的协议。
陶罗胆酸钠与多肽（NTCP）是人体乙型肝炎和D型肝炎病毒4的功能受体。肝细胞核因子4°（HNF4°）、视网膜X受体+（RXR+）和过氧化物增殖剂活化受体（PPAR+）是限制HBV病毒性转录因子的肝状转录因子。它们已被验证，以促进HBV基因组RNA合成，并支持HBV复制在非肝瘤细胞系5。我们构建了三种不同的细胞系，表示NTCP（HepG2-NE）的 HepG2细胞系，表达NTCP（293T-NE）的293T细胞系和表达四个宿主基因的293T细胞系;NTCP、HNF4+、RXR+和PAR+（293T-NE-3NR）。基于293T-NE-3NRs开发了两种乙肝病毒感染方法（图1）。第一种方法使用接种293T-NE-3NR高病毒基因组等效性（高GEq（150），DMSO和PEG8000）24小时。第二种方法采用与 HepG2.2.15 共同培养 293T-NE-3NR 的方法，它可以产生 HBV 粒子（低 GEq（约 1.83），无需 DMSO 和 PEG8000），从而密切模拟自然条件。
HepG2.2.15细胞来自 HepG2 线和慢性分泌传染性 HBV，以及亚病毒颗粒进入培养基 6，7,7。Cyclosporin A （CsA） 是一种免疫抑制剂，临床上用于抑制异种移植排斥。研究表明，CSA通过抑制NTCP的运输机活性，阻断NTCP与大包络蛋白8的结合，抑制HBV进入培养的肝细胞。
HepG2-NE细胞用作阳性对照，而CsA处理细胞用作阴性对照。通过与阳性和阴性对照组进行比较，我们可以找出哪些宿主基因在HBV感染中起着关键作用。此外，通过这种乙肝病毒感染模式，我们还可以找到其他与乙肝病毒感染相关的新机制或宿主基因。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.45&#956;m membrane filter</td>
			<td>Millex-HV</td>
			<td>SLHU033RB</td>
			<td>Filter for HepG 2.2.15 supernatant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>293T-NE</td>
			<td>Laboratory construction</td>
			<td>&#8212;&#8212;</td>
			<td>Cell model for HBV infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>293T-NE-3NRs</td>
			<td>Laboratory construction</td>
			<td>&#8212;&#8212;</td>
			<td>Cell model for HBV infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>594 labeled goat against rabbit IgG</td>
			<td>ZSGB-BIO</td>
			<td>ZF-0516</td>
			<td>For immunofluorescence assay,second antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well plate</td>
			<td>BIOFIL</td>
			<td>TCP010006</td>
			<td>For co-culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amicon Ultra 15 ml</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>UFC910008</td>
			<td>For concentration of HepG 2.2.15 supernatant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>ST023</td>
			<td>For immunofluorescence assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyclosporin A</td>
			<td>Sangon biotech</td>
			<td>59865-13-3</td>
			<td>inhibitor of HBV infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>C1006</td>
			<td>For nuclear staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diagnostic kit for Quantification of Hepatitis B Virus DNA(PCR-Fluorescence Probing)</td>
			<td>DAAN GENE</td>
			<td>7265-2013</td>
			<td>For HBV DNA detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>HyClong</td>
			<td>SH30243.01</td>
			<td>For culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D5879</td>
			<td>For improvement of infection efficiency</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum&#65288;FBS&#65289;</td>
			<td>CLARK Bioscience</td>
			<td>FB25015</td>
			<td>For culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>Axio observer Z1</td>
			<td>For immunofluorescence assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HepG2-NE</td>
			<td>Laboratory construction</td>
			<td>&#8212;&#8212;</td>
			<td>Cell model for HBV infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBcAg antibody</td>
			<td>ZSGB-BIO</td>
			<td>ZA-0121</td>
			<td>For immunofluorescence assay, primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>ZSGB-BIO</td>
			<td>ZLI-9062</td>
			<td>For cell wash</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEG8000</td>
			<td>Merck</td>
			<td>P8260</td>
			<td>For infection medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin-Glutamine</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>10378016</td>
			<td>For culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transwell</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>3412</td>
			<td>For co-culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>sigma-Aldrich</td>
			<td>WXBB7485V</td>
			<td>For PBST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virkon</td>
			<td>Douban</td>
			<td>6971728840012</td>
			<td>Viruside</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling hepatitis b virus infection in non-hepatic 293t-ne-3nrs cells

HBV主要感染人类肝细胞，但也被发现感染肾外组织，如肾脏和睾丸。尽管如此，基于细胞的HBV模型仅限于肝瘤细胞系（如 HepG2 和 Huh7）过度表达功能性HBV受体，钠陶罗胆酸盐共同运输多肽（NTCP）。在这里，我们使用293T-NE-3NR（293T过度表达人类NTCP、HNF4+、RXR+和PAR+）和 HepG2-NE（HepG2 过行NTCP）作为模型细胞系。  这些细胞系中的HBV感染是通过使用来自 HepG2.2.15 的浓缩 HBV 病毒颗粒或与目标细胞系共同培养 HepG2.2.15 进行的。为HBcAg执行HBcAg免疫荧光以确认HBV感染。这里介绍的两种方法将有助于我们研究非肝细胞系的HBV感染。

我们构建了pSIN-NTCP-EGFP质粒表达NTCP和EGFP融合，具有霉素耐药性。质粒被转染到 HepG2 和 293T 细胞中，以构建稳定的细胞系 HepG2-NE 和 293T-NE 表达 NTCP 和 EGFP。具有普洛霉素耐药性和表达的质粒（pSIN-HNF4+，pSIN-RXR+，pLV-PPAR®-puro-flag）被转染成293T-NE细胞，以构建一个稳定的细胞系，表达4个宿主基因9。NTCP-EGFP的表达可以通过绿色荧光来观察，并经qPCR和西印验证（数据未显示，但见上一?...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Hepatitis B Virus Infection in Non-Hepatic 293T-NE-3NRs Cells at JoVE.com

Modeling Hepatitis B Virus Infection in Non-Hepatic 293T-NE-3NRs Cells

本手稿描述了新型工程293T细胞（293T-NE-3NRS，表达人类NTCP、HNF4+、RXR+和PAR+）和传统肝细胞（HepG2-NE，表达人类NTCP）中乙型肝炎病毒（HBV）感染的详细方案。

非肝细胞293T-NE-3NRS细胞中乙型肝炎病毒感染的建模

HBV mainly infects human hepatocytes, but it has also been found to infect extrahepatic tissues such as kidney and testis. Nonetheless, cell-based HBV ...

肝外HBV病毒复制在肝外综合征的发病机制中起着重要的作用。目前，开始肝病毒感染的细胞培养模型是有限的。我们提出了一个体外非肝感染模型，以帮助确定影响HBV复制的新宿主因素，并研究HBV相关的肾脏疾病。与传统的乙肝病毒感染模式相比，我们采用并设计了293T细胞系、293T-NE-3NR，并与HpG2.2.15共同培养。HBV 感染应在生物安全二级或生物安全三级实验室进行。应遵循实验室安全做法，以确保实验室人员的安全，所有研究人员应在进行HBV实验前接种疫苗并检测HBS抗体阳性。首先培养 HepG2.2.15 细胞，请记住，与 HepG2.2.15 接触的所有小贴士、烧瓶、板和管应在处置前一夜之间浸泡在 2%的维苏化中。从液氮中去除含有 HepG2.2.15 细胞的小瓶，在 37 摄氏度的水浴中轻轻旋转解冻。将细胞转移到25厘米方形组织培养瓶中，并加入四毫升完整的培养基。在37摄氏度和5%的二氧化碳下在加湿的培养箱中培养 HepG2.2.15 细胞。每三天更换一次介质。准备就绪后，将细胞上一提液收集在50毫升离心管中。牢固地合上盖子，用石蜡薄膜包裹。要去除细胞碎片，请将 HepG2.2.15 上清液与 0.45 微米膜过滤到新的 50 毫升离心管中。然后将14毫升过滤的上清液加入病毒集中器柱并合上盖子。在水平旋转离心机中以 3，200 次 g 离心，将柱离，35 分钟，然后将 HepG2.2.15 上流液浓缩物收集到 1.5 毫升管中。运行实时 PCR 以确保 HepG2.2.15 中HBV DNA的浓度在标准曲线范围内。在1.5毫升微离心管中，向190微升DMEM中加入10微升，使浓缩物稀释20倍。与上一液一起，准备负控制、正控和四稀释定量参考。在每个样品中加入450微升HBVDNA提取缓冲液，并在室温下以12，000倍g离心，5分钟。将 PCR 主混合物的 27 微升和放在冰上的 PCR 管中每个样品中的 3 微升 Taq 聚合酶组合在一起。然后在每个管中加入20微升离心样品。根据手稿方向执行实时 PCR，并导出 CT 值以获取标准曲线。将 HepG2 . 2 . 15 上大分成等分，将其储存在零下 80 摄氏度，直到可以使用。根据手稿指示准备感染介质。然后在两口井中播种 HepG2-NE，在两口井中播种 293T-NE-3NR 细胞，在一口井中播种 293T-NE。在37摄氏度和5%的二氧化碳下在加湿的培养箱中孵育细胞24小时。孵育后，观察细胞，如果细胞健康，则继续感染。在每个井中加入500微升的感染复合物，再孵育24小时。用500微升PBS清洗细胞两次。然后向每井添加一毫升的介质。每两天轻轻更换一次介质。第11天，用500微升PBS轻轻清洗细胞，用冰冰甲醇固定细胞进行免疫荧光。将 HepG-NE 每井的 10 万个细胞种子分成两口井，293T-NE-3NRs 分成两口井，将 293T-NE 放入一个孔中。种子10万细胞每井的 HepG2.2.15 到五个膜插入在一个单独的六孔板。孵育细胞24小时。孵育后，确保细胞全部粘附，状态良好。丢弃六孔板中的介质和细胞膜插入物。然后将带 HepG2.2.15 的膜插入物放入六孔板中，用 HepG-NE、293T-NE-3NRs 和 293T-NE 播种。在37摄氏度和5%的二氧化碳下在加湿培养箱中孵育细胞，每三到四天更换一次培养基。10天后，取出膜插入物，用PBS轻轻清洗细胞两次，用冰冰甲醇固定细胞进行免疫荧光。与HBcAg原抗体和DAPI的孵育，在荧光倒置显微镜上以10倍的靶点观察到时，产生了明显的染色。用DAPI染色证实了核定位，NTCP-EGFP表达与绿色荧光确认。HBcAg 的表达站点位于红色荧光。当DAPI、NTCP和HBcAg在同一细胞中时，该细胞已成功感染HBV。Cyclosporin A 组是负对对的，因为它通过阻断 NTCP 阻止 HBV 进入细胞。在293T-NE-3NR中检测到HBcAg，但在293T-NE细胞中未检测到，表明NTCP并不是293T中HBV感染的唯一重要因素。良好的细胞状态和高效的操作是获得成功感染结果的关键。感染后温和清洗和更换介质也很重要。作为替代方法，基于肝瘤的HBV感染方法与这种方法具有更高的感染效率，适用于抗HBV药物筛查。在293T-NE-3NR中对HBV感染进行建模，由于这些细胞的非肝背景，对传统细胞模型是一种有用的补充。该方法将有助于研究非肝细胞的HBV感染以及HBV肝脏所需的宿主因子。

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

RNAi Screening for Host Factors Involved in Vaccinia Virus Infection using Drosophila Cells

RNAi Screening for Host Factors Involved in Vaccinia Virus Infection using Drosophila Cells

RNAi筛选参与宿主因素牛痘病毒感染使用果蝇细胞

Viral pathogens represent a significant public health threat; not only can viruses cause natural epidemics of human disease, but their potential use in ...

科研

免疫与感染

Recombinant Retroviral Production and Infection of B Cells

重组逆转录病毒的生产和B细胞的感染

The transgenic expression of genes in eukaryotic cells is a powerful reverse genetic approach in which a gene of interest is expressed under the control ...

Visualizing Dengue Virus through Alexa Fluor Labeling

可视登革病毒通过的Alexa Fluor标签

The early events in the interaction between virus and cell can have profound influence on the outcome of infection. Determining the factors 
that ...

Following Cell-fate in E. coli After Infection by Phage Lambda

Following Cell-fate in E. coli After Infection by Phage Lambda

在细胞命运<em&gt; E.大肠杆菌</em感染后的噬菌体λ

The system comprising bacteriophage (phage) lambda and the bacterium E. coli has long served as a paradigm for cell-fate determination1,2. Following the ...

A Protocol for Analyzing Hepatitis C Virus Replication

一个协议，用于分析丙型肝炎病毒复制

Hepatitis C Virus (HCV) affects 3% of the world&#8217;s population and causes serious liver ailments including&#160;chronic hepatitis, cirrhosis, and ...

Modeling The Lifecycle Of Ebola Virus Under Biosafety Level 2 Conditions With Virus-like Particles Containing Tetracistronic Minigenomes

造型埃博拉病毒的生命周期在生物安全二级条件下的病毒样颗粒包含Tetracistronic小基因组

Ebola viruses cause severe hemorrhagic fevers in humans and non-human primates, with case fatality rates as high as 90%. There are no approved vaccines or ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

中性粒细胞分离和分析，以确定他们的淋巴瘤细胞的敏感性对治疗药物的作用

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

乙型肝炎病毒记者系统的开发监控复制周期的早期阶段

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Detection of Low Copy Number Integrated Viral DNA Formed by In Vitro Hepatitis B Infection

Detection of Low Copy Number Integrated Viral DNA Formed by In Vitro Hepatitis B Infection

乙型肝炎体外感染形成的低拷贝数综合病毒 dna 的检测

Hepatitis B Virus (HBV) is a common blood-borne pathogen causing liver cancer and liver cirrhosis resulting from chronic infection. The virus generally ...

"Liver-on-a-Chip" Cultures of Primary Hepatocytes and Kupffer Cells for Hepatitis B Virus Infection

乙型肝炎病毒感染原代肝细胞和库珀细胞的 "肝片上" 培养

Despite the exceptional infectivity of the hepatitis B virus (HBV) in vivo, where only three viral genomes can result in a chronicity of experimentally ...