Name: a novel pavlovian fear conditioning paradigm to study freezing and flight behavior
Uploaded: 2021-01-05T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior Video at JoVE.com

وقد تم دعم هذا العمل من قبل مجلس ولاية لويزيانا من خلال مجلس أمناء صندوق الدعم (LEQSF (2018-21)-RD-A-17) والمعهد الوطني للصحة العقلية في المعاهد الوطنية للصحة تحت رقم الجائزة R01MH122561. والمحتوى هو مسؤولية المؤلفين وحده ولا يمثل بالضرورة وجهات النظر الرسمية للمعاهد الوطنية للصحة.

وقد تم تنفيذ الخطوات والإجراءات التالية وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية بعد موافقة لجنة الرعاية والاستخدام الحيواني المؤسسية في جامعة تولين.
1. إعداد الفئران
<ol><li>استخدام الفئران البالغة من الذكور و /أو الإناث الذين تتراوح أعمارهم بين 3-5 أشهر. في هذه الدراسة، استخدمنا ذكو?...

<ol>
	<li>Gross, C. T., Canteras, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+many+paths+to+fear.">The many paths to fear.</a> Nature Reviews Neuroscience. 13 (9), 651-658 (2012).</li><li>LeDoux, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rethinking+the+Emotional+Brain.">Rethinking the Emotional Brain.</a> Neuron. , (2012).</li><li>Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobiology+of+Pavlovian+fear+conditioning.">Neurobiology of Pavlovian fear conditioning.</a> Annual Review of Neuroscience. 24, 897-931 (2001).</li><li>Johnson, P. L., Truitt, W. A., Fitz, S. D., Lowry, C. A., Shekhar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+pathways+underlying+lactate-induced+panic.">Neural pathways underlying lactate-induced panic.</a> Neuropsychopharmacology. 33 (9), 2093-2107 (2008).</li><li>Mobbs, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+threat+to+fear:+The+neural+organization+of+defensive+fear+systems+in+humans.">From threat to fear: The neural organization of defensive fear systems in humans.</a> Journal of Neuroscience. 29 (39), 12236-12243 (2009).</li><li>M&#252;nsterk&#246;tter, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+or+no+spider?+neural+correlates+of+sustained+and+phasic+fear+in+spider+phobia.">Spider or no spider? neural correlates of sustained and phasic fear in spider phobia.</a> Depression and Anxiety. 32 (9), 656-663 (2015).</li><li>Kessler, R. C., Wai, T. C., Demler, O., Walters, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence,+severity,+and+comorbidity+of+12-month+DSM-IV+disorders+in+the+National+Comorbidity+Survey+Replication.">Prevalence, severity, and comorbidity of 12-month DSM-IV disorders in the National Comorbidity Survey Replication.</a> Archives of General Psychiatry. 62 (6), 617-627 (2005).</li><li>National Institute of Mental Health. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generalized+anxiety+disorder.">Generalized anxiety disorder.</a> National Institute of Mental Health. , 3-8 (2017).</li><li>Herry, C., Johansen, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Encoding+of+fear+learning+and+memory+in+distributed+neuronal+circuits.">Encoding of fear learning and memory in distributed neuronal circuits.</a> Nature Neuroscience. 17 (12), 1644-1654 (2014).</li><li>Janak, P. H., Tye, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+circuits+to+behaviour+in+the+amygdala.">From circuits to behaviour in the amygdala.</a> Nature. 517 (7534), 284-292 (2015).</li><li>Tovote, P., Fadok, J. P., L&#252;thi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+circuits+for+fear+and+anxiety.">Neuronal circuits for fear and anxiety.</a> Nature Reviews Neuroscience. 16 (6), 317-331 (2015).</li><li>Seidenbecher, T., Laxmi, T. R., Stork, O., Pape, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amygdalar+and+hippocampal+theta+rhythm+synchronization+during+fear+memory+retrieval.">Amygdalar and hippocampal theta rhythm synchronization during fear memory retrieval.</a> Science. 301 (5634), 846-850 (2003).</li><li>Blanchard, D. C., Blanchard, R. J., Blanchard, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defensive+behaviors,+fear,+and+anxiety.">Defensive behaviors, fear, and anxiety.</a> Handbook of Anxiety and Fear. Handbook of behavioral neuroscience. , 63-79 (2008).</li><li>Perusini, J. N., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobehavioral+perspectives+on+the+distinction+between+fear+and+anxiety.">Neurobehavioral perspectives on the distinction between fear and anxiety.</a> Learning and Memory. 22 (9), 417-425 (2015).</li><li>Fadok, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+competitive+inhibitory+circuit+for+selection+of+active+and+passive+fear+responses.">A competitive inhibitory circuit for selection of active and passive fear responses.</a> Nature. 542 (7639), 96-99 (2017).</li><li>Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotoxic+or+electrolytic+lesions+of+the+ventral+subiculum+produce+deficits+in+the+acquisition+and+expression+of+Pavlovian+fear+conditioning+in+rats.">Neurotoxic or electrolytic lesions of the ventral subiculum produce deficits in the acquisition and expression of Pavlovian fear conditioning in rats.</a> Behavioral Neuroscience. 113 (2), 283-290 (1999).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+hippocampal+pathways+mediate+dissociable+roles+of+context+in+memory+retrieval.">Distinct hippocampal pathways mediate dissociable roles of context in memory retrieval.</a> Cell. 167 (4), 961-972 (2016).</li><li>Curzon, P., Rustay, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+2:+Cued+and+contextual+fear+conditioning+for+rodents.">Chapter 2: Cued and contextual fear conditioning for rodents.</a> Methods of Behavior Analysis in Neuroscience. 2nd edition. , (2009).</li><li>Mollenauer, S., Bryson, R., Robison, M., Phillips, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noise+avoidance+in+the+C57BL/6J+mouse.">Noise avoidance in the C57BL/6J mouse.</a> Animal Learning &amp; Behavior. 20 (1), 25-32 (1992).</li><li>Hersman, S., Allen, D., Hashimoto, M., Brito, S. I., Anthony, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulus+salience+determines+defensive+behaviors+elicited+by+aversively+conditioned+serial+compound+auditory+stimuli.">Stimulus salience determines defensive behaviors elicited by aversively conditioned serial compound auditory stimuli.</a> eLife. 9, (2020).</li><li>Dong, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+cortico-intrathalamic+circuit+for+flight+behavior.">A novel cortico-intrathalamic circuit for flight behavior.</a> Nature Neuroscience. 22 (6), 941-949 (2019).</li><li>Borkar, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+behavioral+responses+during+a+conditioned+flight+paradigm.">Sex differences in behavioral responses during a conditioned flight paradigm.</a> Behavioural Brain Research. 389, 112623 (2020).</li><li>Fadok, J. P., Markovic, M., Tovote, P., L&#252;thi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+on+central+amygdala+function.">New perspectives on central amygdala function.</a> Current Opinion in Neurobiology. 49, 141-147 (2018).</li><li>Pitman, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+studies+of+post-traumatic+stress+disorder.">Biological studies of post-traumatic stress disorder.</a> Nature Reviews Neuroscience. 13 (11), 769-787 (2012).</li><li>Canteras, N. S., Graeff, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Executive+and+modulatory+neural+circuits+of+defensive+reactions:+Implications+for+panic+disorder.">Executive and modulatory neural circuits of defensive reactions: Implications for panic disorder.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. , (2014).</li></ol>

تعد معلمات الصوت والصدمة الموصوفة عناصر هامة في هذا البروتوكول. لذلك، من المهم اختبار سعة الصدمة ومستوى ضغط الصوت قبل بدء التجارب. دراسات تكييف الخوف عادة استخدام 70-80 ديسيبل مستويات ضغط الصوت و0.1-1 1 شدة الصدمة18mA ; وبالتالي، فإن المعلمات الموصوفة تقع ضمن حدود نماذج تكييف الخوف ?...

الخوف هو استجابة تكيفية تحفظ تطوريا لتهديد فوري1،2. في حين أن الكائنات الحية تمتلك استجابات دفاعية فطرية للتهديد ، فإن الجمعيات المستفادة حاسمة للحصول على استجابات دفاعية مناسبة للمحفزات التنبؤية للخطر3. Dysregulation في دوائر الدماغ السيطرة على الاستجابات الدفاعية من المرجح أن تسهم في ردود الفعل غير المهكة المرتبطة باضطرابات القلق المنهكة متعددة, مثل اضطراب ما بعد الصدمة (PTSD), اضطراب الذعر4, والرهاب محددة5,6. معدل انتشار اضطرابات القلق في الولايات المتحدة هو 19.1٪ للبالغين و 31.9٪ في المراهقين7,8. وعبء هذه الأمراض مرتفع للغاية على الروتين اليومي للأفراد ويؤثر سلبا على نوعية حياتهم.
على مدى العقود العديدة الماضية، وقد خدم بافلوفيان تكييف الخوف كنظام نموذج قوي للحصول على نظرة هائلة في الآليات العصبية الكامنة في التعلم المتعلقة بالخوف والذاكرة9،10،11. تكييف الخوف بافلوفيان ينطوي على إقران التحفيز مشروطة (CS، مثل التحفيز السمعي) مع التحفيز غير مشروط (الولايات المتحدة؛ على سبيل المثال، هزة القدم الكهربائية)12. لأن التجميد هو السلوك المهيمن الذي أثار ويقاس في نماذج تكييف بافلوفيان القياسية ، فإن آليات التحكم العصبية لأشكال نشطة من السلوك الدفاعي مثل استجابات الهروب / الطيران لا تزال غير مستكشفة إلى حد كبير. وتظهر الدراسات السابقة أن أشكال مختلفة من السلوك الدفاعي، مثل الطيران، يتم استحضارها اعتمادا على شدة التهديد، وقرب السياق13،14. دراسة كيفية الدماغ تسيطر على أنواع مختلفة من السلوك الدفاعي قد تسهم بشكل كبير في فهم العمليات العصبية التي يتم dysregulated في اضطرابات الخوف والقلق.
لمعالجة هذه الحاجة الملحة، وضعنا نموذج تكييف بافلوفيان المعدلة التي تثير الهروب والقفزات الهروب، بالإضافة إلى تجميد15. في هذا النموذج، يتم مكيفة الفئران مع التحفيز المركب التسلسلي (SCS) تتكون من لهجة نقية تليها الضوضاء البيضاء. بعد يومين من إقران SCS مع هزة قدم كهربائية قوية ، تظهر الفئران التجميد استجابة لعنصر النغمة والطيران أثناء الضوضاء البيضاء. إن التبديل السلوكي بين التجميد المشروط وسلوك الطيران سريع وثابت. ومن المثير للاهتمام أن الفئران تعرض سلوك الطيران فقط عندما يتم عرض الضوضاء البيضاء CS في نفس سياق هزة القدم التي تم تسليمها مسبقًا (سياق التكييف) ولكن ليس في سياق محايد. بدلا من ذلك ، تجميد الردود تهيمن في هذا السياق محايدة ، مع مستويات أكبر بكثير من تجميد استجابة للضوضاء البيضاء مقارنة مع لهجة. وهذا يتسق مع دور السياق في تعديل كثافة الاستجابة الدفاعية ومع الدور التنظيمي للمعلومات السياقية في التعلم والذاكرة المرتبطة بالخوف الموجودة في نماذج تكييف التهديدات التقليدية16،17. يسمح هذا النموذج لمقارنات مباشرة داخل الموضوع من السلوكيات الدفاعية متعددة بطريقة خاصة السياق.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	
	<tbody>
		<tr >
			<td >Neutral context</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td >Plexiglass cylinder 30 X 30 cm&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fear conditioning box</td>
			<td >Med Associates, Inc.</td>
			<td >VFC-008</td>
			<td>25 X 30 X 35 cm dimentions</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Audio generator&#160;</td>
			<td >Med Associates, Inc.</td>
			<td >ANL-926&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Shocker</td>
			<td >Med Associates Inc.</td>
			<td >ENV-414S</td>
			<td>Stainless steel grid</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Speaker</td>
			<td >Med Associates, Inc.</td>
			<td >ENV-224AM</td>
			<td>Suitable for pure tone and white noise&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >C57/BL6J mice</td>
			<td >Jackson laboratory, USA</td>
			<td >664</td>
			<td>Aged 3-5 month</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cineplex software (Editor/ studio)</td>
			<td >Plexon</td>
			<td>CinePlex Studio v3.8.0</td>
			<td>For video tracking and behavioral scoring analysis</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MedPC software V</td>
			<td >Med Associates, Inc.</td>
			<td >SOF-736</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Neuroexplorer</td>
			<td >Plexon</td>
			<td ></td>
			<td>Used to extract the freezing data scored in PlexonEditor</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >GraphPad Prism 8</td>
			<td >GraphPad Software, Inc.</td>
			<td >Version 8</td>
			<td>Statistical analysis software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel pavlovian fear conditioning paradigm to study freezing and flight behavior

الخوف والسلوكيات المتعلقة بالقلق تساهم بشكل كبير في بقاء الكائن الحي. ومع ذلك، فإن الاستجابات الدفاعية المبالغ فيها للتهديد المتصور هي سمة من سمات اضطرابات القلق المختلفة، التي هي الشكل الأكثر انتشارا من الأمراض العقلية في الولايات المتحدة. إن اكتشاف الآليات العصبية البيولوجية المسؤولة عن السلوكيات الدفاعية سيساعد في تطوير التدخلات العلاجية الجديدة. بافلوفيان تكييف الخوف هو نموذج مختبر المستخدمة على نطاق واسع لدراسة التعلم المتعلقة بالخوف والذاكرة. أحد القيود الرئيسية على نماذج تكييف الخوف بافلوفية التقليدية هو أن التجميد هو السلوك الدفاعي الوحيد الذي تم رصده. لقد طورنا مؤخرًا نموذجًا معدلًا لتكييف الخوف من بافلوفيان يسمح لنا بدراسة كل من التجميد المشروط والهروب (المعروف أيضًا باسم الهروب) السلوك داخل الموضوعات الفردية. هذا النموذج يستخدم ارتفاع كثافة الاقدام وعدد أكبر من الاقترانات بين التحفيز المشروط والحوافز غير مشروط. بالإضافة إلى ذلك، يستخدم هذا النموذج طيران مشروط العرض المسلسل من لهجة نقية والمحفزات السمعية الضوضاء البيضاء كما التحفيز مشروطة. بعد تكييف في هذا النموذج، الفئران يحمل تجميد السلوك استجابة لحافز لهجة، واستجابات الطيران خلال الضوضاء البيضاء. يمكن تطبيق هذا النموذج تكييف لدراسة التحولات السريعة والمرنة بين الاستجابات السلوكية اللازمة للبقاء على قيد الحياة.

وكما هو موضح في الرسم البياني (الشكل 1A)،تبدأ الجلسة بالتعرض المسبق (اليوم 1)، متبوعاً بتكييف الخوف (أيام 2 و3)، ثم إما انقراض أو استرجاع (اليوم الرابع).
لم العروض من SCS في جلسة ما قبل التعرض (يوم 1) لا تثير الطيران أو تجميد الاستجابة في الفئران (الشكل 2</str...

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior Video at JoVE.com

A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior Video (Video) | JoVE

وتتوقف الاستجابات السلوكية الدفاعية على شدة التهديد وقربه، ومدى تعرضه للخطر. وبناء على هذه العوامل، قمنا بتطوير نموذج تكييف الكلاسيكية التي تثير التحولات واضحة بين تجميد مشروط وسلوك الطيران داخل المواضيع الفردية. هذا النموذج هو أمر بالغ الأهمية لفهم الأمراض التي تنطوي عليها في القلق, الذعر, واضطرابات ما بعد الصدمة.

رواية بافلوفيان الخوف تكييف نموذج لدراسة تجميد وسلوك الطيران

Fear- and anxiety-related behaviors significantly contribute to an organism&#8217;s survival. However, exaggerated defensive responses to perceived threat ...

الهدف العام لهذا النموذج هو تقييم السلوك الدفاعي المعقد في القوارض. وهذا البروتوكول مهم لأنه يسهل التحقيقات في التحولات بين السلوكيات الدفاعية، مما يجعله مثاليا للباحثين المهتمين بدراسة الاستجابات التكيفية المعقدة للتهديد. يستخدم هذا البروتوكول محفزات حالة دقيقة مؤقتًا للحصول على الانتقال بين الاستجابات الدفاعية ، مما يسمح لنا بدراسة كل من التجميد المشروط وسلوكيات الطيران داخل الموضوع الفردي.استخدام هذا النموذج للكشف عن آليات السلوك الدفاعي يمكن أن توفر نظرة ثاقبة في الخلل المرتبط باضطراب ما بعد الصدمة واضطرابات الهلع ويمكن أن تساعد في تطوير علاجات جديدة. لإعداد البروتوكولات السلوكية، في البرنامج، تحديد SCS، تعيين المحفزات التي سيتم تسليمها إما نغمة نقية عشر ثانية، أو ضوضاء بيضاء عشر ثوان، وتحديد الفترات الفاصلة بين المحاكمات التي ستقدم بشكل عشوائي زائف بعد كل محاكمة. لإعداد تتبع البرنامج، ضع ماوس اختبار في كل سياق ذي صلة، وحدد مركز الجاذبية، وضبط حجم الكنتوري.استخدم حجم الغرف وأبعاد البكسل للكاميرا لتحديد معامل المعايرة. ثم قم بإنشاء رمز نبض TTL لمزامنة علامات الحدث للكمبيوتر المركزي مع تواجدات الوقت الحقيقي الخاصة بهم. قبل البدء في تجربة، قم بتشغيل وحدة تحكم مربع تكييف الخوف، ومصدّق، وبرامج تسجيل الفيديو.قم بتركيب مكبر صوت علوي فوق سياقات تسليم المحفزات السمعية عند 75 ديسيبل، وتعيين مولد صوتي قابل للبرمجة لتوليد محفزات سمعية وفق جدول زمني محدد مسبقًا. بعد التأكد من أن لهجة والضوضاء البيضاء وظيفية، تعيين نظام للحصول على البيانات ونقل ثلاثة إلى خمسة أشهر الفئران الذكور أو الإناث إلى غرفة تكييف. قبل البدء في محاكمة الشروط المسبقة، وتنظيف قطرها 30 سنتيمترا، 30 سم عالية واضحة plexiglass غرفة مع 1٪ حمض الخليك لاستخدامها في سياق الغرفة A.لشرط مسبق، ضع الماوس في سياق A والسماح لها بالتأقلم لمدة ثلاث دقائق قبل تعريض الماوس إلى أربعة مسارات SCS 20 ثانية مع متوسط متوسط شبه عشوائي 90-second الفاصل الزمني بين المحاكمة. بعد 10 دقائق من التأقلم، قم بنقل فأرة واحدة إلى غرفة السياق A، ثم قم بتنشيط نظام تكييف الخوف وبرامج جمع البيانات على الفور. قبل البدء في تجربة تكييف الخوف، قم بتنظيف ارتفاع لا يقل عن 35 سنتيمترًا، 25 في 30 سنتيمترًا مستطيلة مع أرضية شبكة كهربائية مع 70٪ إيثانول لاستخدامه كغرفة السياق B.ثم، قم بتوصيل المصدّر بأرضية الشبكة الكهربائية لغرفة السياق B، وحدد وتيرة الصدمات وبداية حدوثها ومدتها في برنامج الكمبيوتر المناسب. عندما يتم تعيين كل المعلمات، تحقق من أن شدة الصدمة يتم تسليمها بشكل صحيح من كل من صدمة وطابق الشبكة. في اليومين الثاني والثلاثة، ضع الماوس في غرفة السياق B لمدة ثلاث دقائق قبل تعريض الحيوان لخمسة أزواج من SCS مع ثانيه و 0.9 ميليمب AC صدمة القدم و 120 ثانية متوسط الفاصل الزمني بين المحاكمات.في نهاية الدورة، وضع الماوس مرة أخرى في قفص المنزل. اعتمادا على الهدف من التجربة، لإخضاع الحيوانات لجلسة استدعاء، في اليوم الرابع، وضع الماوس في سياق غرفة لمدة ثلاث دقائق قبل تقديم الحيوان مع أربع تجارب SCS دون صدمة القدم مع متوسط 90 ثانية الفاصل الزمني بين التجارب الزائفة عشوائي على مدى 590 ثانية لاختبار استجابة الحيوان استدعاء الخوف. أو، لاختبار الانقراض الخوف، في اليوم الرابع، وضع الماوس في غرفة السياق B لمدة ثلاث دقائق قبل إخضاع الحيوان إلى 16 تجارب SCS دون صدمة القدم مع متوسط 90 ثانية شبه عشوائي الفاصل الزمني بين المحاكمات على مدى فترة 1، 910 ثانية.لتحديد كمية سلوك الماوس، في نهاية التجربة، يكون المراقب أعمى لتحليل درجة أشرطة الفيديو المسجلة لتجميد السلوك باستخدام عتبة كاشف التجميد التلقائي تليها تحليل الإطار حسب الإطار من التغييرات بكسل. تعريف التجميد على أنه وقف تام للحركات الجسدية ، باستثناء تلك المطلوبة للتنفس لمدة ثانية واحدة على الأقل. يسجل قفزة كمثال عندما يترك جميع الكفوف الأربعة الأرض ، مما يؤدي إلى حركة رأسية و / أو أفقية.عندما يتم تحليل الجزء بأكمله، قم بتصدير الملف المميز مع علامات التجميد والقفز والأحداث واستخراج الأحداث ذات الصلة من الفترات الزمنية المحددة التي تهمك في جدول بيانات. لحساب مدة التجميد، اطرح وقت البدء من وقت الانتهاء لكل فترة تجريبية. جمع العدد الإجمالي ل القفزات من مدة تجريبية معينة.لحساب سرعة الماوس، تتبع الإحداثيات من حركة محور XY الإطار حسب الإطار من مركز ثقل الماوس. لحساب درجات الرحلة، قم بتقسيم متوسط السرعة أثناء كل SCS على متوسط السرعة خلال فترة ما قبل SCS لمدة عشر ثوان، وإضافة نقطة واحدة لكل قفزة هروب. وتشير درجة الرحلة الواحدة إلى عدم حدوث أي تغيير في سلوك الرحلة عن فترة ما قبل SCS.ثم، تحليل البيانات للأهمية الإحصائية باستخدام برنامج تحليل إحصائي مناسب. لا تثير العروض التقديمية SCS في جلسة ما قبل التعرض للطيران أو الردود على تجميد في الفئران. التحليل السلوكي أثناء التكييف يكشف أن مكون نغمة SCS يعزز بشكل كبير تجميد مقارنة بالتجميد أثناء SCS ما قبل.تغيرت درجات الرحلة بشكل كبير عبر الجلسات ، وتظهر الفئران سرعات أعلى والمزيد من القفزات إلى جديلة الضوضاء البيضاء مقارنة بإشارة Tone. تظهر الفئران انتقالًا واضحًا في السلوك الدفاعي ، حيث تظهر درجات طيران أقل خلال النغمة ودرجات طيران أعلى خلال الضوضاء البيضاء ، مع ملاحظة العكس لتجميد الاستجابات. الفئران التي تعرضت ل16 تجارب من التدريب على الانقراض تثبت الانقراض السريع للطيران مشروطة، مع عشرات القتال خلال الكتلة الأولى من أربع تجارب قياس أعلى خلال الضوضاء البيضاء بالمقارنة مع جديلة لهجة.في نهاية جلسة الانقراض، لم يعد سلوك الطيران يُثار بأي من الإشارات. تجميد إلى لهجة هو أعلى بكثير من تجميد الضوضاء البيضاء للكتلة الأولى من أربع تجارب أثناء الانقراض. وينخفض التجميد الناجم عن النبرة خلال تجارب الانقراض الـ 16، في حين لوحظت زيادة في التجميد بوساطة الضوضاء البيضاء.في جلسة الاستدعاء، لا يؤدي التعرض للضوضاء البيضاء في سياق محايد إلى رحلة جوية، حيث أن درجات الرحلة أقل من واحد. بدلاً من ذلك ، فإن عروض الضوضاء البيضاء في السياق المحايد تثير استجابات تجميد أعلى من تلك التي أثارتها النغمة. من المهم تنظيف السياق في جميع أنحاء، وأنه من المهم لاختبار سعة الصدمة ومستوى ضغط الصوت قبل بدء تجربة.ويستخدم هذا النموذج حاليا من قبل الجماعات المهتمة في فهم تعقيدات السلوك الدفاعي، ويمكن استخدامها لتعزيز فهمنا لاختيار العمل الدفاعي.

Research

JoVE Journal

Behavior

A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior

The Resident-intruder Paradigm: A Standardized Test for Aggression, Violence and Social Stress

The Resident-intruder Paradigm: A Standardized Test for Aggression, Violence and Social Stress Video (Video) | JoVE

نموذج المقيم الدخيل: اختبار موحد للعدوان والعنف والتوتر الاجتماعي

This video publication explains in detail the experimental protocol of the resident-intruder paradigm in rats. This test is a standardized method to ...

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice Video (Video) | JoVE

السياقية وملقن الخوف تكييف اختبار باستخدام نظام تحليل الفيديو في الفئران

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Trace Fear Conditioning in Mice

Trace Fear Conditioning in Mice Video (Video) | JoVE

تتبع تكييف الخوف في الفئران

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats Video (Video) | JoVE

إجراءات لمراقبة الناجم عن السياق تجديد مكيفة بافلوف-السلوك الكحول التماس في الجرذان

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Using the Threat Probability Task to Assess Anxiety and Fear During Uncertain and Certain Threat

Using the Threat Probability Task to Assess Anxiety and Fear During Uncertain and Certain Threat Video (Video) | JoVE

العمل باستخدام التهديد الاحتمالات لتقييم القلق والخوف وخلال التهديد غير مؤكد وبعض

Fear of certain threat and anxiety about uncertain threat are distinct emotions with unique behavioral, cognitive-attentional, and neuroanatomical ...

A Cognitive Paradigm to Investigate Interference in Working Memory by Distractions and Interruptions

A Cognitive Paradigm to Investigate Interference in Working Memory by Distractions and Interruptions Video (Video) | JoVE

A المعرفي بارادايم المعنية بالتحقيق في التدخل في الذاكرة العاملة التي كتبها الانحرافات والانقطاعات

Goal-directed behavior is often impaired by interference from the external environment, either in the form of distraction by irrelevant information that ...

How to Study Placebo Responses in Motion Sickness with a Rotation Chair Paradigm in Healthy Participants

How to Study Placebo Responses in Motion Sickness with a Rotation Chair Paradigm in Healthy Participants Video (Video) | JoVE

كيفية دراسة الردود همي في دوار الحركة مع دوران كرسي بارادايم في المشاركون صحي

Placebo responses occur in every medical intervention when patients or participants expect to receive an effective treatment to relieve symptoms. However, ...

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats Video (Video) | JoVE

بافلوف التدريب نهج مشروطة في الجرذان

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the ...

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder Video (Video) | JoVE

الخوف الإجهاد--تعزيز التعلم، نموذج القوارض قوية من اضطراب الإجهاد اللاحق للصدمة النفسية

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders ...

Visual Classical Conditioning in Wood Ants

Visual Classical Conditioning in Wood Ants Video (Video) | JoVE

الاشراط الكلاسيكي البصرية في الخشب النمل

Several species of insects have become model systems for studying learning and memory formation. Although many studies focus on freely moving animals, ...