Name: leveraging turbidity and thromboelastography for complementary clot characterization
Uploaded: 2020-06-04T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Leveraging Turbidity and Thromboelastography for Complementary Clot Characterization at JoVE.com

1. Bereiding van fosfaatbuffer zoutoplossing (PBS)
OPMERKING: PBS werd gebruikt tijdens deze studie als de beschreven tests niet vereist de toevoeging van calcium. Het is belangrijk op te merken dat bij het toevoegen van calcium, vaak gebruikt om citrated bloedproducten opnieuw te verkalken, PBS moet worden vermeden als calcium is bekend dat neerslaan in fosfaatbuffers.
<ol><li>Maak een 0,01 M, pH 7.4 PBS buffer door het mengen van 137 mM natriumchloride, 1,8 mM kalium fosfaat monobasic, 10 ...

<ol>
	<li>Beckman, M. G., Hooper, W. C., Critchley, S. E., Ortel, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Venous+Thromboembolism.+A+Public+Health+Concern.">Venous Thromboembolism. A Public Health Concern.</a> American Journal of Preventive Medicine. 38, 495-501 (2010).</li><li>Goldhaber, S. Z., Bounameaux, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+embolism+and+deep+vein+thrombosis.">Pulmonary embolism and deep vein thrombosis.</a> The Lancet. 379 (9828), 1835-1846 (2012).</li><li>Weisel, J. W., Litvinov, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+fibrin+polymerization+and+clinical+implications.">Mechanisms of fibrin polymerization and clinical implications.</a> Blood. 121 (10), 1712-1719 (2013).</li><li>Weisel, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+assembly.+Lateral+aggregation+and+the+role+of+the+two+pairs+of+fibrinopeptides.">Fibrin assembly. Lateral aggregation and the role of the two pairs of fibrinopeptides.</a> Biophysical Journal. 50 (6), 1079-1093 (1986).</li><li>Tripathi, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+whole+blood+prothrombin+time+(PT)+and+international+normalized+ratio+(INR)+using+a+Laser+Speckle+Rheology+sensor.">Clinical evaluation of whole blood prothrombin time (PT) and international normalized ratio (INR) using a Laser Speckle Rheology sensor.</a> Scientific Reports. 7 (1), 1-8 (2017).</li><li>Ryan, E. A., Mockros, L. F., Weisel, J. W., Lorand, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+origins+of+fibrin+clot+rheology.">Structural origins of fibrin clot rheology.</a> Biophysical Journal. 77 (5), 2813-2826 (1999).</li><li>Carr, M. E., Hermans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Size+and+Density+of+Fibrin+Fibers+from+Turbidity.">Size and Density of Fibrin Fibers from Turbidity.</a> Macromolecules. 11 (1), 46-50 (1978).</li><li>Carr, M. E., Shen, L. L., Hermans, J. A. N., Chapel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mass-Length Ratio of Fibrin Fibers from Gel Permeation and Light Scattering. 16, 1-15 (1977).</li><li>Gabriel, D. A., Muga, K., Boothroyd, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Effect of Fibrin Structure on Fibrinolysis. , 24259-24263 (1992).</li><li>Wolberg, A. S., Gabriel, D. A., Hoffman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+fibrin+clot+structure+using+a+microplate+reader.">Analyzing fibrin clot structure using a microplate reader.</a> Blood Coagulation and Fibrinolysis. 13 (6), 533-539 (2002).</li><li>da Luz, L. T., Nascimento, B., Rizoli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombelastography+(TEG):+practical+considerations+on+its+clinical+use+in+trauma+resuscitation.">Thrombelastography (TEG): practical considerations on its clinical use in trauma resuscitation.</a> Scandinavian Journal of Trauma, Resuscitation and Emergency Medicine. 21 (1), 29 (2013).</li><li>Whitten, C. W., Greilich, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thromboelastography:+past,+present,+and+future+.">Thromboelastography: past, present, and future .</a> Anesthesiology: The Journal of the American Society of Anesthesiologists. 92 (5), 1223-1225 (2000).</li><li>Ranucci, M., Laddomada, T., Ranucci, M., Baryshnikova, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+viscosity+during+coagulation+at+different+shear+rates.">Blood viscosity during coagulation at different shear rates.</a> Physiological Reports. 2 (7), 1-7 (2014).</li><li>Zeng, Z., Fagnon, M., Nallan Chakravarthula, T., Alves, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+clot+formation+under+diverse+clotting+conditions:+Comparing+turbidimetry+and+thromboelastography.">Fibrin clot formation under diverse clotting conditions: Comparing turbidimetry and thromboelastography.</a> Thrombosis Research. 187, 48-55 (2020).</li></ol>

Dit protocol toont het gebruik van twee verschillende stolsel karakterisering tools testen van een vereenvoudigde fibrinogen / trombin stolsel model met behulp van commercieel beschikbare componenten. Zowel TEG- als troebelheidstesten zijn eenvoudig uit te voeren. Ze bieden niet alleen eindpunt stolsel onderzoeken zoals max stolsel vorming (TurbMax en TEGMax) en stolsel vorming tijden (TurbTime en TEGTime),maar ook beoordelen de dynamische stolsel vorming proces. Dit maakt TEG ...

Trombose is de pathologische vorming van een bloedstolsel in het lichaam dat de bloedcirculatie blokkeert, wat wereldwijd leidt tot hoge morbiditeit en mortaliteit. Er zijn 1 tot 2 gevallen van veneuze trombo-embolie en 2 tot 3 gevallen van trombose-geïnduceerde vasculaire ziekten per 1000 mensen per jaar1,2. Hier gepresenteerd is een methode gebruik te maken van trombo-lastografie (TEG) en troebelheid om stolselvorming te controleren onder verschillende stollingsomstandigheden. Fibrin(ogen) is het primaire eiwit dat verantwoordelijk is voor stolselvorming in het lichaam. In de laatste stappen van de stollingscasclaat worden fibrinopeptiden uit fibrinogen gespleten door trombine die de polymerisatie van onoplosbare fibrinemonmeren initieert terwijl het stolselzich ontwikkelt 3,4. Om stolselvorming in pathologische trombose te begrijpen, is het noodzakelijk om fibrinevorming te karakteriseren onder diverse stollingsomstandigheden. Meerdere stolsel monitoring testen zijn gebruikt om fibrin stolsel vorming in vitro studie. Prothrombin tijd (PT / INR) en geactiveerde gedeeltelijke tromboplastine tijd (aPTT) zijn twee veel voorkomende klinische tests die de integriteit van een specifieke stollingsroute te meten. Ze gebruiken echter tijd als de enige variabele die geen indicatie geeft van fysieke stolseleigenschappen5. Elektronenmicroscopie maakt visualisatie van de microstructuur van een volledig gevormd fibrinstolsel mogelijk, maar geeft geen informatie over het stolselvormingsproces zelf6. Onder alle testen, troebelheid testen en TEG bieden de mogelijkheid om stolsel kenmerken dynamisch te volgen in de tijd. Deze technieken maken het mogelijk om uitgebreide stollingsprofielen te meten en bieden daarom enig voordeel ten opzichte van andere fibrine stolselkarakteriseringstools.
Specifiek, troebelheid testen (of stolsel troebeleimetrie) wordt op grote schaal gebruikt voor onderzoek en klinische toepassingen als gevolg van de simplistische implementatie en de brede toegankelijkheid van spectrometers in onderzoekslaboratoria. Deze test maakt een dynamische meting van lichtdoorlatendheid door middel van een vormend stolsel mogelijk door individuele repetitieve metingen te doen op een gedefinieerde golflengte (meestal bij een golflengte in het bereik van 350 – 700 nm)7. Ook de temperatuur in de leeskamer kan worden aangepast. Naarmate fibringel zich vormt, wordt de hoeveelheid licht die door het eiwitnetwerk reist verminderd waardoor de absorptie na verloop van tijd toeneemt. Op dezelfde manier neemt de absorptie af wanneer het stolselnetwerk degradeert. Troebelheidstesten kunnen gemakkelijk worden gevoefd met behulp van een multi-well plaatformaat om een hoge doorvoermonsterscreening in zowel 96- als 384-putplaten mogelijk te maken. Verschillende stolsel kenmerken kunnen worden afgeleid van een troebelheid tracing curve (absorptie na tijd meting) die omvatten: maximale troebelheid, tijd tot maximale troebelheid, tijd om te stollen begin, en stolsel vorming tarief (Vmax). Een fibrin vezel massa / lengte verhouding kan ook worden afgeleid van ruwe troebelheid gegevens te schatten fibrin vezel dikte8,9,10.
TEG wordt voornamelijk gebruikt in de klinische setting om de hemostase en stolsellyse van patiënten te beoordelen. Het wordt ook vaak gebruikt in chirurgische toepassingen om te bepalen wanneer anti-fibrinolytische geneesmiddelen of hemostatische bloedproducten moeten worden toegediend11,12. Stolselvorming vindt plaats in een TEG-beker waarbij alle stollingscomponenten aan de beker worden toegevoegd voordat de test wordt ingeleid. De beker, met evoluerende stolsel, draait fysiek tegen een pin die in het midden wordt ingebracht en een elektromechanische torsiesensor meet de toenemende visco-elastische sterkte van het stolsel. Deze test wordt meestal uitgevoerd bij de fysiologische temperatuur van 37 °C; de temperatuur kan echter handmatig op het instrument worden aangepast. Maximale amplitude (MA), reactiesnelheid (R), kinetiektijd (K), α-hoek (Hoek) en time-to-maximum amplitude (TMA) worden door de TEG-software uit de dynamische TEG-tracering gehaald. Deze waarden worden meestal vergeleken met klinische normale bereiken om de stolling van een patiënt te beoordelen. Hoewel TEG niet precies een viscometer is, omdat het de stollingssterkte meet in millimetereenheden, biedt het wel belangrijke visco-elastische stolselgegevens en functioneert het als een waardevol klinisch beslissingsinstrument voor artsen om te beslissen om specifieke bloedproducten toe te dienen en therapeutische dosering aan te passen13. Wanneer zowel TEG- als troebelheidstesten samen worden gebruikt, bieden ze aanvullende informatie over de karakterisering van het stolsel, omdat stolselsterkte en kinetiek gemakkelijk kunnen worden geëxtraheerd uit TEG en fibrinvezeldikte toegankelijk is via optische troebelheidsmetingen.
Omdat fibrin een essentieel onderdeel is van een bloedstolsel, kan fibrinstololkkarakterisering onder diverse stolselvormingsomstandigheden waardevol inzicht geven in hoe een specifieke variabele bijdraagt aan het stolselvormingsproces en de uiteindelijke stolseleigenschappen. Inzicht in dit kan begeleiding bieden voor trombose diagnose en de ontwikkeling van therapieën. Om een representatievere fibrin stollende karakterisering te verkrijgen, kan plasma worden vervangen om de stolselvorming te controleren omdat het lijkt op in vivo stollingsomstandigheden dichter dan een vereenvoudigd fibrinogen/trombin modelsysteem. Echter, als gevolg van de ingewikkelde aard van de stolling cascade, stolsel vorming met behulp van plasma draagt bij aan de complexiteit, waardoor het moeilijker is om de impact van individuele factoren te isoleren. Het gebruik van een vereenvoudigd fibrinogen/trombin model voorkomt dat de hele stollingscascade moet worden gestart, waardoor de uiteindelijke fibrinevormingsstap kan worden geïsoleerd. Door het opnemen van twee grote fibrinevormende componenten (fibrinogen en trorombine), creëert deze setup een zeer gecontroleerde stolselvormingsconditie. Het is ook belangrijk op te merken dat, terwijl de vereenvoudigde stolsel model hier wordt gebruikt, dit protocol kan ook worden gebruikt om meer complexe stolsels te karakteriseren door het opnemen van extra stollingsfactoren. In deze studie worden fibrinstolololtaktisatie met troebelheid en TEG uitgevoerd door verschillende fibrinogen- en trombineconcentraties, ionische sterkte, pH en totale eiwitconcentratie in de stollingsoplossing om verschillende in vivo stollingsomstandigheden na te bootsen14. Details met betrekking tot deze wijzigingen in het protocol zijn opgenomen in sectie 5.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>96-Well Clear Flat Bottom UV-Transparent Microplate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3635</td>
			<td>Non-treated acrylic copolymer, non-sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Albumin from human serum</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A1653</td>
			<td>&#8805;96%, lyophilized powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arium Mini Plus Ultrapure Water System</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>NA</td>
			<td>DI water source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A2153</td>
			<td>&#8805;96%, lyophilized powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Cups and Pins for TEG 5000 (Clear)</td>
			<td>Haemonetics</td>
			<td>REF 6211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen, Bovine Plasma</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>341573</td>
			<td>contains more than 95% clottable protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen, Plasmingogen-Depleted, Human Plasma</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>341578</td>
			<td>Contains &#8805; 95% clottable proteins.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P3813</td>
			<td>Powder, pH 7.4, for preparing 1 L solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>60130</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P9791</td>
			<td>&#8805;98% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SevenEasy pH Meter</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>S20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>71378</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>71636</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SpectraMax M5 multi-detection microplate reader system</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>M5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TEG 5000 Thrombelastograph Hemostasis analyzer system</td>
			<td>Haemonetics</td>
			<td>07-022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin, Bovine</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>605157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin, Human Plasma, High Activity</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>605195</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

leveraging turbidity and thromboelastography for complementary clot characterization

Trombose is wereldwijd een belangrijke doodsoorzaak. Fibrin(ogen) is het eiwit dat primair verantwoordelijk is voor stolselvorming of trombose. Daarom is het karakteriseren van fibrinestolselvorming gunstig voor de studie van trombose. Troebelheid en trombo-lastografie (TEG) worden beide op grote schaal gebruikt in vitro tests voor het monitoren van stolselvorming. Troebelheid meet dynamisch de lichtdoorlatendheid via een fibrinstolselstructuur via een spectrometer en wordt vaak gebruikt in onderzoekslaboratoria. TEG is een gespecialiseerde visco-elastische techniek die direct de sterkte van de bloedstolsel meet en voornamelijk wordt gebruikt in klinische omgevingen om de hemostase van patiënten te beoordelen. Met behulp van deze twee instrumenten beschrijft deze studie een methode voor het karakteriseren van een in vitro fibrin stolsel met behulp van een vereenvoudigd fibrinogen/trombinstoletmodel. Gegevenstrends in beide technieken werden onder verschillende stollingsomstandigheden vergeleken. Menselijke en runderfibrinstols werden in deze studie naast elkaar gevormd, omdat boviene stollingsfactoren vaak worden gebruikt als vervanging van menselijke stollingsfactoren in klinische en onderzoeksomgevingen. De resultaten tonen aan dat TEG en troebelheid stolselvorming volgen via twee verschillende methoden en wanneer ze samen worden gebruikt complementaire stollingssterkte en vezel structurele informatie bieden over diverse stollingsomstandigheden.

De in figuur 1 getoonde experimenten zijn representatieve troebelheidstraceringskrommen van menselijke en runderfibrinstols op verschillende fibrinogenniveaus. Representatieve TEG-traceringscurven voor fibrinstolselvorming op verschillende fibrinogenniveaus worden weergegeven in figuur 2. Beide traceringscurven tonen aan dat na een vertragingsperiode na het initiëren van stolsel, stolsel troebelheid of stolselamplitude in de loop van de tijd toeneemt en niveaus...

Watch this Scientific Journal Video about Leveraging Turbidity and Thromboelastography for Complementary Clot Characterization at JoVE.com

Leveraging Turbidity and Thromboelastography for Complementary Clot Characterization

Fibrin is verantwoordelijk voor stolselvorming tijdens hemostase en trombose. Troebelheidstesten en tromboelastograhy (TEG) kunnen worden gebruikt als synergetische instrumenten die complementaire beoordeling van een stolsel bieden. Deze twee technieken samen kunnen meer inzicht geven in hoe stollingscondities de vorming van fibrinstolsel beïnvloeden.

Gebruikmaken van troebelheid en trombo-lastografie voor complementaire clot karakterisering

Thrombosis is a leading cause of death worldwide. Fibrin(ogen) is the protein primarily responsible for clot formation or&#160;thrombosis. Therefore, ...

Trombo-lastografie en troebelheidstesten zijn twee eenvoudige en onderscheidende methoden voor stolselkarakterisering. Deze technieken bieden samen een uitgebreider inzicht in hoe stollingsvariabelen van invloed zijn op stolselkenmerken. Beide testen, bieden niet alleen endpoint clot analyse, maar ook het aantrekken van fibrin stolsel vorming na verloop van tijd, in tegenstelling tot veel andere stolsel karakterisering tools Deze technieken kunnen helpen bij de ontwikkeling van een fysiologisch relevante synthetische stolsel platform dat betrouwbare diagnose van de fibrinolytische toestand van trombose patiënten kan bieden Om stolsel troebelheid te controleren na verloop van tijd, gebruik maken van een commercieel beschikbare spectrometer die een absorptiebereik van 350 tot 700 nanometer heeft.Schakel de spectrometer in en open de bijbehorende analysesoftware. Selecteer vervolgens plaat één en open het tabblad plaatinstellingen. Klik op ABS en kinetisch om een dynamische absorptie na verloop van tijd te controleren.Selecteer 550 nanometer in het tabblad golflengte, schakel vervolgens over naar het tabblad timing en pas de totale runtime aan tot 60 minuten met een interval van 30 seconden, selecteer de putten van belang door ze te markeren. Pipette 140 microliter PBS in een put van een UV transparante 96 putplaat. Voeg vervolgens 10 microliters trombine toe en meng, start onmiddellijk stolling door 50 microliters fibrinogen toe te voegen aan de put en pipet op en neer vijf keer met behulp van alleen de eerste stop van de pipet die ervoor zorgt dat er geen bellen ontstaan.Plaats de plaat in de plaathouder en klik op lezen in de software om de troebelheid te starten. Wanneer de read klaar is ophalen van de troebelheid gegevens en het verkrijgen van een troebelheid tracing curve door het plotten van de absorbenten veranderen in de tijd, ontlenen maximale troebeliteit door het nemen van de maximale absorptiewaarde van de curve in de tijd, bereken dan 90% maximale troebeliteit door het vermenigvuldigen van maximale troebeliteit met 0,9. Ontlenen de tijd tot maximale troebelheid door het berekenen van de tijd van stolsel initiatie tot 90% maximale troebelheid.Schakel de trombo-lastografie of TEG-analysemachine in en wacht tot de temperatuur is gestabiliseerd bij 37 graden Celsius, open vervolgens de TEG-software en maak een experimentnaam onder de sectie ID. Klik op het tabblad TEG en volg de aanwijzingen op het scherm om een eTest-test voor alle kanalen uit te voeren. Plaats de hendel vervolgens terug naar de laadpositie zodra alle controles zijn voltooid.Klik op gereed op de informatiepagina en voer voorbeeldinformatie in voor kanalen die worden gebruikt. Plaats een duidelijke ongecoate TEG-beker in het bijbehorende kanaal. Schuif de drager naar boven en druk de kopje onder vijf keer op een fix de pin aan de torsiestang dan lager de drager en druk de beker naar beneden in de basis totdat het klikt.Pipette 20 microliters van trombineoplossing in de TEG-beker en start vervolgens stolling door 340 microliters fibrinogen in de beker toe te voegen om een 360 microliter stollingsoplossing te verkrijgen. Meng de inhoud van de beker door het op en neer buigen vijf keer. Schuif de cup geladen drager omhoog zet de hendel naar de leespositie en klik op start in de software om de TEG-lezing te starten.Zodra de meting is voltooid, u de parameters ophalen en een TEG-traceringscurve verkrijgen door amplitude in de loop van de tijd uit te plotten. Kies MA als maximale amplitude, wat wijst op stolselstam en TMA als tijd tot maximale amplitude van de software. Representatieve troebelheid en een TEG tracing curves van menselijke en runder fibrine stolsels op verschillende fibrinogen niveaus worden hier getoond.De traceringscurven tonen aan dat na een vertragingsperiode na het initiëren van stolsel, stolsel troebelheid of stolselamplitude in de loop van de tijd toeneemt en niveaus af nemen aan het einde van de stolselvorming. Maximale troebelheid en tijd tot maximale troebelheid zijn de twee parameters afgeleid van troebelheid, terwijl maximale amplitude en tijd tot maximale amplitude zijn afgeleid van TEG. Op een hoger niveau van fibrinogen in de stollingsoplossing nemen alle vier de waarden toe.Maximale troebelheid is een optische maat voor de stolselstructuur, die indicatief is voor fibrin vezeldikte en fibrin netwerkdichtheid. Terwijl maximale amplitude is een mechanische maatregel die absolute stolsel stam weerspiegelt, samen genomen de twee waarden bieden gratis inzicht over de stolsel micro structuren. Deze procedure toont een vereenvoudigd stollingsmodel aan om variabelen te onderzoeken die voornamelijk fibrinpolymerisatie beïnvloeden.Dit model kan worden aangepast door toevoeging van extra stollingsfactoren om andere parameters te bestuderen. Het stollingsmodel kan eenvoudig worden gewijzigd met behulp van klinische plasmamonsters om stolselvorming en desillusie in aanwezigheid van antitrombotische geneesmiddelen te controleren. De resultaten kunnen leiden tot therapeutisch beheer bij patiënten.

Research

JoVE Journal

Medicine

Characterization of Molecular Mechanisms of In vivo UVR Induced Cataract

Characterization of Molecular Mechanisms of In vivo UVR Induced Cataract

Karakterisering van moleculaire mechanismen van<em&gt; In vivo</em&gt; UVR Induced Cataract

Cataract is the leading cause of blindness in the world 1. The World Health Organization defines cataract as a clouding of the lens of the eye which ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolatie, karakterisering en vergelijkende differentiatie van humane Dental Pulp stamcellen uit permanente tanden met behulp van twee verschillende methoden

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Experimental and Imaging Techniques for Examining Fibrin Clot Structures in Normal and Diseased States

Experimentele en Imaging technieken voor de behandeling fibrinestolsel Structuren in normale en zieke Staten

Fibrin is an extracellular matrix protein that is responsible for maintaining the structural integrity of blood clots. Much research has been done on ...

High Throughput Characterization of Adult Stem Cells Engineered for Delivery of Therapeutic Factors for Neuroprotective Strategies

Hoge doorvoer analyse van volwassen stamcellen ontwikkeld voor toediening van therapeutische factoren voor Neuroprotective Strategies

Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow are a powerful cellular resource and have been used in numerous studies as potential candidates to ...

In vitro Functional Characterization of Mouse Colorectal Afferent Endings

In vitro Functional Characterization of Mouse Colorectal Afferent Endings

In vitro functionele karakterisering van de Muis Colorectale Afferent Endings

This video demonstrates in detail an in vitro single-fiber electrophysiological recording protocol using a mouse colorectum-nerve preparation. The ...

Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model

Oprichting en karakterisering van UTI en Cauti in een muismodel

Urinary tract infections (UTI) are highly prevalent, a significant cause of morbidity and are increasingly resistant to treatment with antibiotics. ...

Tissue Characterization after a New Disaggregation Method for Skin Micro-Grafts Generation

Weefsel karakterisering na een New Uitsplitsing Methode voor de huid Micro-Enten Generation

Several new methods have been developed in the field of biotechnology to obtain autologous cellular suspensions during surgery, in order to provide one ...

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

Echocardiografische benaderingen en protocollen voor Comprehensive Fenotypische karakterisering van Valvular hart-en vaatziekten in Muizen

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

voorbereiding en<em&gt; In Vitro</em&gt; Karakterisering van Magnetische miR-gemodificeerde endotheelcellen

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

Development and Functional Characterization of Murine Tolerogenic Dendritic Cells

Ontwikkeling en functionele karakterisering van lymfkliertest Tolerogenic dendritische cellen

The immune system operates by maintaining a tight balance between coordinating responses against foreign antigens and maintaining an unresponsive state ...