Name: super-resolution live cell imaging of subcellular structures
Uploaded: 2021-01-13T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Super-Resolution Live Cell Imaging of Subcellular Structures at JoVE.com

Авторы хотели бы поблагодарить integrated Imaging Core в Университете Джона Хопкинса за микроскопы и программное обеспечение для анализа данных. Мы благодарим J. Snedeker и Q. E. Yu за корректуру и предложения, а также членов лаборатории X.C. за полезные обсуждения и предложения. При поддержке NIGMS/NIH R35GM127075, Медицинского института Говарда Хьюза, Фонда Дэвида и Люсиль Паккард и стартап-фондов Университета Джона Хопкинса (X.C.).

1. Приготовление коктейля для визуализации живых клеток (живые клеточные среды)
<ol><li>Дополните среду Drosophila Schneider 15% фетальной бычим сывороткой (FBS) и 0,6x пенициллином / стрептомицином. Отрегулируйте pH примерно до 7,0.</li>
	<li>Непосредственно перед использованием среды добавьте инсулин д?...

<ol>
	<li>Breedijk, R. M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+live-cell+super-resolution+technique+demonstrated+by+imaging+germinosomes+in+wild-type+bacterial+spores.">A live-cell super-resolution technique demonstrated by imaging germinosomes in wild-type bacterial spores.</a> Scientific Reports. 10 (1), 5312 (2020).</li><li>Maddox, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+the+mitotic+spindle.">Imaging the mitotic spindle.</a> Methods in Enzymology. 505, 81-103 (2012).</li><li>Frigault, M. M., Lacoste, J., Swift, J. L., Brown, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-cell+microscopy+-+tips+and+tools.">Live-cell microscopy - tips and tools.</a> Journal of Cell Science. 122 (6), 753-767 (2009).</li><li>Bates, M., Jones, S. A., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stochastic+optical+reconstruction+microscopy+(STORM):+A+method+for+super+resolution+fluorescence+imaging.">Stochastic optical reconstruction microscopy (STORM): A method for super resolution fluorescence imaging.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2013 (6), 075143 (2013).</li><li>Shroff, H., Galbraith, C. G., Galbraith, J. A., Betzig, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-cell+photoactivated+localization+microscopy+of+nanoscale+adhesion+dynamics.">Live-cell photoactivated localization microscopy of nanoscale adhesion dynamics.</a> Nature Methods. 5 (5), 417-423 (2008).</li><li>Vicidomini, G., Bianchini, P., Diaspro, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=STED+super-resolved+microscopy.">STED super-resolved microscopy.</a> Nature Methods. 15 (3), 173-182 (2018).</li><li>Huff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Airyscan+detector+from+ZEISS:+confocal+imaging+with+improved+signal-to-noise+ratio+and+super-resolution.">The Airyscan detector from ZEISS: confocal imaging with improved signal-to-noise ratio and super-resolution.</a> Nature Methods. 12 (12), (2015).</li><li>Huff, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+new+2D+superresolution+mode+for+ZEISS+Airyscan.">The new 2D superresolution mode for ZEISS Airyscan.</a> Nature Methods. 14 (12), 1223 (2017).</li><li>Korobchevskaya, K., Lagerholm, B., Colin-York, H., Fritzsche, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+potential+of+Airyscan+microscopy+for+live+cell+imaging.">Exploring the potential of Airyscan microscopy for live cell imaging.</a> Photonics. 4 (4), 41 (2017).</li><li>Ranjan, R., Snedeker, J., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+centromeres+differentially+coordinate+with+mitotic+machinery+to+ensure+biased+sister+chromatid+segregation+in+germline+stem+cells.">Asymmetric centromeres differentially coordinate with mitotic machinery to ensure biased sister chromatid segregation in germline stem cells.</a> Cell Stem Cell. 25 (5), 666-681 (2019).</li><li>Kahney, E. W., Ranjan, R., Gleason, R. J., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Symmetry+from+asymmetry+or+asymmetry+from+symmetry.">Symmetry from asymmetry or asymmetry from symmetry.</a> Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology. 82, 305-318 (2017).</li><li>Wooten, M., Ranjan, R., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+histone+inheritance+in+asymmetrically+dividing+stem+cells.">Asymmetric histone inheritance in asymmetrically dividing stem cells.</a> Trends in Genetics. 36 (1), 30-43 (2020).</li><li>Wooten, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymmetric+histone+inheritance+via+strand-specific+incorporation+and+biased+replication+fork+movement.">Asymmetric histone inheritance via strand-specific incorporation and biased replication fork movement.</a> Nature Structural &amp; Molecular Biology. 26 (8), 732-743 (2019).</li><li>Prasad, M., Jang, A. C. C., Starz-Gaiano, M., Melani, M., Montell, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+culturing+Drosophila+melanogaster+stage+9+egg+chambers+for+live+imaging.">A protocol for culturing Drosophila melanogaster stage 9 egg chambers for live imaging.</a> Nature Protocols. 2 (10), 2467-2473 (2007).</li><li>Schermelleh, L., Heintzmann, R., Leonhardt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+guide+to+super-resolution+fluorescence+microscopy.">A guide to super-resolution fluorescence microscopy.</a> Journal of Cell Biology. 190 (2), 165-175 (2010).</li><li>Sivaguru, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+performance+of+airyscan+and+structured+illumination+superresolution+microscopy+in+the+study+of+the+surface+texture+and+3D+shape+of+pollen.">Comparative performance of airyscan and structured illumination superresolution microscopy in the study of the surface texture and 3D shape of pollen.</a> Microscopy Research and Technique. 81 (2), 101-114 (2018).</li></ol>

Методы микроскопии со сверхвысоким разрешением обеспечивают пространственное разрешение до 10 нанометров4,5,6. Методы микроскопии STORM и PALM позволяют разрешать до 20-50 нм (XY-разрешение), в то время как STED-микроскопия предлагает разрешение о...

Визуализация субклеточных структур и динамики белка в живых клетках с разрешением, выходящим за предел дифракционного предела света, обычно очень сложна1-3. В то время как были разработаны многочисленные методы сверхвысокого разрешения, такие как стохастическая-оптическая-реконструкционная-микроскопия (STORM), фотоактивированная локализация-микроскопия (PALM) и стимуляция-эмиссия-истощение (STED)4,5,6, осложнения в подготовке образцов, а также необходимость поддержания жизнеспособности и активности ex vivo ограничивают использование обычной микроскопии сверхвысокого разрешения для визуализации живых образцов. Обычная конфокальная микроскопия не может достичь пространственного разрешения выше ~ 230 нм XY-разрешения и часто недостаточна для наблюдения сложных клеточных подструктур5,6. Однако недавняя разработка в конфокальной микроскопии, Airyscan super-resolution imaging, способна достигать примерно 140 нм (XY-разрешение)7,8 и имеет относительно простую пробоподготовку, совместимую с живой визуализацией. Поскольку эта система обнаружения изображений требует длительного времени сбора, ее высокое пространственное разрешение происходит за счет временного разрешения9. Поэтому необходим метод, гарантируя, что визуализация живых клеток расширена с высоким пространственным разрешением.
Здесь мы разработали метод наблюдения живых клеток в интактной ткани с оптимальным разрешением для расшифровки субклеточных структур с подробной пространственной информацией. Этот метод разработан таким образом, что образцы могут быть установлены стабильно в течение длительного периода времени (~ 10 ч) без перемещения или вырождения. Живые клеточные среды, используемые в этой технике, могут поддерживать клеточную функцию и избегать фотоотбеливания в течение 10 часов под микроскопом сверхвысокого разрешения. Наконец, этот протокол минимизирует большинство стрессов, вызванных постоянным освещением лазеров в течение длительных периодов времени, таких как гипоксия, изменения влажности и температуры, а также истощение питательных веществ.
Используя этот протокол для изображения стволовых клеток зародышевой линии (GSC) дрозофилы, мы смогли наблюдать, как асимметричная активность микротрубочек позволяет предпочтительно взаимодействовать с эпигенетически отличными сестринскими хроматидами10,11,12,13. Эти типы клеточных событий очень динамичны и их очень трудно визуализировать в живых клетках с использованием других методов визуализации со сверхвысоким разрешением, таких как STORM, PALM или STED. Мы ожидаем, что этот метод станет очень полезным для клеточных биологов, поскольку они стремятся понять динамические субклеточные структуры живых клеток, проживающих в тканях. Существует множество областей, в которых этот метод может быть применен, например, изучение динамики белков; понимание движения клеток; и процессы отслеживания родословной и клеточной дифференцировки, среди других возможных применений.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adobe Illustrator CS6 (figure making software)</td>
			<td>Adobe</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis membrane</td>
			<td>Spectra/Por 1-4 Standard RC Dialysis Membrane</td>
			<td>Cat No. 08-67121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Cat. no. 26140079</td>
			<td>15% (V/V)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji (analysis software)</td>
			<td>NIH</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Image fluorescence intensity quantification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom cell culture dishes (FluroDish)</td>
			<td>World Precision Instrument, Inc.</td>
			<td>FD35PDL-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris (image reconstruction software)</td>
			<td>Bitplane</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3D image reconstruction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imerssion oil</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Immersol 518F/30 &#176;C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Cat. No. 15550</td>
			<td>200 &#181;g/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Cat No. - 15140-122</td>
			<td>0.6x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schneider Drosophila media</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Cat No. - 11720-034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinning disc confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td>equipped with an evolve camera (Photometrics), using a 63x Zeiss objective (1.4 NA).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue paper</td>
			<td>Kimwipe</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Wet to form humid chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 800 confocal microscope with AiryScan super-resolution module</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td>equipped with highly sensitive GaAsP (Gallium Arsenide Phosphide) detectors using a 63x Zeiss objective (1.4 NA)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEN (imaging software)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

super-resolution live cell imaging of subcellular structures

Уже давно существует важный компромисс между пространственным и временным разрешением в изображениях. Визуализация за пределами дифракционного предела света традиционно ограничивалась использованием только на фиксированных образцах или живых клетках вне ткани, помеченной сильным флуоресцентным сигналом. Современные методы визуализации живых клеток со сверхвысоким разрешением требуют использования специальных флуоресцентных зондов, высокой освещенности, многократного получения изображений с обработкой после получения или часто комбинации этих процессов. Эти предпосылки значительно ограничивают биологические образцы и контексты, к которым может быть применен этот метод.
Здесь мы описываем метод выполнения флуоресцентной визуализации живых клеток со сверхвысоким разрешением (~ 140 нм XY) in situ. Этот метод также совместим с низкой интенсивностью флуоресцентной связи, например, EGFP или mCherry эндогенно помечены в низко экспрессированных генах. В качестве доказательства принципа мы использовали этот метод для визуализации нескольких субклеточных структур в яичках Drosophila. Во время подготовки ткани в рассеченном яичках сохраняется как клеточная структура, так и морфология ткани. Здесь мы используем этот метод для изображения динамики микротрубочек, взаимодействий между микротрубочками и ядерной мембраной, а также прикрепления микротрубочек к центромерам.
Этот метод требует специальных процедур по подготовке образцов, монтажу образцов и иммобилизации образцов. Кроме того, образцы должны поддерживаться в течение нескольких часов после рассечения без ущерба для клеточной функции и активности. Хотя мы оптимизировали условия для визуализации живого сверхвысокого разрешения, особенно в стволовых клетках зародышевой линии (GSC) и половых клетках-прародителях в рассеченной ткани яичка, этот метод широко применим к различным типам клеток. Способность наблюдать за клетками в их физиологических условиях без ущерба для пространственного или временного разрешения будет служить бесценным инструментом для исследователей, стремящихся решить важнейшие вопросы клеточной биологии.

Визуализация живых клеток за пределами дифракционного предела в ткани дрозофилы, особенно для ГСК, дает возможность исследовать динамику субклеточных событий в контексте прогрессирования клеточного цикла. Недавно исследование, использующее этот протокол, показало, что активнос...

Watch this Scientific Journal Video about Super-Resolution Live Cell Imaging of Subcellular Structures at JoVE.com

Super-Resolution Live Cell Imaging of Subcellular Structures

Здесь представлен протокол для визуализации живых клеток сверхвысокого разрешения в интактной ткани. Мы стандартизировали условия для визуализации высокочувствительной популяции взрослых стволовых клеток в ее родной тканевой среде. Этот метод включает в себя балансировку временного и пространственного разрешения, чтобы обеспечить непосредственное наблюдение за биологическими явлениями в живой ткани.

Визуализация субклеточных структур в живых клетках сверхвысокого разрешения

There has long been a crucial tradeoff between spatial and temporal resolution in imaging. Imaging beyond the diffraction limit of light has traditionally ...

Наш протокол использует обычные флуорофорные зонды и простые методы подготовки образцов, которые поддерживают изображение клетки в физиологическом состоянии для изучения высокодинамичных клеточных процессов и подробных субклеточных структур. Этот метод позволяет исследовать клеточные процессы в сверхвысоком разрешении и в физиологических условиях в течение длительного периода без ущерба для специального или временного разрешения. Начните с разрезания отрезанной диализной мембраны с молекулярной массой от 12 до 14 килодалтон на мелкие кусочки и замачивания кусочков 100 микролитрами среды живых клеток в течение примерно пяти минут.Пока мембраны замачивания, разрежьте наружное кольцо 50-миллилитровой трубки на мелкие кусочки и стерилизуйте кусочки в 70% этаноле. Для рассечения и крепления яичек переложите десять двух-трехдневных обезболивающих самцов в рассеченную посуду под рассекающим микроскопом и используйте тонкие щипцы для удаления яичек. Когда все яички будут собраны, вымойте яички два раза в среде живых клеток и используйте наконечник пипетки, чтобы распределить от 100 до 150 микролитров живой клеточной среды на приготовленную стеклянную нижнюю посуду.Используйте тонкие щипцы, чтобы перенести яички мухи в центр тарелки и удалить все, кроме около 10 микролитров среды. Быстро поместите предварительно влажную мембрану на яички и поместите на мембрану два-три небольших пластиковых груза. Сразу же добавьте от 100 до 150 микролитров свежей среды живых клеток и поместите кольцо обратно на приподнятую сторону блюда.Поместите крышку обратно на кольцо и закрутите лист папиросной бумаги в воде, прежде чем положить бумагу на крышку. Затем накройте блюдо крышкой и закрепите блюдо на сцене микроскопа сверхвысокого разрешения. Для визуализации стволовых клеток зародышевой линии откройте программное обеспечение для визуализации и включите проходящий свет.Используйте объектив 63X, чтобы сосредоточиться на ткани яичек и включить лазеры. Нажмите Live», чтобы найти зародышевые стволовые клетки. Отрегулируйте фокус и нажмите «Размер кадра», чтобы установить размер кадра в диапазоне от 512 до 512 до 1024 на 1024 пикселя, и «Усреднение», чтобы установить среднее значение кадра на один или два.Нажмите Master Gain, чтобы установить коэффициент усиления умножения электронов на менее 800, и Lasers, чтобы установить мощность лазера на 1%-2%Увеличить масштаб до интересующей области или ячейки, чтобы сократить время получения изображения и уменьшить отбеливание фотографий, и подтвердить, что изображение было оптимально настроено, прежде чем нажать Начать эксперимент», чтобы начать захват изображения с замедленной съемкой. Если Airyscan Acquisition не настроен оптимально, щелкните «Оптимальный» в разделах «Размер кадра», «Z-стек» и «Область сканирования» и оптимизируйте временной интервал, количество Z-срезов и продолжительность покадровой визуализации в соответствии с экспериментальным дизайном и типом образца. После создания образа выберите «Обработка», «Пакетная обработка» и «Обработка Airyscan», а затем выберите изображения для обработки.Затем нажмите «Выполнить процесс», чтобы получить изображения с сверхвысоким разрешением. Визуализация живых клеток яичек дрозофилы, экспрессирующих альфа-тубулин GFP в половых клетках на ранней стадии с использованием конфокального микроскопа вращающегося диска, позволяет визуализировать асимметричную интенсивность сигналов GFP в двух центросомах, как более яркий сигнал в материнской центросоме и относительно более слабый сигнал в дочерних центросомах. Разница в яркости, вероятно, отражается временной асимметрией ядра микротрубочек, но подробная морфология и количество микротрубочек не могут быть решены с помощью конфокальной микроскопии вращающегося диска.Напротив, визуализация с супервысокими живыми клетками позволяет визуализировать и количественно определять морфологию и числа микротрубочек. Это улучшенное разрешение также выявляет закономерности асимметричного зародышка микротрубочек, удлинения и повышенного взаимодействия с ядерной мембраной. Визуализация живых клеток также позволяет визуализировать асимметричную инвагинацию ядерной мембраны, но не отдельных микротрубочек, которые непосредственно входят в ядро.Напротив, этот метод сверхвысокого разрешения живых клеток позволяет непосредственно наблюдать за этими событиями путем одновременной визуализации как микротрубочек, так и ядерной пластинки. Во время метафазы обе сестринские центромеры могут быть обнаружены как один сигнал с помощью вращающейся дисковой микроскопии, хотя центральное прикрепление микротрубочек не может наблюдаться. Напротив, живая визуализация с сверхвысоким разрешением позволяет визуализировать прикрепление микротрубочек центромеры в ранней профазе.Обязательно поместите мембрану над яичами, чтобы убедиться, что они не двигаются или не плавают во время визуализации, и оптимизируйте настройки микроскопа, чтобы избежать фотоотбеливания и фототоксичности. Есть много способов, которыми этот метод может быть применен, например, для исследования динамики белка, линейного напряжения или клеточной защиты и процессов.

Research

JoVE Journal

Biology

Super-resolution Imaging of the Bacterial Division Machinery

Super-Resolution Imaging бактериального Машины отдела

Bacterial cell division requires the coordinated  assembly of more than ten essential proteins at midcell1,2. Central  to this process is the formation of ...

Intravital Microscopy for Imaging Subcellular Structures in Live Mice Expressing Fluorescent Proteins

Прижизненные микроскопия для визуализации субклеточных структур в живых мышей, экспрессирующих флуоресцентные белки

Here we describe a procedure to image subcellular structures in live rodents that is based on the use of confocal intravital microscopy. As a model organ, ...

Test Samples for Optimizing STORM Super-Resolution Microscopy

Опытные образцы для оптимизации STORM супер-разрешения микроскопии

STORM is a recently developed super-resolution microscopy technique with up to 10 times better resolution than standard fluorescence microscopy ...

Imaging Cell Membrane Injury and Subcellular Processes Involved in Repair

Изображений Клеточная мембрана Травмы и субклеточных процессов, связанных с Ремонт

The ability of injured cells to heal is a fundamental cellular process, but cellular and molecular mechanisms involved in healing injured cells are poorly ...

Sample Preparation for Single Virion Atomic Force Microscopy and Super-resolution Fluorescence Imaging

Подготовка образцов для одной микроскопии атомной силы Virion и флуоресценции супер-разрешения

Immobilization of virions to glass surfaces is a critical step in single virion imaging. Here we present a technique&#160;adopted from single molecule ...

Super-resolution Imaging of the Cytokinetic Z Ring in Live Bacteria Using Fast 3D-Structured Illumination Microscopy (f3D-SIM)

Super-resolution Imaging of the Cytokinetic Z Ring in Live Bacteria Using Fast 3D-Structured Illumination Microscopy f3D-SIM

Супер-Resolution Imaging из Cytokinetic Z Кольцо в живых бактерий Использование быстрого 3D-Structured Illumination микроскопии (F3D-SIM)

Imaging of biological samples using fluorescence microscopy has advanced substantially with new technologies to overcome the resolution barrier of the ...

Open-source Single-particle Analysis for Super-resolution Microscopy with VirusMapper

С открытым исходным кодом Анализ Одночастичного для супер-разрешение микроскопии с VirusMapper

Super-resolution fluorescence microscopy is currently revolutionizing cell biology research. Its capacity to break the resolution limit of around 300 nm ...

Live-cell Imaging of Fungal Cells to Investigate Modes of Entry and Subcellular Localization of Antifungal Plant Defensins

Жить клеточной изображений грибковых клеток расследовать режимы записи и внутриклеточных локализации дефензинов противогрибковые завод

Small cysteine-rich defensins are one of the largest groups of host defense peptides present in all plants. Many plant defensins exhibit potent in vitro ...

Ground State Depletion Super-resolution Imaging in Mammalian Cells

Основного состояния истощения суперразрешением изображений в клетках млекопитающих

Advances in fluorescent microscopy and cell biology are intimately correlated, with the enhanced ability to visualize cellular events often leading to ...

Application of High-speed Super-resolution SPEED Microscopy in Live Primary Cilium

Применение высокоскоростных суперразрешением скорость микроскопии в прямом первичной ресничку

The primary cilium is a microtubule-based protrusion on the surface of many eukaryotic cells and contains a unique complement of proteins that function ...