Name: super-resolution live cell imaging of subcellular structures
Uploaded: 2021-01-13T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Super-Resolution Live Cell Imaging of Subcellular Structures at JoVE.com

Forfatterne vil gerne takke Integrated Imaging Core facilitet på Johns Hopkins University for mikroskoper og dataanalyse software. Vi takker J. Snedeker og Q. E. Yu for korrekturlæsning og forslag, og X.C. lab medlemmer for nyttige diskussioner og forslag. Støttet af NIGMS/NIH R35GM127075, Howard Hughes Medical Institute, David og Lucile Packard Foundation og Johns Hopkins University startfonde (X.C.).

1. Forberedelse af levende celle billeddannelse cocktail (levende celle medier)
<ol><li>Supplere Schneider's Drosophila medium med 15% føtal kvæg serum (FBS) og 0,6x penicillin / streptomycin. PH-vinduet justeres til ca. 7,0.</li>
	<li>Lige før du bruger mediet, tilsættes insulin til en endelig koncentration på 200 μg/mL. BEMÆRK: Dette medie er afgørende for at opretholde normal celledeling og udvikling af Drosophila-testis under time-lapse imaging10,<sup ...

<ol>
	<li>Breedijk, R. M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+live-cell+super-resolution+technique+demonstrated+by+imaging+germinosomes+in+wild-type+bacterial+spores.">A live-cell super-resolution technique demonstrated by imaging germinosomes in wild-type bacterial spores.</a> Scientific Reports. 10 (1), 5312 (2020).</li><li>Maddox, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+the+mitotic+spindle.">Imaging the mitotic spindle.</a> Methods in Enzymology. 505, 81-103 (2012).</li><li>Frigault, M. M., Lacoste, J., Swift, J. L., Brown, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-cell+microscopy+-+tips+and+tools.">Live-cell microscopy - tips and tools.</a> Journal of Cell Science. 122 (6), 753-767 (2009).</li><li>Bates, M., Jones, S. A., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stochastic+optical+reconstruction+microscopy+(STORM):+A+method+for+super+resolution+fluorescence+imaging.">Stochastic optical reconstruction microscopy (STORM): A method for super resolution fluorescence imaging.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2013 (6), 075143 (2013).</li><li>Shroff, H., Galbraith, C. G., Galbraith, J. A., Betzig, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-cell+photoactivated+localization+microscopy+of+nanoscale+adhesion+dynamics.">Live-cell photoactivated localization microscopy of nanoscale adhesion dynamics.</a> Nature Methods. 5 (5), 417-423 (2008).</li><li>Vicidomini, G., Bianchini, P., Diaspro, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=STED+super-resolved+microscopy.">STED super-resolved microscopy.</a> Nature Methods. 15 (3), 173-182 (2018).</li><li>Huff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Airyscan+detector+from+ZEISS:+confocal+imaging+with+improved+signal-to-noise+ratio+and+super-resolution.">The Airyscan detector from ZEISS: confocal imaging with improved signal-to-noise ratio and super-resolution.</a> Nature Methods. 12 (12), (2015).</li><li>Huff, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+new+2D+superresolution+mode+for+ZEISS+Airyscan.">The new 2D superresolution mode for ZEISS Airyscan.</a> Nature Methods. 14 (12), 1223 (2017).</li><li>Korobchevskaya, K., Lagerholm, B., Colin-York, H., Fritzsche, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+potential+of+Airyscan+microscopy+for+live+cell+imaging.">Exploring the potential of Airyscan microscopy for live cell imaging.</a> Photonics. 4 (4), 41 (2017).</li><li>Ranjan, R., Snedeker, J., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+centromeres+differentially+coordinate+with+mitotic+machinery+to+ensure+biased+sister+chromatid+segregation+in+germline+stem+cells.">Asymmetric centromeres differentially coordinate with mitotic machinery to ensure biased sister chromatid segregation in germline stem cells.</a> Cell Stem Cell. 25 (5), 666-681 (2019).</li><li>Kahney, E. W., Ranjan, R., Gleason, R. J., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symmetry+from+asymmetry+or+asymmetry+from+symmetry.">Symmetry from asymmetry or asymmetry from symmetry.</a> Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology. 82, 305-318 (2017).</li><li>Wooten, M., Ranjan, R., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+histone+inheritance+in+asymmetrically+dividing+stem+cells.">Asymmetric histone inheritance in asymmetrically dividing stem cells.</a> Trends in Genetics. 36 (1), 30-43 (2020).</li><li>Wooten, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+histone+inheritance+via+strand-specific+incorporation+and+biased+replication+fork+movement.">Asymmetric histone inheritance via strand-specific incorporation and biased replication fork movement.</a> Nature Structural &amp; Molecular Biology. 26 (8), 732-743 (2019).</li><li>Prasad, M., Jang, A. C. C., Starz-Gaiano, M., Melani, M., Montell, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+culturing+Drosophila+melanogaster+stage+9+egg+chambers+for+live+imaging.">A protocol for culturing Drosophila melanogaster stage 9 egg chambers for live imaging.</a> Nature Protocols. 2 (10), 2467-2473 (2007).</li><li>Schermelleh, L., Heintzmann, R., Leonhardt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+guide+to+super-resolution+fluorescence+microscopy.">A guide to super-resolution fluorescence microscopy.</a> Journal of Cell Biology. 190 (2), 165-175 (2010).</li><li>Sivaguru, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+performance+of+airyscan+and+structured+illumination+superresolution+microscopy+in+the+study+of+the+surface+texture+and+3D+shape+of+pollen.">Comparative performance of airyscan and structured illumination superresolution microscopy in the study of the surface texture and 3D shape of pollen.</a> Microscopy Research and Technique. 81 (2), 101-114 (2018).</li></ol>

Mikroskopimetoder med superopløsning giver rumlig opløsning helt op til 10'erne af nanometer4,5,6. STORM- og PALM-mikroskopimetoderne tillader opløsning på op til 20 til 50 nm (XY-opløsning), mens STED-mikroskopi giver en opløsning på 20 til 100 nm (XY-opløsning). Sim-mikroskopiens rumlige opløsning er begrænset til 100 til 130 nm15. Men på grund af sin høje fotontæthed og lange anskaffelsestid er det eks...

Visualisering af subcellulære strukturer og proteindynamik i levende celler med opløsning ud over lysets diffraktionsgrænse er typisk meget udfordrende1-3. Mens flere super-opløsning teknikker såsom stokastisk-optisk-rekonstruktion-mikroskopi (STORM), Foto-Aktiveret-Lokalisering-Mikroskopi (PALM) og Stimuleret-Emission-Depletion (STED)4,5,6 mikroskopi er blevet udviklet, komplikationer i prøven forberedelse samt behovet for at opretholde levedygtighed og aktivitet ex vivo, begrænse brugen af konventionelle super-opløsning mikroskopi til billedbehandling levende prøver. Konventionel konfokal mikroskopi kan ikke opnå rumlig opløsning ud over ~230 nm XY-opløsning og er ofte utilstrækkelig til at observere indviklede cellulære understrukturer5,6. Men en nylig udvikling i konfokal mikroskopi, Airyscan super-opløsning billedbehandling, er i stand til at opnå ca 140 nm (XY-opløsning)7,8 og har en forholdsvis enkel prøve forberedelse, der er kompatibel med levende billedbehandling. Da dette billeddetekteringssystem kræver lang anskaffelsestid, kommer dets høje rumlige opløsning på bekostning af tidsmæssig opløsning9. Derfor er der brug for en metode til at sikre, at billeddannelse af levende celler udvides med høj rumlig opløsning.
Her udviklede vi en metode til observation af levende celler i intakt væv ved sin optimale opløsning til at dechifrere subcellulære strukturer med detaljerede rumlige oplysninger. Denne metode er udformet som sådan, så prøverne kan monteres stabilt i en lang periode (~ 10 h) uden at bevæge sig eller degenerere. De levende cellemedier, der bruges i denne teknik, kan understøtte cellulær funktion og undgå fotobleaching i op til 10 timer under et mikroskop i superopløsning. Endelig minimerer denne protokol de fleste belastninger forårsaget af den konstante belysning af lasere over længere tid, såsom hypoxi, ændringer i fugtighed og temperatur samt næringsstofudtømning.
Ved hjælp af denne protokol til at afbilde Drosophila mandlige kønsceller (GSC'er), var vi i stand til at observere, hvordan mikrotubulis asymmetriske aktivitet giver mulighed for præferenceinteraktion med epigenetisk forskellige søsterkromatiderne10,11,12,13. Disse typer af cellulære hændelser er meget dynamiske og er meget vanskelige at visualisere i levende celler ved hjælp af andre superopløsningsbilleddannelsesmetoder som STORM, PALM eller STED. Vi forventer, at denne metode vil blive meget nyttig for cellebiologer, da de sigter mod at forstå de dynamiske subcellulære strukturer af levende celler, der er bosiddende i væv. Der er mange områder, hvor denne metode kan anvendes til, såsom at studere proteindynamikken; forståelse af cellernes bevægelser og afstamningssporing og cellulære differentieringsprocesser, blandt andre mulige applikationer.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adobe Illustrator CS6 (figure making software)</td>
			<td>Adobe</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis membrane</td>
			<td>Spectra/Por 1-4 Standard RC Dialysis Membrane</td>
			<td>Cat No. 08-67121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Cat. no. 26140079</td>
			<td>15% (V/V)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji (analysis software)</td>
			<td>NIH</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Image fluorescence intensity quantification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom cell culture dishes (FluroDish)</td>
			<td>World Precision Instrument, Inc.</td>
			<td>FD35PDL-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris (image reconstruction software)</td>
			<td>Bitplane</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3D image reconstruction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imerssion oil</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Immersol 518F/30 &#176;C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Cat. No. 15550</td>
			<td>200 &#181;g/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Cat No. - 15140-122</td>
			<td>0.6x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schneider Drosophila media</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Cat No. - 11720-034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinning disc confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td>equipped with an evolve camera (Photometrics), using a 63x Zeiss objective (1.4 NA).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue paper</td>
			<td>Kimwipe</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Wet to form humid chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 800 confocal microscope with AiryScan super-resolution module</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td>equipped with highly sensitive GaAsP (Gallium Arsenide Phosphide) detectors using a 63x Zeiss objective (1.4 NA)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEN (imaging software)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

super-resolution live cell imaging of subcellular structures

Der har længe været en afgørende afvejning mellem rumlig og tidsmæssig opløsning i billeddannelse. Billeddannelse ud over lysgrænsen har traditionelt været begrænset til kun at blive brugt på faste prøver eller levende celler uden for væv mærket med stærkt lysstofrør. Nuværende super-opløsning levende celle billeddannelse teknikker kræver brug af særlige fluorescens sonder, høj belysning, flere billedopsamlinger med post-erhvervelse behandling, eller ofte en kombination af disse processer. Disse forudsætninger begrænser i væsentlig grad de biologiske prøver og sammenhænge, som denne teknik kan anvendes på.
Her beskriver vi en metode til at udføre superopløsning (~140 nm XY-opløsning) time-lapse fluorescens levende celle imaging in situ. Denne teknik er også kompatibel med lav fluorescerende intensitet, for eksempel EGFP eller mCherry endogent mærket ved lavt udtrykte gener. Som et principbevis har vi brugt denne metode til at visualisere flere subcellulære strukturer i Drosophila-testis. Under vævsforberedelse opretholdes både cellestrukturen og vævsmorfologien inden for de dissekerede testis. Her bruger vi denne teknik til at afbilde mikrotubuledynamik, samspillet mellem mikrotubuli og den nukleare membran samt fastgørelse af mikrotubuli til centromerer.
Denne teknik kræver særlige procedurer i prøveforberedelse, prøvemontering og immobilisering af prøver. Derudover skal prøverne opbevares i flere timer efter dissektion uden at gå på kompromis med cellulær funktion og aktivitet. Mens vi har optimeret betingelserne for levende super-opløsning billeddannelse specifikt i Drosophila mandlige kønsceller (GSC' er) og stamceller i stamceller i dissekeret testis væv, denne teknik er bredt anvendelig til en række forskellige celletyper. Evnen til at observere celler under deres fysiologiske forhold uden at ofre hverken rumlig eller tidsmæssig opløsning vil tjene som et uvurderligt værktøj for forskere, der søger at løse afgørende spørgsmål i cellebiologi.

Live celle billeddannelse ud over diffraktion grænse i Drosophila væv, især for GSC'er, giver mulighed for at undersøge dynamikken i subcellulære begivenheder i forbindelse med cellecyklus progression. For nylig har en undersøgelse, der bruger denne protokol, vist, at mikrotubule-aktiviteter hos moderen centrær versus datterens centrsome er tidsmæssigt asymmetriske i GSC'er10. Moderen centrobiøse udstråler mikrotubuli ca 4 timer før mitotiske indrejse, mens datteren centrobik k...

Watch this Scientific Journal Video about Super-Resolution Live Cell Imaging of Subcellular Structures at JoVE.com

Super-Resolution Live Cell Imaging of Subcellular Structures

Præsenteret her er en protokol for super-opløsning levende celle billeddannelse i intakt væv. Vi har standardiseret betingelserne for billeddannelse en meget følsom voksen stamcellepopulation i sit oprindelige væv miljø. Denne teknik indebærer balancering af tidsmæssige og rumlige opløsning for at give mulighed for direkte observation af biologiske fænomener i levende væv.

Dynamisk cellebilledbehandling i superopløsning af undercellulære strukturer

There has long been a crucial tradeoff between spatial and temporal resolution in imaging. Imaging beyond the diffraction limit of light has traditionally ...

Vores protokol bruger regelmæssige fluorophore sonder og enkle prøve forberedelse teknikker, der opretholder den afbildede celle i fysiologisk tilstand til at studere meget dynamisk cellulær proces og detaljerede sub-cellulære strukturer. Denne teknik giver os mulighed for at undersøge cellulære processer i en super opløsning og under fysiologiske forhold i en længere periode uden at ofre hverken den specielle eller midlertidige opløsning. Begynd med at skære en 12 til 14 kilodalton molekylær vægt cutoff dialysemembran i små stykker og iblødsætning stykkerne med 100 mikroliter af levende celle medium i cirka fem minutter.Mens membranerne er iblødsætning, skæres den ydre ring af en 50 milliliter rør i små stykker og sterilisere stykkerne i 70% ethanol. For testikler dissektion og montering, overføre ti to til tre dage gamle bedøvet mandlige fluer i en dissektion parabol under en dissekere mikroskop og bruge fine pincet til at fjerne testiklerne. Når alle testiklerne er indsamlet, vaskes testiklerne to gange i levende cellemedie og bruge en pipettespids til at sprede 100 til 150 mikroliter af levende cellemedie til den forberedte glasbundsskål.Brug fine pincet til at overføre flue testikler til midten af fadet og fjerne alle, men omkring 10 mikroliter af mediet. Placer hurtigt den forgågste membran på testiklerne, og placer to til tre små plastvægte på membranen. Straks tilsættes 100 til 150 mikroliter af frisk levende celle medium og placere ringen tilbage på den forhøjede side af fadet.Placer dækslet glide tilbage på ringen og hvirvle et stykke silkepapir i vand, før du placerer papiret på dækslet slip. Dæk derefter skålen med et låg og fastgør skålen på scenen i et superopløsningsmikroskop. Til billeddannelse af kønsceller skal du åbne billedbehandlingssoftwaren og tænde for det transmitterede lys.Brug 63X målet at fokusere på testiklerne væv og tænde lasere. Klik på Live"for at finde germinale stamceller. Juster fokus, og klik på Rammestørrelse"for at indstille rammestørrelsen til mellem 512 og 512 og 1024 pixel med 1024 pixel og Gennemsnit for at indstille rammegennemsnittet til en eller to.Klik på Master Gain"for at indstille elektronen multiplikation gevinst til mindre end 800, og Lasere "for at indstille laser magt til 1%til 2%Zoom ind på det område eller celle af interesse for at reducere billedet erhvervelse tid og for at reducere foto blegning, og bekræfte, at billedet er blevet optimalt konfigureret, før du klikker på Start Eksperiment"for at starte tid bortfalder billedoptagelse. Hvis Airyscan Acquisition ikke er konfigureret optimalt", skal du klikke på Optimal"i rammestørrelses-, Z-Stack- og Scan Area-afsnittene og optimere tidsintervallet, antallet af Z-skiver og varigheden af time-lapse-billeddannelsen i henhold til det eksperimentelle design og prøvetypen. Efter billedbehandling skal du vælge Behandling, Batch" og Airyscan-behandling og vælge de billeder, der skal behandles.Klik derefter på Kør proces"for at hente billederne i superopløsning. Levende celle billeddannelse af drosophila testikler udtrykke alfa tubulin GFP i den tidlige fase kimceller ved hjælp af en roterende disk confocal mikroskop, giver mulighed for visualisering af den asymmetriske intensitet af GFP signaler på to centromer, som et lysere signal på moderen centrafæring og en relativt svagere signal på datteren centrosomer. Forskellen i lysstyrke afspejles sandsynligvis af den tidsmæssige asymmetri i mikrotubulekernen, men den detaljerede morfologi og mængden af mikrotubuline kan ikke løses ved hjælp af spindingsskivekonfokal mikroskopi.I modsætning hertil giver levende celle super opløsning billeddannelse visualisering og kvantificering af mikrotubule morfologi og tal. Denne forbedrede opløsning afslører også mønstre af asymmetrisk mikrotubulekerner, forlængelse og øget interaktion med atommembranen. Levende cellebilleddannelse gør det også muligt at visualisering af asymmetrisk nuklear membraninvagination, men ikke af individuelle mikrotubuli, der direkte kommer ind i kernen.I modsætning hertil tillader denne levende celle superopløsningsteknik direkte observation af disse begivenheder ved samtidig billeddannelse af både mikrotubuli og det nukleare lamina. Under metafasen kan begge søster centromerer detekteres som et signal ved hjælp af roterende skivemikroskopi, selvom mikrotubule centraltilbehør ikke kan observeres. I modsætning hertil giver superopløsnings live imaging visualisering af mikrotubule centromere vedhæftet fil i tidlig profase.Sørg for at placere en membran over testiklerne for at sikre, at de ikke bevæger sig eller flyder under billeddannelse, og for at optimere mikroskopindstillingerne for at undgå fotoblegning og fototoksicitet. Der er mange måder, hvorpå denne metode kan anvendes, såsom at undersøge proteindynamik, lineær stress eller cellulære forsvar og processer.

Research

JoVE Journal

Biology

Super-resolution Imaging of the Bacterial Division Machinery

Super-opløsning Imaging af Bakteriel Division Machinery

Bacterial cell division requires the coordinated  assembly of more than ten essential proteins at midcell1,2. Central  to this process is the formation of ...

Intravital Microscopy for Imaging Subcellular Structures in Live Mice Expressing Fluorescent Proteins

Intravital mikroskopi af Imaging Subcellulære Strukturer Live mus, der udtrykker fluorescerende proteiner

Here we describe a procedure to image subcellular structures in live rodents that is based on the use of confocal intravital microscopy. As a model organ, ...

Test Samples for Optimizing STORM Super-Resolution Microscopy

Prøverne, til Optimering STORM Super-opløsning Microscopy

STORM is a recently developed super-resolution microscopy technique with up to 10 times better resolution than standard fluorescence microscopy ...

Imaging Cell Membrane Injury and Subcellular Processes Involved in Repair

Imaging Cell Membrane Skade og Subcellulære processer involveret i reparation

The ability of injured cells to heal is a fundamental cellular process, but cellular and molecular mechanisms involved in healing injured cells are poorly ...

Sample Preparation for Single Virion Atomic Force Microscopy and Super-resolution Fluorescence Imaging

Prøve forberedelse til single virion Atomic Force mikroskopi og superopløsning fluorescens Imaging

Immobilization of virions to glass surfaces is a critical step in single virion imaging. Here we present a technique&#160;adopted from single molecule ...

Super-resolution Imaging of the Cytokinetic Z Ring in Live Bacteria Using Fast 3D-Structured Illumination Microscopy (f3D-SIM)

Super-resolution Imaging of the Cytokinetic Z Ring in Live Bacteria Using Fast 3D-Structured Illumination Microscopy f3D-SIM

Super-opløsning Imaging af Cytokinetic Z Ring i levende bakterier Brug af Fast 3D-strukturerede Illumination Mikroskopi (F3D-SIM)

Imaging of biological samples using fluorescence microscopy has advanced substantially with new technologies to overcome the resolution barrier of the ...

Open-source Single-particle Analysis for Super-resolution Microscopy with VirusMapper

Open source Single-partikel Analyse for Super-resolution Microscopy med VirusMapper

Super-resolution fluorescence microscopy is currently revolutionizing cell biology research. Its capacity to break the resolution limit of around 300 nm ...

Live-cell Imaging of Fungal Cells to Investigate Modes of Entry and Subcellular Localization of Antifungal Plant Defensins

Live-celle billeddannelse af svampe celler at undersøge tilstande af post og subcellulært lokalisering af svampedræbende plante Defensins

Small cysteine-rich defensins are one of the largest groups of host defense peptides present in all plants. Many plant defensins exhibit potent in vitro ...

Ground State Depletion Super-resolution Imaging in Mammalian Cells

Grundtilstand udtynding super-resolution Imaging i pattedyrceller

Advances in fluorescent microscopy and cell biology are intimately correlated, with the enhanced ability to visualize cellular events often leading to ...

Application of High-speed Super-resolution SPEED Microscopy in Live Primary Cilium

Anvendelsen af højhastigheds super-resolution hastighed mikroskopi i Live primære Cilium

The primary cilium is a microtubule-based protrusion on the surface of many eukaryotic cells and contains a unique complement of proteins that function ...