Name: leveraging turbidity and thromboelastography for complementary clot characterization
Uploaded: 2020-06-04T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Leveraging Turbidity and Thromboelastography for Complementary Clot Characterization at JoVE.com

1. Fremstilling av fosfatbuffer saltvann (PBS)
MERK: PBS ble brukt gjennom hele denne studien, da de beskrevne analysene ikke krevde tilsetning av kalsium. Det er viktig å merke seg at når du legger til kalsium, ofte brukt til å forkalke citrated blodprodukter, PBS bør unngås som kalsium er kjent for å utløse i fosfat buffere.
<ol><li>Lag en 0,01 M, pH 7,4 PBS buffer ved å blande 137 mM natriumklorid, 1,8 mM kaliumfosfat monobasisk, 10 mM natriumfosfatdibasisk og 2,7 mM kaliumklorid ...

<ol>
	<li>Beckman, M. G., Hooper, W. C., Critchley, S. E., Ortel, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Venous+Thromboembolism.+A+Public+Health+Concern.">Venous Thromboembolism. A Public Health Concern.</a> American Journal of Preventive Medicine. 38, 495-501 (2010).</li><li>Goldhaber, S. Z., Bounameaux, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+embolism+and+deep+vein+thrombosis.">Pulmonary embolism and deep vein thrombosis.</a> The Lancet. 379 (9828), 1835-1846 (2012).</li><li>Weisel, J. W., Litvinov, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+fibrin+polymerization+and+clinical+implications.">Mechanisms of fibrin polymerization and clinical implications.</a> Blood. 121 (10), 1712-1719 (2013).</li><li>Weisel, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+assembly.+Lateral+aggregation+and+the+role+of+the+two+pairs+of+fibrinopeptides.">Fibrin assembly. Lateral aggregation and the role of the two pairs of fibrinopeptides.</a> Biophysical Journal. 50 (6), 1079-1093 (1986).</li><li>Tripathi, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+evaluation+of+whole+blood+prothrombin+time+(PT)+and+international+normalized+ratio+(INR)+using+a+Laser+Speckle+Rheology+sensor.">Clinical evaluation of whole blood prothrombin time (PT) and international normalized ratio (INR) using a Laser Speckle Rheology sensor.</a> Scientific Reports. 7 (1), 1-8 (2017).</li><li>Ryan, E. A., Mockros, L. F., Weisel, J. W., Lorand, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+origins+of+fibrin+clot+rheology.">Structural origins of fibrin clot rheology.</a> Biophysical Journal. 77 (5), 2813-2826 (1999).</li><li>Carr, M. E., Hermans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Size+and+Density+of+Fibrin+Fibers+from+Turbidity.">Size and Density of Fibrin Fibers from Turbidity.</a> Macromolecules. 11 (1), 46-50 (1978).</li><li>Carr, M. E., Shen, L. L., Hermans, J. A. N., Chapel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mass-Length Ratio of Fibrin Fibers from Gel Permeation and Light Scattering. 16, 1-15 (1977).</li><li>Gabriel, D. A., Muga, K., Boothroyd, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Effect of Fibrin Structure on Fibrinolysis. , 24259-24263 (1992).</li><li>Wolberg, A. S., Gabriel, D. A., Hoffman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+fibrin+clot+structure+using+a+microplate+reader.">Analyzing fibrin clot structure using a microplate reader.</a> Blood Coagulation and Fibrinolysis. 13 (6), 533-539 (2002).</li><li>da Luz, L. T., Nascimento, B., Rizoli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombelastography+(TEG):+practical+considerations+on+its+clinical+use+in+trauma+resuscitation.">Thrombelastography (TEG): practical considerations on its clinical use in trauma resuscitation.</a> Scandinavian Journal of Trauma, Resuscitation and Emergency Medicine. 21 (1), 29 (2013).</li><li>Whitten, C. W., Greilich, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thromboelastography:+past,+present,+and+future+.">Thromboelastography: past, present, and future .</a> Anesthesiology: The Journal of the American Society of Anesthesiologists. 92 (5), 1223-1225 (2000).</li><li>Ranucci, M., Laddomada, T., Ranucci, M., Baryshnikova, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+viscosity+during+coagulation+at+different+shear+rates.">Blood viscosity during coagulation at different shear rates.</a> Physiological Reports. 2 (7), 1-7 (2014).</li><li>Zeng, Z., Fagnon, M., Nallan Chakravarthula, T., Alves, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+clot+formation+under+diverse+clotting+conditions:+Comparing+turbidimetry+and+thromboelastography.">Fibrin clot formation under diverse clotting conditions: Comparing turbidimetry and thromboelastography.</a> Thrombosis Research. 187, 48-55 (2020).</li></ol>

Denne protokollen viser utnyttelsen av to forskjellige koagulasjonstegneverktøy som tester en forenklet fibrinogen/trombinknektmodell ved hjelp av kommersielt tilgjengelige komponenter. Både TEG og turbiditetsanalyser er enkle å gjennomføre. De gir ikke bare endepunktklotundersøkelser som maksimal blodproppdannelse (TurbMax og TEGMax) og blodproppformasjonstider (TurbTime og TEGTime), men vurderer også den dynamiske koagulasjonsprosessen. Dette gjør TEG og turbiditet ver...

Trombose er den patologiske dannelsen av en blodpropp i kroppen som blokkerer blodsirkulasjonen som fører til høy sykelighet og dødelighet over hele verden. Det er 1 til 2 tilfeller av venøs tromboembolisme og 2 til 3 tilfeller av tromboseinduserte vaskulære sykdommer per 1000 mennesker årlig1,,2. Presentert her er en metode som utnytter tromboelastografi (TEG) og turbiditet for å overvåke koagulasjonsdannelse under ulike koagulasjonsforhold. Fibrin(ogen) er det primære proteinet som er ansvarlig for blodproppdannelse i kroppen. I de siste trinnene i koagulasjonskaskaden blir fibrinopeptider spaltet fra fibrinogen ved trombin som initierer polymeriseringen av uoppløselige fibrinmonabimerer etter hvert som blodproppen utvikler3,4. For å forstå blodproppdannelse i patologisk trombose, er det nødvendig å karakterisere fibrindannelse under ulike koagulasjonsforhold. Det er brukt flere koagulasjonsanalyser for å studere fibrin clot formasjon in vitro. Protrombintid (PT/INR) og aktivert delvis tromboplastintid (aPTT) er to vanlige kliniske analyser som måler integriteten til en bestemt koagulasjonsvei. De bruker imidlertid tid som den eneste variabelen som ikke gir noen indikasjon på fysiske blodproppegenskaper5. Elektronmikroskopi tillater visualisering av mikrostrukturen til en fullstendig dannet fibrinklot, men gir ingen informasjon om selve koagulasjonsprosessen6. Blant alle analyser tilbyr turbiditetsanalyser og TEG muligheten til å spore koagulasjonsegenskaper dynamisk over tid. Disse teknikkene gjør det mulig å måle omfattende koagulasjonsprofiler, og gir derfor en viss fordel over andre fibrin clot karakteriseringsverktøy.
Spesielt er turbiditetsanalyser (eller klonet turbidimetry) mye brukt til forskning og kliniske anvendelser på grunn av sin forenklede implementering og den brede tilgjengeligheten av spektrometre i forskningslaboratorier. Denne analysen tillater en dynamisk måling av lystransndering gjennom en forming blodpropp ved å ta individuelle repeterende avlesninger ved en definert bølgelengde (oftest ved en bølgelengde i området 350 - 700 nm)7. Temperaturen i lesekammeret kan også justeres. Som fibrin gel dannes, reduseres mengden lys som reiser gjennom proteinnettverket, noe som forårsaker en økning i absorbans over tid. På samme måte reduseres absorbansen når koagulasjonsnettverket brytes ned. Turbiditetsanalyser kan enkelt multiplekseres ved hjelp av et multi-well plateformat for å tillate høy gjennomstrømningsprøvescreening i både 96- og 384-brønnplater. Flere koagulasjonsegenskaper kan avledet fra en turbiditetssporingskurve (absorbans over tidsmåling) som inkluderer: maksimal turbiditet, tid til maksimal turbiditet, tid til å koagulere utbruddet og blodproppformasjonshastighet (Vmax). En fibrin fiber masse / lengde forholdet kan også utledes fra rå turbiditet data for å estimere fibrin fibertykkelse 8,,9,,10.
TEG benyttes hovedsakelig i klinisk setting for å vurdere pasientenes hemostase og blodpropplys. Det er også vanlig i kirurgiske applikasjoner for å avgjøre når anti-fibrinolytiske legemidler eller hemostatiske blodprodukter skal administreres11,12. Koagulasjonsdannelse skjer inne i en TEG-kopp, og alle koagulasjonskomponentene legges til koppen før analysen starter. Koppen, med utviklende blodpropp, roterer fysisk mot en pinne som settes inn i midten og en elektromekanisk torsjonssensor måler den økende viskoelastiske styrken til blodproppen. Denne analysen utføres vanligvis ved den fysiologiske temperaturen på 37 °C; Temperaturen kan imidlertid justeres manuelt på instrumentet. Maksimal amplitude (MA), reaksjonshastighet (R), kinetikktid (K), α-vinkel (vinkel) og tid til maksimal amplitude (TMA) ekstraheres av TEG-programvaren fra den dynamiske TEG-sporingen. Disse verdiene sammenlignes vanligvis med kliniske normale områder for å vurdere pasientens koagulasjonstilstand. Mens TEG ikke er nettopp et viskometer, da det måler blodproppstyrke i millimeterenheter, gir det viktige viskoelastiske koagulasjonsdata og fungerer som et verdifullt klinisk beslutningsverktøy for leger å bestemme seg for å administrere spesifikke blodprodukter og justere terapeutisk dosering13. Når både TEG og turbiditetsanalyser brukes sammen, gir de komplementær koagulasjonskarakteriseringsinformasjon som blodproppstyrke og kinetikk lett ekstraheres fra TEG og fibrin fibertykkelse kan nås ved optiske turbiditetsmålinger.
Siden fibrin er en kritisk komponent i en blodpropp, kan fibrin clot karakterisering under ulike blodproppformasjonsforhold gi verdifull innsikt i hvordan en bestemt variabel bidrar til koagulasjonsprosessen og ultimate koagulasjonsegenskaper. Forstå dette kan gi veiledning for trombose diagnose og utvikling av terapeutiske midler. For å oppnå en mer representativ fibrin clot karakterisering, plasma kan erstattes for å overvåke blodpropp dannelse som det ligner på vivo koagulasjonsforhold tettere enn en forenklet fibrinogen / trombin modellsystem. Men på grunn av koagulasjonskaskadens intrikate natur, legger koagulasjonsdannelse ved hjelp av plasma til kompleksiteten, noe som gjør det vanskeligere å isolere virkningen av individuelle faktorer. Ved hjelp av en forenklet fibrinogen/trombinmodell forhindrer behovet for å initiere hele koagulasjonskaskaden som åpner for isolering av det endelige fibrinformasjonstrinnet. Ved å inkludere to store fibrin forming komponenter (fibrinogen og trombin), dette oppsettet skaper en svært kontrollert blodpropp formasjon tilstand. Det er også viktig å merke seg at mens den forenklede koagulasjonsmodellen brukes her, kan denne protokollen også brukes til å karakterisere mer komplekse blodpropper ved å inkludere flere koagulasjonsfaktorer. I denne studien utføres fibrin clot karakterisering ved hjelp av turbiditet og TEG av varierende fibrinogen og trombinkonsentrasjoner, ionisk styrke, pH og total proteinkonsentrasjon i koagulasjonsløsningen for å etterligne forskjellige in vivo koagulasjonsforhold14. Detaljer om disse variasjonene i protokollen er inkludert i avsnitt 5.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>96-Well Clear Flat Bottom UV-Transparent Microplate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3635</td>
			<td>Non-treated acrylic copolymer, non-sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Albumin from human serum</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A1653</td>
			<td>&#8805;96%, lyophilized powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arium Mini Plus Ultrapure Water System</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>NA</td>
			<td>DI water source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A2153</td>
			<td>&#8805;96%, lyophilized powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Cups and Pins for TEG 5000 (Clear)</td>
			<td>Haemonetics</td>
			<td>REF 6211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen, Bovine Plasma</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>341573</td>
			<td>contains more than 95% clottable protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen, Plasmingogen-Depleted, Human Plasma</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>341578</td>
			<td>Contains &#8805; 95% clottable proteins.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P3813</td>
			<td>Powder, pH 7.4, for preparing 1 L solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>60130</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P9791</td>
			<td>&#8805;98% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SevenEasy pH Meter</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>S20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>71378</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>71636</td>
			<td>&#8805;99.5% purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SpectraMax M5 multi-detection microplate reader system</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>M5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TEG 5000 Thrombelastograph Hemostasis analyzer system</td>
			<td>Haemonetics</td>
			<td>07-022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin, Bovine</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>605157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin, Human Plasma, High Activity</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>605195</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

leveraging turbidity and thromboelastography for complementary clot characterization

Trombose er en ledende dødsårsak over hele verden. Fibrin(ogen) er proteinet som primært er ansvarlig for koagulasjon eller trombose. Derfor er karakterisering av fibrin koagulasjonsdannelse gunstig for studiet av trombose. Turbiditet og tromboelastografi (TEG) er begge mye brukt in vitro analyser for overvåking av blodproppdannelse. Turbiditet måler dynamisk lysoverføringen gjennom en fibrinklotstruktur via et spektrometer og brukes ofte i forskningslaboratorier. TEG er en spesialisert viskoelastisk teknikk som direkte måler blodproppstyrke og brukes hovedsakelig i kliniske omgivelser for å vurdere pasientenes hemostase. Ved hjelp av disse to verktøyene beskriver denne studien en metode for å karakterisere en in vitro fibrin blodpropp ved hjelp av en forenklet fibrinogen / trombin koagulasjonsmodell. Datatrender på tvers av begge teknikkene ble sammenlignet under ulike koagulasjonsforhold. Menneskelige og storfe fibrin blodpropper ble dannet side om side i denne studien som storfe koagulasjon faktorer brukes ofte som erstatninger til menneskelige koagulasjonsfaktorer i kliniske og forskningsinnstillinger. Resultatene viser at TEG og turbiditet spor blodpropp dannelse via to forskjellige metoder og når det brukes sammen gir komplementære blodpropp styrke og fiber strukturell informasjon på tvers av ulike koagulasjonsforhold.

Eksperimentene som vises i figur 1 er representative turbiditetssporingskurver av menneskelige og storfe fibrinkløver på forskjellige fibrinogennivåer. Representative TEG sporingskurver for fibrin koagulasjon ved ulike fibrinogennivåer er vist i figur 2. Begge sporingskurvene viser at etter en forsinkelsesperiode etter blodproppinitiering øker koagulasjonsturbiditeten eller koagulasjonsalituden over tid og nivåer av ved slutten av koagulasjonsdannelsen. En...

Watch this Scientific Journal Video about Leveraging Turbidity and Thromboelastography for Complementary Clot Characterization at JoVE.com

Leveraging Turbidity and Thromboelastography for Complementary Clot Characterization

Fibrin er ansvarlig for blodproppdannelse under hemostase og trombose. Turbiditetsanalyser og tromboelastograhy (TEG) kan benyttes som synergistiske verktøy som gir komplementær vurdering av en blodpropp. Disse to teknikkene sammen kan gi mer innsikt i hvordan koagulasjonsforhold påvirker fibrin koagulasjonsdannelse.

Utnytte turbiditet og tromboelastografi for komplementær blodproppkarakterisering

Thrombosis is a leading cause of death worldwide. Fibrin(ogen) is the protein primarily responsible for clot formation or&#160;thrombosis. Therefore, ...

Tromboelastografi og turbiditetsanalyser er to enkle og særegne metoder for blodproppkarakterisering. Disse teknikkene sammen gir en mer omfattende forståelse av hvordan koagulasjonsvariabler påvirker koagulasjonsfunksjoner. Begge disse analysene, ikke bare tilby endepunktklot analyse, men også tiltrekke fibrin blodpropp dannelse over tid, i motsetning til mange andre blodpropp karakterisering verktøy Disse teknikkene kan bidra til å utvikle en fysiologisk relevant syntetisk blodpropp plattform som kan gi pålitelig diagnose av fibrinolytisk tilstand av trombose pasienter Å overvåke clot turbidity over tid, bruke noen kommersielt tilgjengelig spektrometer som har en absorbans rekkevidde av 350 til 700 nanometer.Slå på spektrometeret og åpne den tilsvarende analyseprogramvaren. Velg deretter plate en og åpne plateinnstillingsfanen. Klikk ABS og kinetisk for å overvåke en dynamisk absorbans over tid.Velg 550 nanometer i bølgelengdefanen, bytt deretter til tidsberegningsfanen og juster den totale kjøretiden til 60 minutter med et intervall på 30 sekunder, velg brønnene av interesse ved å markere dem. Pipette 140 mikroliter PBS i en brønn av en UV gjennomsiktig 96 brønnplate. Tilsett deretter 10 mikroliter trombin og bland, umiddelbart initiere koagulering ved å legge til 50 mikroliter fibrinogen til brønnen og pipetten opp og ned fem ganger ved hjelp av bare første stopp av pipetten tar vare på å unngå å lage bobler.Plasser platen i plateholderen og klikk på les i programvaren for å starte turbiditetsavlesningen. Når lesingen er ferdig hente turbiditet data og få en turbiditet sporing kurve ved å plotte absorbemidler endring over tid, utlede maksimal turbiditet ved å ta maksimal absorbans verdi av kurven over tid, deretter beregne 90% maksimal turbiditet ved å multiplisere maksimal turbiditet med 0,9. Utlede tiden til maksimal turbiditet ved å beregne tiden fra blodpropp initiering til 90% maksimal turbiditet.Slå på tromboelastografien eller TEG-analysatoren, og vent til temperaturen stabiliserer seg ved 37 grader Celsius, og åpne deretter TEG-programvaren og opprett et eksperimentnavn under ID-delen. Klikk kategorien TEG, og følg instruksjonene på skjermen for å utføre en eTest-test for alle kanaler. Plasser deretter spaken tilbake til lasteposisjonen når alle kontrollene er fullført.Klikk gjort på informasjonssiden og skriv inn eksempelinformasjon for kanaler som skal brukes. Plasser en klar ubestrøket TEG-kopp i den tilsvarende kanalen. Skyv stativet opp til toppen og trykk koppen nederst fem ganger for å feste pinnen til torsjonstangen og senk deretter stativet og trykk koppen nedover i basen til den klikker.Pipette 20 mikroliter av trombinoppløsning i TEG-koppen, og start deretter koagulering ved å tilsette 340 mikroliter fibrinogen i koppen for å få en 360 mikroliter koagulasjonsløsning. Bland innholdet i koppen ved å pipetter opp og ned fem ganger. Skyv den koppbelastede stativet opp flytt spaken til leseposisjonen og klikk start i programvaren for å starte TEG-avlesningen.Når avlesningen er fullført hente parameterne og få en TEG sporing kurve ved å plotte amplitude over tid. Velg MA som maksimal amplitude, som er et tegn på koagulasjonsstamme og TMA som tid til maksimal amplitude fra programvaren. Representativ turbiditet og en TEG sporing kurver av menneskelige og storfe fibrin blodpropper på ulike fibrinogen nivåer er vist her.Sporingskurvene viser at etter en forsinkelsesperiode etter blodproppinitiering øker koagulasjonsturbiditet eller blodproppalitud over tid og nivåer av ved slutten av koagulasjonsdannelsen. Maksimal turbiditet og tid til maksimal turbiditet er de to parametrene avledet fra turbiditet, mens maksimal amplitude og tid til maksimal amplitude er avledet fra TEG. På et høyere nivå av fibrinogen i koagulasjonsløsningen øker alle fire verdiene.Maksimal turbiditet er et optisk mål på koagulasjonsstruktur, som indikerer fibrinfibertykkelse og fibrin nettverkstetthet. Mens maksimal amplitude er et mekanisk tiltak som gjenspeiler absolutt koagulasjonsstamme, gir de to verdiene gratis innsikt om blodproppmikrostrukturene. Denne prosedyren viser en forenklet koagulasjonsmodell for å undersøke variabler som hovedsakelig påvirker fibrin polymerisering.Denne modellen kan tilpasses ved inkludering av flere koagulasjonsfaktorer for å studere andre parametere. Koagulasjonsmodellen kan enkelt endres ved hjelp av kliniske plasmaprøver for å overvåke koagulasjonsdannelse og desillusjon i nærvær av antitrombotiske legemidler. Resultatene kan veilede terapeutisk behandling hos pasienter.

Research

JoVE Journal

Medicine

Characterization of Molecular Mechanisms of In vivo UVR Induced Cataract

Characterization of Molecular Mechanisms of In vivo UVR Induced Cataract

Karakterisering av molekylære mekanismer for<em&gt; In vivo</em&gt; UVR Induced Cataract

Cataract is the leading cause of blindness in the world 1. The World Health Organization defines cataract as a clouding of the lens of the eye which ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolasjon, karakterisering og Comparative Differensiering av Human tannpulpa stamceller hentet fra permanente tenner ved hjelp av to ulike metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Experimental and Imaging Techniques for Examining Fibrin Clot Structures in Normal and Diseased States

Eksperimentelle og Imaging Teknikker for Undersøke fibrinkoagel Structures i Normal og Syke States

Fibrin is an extracellular matrix protein that is responsible for maintaining the structural integrity of blood clots. Much research has been done on ...

High Throughput Characterization of Adult Stem Cells Engineered for Delivery of Therapeutic Factors for Neuroprotective Strategies

Høy gjennomstrømning Karakterisering av voksne stamceller Konstruert for levering av terapeutiske faktorer for nervecellene strategier

Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow are a powerful cellular resource and have been used in numerous studies as potential candidates to ...

In vitro Functional Characterization of Mouse Colorectal Afferent Endings

In vitro Functional Characterization of Mouse Colorectal Afferent Endings

In vitro Funksjonell karakterisering av Mouse Colorectal afferent Endings

This video demonstrates in detail an in vitro single-fiber electrophysiological recording protocol using a mouse colorectum-nerve preparation. The ...

Establishment and Characterization of UTI and CAUTI in a Mouse Model

Etablering og karakterisering av UTI og CAUTI i en musemodell

Urinary tract infections (UTI) are highly prevalent, a significant cause of morbidity and are increasingly resistant to treatment with antibiotics. ...

Tissue Characterization after a New Disaggregation Method for Skin Micro-Grafts Generation

Tissue Karakterisering etter en ny Disaggregering metode for Skin Micro-Grafts Generation

Several new methods have been developed in the field of biotechnology to obtain autologous cellular suspensions during surgery, in order to provide one ...

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

Ekkokardiografiske tilnærminger og protokoller for omfattende Fenotypisk Karakterisering av hjerteklaffsykdom i Mus

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

Fremstilling og<em&gt; In Vitro</em&gt; Karakterisering av magnetisert mir-modifisert endotelceller

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

Development and Functional Characterization of Murine Tolerogenic Dendritic Cells

Utvikling og funksjonell karakteristikk av Murine Tolerogenic dendrittiske celler

The immune system operates by maintaining a tight balance between coordinating responses against foreign antigens and maintaining an unresponsive state ...