Name: measuring naturally acquired phagocytosis-inducing antibodies to plasmodium falciparum parasites by a flow cytometry-based assay
Uploaded: 2020-08-06T16:20:00
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마이켄 비스티는 우수한 기술 지원에 감사드립니다. 이 작품은 부분적으로 덴마크 외교부로부터 보조금(MAVARECA II; 17-02-KU)에 의해 지원되었으며 다니다 펠로우십 센터가 관리했습니다. 펀더는 연구 설계, 데이터 수집 및 분석, 출판 결정 또는 원고 작성에 아무런 역할이 없었습니다.

여기에 제시된 결과에 사용되는 인간 혈청 샘플은 별도의연구(19)에서수집되었다. 수집은 가나 대학 의학 연구를위한 노구치 기념 연구소의 기관 검토 위원회에 의해 승인되었다 (연구 038/10-11), 지역 연구 윤리위원회에 의해, 덴마크의 수도 지역 (프로토콜 H-4-2013-083).
1. 기생충 문화
참고: 인간 병원균 취급에 대한 현지 규정을 따릅니다.</p...

<ol>
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P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+in+children+with+malaria+to+PfEMP1,+RIFIN+and+SURFIN+expressed+at+the+Plasmodium+falciparum+parasitized+red+blood+cell+surface.">Antibodies in children with malaria to PfEMP1, RIFIN and SURFIN expressed at the Plasmodium falciparum parasitized red blood cell surface.</a> Scientific Reports. 8 (1), 3262 (2018).</li><li>Hommel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+antibody+functional+activity+and+strain-specificity+of+vaccine+candidates+for+malaria+in+pregnancy+using+in+vitro+phagocytosis+assays.">Evaluating antibody functional activity and strain-specificity of vaccine candidates for malaria in pregnancy using in vitro phagocytosis assays.</a> Parasites &amp; Vectors. 11 (69), 1-7 (2018).</li><li>Ampomah, P., Stevenson, L., Ofori, M. 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Part I. Learner's Guide.</a> World Health Organization. , (1991).</li><li>Tsuchiya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+characterization+of+a+human+acute+monocytic+leukemia+cell+line+(THP-1).">Establishment and characterization of a human acute monocytic leukemia cell line (THP-1).</a> International Journal of Cancer. Journal International Du Cancer. 26 (2), 171-176 (1980).</li><li>Fleit, H. B., Kobasiuk, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+monocyte-like+cell+line+THP-1+expresses+FcyRl+and+Fc'yRIl.">The human monocyte-like cell line THP-1 expresses FcyRl and Fc'yRIl.</a> Journal of Leukocyte Biology. 49, 556-565 (1991).</li><li>Auwerx, J., Staels, B., Van Vaeck, F., Ceuppens, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+IgG+Fc+receptor+expression+induced+by+phorbol+12-myristate+13-acetate+treatment+of+THP-1+monocytic+leukemia+cells.">Changes in IgG Fc receptor expression induced by phorbol 12-myristate 13-acetate treatment of THP-1 monocytic leukemia cells.</a> Leukemia research. 16 (3), 317-327 (1992).</li><li>Ata&#237;de, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+an+improved+phagocytosis+assay+to+evaluate+the+effect+of+HIV+on+specific+antibodies+to+pregnancy-associated+malaria.">Using an improved phagocytosis assay to evaluate the effect of HIV on specific antibodies to pregnancy-associated malaria.</a> PloS One. 5 (5), 10807 (2010).</li></ol>

여기서 제시된 프로토콜은 이전에 기술및 THP-1 세포에 의한 편화 및 식세포증을 유도하기 위해 P. falciparum IEs의 표면을 표적으로 하는 항체의 용량을 측정하기 위하여12,,15,,17,,31을 이용하였다. 여기에 제시 된 결과는 P. falciparum 풍토성 지역에 사는 여성의 플라즈마 / 혈청에서 VAR2CSA 특정 ...

말라리아는 플라스모듐속의 5개의 다른 종을 가진 감염시 인간에서 생기는 벡터 매개 질병입니다. 가장 널리 퍼진 종은 P. falciparum,또한 가장 이환율과 사망률에 대 한 책임은1. 말라리아 임상 프리젠 테이션은 무증상 또는 양성 감염에서 복잡 / 심한 질병에 이르기까지 다양하며, 후자는 5 세 미만의 어린이에서 주로 발생합니다. P. falciparum에 노출은 멸균 면역을 유도하지 않습니다, 그러나 풍토성 지역에 사는 개별은 천천히 임상 질병에 대하여 면역을 개발합니다. 보호는 나이/노출에 따라 다르며 면역은 일반적으로 생활의 첫번째 5-10 년 도중취득됩니다 2. 성인 여성은 태반 말라리아 (PM)로 알려진 임상 프리젠 테이션에서 임신 중에 심각한 말라리아가 발생할 수 있기 때문에 중요한 예외입니다. PM은 낙태, 사산, 조산, 저출산, 태아 사망 및 모계 빈혈의 중요한 원인입니다. PM에 대한 저항은 연속 임신3을통해 개발됩니다. PM으로부터의 보호는 VAR2CSA 형 PfEMP14,5,5콘드로이틴 황산염 A(CSA)에 결합하는 감염된 적혈구(IE) 표면 항원에 대한 항체의 획득과 관련이 있어 태반에서 IE 격리를 가능하게 한다. 항체 중재 보호는 phagocytosis를 유도하기 위하여 IEs의 편화를 포함하여 각종 기능적 활동(6,,7에서검토)를 능력을 발휘합니다. 초기 시험관내 연구는 항체가 phagocytosis 를 통해 단핵구의 존재에 있는 P. falciparum 성장을 제한할 수 있다는 것을 보여주었다8,,9. 최근 연구에 따르면 식세포증유도 항체의 높은 수준은 더 나은 임신 결과(HIV 공동 감염의 맥락에서)10,,11로자연적으로 획득된 면역 반응에서 이 이펙터 기능의 관련성을 나타내는 것으로 나타났습니다.
여기서 우리는 단핵선 THP-1과 함께 VAR2CSA를 발현하는 체외 배양 IE를 사용하여 인간 플라즈마/혈청에 존재하는 항체의 이 기능을 측정하는 프로토콜을 제시한다. 분석법은,이전에11, 12,,1214,13,15,,15,16,17,,18을 사용했으며, 항체의 작은 볼륨을 사용하여 한 번의 실행에서 더 많은 수의 항체 시료를 테스트하고 지루하고 편향된 현미경 검사세계산을 피할 수 있기 때문에 이전 현미경 기반 프로토콜8에비해 개선되고 쉬운 접근법으로 간주됩니다. 분석이 여러 실험실에서 사용되었으며 실행은 충분히 간단하지만 신중한 계획과 준비가 필요하므로 상세한 프로토콜은 이전 경험이 부족한 실험실 및 연구자들에 의한 응용 프로그램을 허용합니다. 우리는, 예를 들어, VAR2CSA를 발현하는 말기 동기화 IEs를 사용하여 자연스럽게 PM 특이적 면역을 획득한 여성으로부터 수집된 혈청에 존재하는 항체로 오손화됩니다. 그러나, 프로토콜은 자연 노출에 의해 유도되거나 예방 접종에 의해 유도되든 IE 표면에 존재하는 모든 기생충 항원에게 항체의 기능을 분석하기 위해 쉽게 변형될 수 있다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>96 well cell culture plates, round bottom with lid</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3799</td>
			<td>Any similar plate can be used, make sure it is compatible with the flow cytometer instrument you intend to use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AlbuMAX-II</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11021-037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AlbuMAX-II (5%)</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>5% AlbuMAX-II (Gibco, 11021-037), 0.2g/L hypoxanthine (Sigma, H9377) in RPMI1640 (Sigma, R5886)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Red Blood Cells antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab34858</td>
			<td>Prepare 2&#65533;&#65533;l aliquots and freeze a -20&#176;C. Use one aliquot per experiment.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8622</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynabeads Protein G</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>10003D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethidium bromide solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E1510</td>
			<td>Prepare a stock solution at 0.1mg/mL in RPMI1640 (R5886). Store protected from light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FC500 flow cytometer</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td></td>
			<td>Any flow cytometer supporting 96 well plate format and having the appropriate lasers/filters to measure EtBr fluorescence can be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10099-141</td>
			<td>Heat inactivate before use.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC mouse anti-human CD16</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555406 or 556618</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC mouse anti-human CD32</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>552883</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC mouse anti-human CD64</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555527</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlowLogic software</td>
			<td>Inivai technologies</td>
			<td></td>
			<td>Any flow cytometry analysis can be used, for example FlowJo or Winlist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin (10mg/mL)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G1272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypoxanthine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine (200mM)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lysing solution</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>15mM NH4Cl, 10mM NaHCO3, 1mM EDTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MACS CS-column and accesories</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-041-305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parasite culture medium</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>2mM L-glutamine (Sigma, G7513), 50&#181;g/mL Gentamicin (Sigma, G1272), 0.5% AlbuMAX-II (AlbuMAX-II 5%) in RPMI1640 (Sigma, R5886)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin (10000U and 10mg/mL)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P0781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 medium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R5886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>THP-1 culture medium</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>10%FBS (Gibco, 10099-141), 2mM L-glutamine (Sigma, G7513), 100U/mL Penicillin, 0.1mg/mL Streptomycin (Sigma, P0781) in RPMI1640 (Sigma, R5886)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vario MACS magnet</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring naturally acquired phagocytosis-inducing antibodies to plasmodium falciparum parasites by a flow cytometry-based assay

이 프로토콜은 VAR2CSA에 특이적으로 획득한 IgG 항체에 의해 불투명화된 플라스모듐 팔시파룸-감염된적혈구(IEs)의 유동 세포측정 기반 phagocytosis 분석법을 설정하고 실행하는 방법을 설명합니다. VAR2CSA는 태반 말라리아 (PM)라고 불리는 임산부에서 심각한 형태의 말라리아를 일으킬 수있는 태반에서 IEs의 선택적 격리를 매개하는 기생충 항원입니다. PM으로부터의 보호는 태반 격리를 억제하고/또는 phagocytosis에 대한 IEs를 오손화하여 기능하는 것으로 여겨지는 VAR2CSA 특이적 항체에 의해 매개됩니다. 분석은 VAR2CSA, 자연스럽게 획득된 PM 특이적 면역을 가진 여성의 플라즈마/혈청 항체, 그리고 식세포주 THP-1을 발현하기 위해 시험관에서 선택된 후기 단계 동기화 IE를 채용한다. 그러나, 프로토콜은 자연 노출에 의해 유도되거나 예방 접종에 의해 유도되든 IE 표면에 존재하는 모든 기생충 항원에게 항체의 기능을 분석하기 위해 쉽게 변형될 수 있다. 분석은 말라리아에서 항체 매개 면역의 중요한 기능적 측면의 좋은 재현성을 가진 간단하고 높은 처리량 평가를 제공합니다. 따라서, P. falciparum 말라리아에 임상 면역을 평가할 때 유용, 열대에서 이환율과 사망의 주요 원인, 특히 사하라 사막 이남의 아프리카에서.

여기서 는 이전에 기재된 프로토콜(31)을 상세히 제시하고,31 11,12,,,13,14,,15, 16,,16,17,,18을 사용하여 THP-1 세포에 의한 opsonization 및 phagocytosis를 유도하기 위해 P. falciparum IEs?...

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Measuring Naturally Acquired Phagocytosis-Inducing Antibodies to Plasmodium falciparum Parasites by a Flow Cytometry-Based Assay

이 프로토콜의 전반적인 목표는 Plasmodium falciparum 감염에 자연적으로 드러나는 개인의 혈장 또는 혈장에 존재하는 항체의 용량을 측정하는 방법에 대한 지침을 제공하여 기생충에 감염된 적혈구 (IEs)의 phagocytosis를 opsonize 및 유도하는 것입니다.

유동 세포측정 기반 분석체에 의한 플라스모듐 팔시파룸 기생충에 자연적으로 획득된 식세포증-유도 항체 측정

The protocol describes how to set up and run a flow cytometry-based phagocytosis assay of Plasmodium falciparum-infected erythrocytes (IEs) opsonized by ...

이 프로토콜은 플라스모듐 falciparum 감염 한 적혈구의 phagocytosis를 opsonize 및 유도 하는 항체의 능력을 측정 할 수 있습니다. 기생충 감염에 자연적으로 노출된 개인의 혈청에 존재하는 항체뿐만 아니라 기생충 항원으로 예방 접종에 의해 유도된 항체는 시험될 수 있다. 나와 함께 절차를 시연하는 것은 마이켄 비스티, 내 실험실에서 기술자가 될 것입니다.식세포 분석에 대한 THP-1 세포 배양을 설정하기 위해, 실험 전날 은 25센티미터 제곱 배양플라스크로 세포를 시드하고 THP 1 세포 배양 배지에서 밀리리터 당 5세포당 2.5배 10배의 농도를 시드한다. 실험 당일, 실험 블록 1시간 전부터 PBS에서 멸균 2%FBS 150마이크로리터를 갖춘 96웰 플레이트를 원형 바닥으로 차단한다. 중후반-투류좀에 감염된 적혈구 수확 및 정제를 위해, 기생충 배양 배지의 10밀리리터에서 포장된 P 팔시파룸 기생충 배양의 약 1.2 밀리리터를 준비하고, 적어도 5%의 기생충증을 가지고 자기 기둥에 추가한다.기생충 배양 배지의 50 밀리리터로 컬럼을 세척하십시오. 감염된 적혈구를 털어내려면 자석에서 컬럼을 제거하고 기생충 배양 배지의 50 밀리리터로 세척합니다. 그런 다음, 원심분리에 의해 감염된 적혈구를 수집하고 계산을 위한 신선한 기생충 배양 배지의 1밀리리터에서 펠릿을 재중단한다.정제된 에리스로세포 현탁액을 에티듐 브로마이드를 함유하는 기생충 배양 배지에서 밀리리터당 7번째 세포에 3.3배 10배, 밀리리터당 2.5 마이크로그램의 최종 농도로 조정한다. 다음으로 플레이트를 폐기물 용기에 밀어 넣음으로써 96웰 플레이트 1개에서 블로킹 용액을 제거합니다. 그런 다음 종이 타월위에 초과물을 제거하고 에티듐 브로마이드 라벨 감염 된 적혈구 현탁액의 30 마이크로 리터를 접시의 상부 절반에 있는 모든 우물을 제외한 모든 사람에게 추가하십시오.빈 우물에 기생충 배양 매체 30 마이크로리터를 추가하고, 빛으로부터 보호되는 실온에서 10분 동안 플레이트를 배양합니다. 인큐베이션의 끝에서, 각 우물에 기생충 배양 배지의 170 마이크로리터를 추가하고 원심분리에 의해 플레이트의 바닥에 감염된 적혈구를 퇴적한다. 플레이트를 폐기물 용기에 밀어 넣는 것으로 상체를 제거하고, 에티듐 브로마이드 라벨에 감염된 적혈구를 두 번 더 세척하고, 200 마이크로리터의 기생충 배양 배지를 잘 세척하여 방금 입증하였다.두 번째 세척 후, 여러 채널 파이펫을 사용하여 펠릿을 방해하지 않고 각 우물에서 전체 체적을 조심스럽게 제거합니다. 그리고 이전에 기생충 배양 배지에서 제조된 적절한 제어 및 테스트 샘플을 포함하여 항체 용액의 30 마이크로리터에서 브로마이드 표지된 에티듐 브로마이드 표지된 에티듐을 재중단한다. 그런 다음, 빛으로부터 보호, 45 분 동안 섭씨 37도에 접시를 배치합니다.감염된 적혈구가 전이되는 동안, 원심분리에 의해 THP-1 세포를 수집하고, 신선한, 미리 따뜻워진 THP-1 세포 배양 배지의 12 밀리리터에서 펠릿을 재중단한다. 두 번째 원심분리 후, THP-1 세포 배양 배지의 1밀리리터에서 펠릿을 재보중단하고, THP-1 세포 배양 배지에서 밀리리터당 5배 10까지 세포 농도를 조절한다. 두 번째 96웰 플레이트에서 차단 용액을 제거하고 각 웰에 100 마이크로리터의 THP-1 셀을 추가합니다.그런 다음, 세포 배양 인큐베이터에 플레이트를 놓는다. 편손화 인큐베이션의 끝에서, 편화 플레이트의 각 웰에 기생충 배양 배지의 170 마이크로리터를 추가하고, 감염된 적혈구를 원심분리에 의해 플레이트 의 바닥에 침전물을 첨가한다. 2차 세척 후 상류제를 조심스럽게 제거하기 위해 다중 채널 파이펫을 사용하여 잘 당 200 마이크로리터의 기생충 배양 배지로 안진 감염된 적혈구를 두 번 세척합니다.전동된 THP-1 세포 배양 배지의 100마이크로리터에서 opsonized 감염된 적혈구를 재중단하고, 각 opsonized 감염된 적혈구 현탁액의 50 마이크로리터를 phagocytosis 플레이트에 상응하는 우물로 이송한다. 모든 세포가 첨가되면, 세포 배양 인큐베이터에 플레이트를 40분 이상 배치하여 빛으로부터 보호합니다. 인큐베이션이 끝나면 섭씨 4도에서 원심분리로 식세포증을 중지하십시오.상체를 제거하고 150 마이크로리터의 실온 염화 용액으로 펠릿을 잘 제거합니다. 정확히 3 분 후, 용액을 중지PBS에서 2 %FBS에서 얼음 차가운 100 마이크로 리터를 추가하고, 원심 분리에 의해 그대로 세포를 퇴적. 다음으로, 세척당 PBS에서 신선한 얼음 차가운 2%FBS 200 마이크로리터로 셀을 세 번 씻습니다.마지막 세척 후, 잘 당 PBS에서 신선한 얼음 차가운 2 %의 마이크로 리터 200 마이크로 리터에 세포 펠릿을 다시 중단합니다. 유동 세포측정습 및 분석을 위해, 즉시 세포를 유동 세포계에 적재하고, THP-1 세포를 게이트하기 위해 감염된 적혈구없이 우물에 대한 선형 전방 대 선형 측면 산란 플롯을 사용합니다. 이 게이트에서 10, 000개의 이벤트를 획득하고, 에디듐 브로마이드 형광 강도를 측정하기 위해 히스토그램 플롯을 설정하는 포지티드 컨트롤로 편손화된 감염된 적혈구를 가진 THP-1 세포를 사용한다.분석을 위해, 감염된 적혈구없이 우물에 대한 선형 전방 및 선형 측 산란 플롯을 열고 THP-1 세포를 게이트한다. 그런 다음, FL-3 히스토그램에 양성 게이트를 설정하고 이 게이트를 다른 모든 샘플 우물에 복사하여 에티듐 브로마이드 양성 THP-1 세포의 백분율을 결정한다. 시험된 각 샘플에 대해, phagocytosis는 절대값으로 또는 양극을 최대로 사용하여 백분율로 계산된 상대식세포증으로 보고될 수 있다.THP-1 세포는 혈류 세포측정에 의한 FC 감마 수용체 표면 발현을 주기적으로 검사해야 한다. 셀은 CD16에 대해 음수이어야 하며 CD32 및 CD64에 대해 양수여야 합니다. 이러한 편화 실험에서 THP-1 세포는 그들의 전방 및 측면 산란 프로파일에 따라 먼저 문이 되었고, 에티듐 브로마이드 표시 세포의 백분율의 정량화를 허용하고, 적어도 하나의 항체가 감염된 적혈구를 opsonized한 세포를 나타낸다.음의 대조군 샘플은 모두 FL3 채널에서 단일 음수 피크를 생성해야 하며, 에티듐 브로마이드 마커에서 관찰되는 이벤트가 거의 없습니다. 따라서, 평균 식세포값은 절대에티듐 브로마이드 양성 THP-1 세포와 상대식세포 백분율로 매우 낮아야 한다. 대조적으로, 양수 제어는 두 개의 피크, 음수 피크 및 에티듐 브로마이드 마커 내에 있는 명확하고 양수적이고 잘 분리된 피크로 흔적을 생성해야 합니다.평균 phagocytosis 값은 일반적으로 말라리아 노출된 여성 수영장 및 단 하나 말라리아 노출 여자 통제에 선행된 긍정적인 통제를 위해 일반적으로 최고입니다. 이 방법론은 일관된 결과를 생성하지만 조정된 선의 경사 계수의 편차가 관찰되었습니다. 따라서 상대값의 사용은 특히 단일 실험에서 모든 샘플을 실행할 수 없는 경우에 권장됩니다.사전에 실험을 미리 계획하여 THP-1 세포와 기생충을 모두 준비하고, 80% 이상의 순도를 가진 트로포세포만을 사용하여, 실험의 품질을 평가하고 데이터 분석을 용이하게 하기 위해 항상 적절한 컨트롤을 포함해야 한다.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measuring Naturally Acquired Phagocytosis-Inducing Antibodies to Plasmodium falciparum Parasites by a Flow Cytometry-Based Assay

Selection of Plasmodium falciparum Parasites for Cytoadhesion to Human Brain Endothelial Cells

Selection of Plasmodium falciparum Parasites for Cytoadhesion to Human Brain Endothelial Cells

선정 Plasmodium falciparum</em인간 두뇌 내피 세포 Cytoadhesion위한> 기생충

Most human malaria deaths are caused by blood-stage Plasmodium falciparum parasites. Cerebral malaria, the most life-threatening complication of the ...

연구

면역학 및 감염병학

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

<em&gt; 체외에서</em공부하기&gt; 공동 감염 모델<em&gt; Plasmodium falciparum</em인간의 기본 단핵구 파생 면역 세포에서&gt; - HIV-1 상호 작용

Plasmodium falciparum, the causative agent  of the deadliest form of malaria, and human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) are among the most important ...

A Simple Protocol for Platelet-mediated Clumping of Plasmodium falciparum-infected Erythrocytes in a Resource Poor Setting

A Simple Protocol for Platelet-mediated Clumping of Plasmodium falciparum-infected Erythrocytes in a Resource Poor Setting

의 혈소판 응집 중재를위한 간단한 프로토콜<em&gt; 변형체 falciparum의</em자원별로 설정에서&gt; - 감염된 적혈구

P. falciparum causes the majority of severe malarial infections. The pathophysiological mechanisms underlying cerebral malaria (CM) are not fully ...

Separation of Plasmodium falciparum Late Stage-infected Erythrocytes by Magnetic Means

Separation of Plasmodium falciparum Late Stage-infected Erythrocytes by Magnetic Means

의 분리<em&gt; Plasmodium falciparum</em자기 수단으로&gt; 늦은 단계에 감염된 적혈구

Unlike other Plasmodium species, P. falciparum can be cultured in the lab, which facilitates its study 1. While the parasitemia achieved can reach the ...

High Yield Purification of Plasmodium falciparum Merozoites For Use in Opsonizing Antibody Assays

High Yield Purification of Plasmodium falciparum Merozoites For Use in Opsonizing Antibody Assays

높은 수익률 정화<em&gt; 변형체 falciparum의</emOpsonizing 항체 분석 실험에 사용하기 위해&gt; Merozoites

Plasmodium falciparum merozoite antigens are under development as potential malaria vaccines. One aspect of immunity against malaria is the removal of ...

In Vivo Assessment of Rodent Plasmodium Parasitemia and Merozoite Invasion by Flow Cytometry

In Vivo Assessment of Rodent Plasmodium Parasitemia and Merozoite Invasion by Flow Cytometry

유동 세포 계측법에 의해 쥐 말라리아 기생충의 생체 내 평가와 Merozoite 침공

During blood stage infection, malaria parasites invade, mature, and replicate within red blood cells (RBCs). This results in a regular growth cycle and an ...

Methods to Investigate the Regulatory Role of Small RNAs and Ribosomal Occupancy of Plasmodium falciparum

Methods to Investigate the Regulatory Role of Small RNAs and Ribosomal Occupancy of Plasmodium falciparum

방법은 작은 RNA를과의 리보솜 점유 규제 역할을 조사하기 위해<em&gt; 말라리아 원충</em

The genetic variation responsible for the sickle cell allele (HbS) enables erythrocytes to resist infection by the malaria parasite, P. falciparum. The ...

Flow Cytometry-based Assay for the Monitoring of NK Cell Functions

흐름 NK 세포의 기능을 모니터링 분석을 기반 세포 계측법

Natural killer (NK) cells are an important part of the human tumor immune surveillance system. NK cells are able to distinguish between healthy and ...

Assessing Retinal Microglial Phagocytic Function In Vivo Using a Flow Cytometry-based Assay

Assessing Retinal Microglial Phagocytic Function In Vivo Using a Flow Cytometry-based Assay

망막 미세 아교 식세포의 기능을 평가<em&gt; 생체</em&gt;은 유동 세포 계측법 기반 분석을 사용하여

Microglia are the tissue resident macrophages of the central nervous system (CNS) and they perform a variety of functions that support CNS homeostasis, ...

A Flow Cytometry-Based Cytotoxicity Assay for the Assessment of Human NK Cell Activity

인간 NK 세포 활동의 평가 대 한 흐름 Cytometry 기반 세포 독성 분석 실험

Within the innate immune system, effector lymphocytes known as natural killer (NK) cells play an essential role in host defense against aberrant cells, ...