Name: an in vitro hemodynamic loop model to investigate the hemocytocompatibility and host cell activation of vascular medical devices
Uploaded: 2020-08-21T13:00:00
Duration: 8 min 44 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Hemodynamic Loop Model to Investigate the Hemocytocompatibility and Host Cell Activation of Vascular Medical Devices at JoVE.com

Авторы благодарны г-же Елене Денкс за ее техническую помощь.

<ol>
	<li>International Organisation for Standardisation. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DIN+ISO+10993-4:+Biological+evaluation+of+medical+devices+-+Part+4:+Selection+of+tests+for+interactions+with+blood.">DIN ISO 10993-4: Biological evaluation of medical devices - Part 4: Selection of tests for interactions with blood.</a> International Organisation for Standardisation. , (2017).</li><li>Mayes, J. T., Schreiber, R. D., Cooper, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+application+of+an+enzyme-linked+immunosorbent+assay+for+the+quantitation+of+alternative+complement+pathway+activation+in+human+serum.">Development and application of an enzyme-linked immunosorbent assay for the quantitation of alternative complement pathway activation in human serum.</a> Journal of Clinical Investigation. 73 (1), 160-170 (1984).</li><li>Maiolini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sandwich+method+of+enzyme-immunoassay.+II.+Quantification+of+rheumatoid+factor.">A sandwich method of enzyme-immunoassay. II. Quantification of rheumatoid factor.</a> Journal of Immunological Methods. 20, 25-34 (1978).</li><li>Shapiro, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+Cytometry:+The+Glass+Is+Half+Full.">Flow Cytometry: The Glass Is Half Full.</a> Methods in Molecular Biology. 1678, 1-10 (2018).</li><li>Betke, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Slurry+Composition+on+Properties+of+Cellular+Alumina:+A+Computed+Tomographic+Study.">Impact of Slurry Composition on Properties of Cellular Alumina: A Computed Tomographic Study.</a> Advanced Engineering Materials. 19 (10), (2017).</li><li>Chandler, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+thrombotic+coagulation+of+the+blood;+a+method+for+producing+a+thrombus.">In vitro thrombotic coagulation of the blood; a method for producing a thrombus.</a> Laboratory Investigation. 7 (2), 110-114 (1958).</li><li>Fink, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vitro+study+of+blood+compatibility+of+vascular+grafts+made+of+bacterial+cellulose+in+comparison+with+conventionally-used+graft+materials.">An in vitro study of blood compatibility of vascular grafts made of bacterial cellulose in comparison with conventionally-used graft materials.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 97 (1), 52-58 (2011).</li><li>Lenz-Habijan, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+Thrombogenicity+of+a+Bare+and+Antithrombogenic+Coated+Flow+Diverter+in+an+In+Vitro+Flow+Model.">Comparison of the Thrombogenicity of a Bare and Antithrombogenic Coated Flow Diverter in an In Vitro Flow Model.</a> Cardiovascular and Interventional Radiology. 43 (1), 140-146 (2020).</li><li>Olsen, A. L., Long, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+catheter+thrombogenicity+in+a+modified+chandler+loop+model+using+goat+blood.">Comparison of catheter thrombogenicity in a modified chandler loop model using goat blood.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 106 (12), 3143-3151 (2018).</li><li>Touma, H., Sahin, I., Gaamangwe, T., Gorbet, M. B., Peterson, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Numerical+investigation+of+fluid+flow+in+a+chandler+loop.">Numerical investigation of fluid flow in a chandler loop.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 136 (7), (2014).</li><li>Slee, J. B., Alferiev, I. S., Levy, R. J., Stachelek, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+the+ex+vivo+Chandler+Loop+Apparatus+to+assess+the+biocompatibility+of+modified+polymeric+blood+conduits.">The use of the ex vivo Chandler Loop Apparatus to assess the biocompatibility of modified polymeric blood conduits.</a> Journal of Visualized Experiments. (90), e51871 (2014).</li><li>Feyerabend, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+compatibility+of+magnesium+and+its+alloys.">Blood compatibility of magnesium and its alloys.</a> Acta Biomaterialia. 25, 384-394 (2015).</li><li>Lukas, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Immobilized+Antithrombin+III+on+the+Thromboresistance+of+Polycarbonate+Urethane.">Effect of Immobilized Antithrombin III on the Thromboresistance of Polycarbonate Urethane.</a> Materials. 10 (4), 355 (2017).</li><li>Paul, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aptamers+influence+the+hemostatic+system+by+activating+the+intrinsic+coagulation+pathway+in+an+in+vitro+Chandler-Loop+model.">Aptamers influence the hemostatic system by activating the intrinsic coagulation pathway in an in vitro Chandler-Loop model.</a> Clinical and Applied Thrombosis/Hemostasis. 16 (2), 161-169 (2010).</li><li>Link, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemocompatibility+Testing+of+Blood-Contacting+Implants+in+a+Flow+Loop+Model+Mimicking+Human+Blood+Flow.">Hemocompatibility Testing of Blood-Contacting Implants in a Flow Loop Model Mimicking Human Blood Flow.</a> Journal of Visualized Experiments. (157), e60610 (2020).</li><li>van Oeveren, W., Tielliu, I. F., de Hart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+modified+chandler,+roller+pump,+and+ball+valve+circulation+models+for+in+vitro+testing+in+high+blood+flow+conditions:+application+in+thrombogenicity+testing+of+different+materials+for+vascular+applications.">Comparison of modified chandler, roller pump, and ball valve circulation models for in vitro testing in high blood flow conditions: application in thrombogenicity testing of different materials for vascular applications.</a> International Journal of Biomaterials. 2012, 673163 (2012).</li><li>Maa, Y. F., Hsu, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+denaturation+by+combined+effect+of+shear+and+air-liquid+interface.">Protein denaturation by combined effect of shear and air-liquid interface.</a> Biotechnology and Bioengineering. 54 (6), 503-512 (1997).</li><li>Mutch, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+the+Chandler+loop+to+examine+the+interaction+potential+of+NXY-059+on+the+thrombolytic+properties+of+rtPA+on+human+thrombi+in+vitro.">The use of the Chandler loop to examine the interaction potential of NXY-059 on the thrombolytic properties of rtPA on human thrombi in vitro.</a> British Journal of Pharmacology. 153 (1), 124-131 (2008).</li><li>Fletcher, E. A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+human+whole+blood+in+motion,+as+a+tool+to+predict+first-infusion+reactions+and+mechanism-of-action+of+immunotherapeutics.">Extracorporeal human whole blood in motion, as a tool to predict first-infusion reactions and mechanism-of-action of immunotherapeutics.</a> International Immunopharmacology. 54, 1-11 (2018).</li><li>Krajewski, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemocompatibility+evaluation+of+different+silver+nanoparticle+concentrations+employing+a+modified+Chandler-loop+in+vitro+assay+on+human+blood.">Hemocompatibility evaluation of different silver nanoparticle concentrations employing a modified Chandler-loop in vitro assay on human blood.</a> Acta Biomaterialia. 9 (7), 7460-7468 (2013).</li><li>Larm, O., Larsson, R., Olsson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+non-thrombogenic+surface+prepared+by+selective+covalent+binding+of+heparin+via+a+modified+reducing+terminal+residue.">A new non-thrombogenic surface prepared by selective covalent binding of heparin via a modified reducing terminal residue.</a> Biomaterials, Medical Devices, and Artificial Organs. 11 (2-3), 161-173 (1983).</li><li>Gong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tubing+loops+as+a+model+for+cardiopulmonary+bypass+circuits:+both+the+biomaterial+and+the+blood-gas+phase+interfaces+induce+complement+activation+in+an+in+vitro+model.">Tubing loops as a model for cardiopulmonary bypass circuits: both the biomaterial and the blood-gas phase interfaces induce complement activation in an in vitro model.</a> Journal of Clinical Immunology. 16 (4), 222-229 (1996).</li><li>Tevaearai, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trillium+coating+of+cardiopulmonary+bypass+circuits+improves+biocompatibility.">Trillium coating of cardiopulmonary bypass circuits improves biocompatibility.</a> The International Journal of Artificial Organs. 22 (9), 629-634 (1999).</li><li>Ma, Y. Q., Plow, E. F., Geng, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P-selectin+binding+to+P-selectin+glycoprotein+ligand-1+induces+an+intermediate+state+of+alphaMbeta2+activation+and+acts+cooperatively+with+extracellular+stimuli+to+support+maximal+adhesion+of+human+neutrophils.">P-selectin binding to P-selectin glycoprotein ligand-1 induces an intermediate state of alphaMbeta2 activation and acts cooperatively with extracellular stimuli to support maximal adhesion of human neutrophils.</a> Blood. 104 (8), 2549-2556 (2004).</li><li>Bandyk, D. F., Galbraith, T. A., Haasler, G. B., Almassi, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+flow+velocity+of+internal+mammary+artery+and+saphenous+vein+grafts+to+the+coronary+arteries.">Blood flow velocity of internal mammary artery and saphenous vein grafts to the coronary arteries.</a> Journal of Surgical Research. 44 (4), 342-351 (1988).</li><li>Gardner, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+examination+of+the+fluid+mechanics+and+thrombus+formation+time+parameters+in+a+Chandler+rotating+loop+system.">An examination of the fluid mechanics and thrombus formation time parameters in a Chandler rotating loop system.</a> Journal of Laboratory and Clinical Medicine. 84 (4), 494-508 (1974).</li><li>Gaamangwe, T., Peterson, S. D., Gorbet, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+the+Effect+of+Blood+Sample+Volume+in+the+Chandler+Loop+Model:+Theoretical+and+Experimental+Analysis.">Investigating the Effect of Blood Sample Volume in the Chandler Loop Model: Theoretical and Experimental Analysis.</a> Cardiovascular Engineering and Technology. 5 (2), 133-144 (2014).</li><li>B&#246;swirth, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Technische Str&#246;mungslehre. 8 edn. , (2010).</li><li>Cartwright, I. J., Pockley, A. G., Galloway, J. H., Greaves, M., Preston, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+dietary+omega-3+polyunsaturated+fatty+acids+on+erythrocyte+membrane+phospholipids,+erythrocyte+deformability+and+blood+viscosity+in+healthy+volunteers.">The effects of dietary omega-3 polyunsaturated fatty acids on erythrocyte membrane phospholipids, erythrocyte deformability and blood viscosity in healthy volunteers.</a> Atherosclerosis. 55 (3), 267-281 (1985).</li><li>Wong, K. K. L., Wu, J., Liu, G., Huang, W., Ghista, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+arteries+hemodynamics:+effect+of+arterial+geometry+on+hemodynamic+parameters+causing+atherosclerosis.">Coronary arteries hemodynamics: effect of arterial geometry on hemodynamic parameters causing atherosclerosis.</a> Medical &amp; biological engineering &amp; computing. 58, 1831-1843 (2020).</li><li>Kania, R. E., Herman, P., Ar, A., Tran Ba Huy, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+pitfalls+in+middle+ear+gas+studies:+errors+introduced+by+the+gas+permeability+of+tubing+and+additional+dead+space.">Technical pitfalls in middle ear gas studies: errors introduced by the gas permeability of tubing and additional dead space.</a> Acta Oto-Laryngologica. 125 (5), 529-533 (2005).</li><li>Foley, M. E., McNicol, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in-vitro+study+of+acidosis,+platelet+function,+and+perinatal+cerebral+intraventricular+haemorrhage.">An in-vitro study of acidosis, platelet function, and perinatal cerebral intraventricular haemorrhage.</a> The Lancet. 1 (8024), 1230-1232 (1977).</li><li>Engstrom, M., Schott, U., Romner, B., Reinstrup, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acidosis+impairs+the+coagulation:+A+thromboelastographic+study.">Acidosis impairs the coagulation: A thromboelastographic study.</a> The Journal of Trauma. 61 (3), 624-628 (2006).</li><li>Dirkmann, D., Hanke, A. A., Gorlinger, K., Peters, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermia+and+acidosis+synergistically+impair+coagulation+in+human+whole+blood.">Hypothermia and acidosis synergistically impair coagulation in human whole blood.</a> Anesthesia &amp; Analgesia. 106 (6), 1627-1632 (2008).</li><li>Ritz-Timme, S., Eckelt, N., Schmidtke, E., Thomsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genesis+and+diagnostic+value+of+leukocyte+and+platelet+accumulations+around+"air+bubbles"+in+blood+after+venous+air+embolism.">Genesis and diagnostic value of leukocyte and platelet accumulations around "air bubbles" in blood after venous air embolism.</a> International Journal of Legal Medicine. 111 (1), 22-26 (1998).</li><li>Thorsen, T., Klausen, H., Lie, R. T., Holmsen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bubble-induced+aggregation+of+platelets:+effects+of+gas+species,+proteins,+and+decompression.">Bubble-induced aggregation of platelets: effects of gas species, proteins, and decompression.</a> Undersea &amp; Hyperbaric Medicine : Journal of the Undersea and Hyperbaric Medical Society, Inc. 20 (2), 101-119 (1993).</li><li>Streller, U., Sperling, C., Hubner, J., Hanke, R., Werner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+and+evaluation+of+novel+blood+incubation+systems+for+in+vitro+hemocompatibility+assessment+of+planar+solid+surfaces.">Design and evaluation of novel blood incubation systems for in vitro hemocompatibility assessment of planar solid surfaces.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part B. 66 (1), 379-390 (2003).</li><li>Hesh, C. A., Qiu, Y., Lam, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+microfluidics+and+the+blood-endothelium+interface.">Vascularized microfluidics and the blood-endothelium interface.</a> Micromachines. 11 (1), 18 (2019).</li><li>Nordling, S., Nilsson, B., Magnusson, P. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+in+vitro+model+for+studying+the+interactions+between+human+whole+blood+and+endothelium.">A novel in vitro model for studying the interactions between human whole blood and endothelium.</a> Journal of Visualized Experiments. (93), e52112 (2014).</li></ol>

Спонсор «ebo kunze industriedesign, Im Dentel 17, 72639 Neuffen, Германия» оказал финансовую поддержку в виде расходных материалов и гонораров за публикацию автору этой рукописи «Макс Ваккер». Спонсоры не играли никакой дополнительной роли в разработке, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Это исследование показало, что представленная в пробирке модель гемодинамической петли предлагает надежный метод для тестирования совместимости крови in vitro медицинских устройств в соответствии со стандартом ISO 10993-4.
Критические шаги в протоколе включают в себя рисунок крови и заполнение трубок кровью, где чрезмерного вакуума или возбуждения следует избегать, чтобы предотвратить активацию компонентов крови процедурой обработки. Кроме того, очень важно немедленно заморозить образцы плазмы и держать их на льду после оттаивания, так как активация системы дополнения и коагуляции может быть подделана, сохраняя образцы на комнатной температуре в течение более длительного времени.
Поскольку эта модель имеет как достоинства, так и недостатки по сравнению с другими моделями in vitro, при проектировании экспериментов необходимо учитывать несколько факторов.
Во-первых, петли могут быть разнообразны по длине и диаметру, чтобы соответствовать различным экспериментальным установкам. В случае, если установка включает в себя контрастные трубки различного внутреннего диаметра, следует иметь в виду, что различия в диаметре приведет к различным силам стрижки, тем самым влияя на коагуляцию и дополнятькаскад 7. Во-вторых, скорость вращения была установлена до 30 оборотов в минуту в этом эксперименте. Это приведет к кровотоку около 25 см/с, что сопоставимо со скоростью кровотока в шунтировании коронарной артериичеловека 25. Скорость напряжения, генерируемая вращением петель, является основным параметром, который будет инициировать биохимические каскады компонентов крови, включая клетки и клеточные белки. Но так как кровь является неньютоновской жидкостью, скорость напряжения также будет зависеть от кривизны трубки, соответственно, длина труб, которые закрыты дляпетель 10. Всякий раз, когда скорость вращения или размер цикла меняются, важно учитывать, что корреляция между скоростью напряжения и скоростью вращения не является линейной. Корреляция между скоростью вращения и скоростью напряжения недостаточно изучена до сегодняшнего дня, и необходимы дальнейшие исследованиядля изучения этих конкретных параметров 10,26,27. Однако, на основе модели ламинарного пограничного слоя, данной трубки диаметром 5 мм и скоростью вращения 25 см/с, приблизительная оценка стены стрижки стресс (WSS) будет указывать значения между 2.20-22.00 Паскаль на расстоянии 1,00-0,01 мм к стене трубки, когда плотность крови оценивается в 1060 кг-3 и кинетической вязкости установлен на 0,0025 Паскаль28,29. Интересно, что также более подробный вычислительный анализ динамики потока в кривизны коронарных артерий человека показал значения WSS в диапазоне от 11,33 до 16,77 паскаля при примерно сопоставимых параметрах скорости, плотности и вязкостикрови 30.
Помимо этого ограничения, представленная модель цикла является давление меньше системы, которая не имитирует внутрисосудистые коэффициенты артериального давления в сосудистой системе человека.
Следующим важным ограничением является то, что кровь находится в контакте с воздухом внутри петель, что приносит дополнительные помехи. На такой кровеный контакт влияют два параметра, которые включают в себя проницаемость газа труб и удержание воздуха внутри петель при заполнении их кровью. Каждый трубчатый материал обладает определенной проницаемостью газа, что может привести к значительным изменениям концентраций газа внутри труб. Хотя некоторые авторы утверждают, что в результате влияние проницаемости газа на активацию компонентов крови остается неясным31, известно, что функция свертывания крови очень чувствительна к рН-сдвиг, который может быть вызван CO2 диффузии32,33,34. Здесь мы протестировали биосовместимость трубок перфузии крови в условиях воздуха в помещении, сравнимые с клиническими сценариями экстракорпорацианой перфузии крови. Для будущих улучшений представленной модели инкубация всей модели в инкубаторе CO2 и выполнение проверки рН крови до и после инкубации могут быть полезны для дальнейшей стандартизации этой модели.
Кроме того, кровено-воздушный интерфейс внутри петель может привести к активации плазменных белков и клеточныхфракций крови 35,36. Ролик насос управляемых устройств без воздуха внутри труб может избежать вопроса о крови воздуха интерфейс, но они, безусловно, вызывают повреждение клеток крови со значительным повышенным уровнем гемоглобина по сравнению с представленной здесь модели петли, и гемоглобин в плазме может помешать чувствительности проверенных анализов в ELISA16. В этом исследовании мы показали, что гемолитический эффект самой модели петли остается минимальным при использовании биосовместимых материалов, таких как гепарин покрытием ПВХ труб. Таким образом, модель, с одной стороны, не вызывает чрезмерного повреждения клеток по сравнению с насосом управляемых моделей, но с другой стороны, вызывая плазменных белков из-за контакта воздуха в крови. Следует отметить, ван Oeveren и др. разработал мяч клапана на основе петли модели избегая воздуха внутри петель16. Эта перспективная альтернатива представленной здесь модели цикла может преодолеть проблему кроваво-воздушного интерфейса, однако, по сравнению с моделью, представленной здесь, слякоть тромбоцитов все еще выше для модели петли на основе шар-клапана.
Что касается статического контроля, следует отметить, что само стекло было показано, что мощный активатор коагуляторной системы37. Однако в представленной установке инкубация в стеклянном стакане (статический контроль) не приводит к чрезмерной активации клеток-хозяина или активации коагуляторной системы по сравнению с базовыми уровнями непосредственно после рисования крови. В заключение, было бы полезно использовать, например, полипропиленовые трубки, если статический контроль показывает высокий уровень активации.
Независимо от того, является ли это петля на основе или насоса управляемой модели, эти модели in vitro полностью не хватает подлинных биологических взаимодействий, которые в основном способствовали нетронутыми эндотелия, который является идеальным крови контактной поверхности. Обоснование этого вопроса является более очевидным, когда медицинское устройство, как стент тестируется, которые могут придать различные результаты, с точки зрения активации и плазменных белков, во время его взаимодействия с компонентами крови в присутствии эндотелия. Это объявляется одним из основных недостатков всех обсуждаемых систем in vitro, имитирующих кровеносную систему. Таким образом, чтобы преодолеть этот вопрос, новые микрофлюидные системы, которые полностью покрыты эндотелием, приобретают огромный интерес, но тем не менее по сравнению с моделью цикла, представленной здесь, они по-прежнему ограничены для размещения меньших объемов крови иминимальных темпов потока 38,39
Таким образом, мы приходим к выводу, что модель Chandler Loop остается надежной моделью для проведения стандартизированных тестов на биосовместимость крови сосудистых медицинских приборов в области сердечно-сосудистых исследований.

Гемосовместимость тестирования медицинских устройств является важным шагом в разработке новых устройств, таких как сосудистые стенты или перфузионые трубки для экстракорпоральных мембранной оксигенации. До сегодняшнего дня модели животных рассматриваются в качестве стандартных инструментов для завершения процедуры тестирования медицинских приборов до их внедрения в организме человека. Отныне необходимо найти альтернативные модели in vitro, которые еще больше помогают минимизировать исследования на животных. В этом исследовании мы, таким образом, исследовали миниатюрную модель гемодинамической петли in vitro. Целью представленного метода является проверка совместимости медицинских приборов в крови in vitro в соответствии со стандартом ISO 10993-4.
Стандарт ISO 10993-4 описывает стандартизированные наборы клинических параметров, которые будут исследованы на образце крови1. Короче говоря, это тромбоз (агрегация и количество тромбоцитов), коагуляция (фибринопептид А, FPA), гематологический анализ (весь анализ клеток крови), индекс гемолита (бесплатный плазменный гемоглобин) и система дополнения (комплекс терминального дополнения, sC5b9). Однако для измерений также могут быть учтены дополнительные маркеры, такие как нейтрофиловая полиморфонуклеарная эластаза (ПМН), интерлейкин 6 (IL-6) и фактор некроза опухоли - альфа (TNF), отражающий состояние активации лейкоцитов. Для определения и количественной оценки циркулирующих белков, свободных от клеток, которые присутствуют в плазме крови, сэндвич-энзиматический связанный иммуносорбентный анализ (ELISA)представляет собой обычный и самый надежный метод 2,3. Аналогичным образом, фенотип и активация статуса клеток-хозяйных (например, лейкоцитов) можно количественно определить путем обнаружения экспрессии поверхности клеток молекул по цитометрии потока (FACS), которая обеспечивает одноклеточную подвеску на основе считывания, где флуоресцентные помечены конкретные антитела связываются с целевымимолекулами поверхности клеток 4. Сканирование электронной микроскопии (SEM) также рекомендуется для определения образования тромба на тестированном материале стандартом ISO 10993-41. Этот метод можно дополнить рентгеновской микротомографией (КТ), для проведения структурного анализа тромба, например, его толщины, размера и локализации на 3D-изображении5.
Смысл использования этой гемодинамической модели in vitro заключается в том, чтобы экран для наиболее эффективных и совместимых медицинских устройств, понимая основные физиологические динамики компонентов крови, таких как тромбоциты, которые участвуют в первичном гемостазе или лейкоцитов и их взаимодействие с различными типами сосудистых устройств. Такие системы in vitro очень востребованы, поскольку они уменьшают потребность в исследованиях на животных.
Представленная здесь модель цикла выполняет эти требования. Эта модель была впервые описана А.B. Чендлером в 1958 году для производства тромбов и, следовательно, также называется Chandler Loop модель6. До сих пор эта модель использовалась в серии экспериментов и модификаций для исследования биосовместимостикрови медицинских приборов 7,8,9,10,11,12,13,14. Он состоит из полимерных трубок, которые частично заполнены кровью и формируются в повторно закрытой петли. Эти петли вращаются в контролируемой температурой водяной бане для имитации условий сосудистого потока с его геморгеологическими эффектами. Альтернативные методы, такие как насос управляемых моделей или моделей, которые используют механические клапаны мяч внутри петли, чтобы вызвать приток крови внутри полимерныхтруб уже были описаны 15,16. Тем не менее, общее преимущество представленного метода заключается в том, что механическая сила, применяемая к клеткам крови и белкам, низка, избегая гемолизиса, и нет контакта между кровью и разъемами, что может привести к турбулентности потока и активации компонентов крови. Основными факторами активации внутри петли являются сам испытательный материал и воздух, который находится в ловушке внутри. Это помогает свести к минимуму источники измерительных ошибок и обеспечить высокую воспроизводимость, даже если интерфейс крови и воздуха может привести к денатурации белка17. Кроме того, можно исследовать разновидности трубчатых материалов и стентовых диаметров без ограничений длины или размера, что позволяет использовать трубки различной длины и внутреннего диаметра. Кроме того, можно также исследовать гемокомпатибильность хозяина на неточном закрытии петли и воздействии неокрашенной поверхности трубки. Другие подобные медицинские применения этой модели гемодинамической петли in vitro что она смогла также быть использована для того чтобы изучить взаимодействия между immunotherapeutics (снадобьями) и компонентами крови во время или preclinical развития или индивидуального скрининга безопасности снадобья до first-in-man этапа iого клинического испытания, или для поколения материала thrombus который можно использовать вболее дополнительных экспериментах 18,19,20.
Это исследование описывает подробный протокол для тестирования гемокомпатибильности перфузионной трубки и / или стенты. Здесь сравнение неокрашенных и покрытых ПВХ труб (гепВХ: гепариновое покрытие, полипВХ: покрытие биоактивным полимером). Снижение активации тромбоцитов, но более высокая активация системы коагуляции (FPA) были найдены для обеих покрытых труб по сравнению с неокрашенными трубками. ГепВВК трубки, используемые здесь, модифицируются с ковалентно связанным гепарином,чтобы сделать их тромборезистентными 21 и уже были использованы в модели цикла для оптимизации и характеристикиразличных параметров 22. ПолиПВК трубки, используемые в этом исследовании являются коммерчески доступны трубы, используемые в клинических условиях экстракорпоративной перфузии крови и покрыты гепарином полимера, чтобы уменьшить ихтромбогенность 23. Иногда в клинических применениях используются даже неокрашенные ПВХ трубки. Поэтому мы включили латексные трубки в качестве положительной контрольной группы, которая показала чрезмерную активацию тромбоцитов, системы свертывания и растворимых факторов, таких как IL-6, TNF и PMN elastase. Формирование тромба было замечено при имитации неточного закрытия петли. Это привело к активации коагуляции и системы дополнения, а также лейкоцитов и тромбоцитов по сравнению с базовыми условиями. Кроме того, контакт крови с использованным здесь стентным материалом (голый металлический стент нитинола, покрытый пропитанным углеродом расширенным полиэтиленом) привел к более высокой активации тромбоцитов и лейкоцитов с точки зрения эластазы ПМН. В целом представленная модель не вызывало гемолизиса ни в одном из проверенных сосудистых устройств, так как они были сопоставимы с базовыми или статическими условиями, за исключением латексных трубок, где гемолиз красных кровяных телец (РБК) был очевиден. Кроме того, эти перфузионные трубки могут быть рассмотрены либо с помощью изображений, либо с помощью гистологии. Хотя гистологические оценки могут быть осуществимы, мы в основном сосредоточились на ELISA и цитометрии потока для выполнения этих экспериментов и тем самым позволяя возможности проведения экспериментов на основе представленной здесь модели для многих лабораторий. Таким образом, данный метод представляет собой осуществимый метод проверки биосовместимости крови сосудистых медицинских приборов в соответствии с рекомендациями стандарта ISO 10993-4. Кроме того, этот метод может быть использован всякий раз, когда взаимодействие между кровью и материалами должны быть проверены в условиях потока, имитируя условия in vivo.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>5 ml tube, K3 EDTA</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>32332</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Mouse Ig, &#954;/Negative Control Compensation Particles Set</td>
			<td>Becton Dickinson BioSciences</td>
			<td>552843</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC anti-human CD45 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>368512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD LSR Fortessa II cell analyzer</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>647465</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Citrate Tubes</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>369714</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer one-use holder</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>364815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Safety-Lok butterfly canula 21 G</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>367282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beaker glass ROTILABO short 10 ml</td>
			<td>Carl Roth GmbH + Co. KG</td>
			<td>X686.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beaker glass ROTILABO short 50 ml</td>
			<td>Carl Roth GmbH + Co. KG</td>
			<td>X688.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant Violet 421 anti-human CD162 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>328808</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brilliant Violet 421 anti-human CD41 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>303730</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge ROTINA 420 | 420 R</td>
			<td>Hettich Zentrifugen</td>
			<td>4701 | 4706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes, 50 ml</td>
			<td>Greiner Bio-One GmbH</td>
			<td>227261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHC Super modified, 5mm PVC tubing</td>
			<td>Corline Sweden</td>
			<td>1807-148</td>
			<td>Referred to as hepPVC tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circular Precision Cutter</td>
			<td>ebo kunze industriedesign, Neuffen, Germany</td>
			<td>CLS 007-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Closing Unit (complete with tension bands)</td>
			<td>ebo kunze industriedesign, Neuffen, Germany</td>
			<td>CLS 008-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric tape Scotch Super 33+</td>
			<td>VWR</td>
			<td>MMMA331933</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELISA MAX Deluxe Set Human IL-6</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>430504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELISA MAX Deluxe Set Human TNF-a</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>430204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Pipette Research plus, single channel, inkl. epT.I.P.S. box, 0,1 &#8211; 2,5 &#181;L, gray</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>3123000012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Pipette Research plus, single channel, inkl. epT.I.P.S. box, 0,5 &#8211; 10 &#181;L, gray</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>3123000020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Pipette Research plus, single channel, inkl. epT.I.P.S. box, 10 &#8211; 100 &#181;L, yellow</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>3123000047</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Pipette Research plus, single channel, inkl. epT.I.P.S. box, 100 &#8211; 1,000 &#181;L, blue</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>3123000063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Pipette Research plus, single channel, inkl. epT.I.P.S. box, 20 &#8211; 200 &#181;L, yellow</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>3123000055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Pipette Research plus, single channel, inkl. epT.I.P.S. sample bag, 0,5 &#8211; 5 mL, violet</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>3123000071</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylenediaminetetraacetic acid solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>03690-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS tubes polystyrene 5.0 ml round bottom</td>
			<td>Corning BV</td>
			<td>352052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum Gold Plus</td>
			<td>Bio-Sell</td>
			<td>FBS.GP.0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC anti-human CD14 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>367116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluency plus stent 13.5 x 60 mm</td>
			<td>Angiomed GmbH &#38; Co</td>
			<td>FVM14060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Free Hemoglobin fHb Reagent</td>
			<td>Bioanalytics GmbH</td>
			<td>004001-0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gibco PBS Tablets</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>18912014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves Vasco Nitril white L</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co.KG</td>
			<td>9208437</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves Vasco Nitril white M</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co.KG</td>
			<td>9208429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde 25% aequous solution</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G6257-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin, 25.000 IE in 5 ml</td>
			<td>Rotexmedica, Trittau, Germany</td>
			<td>PZN 3862340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Fibrinopeptide A (FPA) ELISA Kit</td>
			<td>H&#246;lzel Diagnostika</td>
			<td>abx253234</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kodan tincture forte colourless</td>
			<td>Sch&#252;lke &#38; Mayr GmbH</td>
			<td>104012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Latex tube, ID 5 mm</td>
			<td>Laborhandel24 GmbH</td>
			<td>305 0507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loop Stand</td>
			<td>ebo kunze industriedesign, Neuffen, Germany</td>
			<td>CLS 009-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medimex venous tourniquet classic</td>
			<td>ROESER Medical GmbH</td>
			<td>310005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate reader Infinite 200 Pro M Plex</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>TEC006418I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate shaker PMS-1000i</td>
			<td>VWR</td>
			<td>444-0041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nalgene Metric non-phthalate PVC tubing, ID 5 mm</td>
			<td>VWR</td>
			<td>NALG8703-0508</td>
			<td>Referred to as PVC tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NexTemp (Standard) Single-Use Clinical Thermometer</td>
			<td>Medical Indicators</td>
			<td>2112-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nunc MaxiSorp ELISA Plates, uncoated</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>423501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmium tetroxide solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10256970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde Solution, 4% in PBS</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>AAJ19943K2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE anti-human CD16Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>302008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE anti-human CD62P (P-Selectin) Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>304906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette controller, pipetus</td>
			<td>VWR</td>
			<td>612-1874</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips epT.I.P.S. 0.2 - 5 ml</td>
			<td>OMNILAB-LABORZENTRUM GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>5186480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips epT.I.P.S. standard 0,1 - 10&#181;l</td>
			<td>Th. Geyer GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>9409410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips epT.I.P.S. standard 2 - 200&#181;l</td>
			<td>Th. Geyer GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>0030 000.870</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips epT.I.P.S. standard 50 - 1000&#181;l blue</td>
			<td>Th. Geyer GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>0030 000.919</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMN (Neutrophil) Elastase Human ELISA Kit</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BMS269</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Probe stand ROTILABO combi</td>
			<td>CARL ROTH</td>
			<td>K082.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rack for rotation unit (12 slots 3/8 &#39;&#39; with variable slot width)</td>
			<td>ebo kunze industriedesign, Neuffen, Germany</td>
			<td>CLS 011-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RBC Lysis Buffer (10X)</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>420301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent reservoirs</td>
			<td>VWR</td>
			<td>613-1184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotation Unit</td>
			<td>ebo kunze industriedesign, Neuffen, Germany</td>
			<td>CLS 010-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safe-Lock micro test tubes 0.5 ml</td>
			<td>OMNILAB-LABORZENTRUM GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>5409320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safe-Lock micro test tubes 1.5 ml</td>
			<td>OMNILAB-LABORZENTRUM GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>5409331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sc5b9 Human ELISA KIT</td>
			<td>TECOmedicalGroup</td>
			<td>A029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel no 10</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9999403</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning electron microscope XL30 ESEM-FEG</td>
			<td>Philips</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw top bottle ROTILABO Clear glass, 1000 ml, GL 45</td>
			<td>Carl Roth GmbH + Co. KG</td>
			<td>X715.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw top bottle ROTILABO Clear glass, 500 ml, GL 45</td>
			<td>Carl Roth GmbH + Co. KG</td>
			<td>X714.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-micro cuvette 1.6 ml</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>67.746</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipette 10.0 ml</td>
			<td>Corning BV</td>
			<td>4488</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipette, 25.0 ml</td>
			<td>Corning BV</td>
			<td>4489</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipette, 5.0 ml</td>
			<td>Corning BV</td>
			<td>4487</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon tube, inner diameter 8 mm, outer diameter 12 mm</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BURK8803-0812</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprout mini centrifuge</td>
			<td>Biozym</td>
			<td>552034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stop Solution for TMB Substrate</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>77316</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Swabs, sterile</td>
			<td>Fuhrmann GmbH</td>
			<td>32055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 10 ml</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>300296</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperature controlled water basin</td>
			<td>ebo kunze industriedesign, Neuffen, Germany</td>
			<td>CLS 020-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tert-Butanol, 99.5%, extra pure, ACROS Organics</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10000730</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TMB Substrate Set</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>421101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trillium PVC tube, 5 mm ID</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>161100107100103</td>
			<td>Referred to as polyPVC tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>AppliChem</td>
			<td>A4974,0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV-Vis Spektrometer Lambda 2</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>33539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vornado Mini Vortexer</td>
			<td>Biozym</td>
			<td>55BV101-B-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XN-3000 workstation blood analyzer</td>
			<td>Sysmex Europe</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#956;-CT Phoenix Nanotom S</td>
			<td>GE Sensing &#38; Inspection, Wunstorf, Germany</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vitro hemodynamic loop model to investigate the hemocytocompatibility and host cell activation of vascular medical devices

В этом исследовании, гемосовместимость труб с внутренним диаметром 5 мм из поливинилхлорида (ПВХ) и покрыты различными биологически активных конъюгированных был по сравнению с неокрашенные трубки ПВХ, латексные трубки, и стент для внутрисосудистого применения, который был помещен внутри труб ПВХ. Оценка гемосовместимости была проведена с использованием модели гемодинамической петли in vitro, которая рекомендована стандартом ISO 10993-4. Трубки были разрезаны на сегменты одинаковой длины и закрыты, чтобы сформировать петли, избегая каких-либо пробелов в сращивании, затем заполнены человеческой кровью и вращаются в водяной бане при 37 градусов по Цельсию в течение 3 часов. После этого кровь внутри трубок была собрана для анализа всего анализа клеток крови, гемолизиса (свободного плазменного гемоглобина), системы комплеления (sC5b-9), коагуляционной системы (фибринопептида А) и лейкоцитной активации (полиморфонуклеарная эластаза, фактор некроза опухоли и интерлейкин-6). Активация клеток-хозяина была определена для активации тромбоцитов, статуса интегрина лейкоцитов и агрегатов тромбоцитов моноцитов с использованием цитометрии потока. Эффект неточного замыкания петли был исследован с помощью рентгеновской микротомографии и сканирующей электронной микроскопии, которая показала образование тромбов при сращивании. Латексные трубки показали сильнейшее активации плазмы и клеточных компонентов крови, что свидетельствует о плохой гемосовместимости, а затем стент группы и неокрашенные трубки ПВХ. Покрытые ПВХ трубки не показали значительного снижения статуса активации тромбоцитов, но показали увеличение в дополнение и коагуляции каскад по сравнению с неокрашенными трубками ПВХ. Сама модель цикла не приводит к активации клеток или растворимым факторам, а уровень гемолизиса низкий. Таким образом, представленная в пробирке модель гемодинамической петли позволяет избежать чрезмерной активации компонентов крови механическими силами и служит методом исследования взаимодействий в пробирке между донорской кровью и сосудистыми медицинскими приборами.

Все представленные данные, за исключением участков FACS, были проанализированы с помощью программного обеспечения статистики. Участки FACS были проанализированы с помощью программного обеспечения цитометрии потока.
Анализ всего числа клеток крови не показал каких-либо существенных различий в отношении эритроцитов между всеми проверенными состояниями(рисунок 2). Но, тромбоциты и лейкоциты были резко сокращены в группе латекса, что указывает на очень плохую биосовместимость латекса. Это еще раз подчеркивается повышенным уровнем свободного гемоглобина в группе латекса, что свидетельствует о том, что, за исключением латексной группы, ни одно из других сосудистых устройств или условий привело к обширному гемолизу(рисунок 2). Кроме того, покрытые ПВХ трубки, полиПВХ и гепВПХ, а также проверенный стент не привели к тромбозу с помощью тромбоцитов и лейкоцитов потери, в то время как латекс выставлены самые высокие потери тромбоцитов и лейкоцитов, а затем без покрытия ПВХ труб, которые показали снижение тенденции.
В то время как все протестированные сосудистые устройства привели к повышенной активации системы коагуляции (FPA) и компонента дополнения (sC5b-9), циклы гепВВК продемонстрировали тенденцию к снижению уровня FPA и sC5b-9 по сравнению конкретно с петлями полипвК(рисунок 3). Интересно, что петли ПВХ и Gap без покрытия показали более низкие уровни FPA по сравнению с полиПВХ, хотя и не достигли уровня статистической значимости. Тем не менее, латексные петли продемонстрировали значительно повышенные уровни FPA по сравнению с базовыми и статическими условиями.
В соответствии со всем числом клеток крови, латексные петли выставлены самые высокие уровни TNF, IL-6 и PMN elastase (Рисунок 4), достигнув уровня статистической значимости по сравнению с остальными группами с точки зрения TNF и IL-6 (Рисунок 4A,B), в то время как статические и базовые условия с точки зрения PMN elastase (Рисунок 4C). Эти результаты указывают на мощную активацию лейкоцитов латексом. Базовые уровни маркеров активации всегда были сопоставимы со статичными условиями, что указывает на правильную гепаринизацию крови.
Интересно, что было показано, что тромбоциты и лейкоциты рассчитывает на разрыв индуцированных петли были лишь незначительно сокращены с умеренной активацией коагуляторной системы (FPA) и лейкоцитов (PMN elastase), хотя неправильное закрытие петли с результатом турбулентности потока и контакта крови с неокрашенной, грубой резки поверхности привело к макроскопически видимых сгустков насплайсе (рисунок 1F). Сгустки и их распределение по всей поверхности сращивания были очевидны с изображениями кТ и SEM, в то время как не было обнаружено сгустка, когда петли были закрыты с внешним устройством закрытия, не оставляя зазора между окончанием цикла(рисунок 5).
Поток цитометрического анализа клеток крови хозяина, которые были окрашены тромбоцитов конкретных маркеров, CD41 и маркер активации тромбоцитов CD62P, показаны на рисунке 6A,B. Здесь латексные трубки продемонстрировали чрезвычайно высокую медианную интенсивность флуоресценции (МФО) для CD62P на тромбоцитах крови, за которыми следовал стент, в то время как трубы с покрытием полиПВК с гепарином продемонстрировали минимальную активацию тромбоцитов, изображающих антитомбогенное свойство полиПВК-труб. Кроме того, лейкоциты были классифицированы на основе CD45 и SSC (боковой рассеяния) на основе гранулированности в (i) гранулоциты; ii) моноциты и (iii) лимфоциты(рисунок 7), а также экспрессия CD162и интегрина была обнаружена на каждой субпопуляции лейкоцитов, которые, как известно, взаимодействуют с CD62P на тромбоцитах24. Было замечено, что интегрин выражения были резко сокращены на гранулоцитов и лимфоцитов в латексных петлях. Этот результат был в соответствии с пониженным уровнем общих частот лейкоцитов в латексных петлях(рисунок 2). В целом, уровень интегрина был выше среди моноцитов по сравнению с гранулоцитами и лимфоцитами, что указывает на вероятность взаимодействия моноцитов с активированными тромбоцитами. В этой связи агрегаты моноцитов тромбоцитов были также оценены путем окрашивания клеток крови с CD14 (как моноцитный маркер) и CD41 (в качестве маркера тромбоцитов) и в конечном счете для выявления двойных положительных клеток, т.е.CD14и CD41(Рисунок 8). Здесь мы заметили, что стент группа выставлены самые высокие уровни выражения CD41 на MPA, а затем латексной группы, что свидетельствует о повышенной тенденции к форме MPA, несмотря на снижение частоты моноцитов (Lt;1 %) в латексных петлях.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61570/61570fig01.jpg"> Рисунок 1: Обзор модели гемодинамической петли in vitro и ее модификаций. (A) Петля для эксперимента разрыва с внешней системой закрытия цикла, не оставляя зазора на сращивании. (B)Петля из полиПВХ покрытием ПВХ трубки и стента внутри (стрелка). (C) Петля из латексной трубки. (D)Петля для эксперимента зазора без внешней системы закрытия цикла оставляя зазор между окончаниями трубки (стрелка). (E)Петли помещены в колыбель петли внутри водяной бани и заполнены кровью. (F)Тромб в результате чего разрыв на сращивание (стрелка) после вращения. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61570/61570fig01large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61570/61570fig02.jpg"> Рисунок 2: Результаты по анализу клеток крови и гемоглобина плазмы. (A)Количество эритроцитов. (B)Количество тромбоцитов. (F)Количество лейкоцитов. (D)Бесплатный плазменный гемоглобин. Результаты указывают на плохую биосовместимость латекса, что приводит к чрезмерному гемолизу. Данные представлены как среднее значение; бары ошибок указывают на SEM. n-1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61570/61570fig02large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61570/61570fig03.jpg"> Рисунок 3: Результаты активации системы коагуляции и дополнения. (A) Активация системы коагуляции, измеряемая уровнями фибринопептида A (FPA)(B) Активация системы дополнения, измеряемая уровнями sC5b-9. В то время как латексные трубки вызвали значительные повышенные уровни FPA, активация дополнения была сильной для всех проверенных материалов. Данные представлены как среднее значение, бары ошибок указывают на SEM. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61570/61570fig03large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61570/61570fig04.jpg"> Рисунок 4: Маркеры активации лейкоцитов. (A)Фактор некроза опухоли альфа (TNF). (B)Интерлейкин 6 (IL-6) (C) PMN Elastase. Результаты указывают на повышенную активацию лейкоцитов из-за повышенных уровней анализируемых маркеров, за которыми следуют стентные петли, что привело лишь к повышению уровня ТЧН-эластасы, но не КНТ или ИЛ-6. Данные представлены как среднее значение, бары ошибок указывают на SEM. Зпю lt;0.01, n-1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61570/61570fig04large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61570/61570fig05.jpg"> Рисунок 5: Изображение сращивания петель. (A)μ компьютерной томографии (КТ) петель с неправильным закрытием (пробел). Красные области указывают на тромбный материал. (B)Рендеринг светимой стороны трубки. Прямоугольный выбор указывает область для сканирования электронной микроскопии (SEM)(C). (D)qCT петель с внешним устройством закрытия петли и без зазора на сращивании, и (E) визуализации и зрения светимой поверхности. Никакого тромбового материала обнаружено не было. (F) SEM изображение прямоугольного выбора в (E). На режущей поверхности не было обнаружено никакого тромбового материала. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61570/61570fig05large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61570/61570fig06.jpg"> Рисунок 6: Участок FACS для активации тромбоцитов (CD62P). (A) Представитель FACS участок (основное состояние), показывающий кровь CD41и тромбоциты. (B)График, показывающий состояние активации тромбоцитов, отраженное в среднем интенсивности флуоресценции (МФО) различных типов сосудистых устройств по сравнению со статическими RT и базовыми условиями. На барах данных присутствуют данные из отдельных измерений. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61570/61570fig06large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61570/61570fig07.jpg"> Рисунок 7: Участок FACS для интегрина лейкоцитов (CD162). (A) Представитель FACS участок (базовое состояние), показывающий кровь CD45 и лейкоцитов и подгрупп(B) График, показывающий лейкоцит CD162- интегрин означает флуоресценцию интенсивности (МФО) различных типов сосудистых устройств по сравнению со статичными и базовыми условиями. На барах данных присутствуют данные из отдельных измерений. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61570/61570fig07large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61570/61570fig08.jpg"> Рисунок 8: Участок FACS для агрегатов моноцитов тромбоцитов (CD41/CD14). (A) Представитель FACS участок (базовое условие), показывающий gating для моноцитов крови (CD45и /CD14 ), тромбоциты (CD41 ) и моноцитов тромбоцитов агрегатов (CD41 / CD14 ) (B) График, показывающий CD41 - средняя интенсивность флуоресценции (МФО) на моноцитов тромбоцитов агрегатов для различных сосудистых устройств по сравнению с различными сосудистыми устройствами. На барах данных присутствуют данные из отдельных измерений. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61570/61570fig08large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>

Watch this Scientific Journal Video about An In Vitro Hemodynamic Loop Model to Investigate the Hemocytocompatibility and Host Cell Activation of Vascular Medical Devices at JoVE.com

An In Vitro Hemodynamic Loop Model to Investigate the Hemocytocompatibility and Host Cell Activation of Vascular Medical Devices

Здесь представлен протокол для стандартизированной модели гемодинамической петли in vitro. Эта модель позволяет проверить гемо совместимость перфузиочных труб или сосудистых стентов в соответствии со стандартом ISO (Международная организация по стандартизации) 10993-4.

Модель гемодинамической петли In Vitro для исследования гемоцитосовместимости и активации клеток-хостов сосудистых медицинских устройств

In this study, the hemocompatibility of tubes with an inner diameter of 5 mm made of polyvinyl chloride (PVC) and coated with different bioactive ...

Эта модель гемодинамической петли позволяет исследователям проверить несовместимость в пробирке гемо сосудистых устройств, таких как перфузионые трубки или стенты. на стандартизированных условиях. Таким образом, этот метод не оказывает никакого влияния на кровь с помощью механической силы и тем самым избежать вводящих в заблуждение результатов внутренней активации компонентов крови.Перед попыткой эксперимента необходимо практиковать правильную механическую сборку деталей, идеальную конструкцию системы замыкания петли и медленную загрузку крови в петли. Для подготовки петли сборки, использовать резак трубки сократить 250 сантиметров в длину, пять миллиметров внутреннего диаметра куски труб на плоской поверхности. И подключите открытые окончания труб в короткий кусок силиконовой трубки установки внешнего диаметра следственной трубки для создания формы петли.Тщательно затяните запирающиеся винты разъема натяжения и отрегулируйте силу закрытия так, чтобы между двумя изгибами не осталось зазора. Если замок винт полностью ужесточены и напряжение поликарбонатной полосы кажется слишком низким, чтобы закрыть разрыв между двумя изгибами, открыть систему блокировки и сократить несколько миллиметров натяжения полосы. Чтобы подготовить сборку стентового цикла, откройте две петли и вынюхив трубку из системы натяжения.Затем вставьте стент в середину трубки по указанию производителя. Когда соответствующее количество петель для эксперимента были созданы безопасные петли в петле колыбели вращения блока, за пределами 37 градусов водяной бани и прикрепить петлю колыбели к блоку вращения внутри водяной бани. Затем заполните один 10 миллилитров шприц на каждые две петли крови, которые будут собраны с 150 микролитров или свежеприготовленный раствор гепарина фонда и использовать 21 калибровочных бабочки, чтобы аккуратно собирать кровь в шприцы, заботясь, чтобы избежать гомолиза или активации клеток из-за чрезмерного вакуума.Когда вся кровь была собрана передачи крови в стакан и использовать пять миллилитров серологических пипетки, чтобы аккуратно смешать кровь и гепарин. Когда однородный раствор был получен с кончиком пипетки не полностью вставляется в трубку, тщательно, заполнить каждую петлю с пятью миллилитров крови. Закройте каждый цикл после того, как он был заполнен и подтвердить, что петля, натяжение полосы и стойки должным образом обеспечены.Затем поверните петли в течение трех часов при 30 оборотов в минуту. В конце вращения, позвольте петли стоять в стойке в течение двух минут, чтобы кровь накапливается на петле днища, прежде чем тщательно открыть разъемы и потянув кровь из дубликатов в отдельных 10 миллилитров стеклянные стаканы. Когда вся кровь была собрана промыть каждую трубку с 10 миллилитров PBS и использовать скальпель тщательно сократить один сантиметр образца от конца каждой трубки.Инкубировать образцы на ночь в 2%glutaraldehyde при четырех градусах по Цельсию, а затем 15 минут инкубации и 1%osmium тетроксида при комнатной температуре. В конце инкубации осмия тетроксида обезвоживает образцы в восходящей серии этанола в течение 20 минут на концентрацию, а затем 30 минут обезвоживания в 100% этанола. В конце 100%-ной инкубации этанола, пусть образцы высыхают на ночь при комнатной температуре перед визуализацией образцов путем сканирования электронной микроскопии при ускорении напряжения в пять киловольт, с помощью рентгеновского микро-КТ сканера.Для цитометрического анализа кровотока. Передача 100 микролитров крови из каждого образца в каждый из девяти пяти миллилитров FACS труб и исправить образцы с добавлением 100 микролитров 4%power формальдегида на трубку в течение 15 минут при комнатной температуре защищены от света. После мытья, повторно приостановить каждую гранулу в один миллилитр красного буфера лиза крови на трубку, в течение пяти минут инкубации при комнатной температуре, защищены от света.В конце инкубации, мыть образцы центрифугации в один миллилитр PBS на трубку и поместить образцы без их supernatants на льду. Для подготовки одного пятна компенсации шарики добавить четыре капли положительных и четыре капли отрицательных шариков в отдельных один миллилитр объемов буфера FACS, и вихрь решения для получения однородной подвески шарика. Добавьте 100 микролитров каждого раствора к каждой из четырех или пяти миллилитров facS труб помечены как указано и мыть бисер с одним миллилитром буфера FACS на трубку.Далее добавьте 100 микролитров соответствующего вихревого коктейля антител к каждой экспериментальной и флуоресценции минус одна трубка с нежным смешиванием. В течение 30 минут инкубации при комнатной температуре, защищенной от света. В конце инкубации промойте образцы одним миллилитром свежего буфера FACS на образец и заново потух в 250 микролитров буфера FACS на трубку.Перед анализом бисера на образцах клеток по цитометрии потока, в соответствии со стандартными протоколами. Распределение клеток крови можно визуализировать по всей поверхности сращивания двух bloops микро КТ и сканирование электронного микроскопа изображения в то время как сгустки не наблюдаются в закрытых петлях без пробелов. Анализ всего количества клеток крови, не показывает значительных различий в цифрах эритроцитов между любым из проверенных условий, тромбоцитов и лейкоцитов номера однако, резко снижается в группе латексной петли и свободные номера гемоглобина резко увеличилось, что свидетельствует о очень плохой биосовместимости латекса.В то время как все проверенные сосудистые устройства вызывают повышенную активацию системы коагуляции и комплимент компонента. Гепарин покрытием ПВХ петли демонстрируют тенденцию к снижению уровня обоих типов активаций по сравнению с полимерным покрытием, ПВХ петли. Латексные петли демонстрируют самые высокие уровни TNF IL-6 и PMN elastase, подчеркивая мощную активацию лейкоцитов латексом.CD41 положительные тромбоциты, восстановленные из латексных трубок, демонстрируют чрезвычайно высокую медианную интенсивность флуоресценции для CD62P, в то время как интегрированное выражение резко снижается на гранулоцитах и лимфоцитах. Интерес, интегральные уровни выше в моноцитах из латексных трубок, предлагая моноцитов активированных взаимодействий тромбоцитов. Действительно окрашивание для моноцитов тромбоцитов агрегатов показывает повышенную тенденцию к агрегации в латексных и стентовых петлях.Несмотря на снижение частоты моноцитов в латексных петлях. Чтобы избежать активации внутреннего компонента крови, важно обеспечить надлежащее закрытие петли и обращаться с кровью с осторожностью. Таким образом, после этой процедуры, можно проанализировать взаимодействие между аллогенными белками или TRUCKs и компонентов крови, которые используются в воспалении или фармацевтических исследований.

Research

JoVE Journal

Medicine

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Использование Количественный ПЦР в реальном времени для определения Приживление клетки-донора в конкурентной мышиной модели трансплантации костного мозга костей

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Технические аспекты свища аортокавальной мышь

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Экзайтотоксическим Стимуляция мозга Microslices как<em&gt; В пробирке</em&gt; Модель инсульта

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice

Мониторинг системных и печени параметров гемодинамики у мышей

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Создание человека Множественная миелома модели ксенотрансплантата в Курица по изучению роста опухоли, инвазии и ангиогенеза

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

Assessment of Perigenital Sensitivity and Prostatic Mast Cell Activation in a Mouse Model of Neonatal Maternal Separation

Оценка чувствительности и Perigenital простаты тучных клеток активации в мышиной модели новорожденных материнской разъединении

Chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome (CP/CPPS) has a lifetime prevalence of 14% and is the most common urological diagnosis for men under the ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Использование метода рукав в мышиной модели аортальной трансплантации - обучающее видео

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

An Optimized Evans Blue Protocol to Assess Vascular Leak in the Mouse

Оптимизированный Эванс синий протокол для оценки сосудистые утечки в мышь

Vascular leak, or plasma extravasation, has a number of causes, and may be a serious consequence or symptom of an inflammatory response. This study may ...

Hemocompatibility Testing of Blood-Contacting Implants in a Flow Loop Model Mimicking Human Blood Flow

Гемосовместимость Тестирование кровоконтактных имплантатов в модели петли потока, имитирующей поток крови человека

The growing use of medical devices (e.g., vascular grafts, stents, and cardiac catheters) for temporary or permanent purposes that remain in the ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Травма ишемии-реперфузии органов путем моделирования гемодинамических изменений в модели трансплантации печени крыс

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...