Name: a novel pavlovian fear conditioning paradigm to study freezing and flight behavior
Uploaded: 2021-01-05T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior Video at JoVE.com

Bu çalışma Louisiana Vekiller Kurulu tarafından Vekiller Kurulu destek fonu (LEQSF(2018-21)-RD-A-17) ve Ulusal Sağlık Enstitüleri Ulusal Ruh Sağlığı Enstitüsü tarafından R01MH122561 ödül numarası altında desteklendi. İçerik sadece yazarların sorumluluğundadır ve Ulusal Sağlık Enstitülerinin resmi görüşlerini temsil etmek zorunda değildir.

Aşağıdaki adımlar/prosedürler, Tulane Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'nin onayından sonra kurumsal yönergelere uygun olarak gerçeklendirilmiştir.
1. Farelerin hazırlanması
<ol><li>3-5 ay arasında erkek ve/veya dişi yetişkin fareler kullanın. Bu çalışmada Jackson Laboratuvarı'ndan elde edilen erkek C57BL/6J fareleri kullandık, ancak saygın bir tedarikçiden gelen herhangi bir fare zorlanması kullanılabilir.</li>
	<li>Deneyden en az bir hafta ?...

<ol>
	<li>Gross, C. T., Canteras, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+many+paths+to+fear.">The many paths to fear.</a> Nature Reviews Neuroscience. 13 (9), 651-658 (2012).</li><li>LeDoux, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rethinking+the+Emotional+Brain.">Rethinking the Emotional Brain.</a> Neuron. , (2012).</li><li>Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobiology+of+Pavlovian+fear+conditioning.">Neurobiology of Pavlovian fear conditioning.</a> Annual Review of Neuroscience. 24, 897-931 (2001).</li><li>Johnson, P. L., Truitt, W. A., Fitz, S. D., Lowry, C. A., Shekhar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+pathways+underlying+lactate-induced+panic.">Neural pathways underlying lactate-induced panic.</a> Neuropsychopharmacology. 33 (9), 2093-2107 (2008).</li><li>Mobbs, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+threat+to+fear:+The+neural+organization+of+defensive+fear+systems+in+humans.">From threat to fear: The neural organization of defensive fear systems in humans.</a> Journal of Neuroscience. 29 (39), 12236-12243 (2009).</li><li>M&#252;nsterk&#246;tter, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+or+no+spider?+neural+correlates+of+sustained+and+phasic+fear+in+spider+phobia.">Spider or no spider? neural correlates of sustained and phasic fear in spider phobia.</a> Depression and Anxiety. 32 (9), 656-663 (2015).</li><li>Kessler, R. C., Wai, T. C., Demler, O., Walters, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence,+severity,+and+comorbidity+of+12-month+DSM-IV+disorders+in+the+National+Comorbidity+Survey+Replication.">Prevalence, severity, and comorbidity of 12-month DSM-IV disorders in the National Comorbidity Survey Replication.</a> Archives of General Psychiatry. 62 (6), 617-627 (2005).</li><li>National Institute of Mental Health. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generalized+anxiety+disorder.">Generalized anxiety disorder.</a> National Institute of Mental Health. , 3-8 (2017).</li><li>Herry, C., Johansen, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Encoding+of+fear+learning+and+memory+in+distributed+neuronal+circuits.">Encoding of fear learning and memory in distributed neuronal circuits.</a> Nature Neuroscience. 17 (12), 1644-1654 (2014).</li><li>Janak, P. H., Tye, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+circuits+to+behaviour+in+the+amygdala.">From circuits to behaviour in the amygdala.</a> Nature. 517 (7534), 284-292 (2015).</li><li>Tovote, P., Fadok, J. P., L&#252;thi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+circuits+for+fear+and+anxiety.">Neuronal circuits for fear and anxiety.</a> Nature Reviews Neuroscience. 16 (6), 317-331 (2015).</li><li>Seidenbecher, T., Laxmi, T. R., Stork, O., Pape, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amygdalar+and+hippocampal+theta+rhythm+synchronization+during+fear+memory+retrieval.">Amygdalar and hippocampal theta rhythm synchronization during fear memory retrieval.</a> Science. 301 (5634), 846-850 (2003).</li><li>Blanchard, D. C., Blanchard, R. J., Blanchard, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defensive+behaviors,+fear,+and+anxiety.">Defensive behaviors, fear, and anxiety.</a> Handbook of Anxiety and Fear. Handbook of behavioral neuroscience. , 63-79 (2008).</li><li>Perusini, J. N., Fanselow, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobehavioral+perspectives+on+the+distinction+between+fear+and+anxiety.">Neurobehavioral perspectives on the distinction between fear and anxiety.</a> Learning and Memory. 22 (9), 417-425 (2015).</li><li>Fadok, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+competitive+inhibitory+circuit+for+selection+of+active+and+passive+fear+responses.">A competitive inhibitory circuit for selection of active and passive fear responses.</a> Nature. 542 (7639), 96-99 (2017).</li><li>Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotoxic+or+electrolytic+lesions+of+the+ventral+subiculum+produce+deficits+in+the+acquisition+and+expression+of+Pavlovian+fear+conditioning+in+rats.">Neurotoxic or electrolytic lesions of the ventral subiculum produce deficits in the acquisition and expression of Pavlovian fear conditioning in rats.</a> Behavioral Neuroscience. 113 (2), 283-290 (1999).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+hippocampal+pathways+mediate+dissociable+roles+of+context+in+memory+retrieval.">Distinct hippocampal pathways mediate dissociable roles of context in memory retrieval.</a> Cell. 167 (4), 961-972 (2016).</li><li>Curzon, P., Rustay, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+2:+Cued+and+contextual+fear+conditioning+for+rodents.">Chapter 2: Cued and contextual fear conditioning for rodents.</a> Methods of Behavior Analysis in Neuroscience. 2nd edition. , (2009).</li><li>Mollenauer, S., Bryson, R., Robison, M., Phillips, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noise+avoidance+in+the+C57BL/6J+mouse.">Noise avoidance in the C57BL/6J mouse.</a> Animal Learning &amp; Behavior. 20 (1), 25-32 (1992).</li><li>Hersman, S., Allen, D., Hashimoto, M., Brito, S. I., Anthony, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulus+salience+determines+defensive+behaviors+elicited+by+aversively+conditioned+serial+compound+auditory+stimuli.">Stimulus salience determines defensive behaviors elicited by aversively conditioned serial compound auditory stimuli.</a> eLife. 9, (2020).</li><li>Dong, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+cortico-intrathalamic+circuit+for+flight+behavior.">A novel cortico-intrathalamic circuit for flight behavior.</a> Nature Neuroscience. 22 (6), 941-949 (2019).</li><li>Borkar, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+behavioral+responses+during+a+conditioned+flight+paradigm.">Sex differences in behavioral responses during a conditioned flight paradigm.</a> Behavioural Brain Research. 389, 112623 (2020).</li><li>Fadok, J. P., Markovic, M., Tovote, P., L&#252;thi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+on+central+amygdala+function.">New perspectives on central amygdala function.</a> Current Opinion in Neurobiology. 49, 141-147 (2018).</li><li>Pitman, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+studies+of+post-traumatic+stress+disorder.">Biological studies of post-traumatic stress disorder.</a> Nature Reviews Neuroscience. 13 (11), 769-787 (2012).</li><li>Canteras, N. S., Graeff, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Executive+and+modulatory+neural+circuits+of+defensive+reactions:+Implications+for+panic+disorder.">Executive and modulatory neural circuits of defensive reactions: Implications for panic disorder.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. , (2014).</li></ol>

Açıklanan ses ve şok parametreleri bu protokolün önemli unsurlarıdır. Bu nedenle, deneylere başlamadan önce şok genliği ve ses basıncı seviyesini test etmek önemlidir. Korku şartlandırma çalışmaları tipik olarak 70-80 dB ses basıncı seviyeleri ve 0.1-1 mA şok yoğunluğu18kullanır; bu nedenle, açıklanan parametreler geleneksel korku şartlandırma paradigmalarının sınırları içindedir. Önceki bir CS-only (ayakçık yok) kontrol deneyinde, farelerde uçuş veya donma...

Korku, acil bir tehdide evrimsel olarak korunmuş uyarlanabilir bir yanıttır1,2. Organizmalar bir tehdide doğuştan gelen savunma tepkilerine sahip olsa da, öğrenilen ilişkiler tehlikenin uyaranlarına uygun savunma tepkileri ortaya çıkarmak için çok önemlidir3. Savunma tepkilerini kontrol eden beyin devrelerindeki düzensizlik, travma sonrası stres bozukluğu (TSSB), panik bozukluk 4 ve spesifik fobiler5,6gibi birdenfazla zayıflatıcı anksiyete bozukluğu ile ilişkili maladaptif reaksiyonlara katkıda bulunma olasılığı yüksektir. Amerika Birleşik Devletleri'nde anksiyete bozukluklarında yaygınlık oranı yetişkinler için% 19.1 ve ergenlerde% 31.9'dur7,8. Bu hastalıkların yükü bireylerin günlük rutini üzerinde son derece yüksektir ve yaşam kalitelerini olumsuz yönde etkiler.
Son birkaç on yılda Pavlovian korku koşullandırması, korkuyla ilgili öğrenme ve hafızanın altında yatan sinirsel mekanizmalar hakkında muazzam bir fikir edinmek için güçlü bir model sistemi olarak hizmet etti9,10,11. Pavlovian korku şartlandırması, koşullandırılmış bir uyaranın (işitsel bir uyaran gibi CS) karşıt koşulsuz bir uyaranla (ABD; örneğin, bir elektrik ayağı)12. Donma, standart Pavlovian şartlandırma paradigmalarında uyandırılan ve ölçülen baskın davranış olduğundan, kaçış/uçuş tepkileri gibi aktif savunma davranışlarının sinir kontrol mekanizmaları büyük ölçüde keşfedilmemiştir. Önceki çalışmalar, tehdit yoğunluğuna, yakınlığa ve içeriğe bağlı olarak uçuş gibi farklı savunma davranışı biçimlerinin uyandırdığını göstermektedir13,14. Beynin farklı savunma davranışlarını nasıl kontrol ettiğini incelemek, korku ve anksiyete bozukluklarında düzensiz olan nöronal süreçlerin anlaşılmasına önemli ölçüde katkıda bulunabilir.
Bu kritik ihtiyacı gidermek için, donma15'e ek olarak uçuş ve kaçış atlayışları ortaya çıkan değiştirilmiş bir Pavlovian şartlandırma paradigması geliştirdik. Bu paradigmada, fareler saf bir tondan ve ardından beyaz gürültüden oluşan bir seri bileşik uyaran (SCS) ile şartlandırılmıştır. SCS'yi güçlü bir elektrikli ayakla eşleştirdikten iki gün sonra, fareler beyaz gürültü sırasında ton bileşenine ve uçuşa yanıt olarak donma sergiler. Koşullandırılmış dondurma ve uçuş davranışı arasındaki davranışsal anahtarlar hızlı ve tutarlıdır. İlginçtir ki, fareler uçuş davranışını yalnızca beyaz gürültü CS'i daha önce teslim edilen bir ayakla (koşullandırma bağlamı) aynı bağlamda sunulduğunda, ancak nötr bir bağlamda olmadığında sergiler. Bunun yerine, donma tepkileri bu nötr bağlamda baskındır ve tona kıyasla beyaz gürültüye yanıt olarak önemli ölçüde daha fazla donma seviyesine sahiptir. Bu, savunma tepki yoğunluğunu modüle etmedeki bağlamın rolü ve geleneksel tehdit koşullandırma paradigmalarında bulunan korkuya bağlı öğrenme ve bellekte bağlamsal bilgilerin düzenleyici rolü ile tutarlıdır16,17. Bu model, birden çok savunma davranışının içeriğe özgü bir şekilde doğrudan, konu içinde karşılaştırılmalarına izin verir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	
	<tbody>
		<tr >
			<td >Neutral context</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td >Plexiglass cylinder 30 X 30 cm&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fear conditioning box</td>
			<td >Med Associates, Inc.</td>
			<td >VFC-008</td>
			<td>25 X 30 X 35 cm dimentions</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Audio generator&#160;</td>
			<td >Med Associates, Inc.</td>
			<td >ANL-926&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Shocker</td>
			<td >Med Associates Inc.</td>
			<td >ENV-414S</td>
			<td>Stainless steel grid</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Speaker</td>
			<td >Med Associates, Inc.</td>
			<td >ENV-224AM</td>
			<td>Suitable for pure tone and white noise&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >C57/BL6J mice</td>
			<td >Jackson laboratory, USA</td>
			<td >664</td>
			<td>Aged 3-5 month</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cineplex software (Editor/ studio)</td>
			<td >Plexon</td>
			<td>CinePlex Studio v3.8.0</td>
			<td>For video tracking and behavioral scoring analysis</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MedPC software V</td>
			<td >Med Associates, Inc.</td>
			<td >SOF-736</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Neuroexplorer</td>
			<td >Plexon</td>
			<td ></td>
			<td>Used to extract the freezing data scored in PlexonEditor</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >GraphPad Prism 8</td>
			<td >GraphPad Software, Inc.</td>
			<td >Version 8</td>
			<td>Statistical analysis software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel pavlovian fear conditioning paradigm to study freezing and flight behavior

Korku ve anksiyete ile ilgili davranışlar bir organizmanın hayatta kalmasına önemli ölçüde katkıda bulunur. Bununla birlikte, algılanan tehdide karşı abartılı savunma yanıtları, AMERIKA Birleşik Devletleri'nde en yaygın akıl hastalığı şekli olan çeşitli anksiyete bozukluklarının karakteristiğidir. Savunma davranışlarından sorumlu nörobiyolojik mekanizmaların keşfedilmeleri, yeni terapötik müdahalelerin geliştirilmesine yardımcı olacaktır. Pavlovian korku şartlandırma, korkuya bağlı öğrenme ve hafızayı incelemek için yaygın olarak kullanılan bir laboratuvar paradigmasıdır. Geleneksel Pavlovian korku şartlandırma paradigmalarının önemli bir sınırlaması, donma izlenen tek savunma davranışıdır. Son zamanlarda, bireysel denekler içinde hem koşullandırılmış dondurma hem de uçuş (kaçış olarak da bilinir) davranışını incelememizi sağlayan değiştirilmiş bir Pavlovian korku şartlandırma paradigması geliştirdik. Bu model, daha yüksek yoğunluklu ayak depremleri ve koşullandırılmış uyaran ile koşulsuz uyaran arasında daha fazla sayıda eşleştirme istihdam eder. Ek olarak, bu şartlı uçuş paradigması, koşullandırılmış uyaran olarak saf ton ve beyaz gürültü işitsel uyaranların seri sunumunu kullanır. Bu paradigmadaki koşullandırmayı takiben, fareler ton uyaranlarına yanıt olarak donma davranışı ve beyaz gürültü sırasında uçuş tepkileri sergiler. Bu koşullandırma modeli, hayatta kalmak için gerekli davranışsal tepkiler arasındaki hızlı ve esnek geçişlerin incelenmesine uygulanabilir.

Diyagramda açıklandığı gibi (Şekil 1A), oturum ön maruz kalma (Gün 1), ardından korku koşullandırması (Gün 2 ve 3) ve ardından yok olma veya geri alma (Gün 4) ile başlar.
SCS'nin ön pozlama (Gün 1) oturumundaki sunumları farelerde uçuş veya donma tepkisi vermedi(Şekil 2A-2B). Koşullandırma sırasında davranışsal analiz (Gün 2 ve 3), SCS'nin ton bileşeninin SCS öncesi dönemde donmaya kıy...

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior Video at JoVE.com

A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior Video (Video) | JoVE

Savunma amaçlı davranışsal tepkiler tehdit yoğunluğuna, yakınlığa ve maruz kalma bağlamı üzerine kuruludur. Bu faktörlere dayanarak, bireysel deneklerde koşullandırılmış donma ve uçuş davranışı arasında net geçişler sağlayan klasik bir şartlandırma paradigması geliştirdik. Bu model anksiyete, panik ve travma sonrası stres bozukluklarında yer alan patolojilerin anlaşılması için çok önemlidir.

Donma ve Uçuş Davranışını İncelemek İçin Yeni Bir Pavlovian Korku Şartlandırma Paradigması

Fear- and anxiety-related behaviors significantly contribute to an organism&#8217;s survival. However, exaggerated defensive responses to perceived threat ...

Bu paradigmanın genel amacı kemirgenlerdeki karmaşık savunma davranışını değerlendirmektir. Bu protokol önemlidir, çünkü savunma davranışları arasındaki geçişlerle ilgili araştırmaları kolaylaştırır ve bu da onu tehdide karşı karmaşık uyarlanabilir yanıtları incelemek isteyen araştırmacılar için ideal hale getirir. Bu protokol, savunma yanıtları arasında geçiş sağlamak için geçici olarak hassas durum uyaranlarını kullanır ve bireysel denek içinde her ikisini de, koşullandırılmış donma ve uçuş davranışlarını incelememizi sağlar.Savunma davranışının mekanizmalarını ortaya çıkarmak için bu modeli kullanmak, TSSB ile ilgili işlev bozukluğu ve panik bozukluklar hakkında fikir verebilir ve yeni terapötiklerin geliştirilmesine yardımcı olabilir. Davranış protokollerini ayarlamak için, programda SCS'yi tanımlayın, uyaranları on saniyelik saf ton veya on saniyelik Beyaz Gürültü olarak ayarlayın ve her denemeyi takiben sahte rastgele sunulacak deneme aralıklarını tanımlayın. Yazılım izlemeyi ayarlamak için, ilgili her bağlamda bir test faresi yerleştirin, ağırlık merkezini tanımlayın ve kontur boyutunu ayarlayın.Kalibrasyon katsayısını belirlemek için odaların boyutunu ve kameranın piksel boyutlarını kullanın. Ardından, merkezi bilgisayarın olay işaretçilerini gerçek zamanlı oluşumlarıyla eşitlemek için TTL darbe kodunu oluşturun. Bir deneye başlamadan önce korku koşullandırma kutusu denetleyicisini, şoklayıcıyı ve video kayıt yazılımını açın.İşitsel uyaranların 75 desibelde teslimi için bağlamların üzerine bir tepegöz hoparlör takın ve önceden tanımlanmış bir programda işitsel uyaranlar oluşturmak için programlanabilir bir ses jeneratörü ayarlayın. Ton ve Beyaz Gürültü'nün işlevsel olduğunu doğruladıktan sonra, veri toplama sistemini ayarlayın ve üç ila beş aylık erkek veya dişi fareleri koşullandırma odasına taşıyın. Ön koşul denemesine başlamadan önce, Bağlam A odası olarak kullanılacak% 1 asetik asit ile 30 santimetre çapında, 30 santimetre yüksekliğinde açık silindirik pleksiglas bir oda temizleyin.Önkoşul için, fareyi Bağlam A'ya yerleştirin ve fareyi 90 saniyelik ortalama sözde rastgele deneme aralığına sahip dört 20 saniyelik SCS izine maruz bırakmadan önce üç dakika boyunca alışmasına izin verin. 10 dakikalık alışmadan sonra, bir fareyi Bağlam A odasına aktarın ve hemen korku koşullandırma sistemini ve veri toplama programlarını etkinleştirin. Bir korku şartlandırma deneyine başlamadan önce, bağlam B odası olarak kullanılacak% 70 etanollü bir elektrik şebekesi zemini ile en az 35 santimetre yüksekliğinde, 25'e 30 santimetre dikdörtgen bir muhafaza temizleyin.Ardından, şoklayıcıyı Bağlam B odasının elektrik şebekesi zeminine bağlayın ve uygun bilgisayar programındaki şokların sıklığını, başlangıcını ve süresini tanımlayın. Tüm parametreler ayarlandığında, şok yoğunluğunun hem şok edici hem de ızgara zeminden düzgün bir şekilde teslim edildiğinden emin olun. İkinci ve üçüncü günlerde, hayvanı bir saniye, 0,9 miliamp AC ayak şoku ve 120 saniyelik ortalama deneme aralığı ile birlikte sonlandırırken SCS'nin beş eşleşmesine maruz kalmadan önce fareyi üç dakika boyunca Bağlam B odasına yerleştirin.Oturumun sonunda, fareyi ev kafesine geri koyun. Deneyin amacına bağlı olarak, hayvanları bir Geri Çağırma oturumuna tabi etmek için, dördüncü günde, fareyi, hayvanın Korku Hatırlama yanıtını test etmek için 590 saniye boyunca 90 saniyelik ortalama sözde rastgele deneme aralığı ile ayak şoku olmadan dört SCS denemesi sunmadan önce üç dakika boyunca Bağlam A odasına yerleştirin. Veya, Fear Extinction için test etmek için, dördüncü günde, fareyi, hayvanı 1,910 saniyelik bir süre boyunca 90 saniyelik ortalama sözde rastgele deneme aralığı ile ayak şoku olmadan 16 SCS denemesine tabi tutmadan önce üç dakika boyunca Bağlam B odasına yerleştirin.Farenin davranışını ölçmek için, deneyin sonunda, analize kör bir gözlemciye sahip olun, otomatik dondurma dedektörü eşiğini kullanarak donma davranışı için kaydedilen videoları puanladı ve ardından piksel değişikliklerinin kare kare analizi yapıldı. Dondurmayı, en az bir saniye solunum için gerekli olanlar dışında, bedensel hareketlerin tamamen durması olarak tanımlayın. Dört pençenin de zeminden ayrılmasıyla dikey ve/veya yatay bir hareketle sonuçlanan bir örnek olarak bir sıçrama puanlayın.Tüm segment analiz edildiğinde, işaretli dosyayı dondurma, atlama ve olay işaretçileriyle dışa aktarın ve ilgili olayları tanımlanan zaman dilimlerinden bir elektronik tabloya ayıklayın. Dondurma süresini hesaplamak için, ilgili her deneme döneminin bitiş saatinden başlangıç saatini çıkarın. Belirli bir deneme süresinden toplam atlama sayısını toplayın.Farenin hızını hesaplamak için, farenin ağırlık merkezinin kare kare XY ekseni hareketinden koordinatları izleyin. Uçuş puanlarını hesaplamak için, her SCS sırasındaki ortalama hızı on saniyelik SCS öncesi ortalama hıza bölün ve her kaçış atlayışı için bir puan ekleyin. Bir uçuş puanı, SCS öncesi dönemden itibaren uçuş davranışında bir değişiklik olmadığını gösterir.Daha sonra, uygun bir istatistiksel analiz yazılım programı kullanarak istatistiksel öneme sahip verileri analiz edin. Ön pozlama oturumundaki SCS sunumları farelerde uçuş veya donma tepkileri ortaya çıkmaz. Koşullandırma sırasında yapılan davranışsal analiz, SCS'nin Ton bileşeninin SCS öncesi dönemde donmaya kıyasla donma olasılığını önemli ölçüde artırdığını ortaya koymaktadır.Uçuş puanları seanslar arasında önemli ölçüde değişti ve fareler Ton işaretine kıyasla Daha yüksek hızlar ve Beyaz Gürültü işaretine daha fazla sıçrama sergiliyor. Fareler, Ton sırasında daha düşük uçuş puanları ve Beyaz Gürültü sırasında daha yüksek uçuş puanları sergileyen ve donma yanıtları için tam tersi gözlemlenen açık bir savunma davranışı geçişi gösterir. 16 yok olma eğitimine tabi tutulan fareler, ton işaretine kıyasla Beyaz Gürültü sırasında daha yüksek ölçümler yapılan dört denemenin ilk bloğu sırasında dövüş puanları ile koşullu uçuşun hızlı bir şekilde yok olduğunu göstermektedir.Yok olma seansının sonunda, uçuş davranışı artık her iki işaret tarafından da ortaya çıkarılıyor. Tona donmak, yok olma sırasında dört denemenin ilk bloğu için Beyaz Gürültü'ye donmaktan önemli ölçüde daha yüksektir. Ton kaynaklı donma, 16 yok olma denemesinde azalırken, Beyaz Gürültü aracılı donmada bir artış gözlenmektedir.Geri Çağırma oturumunda, uçuş puanları birin altında olduğu için nötr bir bağlamda Beyaz Gürültüye maruz kalmak uçuşa neden olmaz. Bunun yerine, nötr bağlamdaki Beyaz Gürültü sunumları, Ton tarafından ortaya çıkanlardan daha yüksek donma tepkileri ortaya çıkarır. Bağlamı boyunca temizlemek önemlidir ve bir deneye başlamadan önce şok genliği ve ses basıncı seviyesini test etmek önemlidir.Bu paradigma şu anda savunma davranışının karmaşıklığını anlamakla ilgilenen gruplar tarafından kullanılmaktadır ve savunma eylemi seçimi anlayışımızı ilerletmek için kullanılabilir.

Research

JoVE Journal

Behavior

A Novel Pavlovian Fear Conditioning Paradigm to Study Freezing and Flight Behavior

The Resident-intruder Paradigm: A Standardized Test for Aggression, Violence and Social Stress

The Resident-intruder Paradigm: A Standardized Test for Aggression, Violence and Social Stress Video (Video) | JoVE

Resident-saldırgan Paradigma: Saldırganlık, Şiddet ve Sosyal Stres için Standart Test

This video publication explains in detail the experimental protocol of the resident-intruder paradigm in rats. This test is a standardized method to ...

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice Video (Video) | JoVE

Farelerde Video Analiz Sistemi kullanma ve bağlamsal cued Korku Klima Testi

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Trace Fear Conditioning in Mice

Trace Fear Conditioning in Mice Video (Video) | JoVE

Farelerde Korku Yastıkları Trace

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats Video (Video) | JoVE

Usulü Sıçanlar Pavlovyan klimalı Alkol arayan Davranış Bağlam kaynaklı Yenileme İnceleyecek

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Using the Threat Probability Task to Assess Anxiety and Fear During Uncertain and Certain Threat

Using the Threat Probability Task to Assess Anxiety and Fear During Uncertain and Certain Threat Video (Video) | JoVE

Tehdit Olasılık Görevi kullanma Belirsiz ve belirli Tehdit sırasında Anksiyete ve Korku değerlendirin

Fear of certain threat and anxiety about uncertain threat are distinct emotions with unique behavioral, cognitive-attentional, and neuroanatomical ...

A Cognitive Paradigm to Investigate Interference in Working Memory by Distractions and Interruptions

A Cognitive Paradigm to Investigate Interference in Working Memory by Distractions and Interruptions Video (Video) | JoVE

Bir Bilişsel Paradigma Dikkatiniz ve kopukluklar tarafından çalışma hafızasındaki Girişim Araştırma

Goal-directed behavior is often impaired by interference from the external environment, either in the form of distraction by irrelevant information that ...

How to Study Placebo Responses in Motion Sickness with a Rotation Chair Paradigm in Healthy Participants

How to Study Placebo Responses in Motion Sickness with a Rotation Chair Paradigm in Healthy Participants Video (Video) | JoVE

Sağlıklı Katılımcılar bir Rotasyon Başkanı Paradigma Hareket Hastalığı Placebo Cevapları Eğitim Nasıl

Placebo responses occur in every medical intervention when patients or participants expect to receive an effective treatment to relieve symptoms. However, ...

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats Video (Video) | JoVE

Sıçanlar Pavlovyan Koúullanmıú Yaklaşım Eğitimi

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the ...

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder Video (Video) | JoVE

Stres gelişmiş korku öğrenme, travma sonrası stres bozukluğu güçlü bir kemirgen modeli

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders ...

Visual Classical Conditioning in Wood Ants

Visual Classical Conditioning in Wood Ants Video (Video) | JoVE

Ahşap karıncalar görsel klasik koşullanma

Several species of insects have become model systems for studying learning and memory formation. Although many studies focus on freely moving animals, ...