Name: leveraging turbidity and thromboelastography for complementary clot characterization
Uploaded: 2020-06-04T15:00:00
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1. Préparation de la solution saline tampon de phosphate (PBS)
REMARQUE : Le PBS a été utilisé tout au long de cette étude car les essais décrits n’ont pas exigé l’ajout de calcium. Il est important de noter que lors de l’ajout de calcium, souvent utilisé pour recalcifier les produits sanguins citrated, PBS doit être évitée que le calcium est connu pour précipiter dans les tampons de phosphate.
<ol><li>Faire un tampon de 0,01 M, pH 7.4 PBS en mélangeant 137 mM de chlorure ...

<ol>
	<li>Beckman, M. G., Hooper, W. C., Critchley, S. E., Ortel, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Venous+Thromboembolism.+A+Public+Health+Concern.">Venous Thromboembolism. A Public Health Concern.</a> American Journal of Preventive Medicine. 38, 495-501 (2010).</li><li>Goldhaber, S. Z., Bounameaux, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+embolism+and+deep+vein+thrombosis.">Pulmonary embolism and deep vein thrombosis.</a> The Lancet. 379 (9828), 1835-1846 (2012).</li><li>Weisel, J. W., Litvinov, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+fibrin+polymerization+and+clinical+implications.">Mechanisms of fibrin polymerization and clinical implications.</a> Blood. 121 (10), 1712-1719 (2013).</li><li>Weisel, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+assembly.+Lateral+aggregation+and+the+role+of+the+two+pairs+of+fibrinopeptides.">Fibrin assembly. Lateral aggregation and the role of the two pairs of fibrinopeptides.</a> Biophysical Journal. 50 (6), 1079-1093 (1986).</li><li>Tripathi, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+whole+blood+prothrombin+time+(PT)+and+international+normalized+ratio+(INR)+using+a+Laser+Speckle+Rheology+sensor.">Clinical evaluation of whole blood prothrombin time (PT) and international normalized ratio (INR) using a Laser Speckle Rheology sensor.</a> Scientific Reports. 7 (1), 1-8 (2017).</li><li>Ryan, E. A., Mockros, L. F., Weisel, J. W., Lorand, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+origins+of+fibrin+clot+rheology.">Structural origins of fibrin clot rheology.</a> Biophysical Journal. 77 (5), 2813-2826 (1999).</li><li>Carr, M. E., Hermans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Size+and+Density+of+Fibrin+Fibers+from+Turbidity.">Size and Density of Fibrin Fibers from Turbidity.</a> Macromolecules. 11 (1), 46-50 (1978).</li><li>Carr, M. E., Shen, L. L., Hermans, J. A. N., Chapel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mass-Length Ratio of Fibrin Fibers from Gel Permeation and Light Scattering. 16, 1-15 (1977).</li><li>Gabriel, D. A., Muga, K., Boothroyd, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Effect of Fibrin Structure on Fibrinolysis. , 24259-24263 (1992).</li><li>Wolberg, A. S., Gabriel, D. A., Hoffman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+fibrin+clot+structure+using+a+microplate+reader.">Analyzing fibrin clot structure using a microplate reader.</a> Blood Coagulation and Fibrinolysis. 13 (6), 533-539 (2002).</li><li>da Luz, L. T., Nascimento, B., Rizoli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombelastography+(TEG):+practical+considerations+on+its+clinical+use+in+trauma+resuscitation.">Thrombelastography (TEG): practical considerations on its clinical use in trauma resuscitation.</a> Scandinavian Journal of Trauma, Resuscitation and Emergency Medicine. 21 (1), 29 (2013).</li><li>Whitten, C. W., Greilich, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thromboelastography:+past,+present,+and+future+.">Thromboelastography: past, present, and future .</a> Anesthesiology: The Journal of the American Society of Anesthesiologists. 92 (5), 1223-1225 (2000).</li><li>Ranucci, M., Laddomada, T., Ranucci, M., Baryshnikova, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+viscosity+during+coagulation+at+different+shear+rates.">Blood viscosity during coagulation at different shear rates.</a> Physiological Reports. 2 (7), 1-7 (2014).</li><li>Zeng, Z., Fagnon, M., Nallan Chakravarthula, T., Alves, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+clot+formation+under+diverse+clotting+conditions:+Comparing+turbidimetry+and+thromboelastography.">Fibrin clot formation under diverse clotting conditions: Comparing turbidimetry and thromboelastography.</a> Thrombosis Research. 187, 48-55 (2020).</li></ol>

Ce protocole démontre l’utilisation de deux outils distincts de caractérisation des caillots qui testent un modèle simplifié de caillots de fibrinogène/thrombine à l’aide de composants disponibles dans le commerce. Les tests de TEG et de turbidité sont faciles à réaliser. Ils fournissent non seulement des examens de caillot de point final tels que la formation maximale de caillot (TurbMax et TEGMax)et les temps de formation de caillots (TurbTime et TEGTime)mais év...

La thrombose est la formation pathologique d’un caillot sanguin dans le corps qui bloque la circulation sanguine conduisant à une morbidité et une mortalité élevées dans le monde entier. Il y a 1 à 2 cas de thromboembolie veineuse et 2 à 3 cas de maladies vasculaires induites par la thrombose pour 1000 personnes par an1,2. Présenté ici est une méthode de mise à profit de la thromboélastographie (TEG) et la turbidité pour surveiller la formation de caillots dans diverses conditions de coagulation. Fibrin(ogen) est la protéine primaire qui est responsable de la formation de caillots dans le corps. Dans les dernières étapes de la cascade de coagulation, les fibrinopeptides sont fendus du fibrinogène par la thrombine initiant la polymérisation des monomères de fibrine insolubles que le caillot se développe3,4. Pour comprendre la formation de caillot dans la thrombose pathologique, il est nécessaire de caractériser la formation de fibrine dans diverses circonstances de coagulation. Des tests multiples de surveillance des caillots ont été utilisés pour étudier la formation de caillots de fibrine in vitro. Le temps de prothrombine (PT/INR) et le temps partiel activé de thromboplastine (aPTT) sont deux essais cliniques communs qui mesurent l’intégrité d’une voie spécifique de coagulation. Cependant, ils utilisent le temps comme la seule variable qui ne donne aucune indication des propriétés physiques de caillot5. La microscopie électronique permet la visualisation de la micro-structure d’un caillot de fibrine complètement formé, mais ne fournit aucune information sur le processus de formation du caillot lui-même6. Parmi tous les tests, les tests de turbidité et teg offrent la capacité de suivre dynamiquement les caractéristiques des caillots au fil du temps. Ces techniques permettent la mesure des profils complets de coagulation et, par conséquent, fournissent un certain avantage par rapport à d’autres outils de caractérisation des caillots fibrine.
Plus précisément, les tests de turbidité (ou turbidimétrie de caillot) sont largement utilisés pour la recherche et les applications cliniques en raison de sa mise en œuvre simpliste et de la grande accessibilité des spectromètres dans les laboratoires de recherche. Ce test permet une mesure dynamique de la transmission de la lumière par un caillot formant en prenant des lectures répétitives individuelles à une longueur d’onde définie (le plus souvent à une longueur d’onde dans la gamme de 350 – 700 nm)7. La température dans la chambre de lecture peut également être ajustée. À mesure que le gel fibrine se forme, la quantité de lumière qui circule dans le réseau protéique est réduite, ce qui entraîne une augmentation de l’absorption au fil du temps. De même, l’absorption diminue lorsque le réseau de caillots se dégrade. Les tests de turbidité peuvent facilement être multiplexés à l’aide d’un format de plaque multi-puits pour permettre un dépistage à haut débit dans les plaques de 96 et 384 puits. Plusieurs caractéristiques de caillot peuvent être dérivées d’une courbe de traçage de turbidité (absorption au fil du temps) qui incluent : turbidité maximale, temps à turbidité maximale, temps pour le début de caillot, et taux de formation de caillot (Vmax). Un rapport masse/longueur de fibre de fibrine peut également être dérivé des données brutes de turbidité pour estimer l’épaisseur de fibre de fibrine8,9,10.
Teg est principalement utilisé dans le cadre clinique pour évaluer l’hémostase des patients et la lyse de caillot. Il est également couramment utilisé dans les applications chirurgicales pour déterminer quand les médicaments anti-fibrinolytiques ou les produits sanguins hémostatiques doivent être administrés11,12. La formation de caillots se produit à l’intérieur d’une tasse teg avec tous les composants de coagulation étant ajouté à la tasse avant le début de l’essai. La tasse, avec un caillot en évolution, tourne physiquement contre une goupille qui est insérée dans son centre et un capteur de torsion électromécanique mesure la force viscoélastique croissante du caillot. Ce test est généralement effectué à la température physiologique de 37 °C; toutefois, la température peut être ajustée manuellement sur l’instrument. L’amplitude maximale (MA), la vitesse de réaction (R), le temps cinétique (K), l’angle α (angle) et le temps jusqu’à l’amplitude maximale (TMA) sont extraits par le logiciel TEG du traçage teg dynamique. Ces valeurs sont généralement comparées aux gammes normales cliniques pour évaluer l’état de coagulation d’un patient. Bien que teg n’est pas précisément un viscomètre, car il mesure la force des caillots en unités millimétriques, il fournit des données importantes sur les caillots viscoélastiques et fonctionne comme un outil de prise de décision clinique précieux pour les médecins de décider d’administrer des produits sanguins spécifiques et ajuster le dosage thérapeutique13. Lorsque les essais de TEG et de turbidité sont utilisés ensemble, ils fournissent des informations complémentaires de caractérisation des caillots que la force du caillot et la cinétique sont facilement extraites de l’épaisseur de la fibre de TEG et fibrine peut être consulté par des mesures de turbidité optique.
Comme la fibrine est un composant critique d’un caillot de sang, la caractérisation des caillots fibrine dans diverses conditions de formation de caillots peut fournir un aperçu précieux de la façon dont une variable spécifique contribue au processus de formation des caillots et aux propriétés ultimes du caillot. Comprendre cela peut fournir des conseils pour le diagnostic de thrombose et le développement de la thérapeutique. Pour obtenir une caractérisation plus représentative des caillots de fibrine, le plasma peut être substitué pour surveiller la formation de caillots, car il ressemble plus étroitement aux conditions de coagulation in vivo qu’un système simplifié de modèle fibrinogène/thrombine. Cependant, en raison de la nature complexe de la cascade de coagulation, la formation de caillots à l’aide de plasma ajoute à la complexité, ce qui rend plus difficile d’isoler l’impact des facteurs individuels. L’utilisation d’un modèle simplifié fibrinogène/thrombine empêche la nécessité d’initier toute la cascade de coagulation permettant l’isolement de l’étape finale de formation de fibrine. En incluant deux composants majeurs de formation de fibrine (fibrinogène et thrombine), cette configuration crée une condition de formation de caillot très contrôlée. Il est également important de noter que bien que le modèle simplifié de caillot soit utilisé ici, ce protocole peut également être utilisé pour caractériser des caillots plus complexes en incluant des facteurs de coagulation supplémentaires. Dans cette étude, la caractérisation des caillots fibrines à l’aide de la turbidité et du TEG est effectuée par des concentrations variables de fibrinogène et de thrombine, de la force ionique, du pH et de la concentration totale de protéines dans la solution de coagulation pour imiter différentes circonstances de coagulation in vivo14. Les détails concernant ces variations du protocole ont été inclus à la section 5.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>96-Well Clear Flat Bottom UV-Transparent Microplate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3635</td>
			<td>Non-treated acrylic copolymer, non-sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Albumin from human serum</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A1653</td>
			<td>&#8805;96%, lyophilized powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arium Mini Plus Ultrapure Water System</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>NA</td>
			<td>DI water source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A2153</td>
			<td>&#8805;96%, lyophilized powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Cups and Pins for TEG 5000 (Clear)</td>
			<td>Haemonetics</td>
			<td>REF 6211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen, Bovine Plasma</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>341573</td>
			<td>contains more than 95% clottable protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen, Plasmingogen-Depleted, Human Plasma</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>341578</td>
			<td>Contains &#8805; 95% clottable proteins.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P3813</td>
			<td>Powder, pH 7.4, for preparing 1 L solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>60130</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P9791</td>
			<td>&#8805;98% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SevenEasy pH Meter</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>S20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>71378</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>71636</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SpectraMax M5 multi-detection microplate reader system</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>M5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TEG 5000 Thrombelastograph Hemostasis analyzer system</td>
			<td>Haemonetics</td>
			<td>07-022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin, Bovine</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>605157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin, Human Plasma, High Activity</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>605195</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

leveraging turbidity and thromboelastography for complementary clot characterization

La thrombose est l’une des principales causes de décès dans le monde. La fibrine(ogen) est la protéine principalement responsable de la formation de caillots ou de la thrombose. Par conséquent, caractériser la formation de caillots de fibrine est bénéfique à l’étude de la thrombose. La turbidité et la thromboélastographie (TEG) sont toutes deux largement utilisées dans les tests in vitro pour surveiller la formation de caillots. La turbidité mesure dynamiquement la transmission de la lumière à travers une structure de caillot de fibrine via un spectromètre et est souvent utilisée dans les laboratoires de recherche. Teg est une technique viscoélastique spécialisée qui mesure directement la force des caillots sanguins et est principalement utilisée en milieu clinique pour évaluer l’hémostase des patients. À l’aide de ces deux outils, cette étude décrit une méthode de caractérisation d’un caillot de fibrine in vitro à l’aide d’un modèle simplifié de caillot de fibrinogène/thrombine. Les tendances des données dans les deux techniques ont été comparées dans diverses conditions de coagulation. Des caillots de fibrine humain et bovin ont été formés côte à côte dans cette étude, car les facteurs de coagulation bovine sont souvent utilisés comme substituts aux facteurs de coagulation humaine dans les milieux cliniques et de recherche. Les résultats démontrent que le TEG et la formation de caillots de trajectoire de turbidité par l’intermédiaire de deux méthodes distinctes et lorsqu’ils sont utilisés ensemble fournissent la force complémentaire de caillot et l’information structurelle de fibre dans diverses conditions de coagulation.

Les expériences présentées à la figure 1 sont des courbes représentatives de traçage de la turbidité des caillots de fibrine humain et bovin à différents niveaux de fibrinogène. Les courbes représentatives de traçage teg pour la formation de caillots de fibrine à différents niveaux de fibrinogène sont indiquées à la figure 2. Les deux courbes de traçage démontrent qu’après une période de décalage suivant l’initiation de caillot, la turb...

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Leveraging Turbidity and Thromboelastography for Complementary Clot Characterization

La fibrine est responsable de la formation de caillots pendant l’hémostase et la thrombose. Les tests de turbidité et thromboelastograhy (TEG) peuvent être utilisés comme outils synergiques qui fournissent une évaluation complémentaire d’un caillot. Ces deux techniques ensemble peuvent donner plus de perspicacité dans la façon dont les conditions de coagulation affectent la formation de caillots de fibrine.

Tirer parti de la turbidité et de la thromboélastographie pour la caractérisation complémentaire des caillots

Thrombosis is a leading cause of death worldwide. Fibrin(ogen) is the protein primarily responsible for clot formation or&#160;thrombosis. Therefore, ...

Thromboelastography et analyses de turbidité sont deux méthodes simples et distinctives pour la caractérisation de caillot. Ensemble, ces techniques offrent une compréhension plus complète de l’impact des variables de coagulation sur les caractéristiques des caillots. Ces deux analyses, non seulement offrent l’analyse de caillot de point final mais attirent également la formation fibrine de caillot au fil du temps, contrairement à beaucoup d’autres outils de caractérisation de caillot Ces techniques peuvent aider à développer une plate-forme synthétique physiologiquement pertinente de caillot qui peut fournir le diagnostic fiable de l’état fibrinolytique des patients de thrombose pour surveiller la turbidité de caillot au fil du temps, employer n’importe quel spectromètre commercialement disponible qui a une gamme d’absorption de 350 à 700 nanomètres.Allumez le spectromètre et ouvrez le logiciel d’analyse correspondant. Sélectionnez ensuite la première plaque et ouvrez l’onglet paramètres de la plaque. Cliquez sur ABS et cinétique pour surveiller une absorption dynamique au fil du temps.Sélectionnez 550 nanomètres dans l’onglet longueur d’onde, puis passez à l’onglet timing et ajustez le temps d’exécution total à 60 minutes avec un intervalle de 30 secondes, sélectionnez les puits d’intérêt en les mettant en évidence. Pipette 140 microlitres de PBS dans un puits d’une plaque de puits uv transparente 96. Ajouter ensuite 10 microlitres de thrombine et mélanger, lancer immédiatement la coagulation en ajoutant 50 microlitres de fibrinogène au puits et pipette de haut en bas cinq fois en utilisant seulement le premier arrêt de la pipette en prenant soin d’éviter de créer des bulles.Placez la plaque dans le porte-plaques et cliquez sur lire dans le logiciel pour commencer la lecture de turbidité. Lorsque la lecture a fini de récupérer les données de turbidité et d’obtenir une courbe de traçage de turbidité en traçant le changement absorbants au fil du temps, tirer une turbidité maximale en prenant la valeur d’absorption maximale de la courbe au fil du temps, puis calculer 90% turbidité maximale en multipliant la turbidité maximale par 0,9. Tirez le temps à la turbidité maximale en calculant le temps de l’initiation de caillot à 90% turbidité maximale.Allumez la thromboelastographie ou l’analyseur TEG, et attendez que la température se stabilise à 37 degrés Celsius, puis ouvrez le logiciel TEG et créez un nom d’expérience sous la section ID. Cliquez sur l’onglet TEG et suivez les invites à l’écran pour effectuer un test eTest pour tous les canaux. Ensuite, placez le levier à la position de charge une fois toutes les vérifications terminées.Cliquez sur la page d’information et entrez l’exemple d’information pour les canaux qui seront utilisés. Placez une tasse TEG claire non encolée dans son canal correspondant. Faites glisser le support vers le haut et appuyez cinq fois sur le fond de la tasse pour fixer la goupille à la tige de torsion, puis abaissez le support et appuyez sur la tasse vers le bas dans la base jusqu’à ce qu’elle clique.Pipette 20 microlitres de solution thrombine dans la tasse TEG, puis initier la coagulation en ajoutant 340 microlitres de fibrinogène dans la tasse pour obtenir une solution de coagulation de 360 microlitres. Mélangez le contenu de la tasse en faisant monter et descendre cinq fois. Faites glisser le transporteur chargé de tasse vers le haut déplacez le levier à la position de lecture et cliquez sur démarrer dans le logiciel pour lancer la lecture de TEG.Une fois la lecture terminée, récupérez les paramètres et obtenez une courbe de traçage TEG en traçant l’amplitude au fil du temps. Elect MA comme amplitude maximale, ce qui est indicatif de la tension du caillot et TMA comme temps à l’amplitude maximale du logiciel. Une turbidité représentative et un TEG retraçant les courbes des caillots de fibrine humains et bovins à différents niveaux de fibrinogène sont montrés ici.Les courbes de traçage démontrent qu’après une période de décalage suivant l’initiation du caillot, la turbidité des caillots ou l’amplitude des caillots augmente avec le temps et s’agenouille à la fin de la formation du caillot. La turbidité maximale et le temps à la turbidité maximale sont les deux paramètres dérivés de la turbidité, tandis que l’amplitude maximale et le temps à l’amplitude maximale sont dérivés de TEG. À un niveau plus élevé de fibrinogen dans la solution de coagulation, les quatre valeurs augmentent.La turbidité maximale est une mesure optique de la structure du caillot, qui est indicative de l’épaisseur de la fibre fibrine et de la densité du réseau fibrine. Bien que l’amplitude maximale soit une mesure mécanique qui reflète la tension absolue des caillots, prises ensemble, les deux valeurs fournissent un aperçu complémentaire des micro-structures des caillots. Cette procédure démontre un modèle simplifié de coagulation pour examiner les variables qui affectent principalement la polymérisation fibrine.Ce modèle peut être personnalisé par l’inclusion de facteurs de coagulation supplémentaires pour étudier d’autres paramètres. Le modèle de coagulation peut être facilement modifié à l’aide d’échantillons cliniques de plasma pour surveiller la formation de caillots et la désillusion en présence de médicaments antithrombotiques. Les résultats pourraient guider la gestion thérapeutique chez les patients.

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