Name: electrocardiogram recordings in anesthetized mice using lead ii
Uploaded: 2020-06-20T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Electrocardiogram Recordings in Anesthetized Mice using Lead II at JoVE.com

Detta arbete stöddes av grundforskningsprogrammen som förvaltas av National Research Foundation of Korea (NRF) (2015R1C1A2A01052419 och 2018R1D1A1B07042484).

Alla djurförsök godkändes av den lokala kommittén för vård och användning av försöksdjur, Kyung Hee University (licensnummer: KHUASP(SE)-18-108) och överensstämmer med US National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals.
1. Försöksdjur
<ol><li>Förvara alla möss (39 möss, Balb/c, hane, 7\u20129 veckor gamla) i en patogenfri anläggning enligt guiden för vård och användning av försöksdjur.</li>
	<li>Håll mössen på en 12 h ljus/mörk cykel v...

<ol>
	<li>Ho, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+rate+and+electrocardiography+monitoring+in+mice.">Heart rate and electrocardiography monitoring in mice.</a> Current Protocols in Mouse Biology. 1, 123-139 (2011).</li><li>Vatner, S. F., Takagi, G., Asai, K., Shannon, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+physiology+in+mice:+Conscious+measurements+and+effects+of+anesthesia.">Cardiovascular physiology in mice: Conscious measurements and effects of anesthesia.</a> Cardiovascular Physiology in the Genetically Engineered Mouse. , 257-275 (2002).</li><li>Cesarovic, N., Jirkof, P., Rettich, A., Arras, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+radiotelemetry+transmitters+yielding+data+on+ecg,+heart+rate,+core+body+temperature+and+activity+in+free-moving+laboratory+mice.">Implantation of radiotelemetry transmitters yielding data on ecg, heart rate, core body temperature and activity in free-moving laboratory mice.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. (57), (2011).</li><li>Chu, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+non-invasively+recording+electrocardiograms+in+conscious+mice.">Method for non-invasively recording electrocardiograms in conscious mice.</a> BMC Physiology. 1, 6 (2001).</li><li>Kim, M. J., Lim, J. E., Oh, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+non-invasive+method+for+electrocardiogram+recording+in+mouse+using+lead+ii.">Validation of non-invasive method for electrocardiogram recording in mouse using lead ii.</a> Biomedical Science Letters. 21, 135-143 (2015).</li><li>Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+cardiac+function+during+echocardiography+in+mice.">Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 282 (6), 2134-2140 (2002).</li><li>Mitchell, G. F., Jeron, A., Koren, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+heart+rate+and+q-t+interval+in+the+conscious+mouse.">Measurement of heart rate and q-t interval in the conscious mouse.</a> The American Journal of Physiology. 274 (3), 747-751 (1998).</li><li>Farraj, A. K., Hazari, M. S., Cascio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+the+small+rodent+electrocardiogram+in+toxicology.">The utility of the small rodent electrocardiogram in toxicology.</a> Toxicological sciences : an official journal of the Society of Toxicology. 121 (1), 11-30 (2011).</li><li>Gehrmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+parasympathetic+heart+rate+control+in+mice+with+a+reduction+of+functional+g+protein+betagamma-subunits.">Impaired parasympathetic heart rate control in mice with a reduction of functional g protein betagamma-subunits.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 282 (2), 445-456 (2002).</li><li>Chu, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrocardiographic+findings+in+mdx+mice:+A+cardiac+phenotype+of+duchenne+muscular+dystrophy.">Electrocardiographic findings in mdx mice: A cardiac phenotype of duchenne muscular dystrophy.</a> Muscle &amp; Nerve. 26 (4), 513-519 (2002).</li><li>Merentie, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+ecg+findings+in+aging,+with+conduction+system+affecting+drugs+and+in+cardiac+pathologies:+Development+and+validation+of+ecg+analysis+algorithm+in+mice.">Mouse ecg findings in aging, with conduction system affecting drugs and in cardiac pathologies: Development and validation of ecg analysis algorithm in mice.</a> Physiological Reports. 3 (12), (2015).</li><li>Calvillo, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propranolol+prevents+life-threatening+arrhythmias+in+lqt3+transgenic+mice:+Implications+for+the+clinical+management+of+lqt3+patients.">Propranolol prevents life-threatening arrhythmias in lqt3 transgenic mice: Implications for the clinical management of lqt3 patients.</a> Heart Rhythm : the Official Journal of the Heart Rhythm Society. 11 (1), 126-132 (2014).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+atrial+arrhythmogenicity+and+altered+ca(2+)+homeostasis+in+murine+ryr2-p2328s+hearts.">Acute atrial arrhythmogenicity and altered ca(2+) homeostasis in murine ryr2-p2328s hearts.</a> Cardiovascular Research. 89 (4), 794-804 (2011).</li><li>Kmecova, J., Klimas, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+rate+correction+of+the+qt+duration+in+rats.">Heart rate correction of the qt duration in rats.</a> European Journal of Pharmacology. 641 (2-3), 187-192 (2010).</li><li>Kim, H. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Garem1+regulates+the+pr+interval+on+electrocardiograms.">Garem1 regulates the pr interval on electrocardiograms.</a> Journal of Human Genetics. 63 (3), 297-307 (2018).</li><li>Nam, J. M., Lim, J. E., Ha, T. W., Oh, B., Kang, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac-specific+inactivation+of+prdm16+effects+cardiac+conduction+abnormalities+and+cardiomyopathy-associated+phenotypes.">Cardiac-specific inactivation of prdm16 effects cardiac conduction abnormalities and cardiomyopathy-associated phenotypes.</a> American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 318 (4), 764-777 (2020).</li><li>Knollmann, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoproterenol+exacerbates+a+long+qt+phenotype+in+kcnq1-deficient+neonatal+mice:+Possible+roles+for+human-like+kcnq1+isoform+1+and+slow+delayed+rectifier+k++current.">Isoproterenol exacerbates a long qt phenotype in kcnq1-deficient neonatal mice: Possible roles for human-like kcnq1 isoform 1 and slow delayed rectifier k+ current.</a> The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 310 (1), 311-318 (2004).</li></ol>

Det finns flera kritiska steg i protokollet. Den omgivande miljön bör vara fri från buller och vibrationer. EKG-elektroderna måste föras in under huden stabilt och konsekvent, vars införingssteg kräver preliminära experiment tills forskaren är tekniskt erfaren. Vidare bör bedövningssyrketen beredas och förvaras på lämpligt sätt och användas vid rätt dos. Slutligen bör PQRS-vågorna placeras på lämpligt sätt i enskilda EKG-slag i fönstret Genomsnittlig vy.
Våra studier in...

Elektrokardiogrammet (EKG), ett test som mäter den elektriska aktiviteten hos sina hjärtslag, är ett värdefullt verktyg för att utvärdera hjärtledningssystemet. De parametrar som mäts med ett EKG inkluderar puls, PR-intervall, QRS-varaktighet och QT-intervall. I korthet motsvarar PR-intervallet den tid som krävs för en elektrisk impuls att resa från förmaksfull sinusnod genom atrioventricular noden till Purkinje fibrerna; QRS varaktighet är tiden för Ventrikulärt depolarisering att ske genom Purkinje systemet och Ventrikulärt hjärtmuskeln; och QT intervall är varaktigheten av ventrikulära repolarization.
EKG-inspelningar hos möss har hjälpt forskare att undersöka hjärtfunktionen och bestämma de fysiologiska och patofysiologiska mekanismerna hos hjärtfenotyper, såsom arytmi, förmaksflimmer och hjärtsvikt. De flesta kardiovaskulär forskning har involverat studier i genetiskt modifierade musmodeller. Det är ofta svårt att få meningsfulla data om EKG-inspelningar från små möss som har manipulerats genetiskt.
Det finns flera metoder för att utföra EKG i möss1. Studier tyder på att EKG-inspelningar hos medvetna djur föredras framför sövda djur när det är möjligt eftersom effekterna av anestesi på hjärtfunktionen har varit väl etablerade2. Två protokoll som registrerar EKG i medvetna möss är av anmärkning1. EKG-radiotelemetrysystemet är guldmyntfoten för kontinuerlig långsiktig övervakning av EKG hos medvetna möss1,3. Trots sin styrka i att registreras i ett medvetet tillstånd, radiotelemetry-kopplade EKG mätningar har flera begränsningar, inklusive den höga kostnaden för installation och implantat, dess krav på en mycket erfaren operatör, en stabiliseringsperiod på över 1 vecka, dess behov av stora möss (> 20 g), och förvärv av endast en enda ledning av EKG-inspelning1. Ett annat system som använder paw-sized ledande elektroder inbäddade i en plattform tillåter EKG-inspelningar i medvetna möss utan anestesi ellerimplantat 1,4. Detta icke-invasiva system är en alternativ metod i situationer där radiotelemetry system inte är tillgängliga eftersom det har många fördelar: inget krav på kirurgisk behandling, inget behov av anestesi, låg kostnad per mus (endast den ursprungliga installationen är dyrt), kort tid för mätning, och överkomliga priser på nyfödda1,4. Den största nackdelen med detta system är att det inte lämpar sig för kontinuerlig långsiktig övervakning1.
Här introducerar vi en annan billig, enkel och snabb EKG-inspelningsmetod i sövda möss och visar dess giltighet och känslighet genom att utföra ett EKG efter autonom blockad/stimulering av hjärtledningssystemet. Vi föreslår denna EKG-metod för screening av effekterna av farmakologiska medel, genetiska modifieringar och sjukdomsmodeller hos möss.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>2,2,2-tribromoethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402-25G</td>
			<td>anesthetics, Avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal</td>
			<td>Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan</td>
			<td></td>
			<td>Balb/c mice, male, aged 7-9 weeks</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A0123</td>
			<td>parasympathetic antagonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BioAmp</td>
			<td>AD Instruments, Bella Vista, Australia</td>
			<td>ML132</td>
			<td>bio amplifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbachol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C4382</td>
			<td>parasympathetic agonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrodes with acupuncture needles</td>
			<td>DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Korea</td>
			<td>DB106</td>
			<td>0.20 x 15 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoprenaline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I2760</td>
			<td>sympathetic agonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabChart 8</td>
			<td>AD Instruments, Bella Vista, Australia</td>
			<td></td>
			<td>data analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse food</td>
			<td>LabDiet, St. Louis, MO, USA</td>
			<td>5L79</td>
			<td>Mouse diet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 2/28</td>
			<td>AD Instruments, Bella Vista, Australia</td>
			<td></td>
			<td>data acquisition system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propranolol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P0884</td>
			<td>sympathetic antagonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS Statistics program</td>
			<td>SPSS</td>
			<td>SPSS 25.0</td>
			<td>statistics program</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

electrocardiogram recordings in anesthetized mice using lead ii

Elektrokardiogrammet är ett värdefullt verktyg för att utvärdera hjärtledningssystemet. Djurforskning har bidragit till att generera ny genetisk och farmakologisk information om elektrokardiogrammet. Att göra elektrokardiogrammätningar hos små djur in vivo, såsom möss, har dock varit en utmaning. För detta ändamål använde vi en elektrokardiogram inspelningsmetod i sövda möss med många fördelar: det är ett tekniskt enkelt förfarande, är billigt, har kort mättid, och är prisvärd, även hos unga möss. Trots begränsningarna med att använda anestesi kan jämförelser mellan kontroll och experimentella grupper utföras med ökad känslighet. Vi behandlade möss med agonister och antagonister i det autonoma nervsystemet för att bestämma giltigheten av detta protokoll och jämförde våra resultat med tidigare rapporter. Vårt EKG protokoll upptäckt ökad hjärtfrekvens och QTc intervall på behandling med atropin, minskade hjärtfrekvenser och QTc intervall efter carbachol behandling och högre hjärtfrekvenser och QTc intervall med isoprenaline men noterade inte någon förändring i EKG parametrar på administrering av propranolol. Dessa resultat stöds av tidigare rapporter som bekräftar tillförlitligheten i detta EKG-protokoll. Denna metod kan därför användas som en screeningmetod för att göra EKG-mätningar som annars inte skulle försökas på grund av höga kostnader och tekniska svårigheter.

Farmakologiska experiment
För att avgöra om vår noninvasive EKG-mätning återspeglar påverkan av autonoma modulering på hjärtledningssystemet, normala Balb/c möss utmanades med agonister och antagonister i det autonoma nervsystemet (ANS). Atropin och karbachol användes för att verkställa parasympatisk autonoma blockad och stimulering, respektive, medan propranolol och isoprenalin administrerades för att framkalla sympatisk autonoma autonoma blockad och<sup class="x...

Watch this Scientific Journal Video about Electrocardiogram Recordings in Anesthetized Mice using Lead II at JoVE.com

Electrocardiogram Recordings in Anesthetized Mice using Lead II

Vi presenterar ett EKG-protokoll som är tekniskt enkelt, billigt, snabbt och prisvärt hos små möss, och kan utföras med förbättrad känslighet. Vi föreslår denna metod som en screening metod för att studera farmakologiska medel, genetiska modifieringar och modeller sjukdom hos möss.

Elektrokardiograminspelningar i bedövningsmö med bly II

The electrocardiogram is a valuable tool for evaluating the cardiac conduction system. Animal research has helped generate novel genetic and ...

Betydelsen av vårt protokoll är att elektrokardiogrammet mätning kan utföras med stor känslighet i en liten mus som har manipulerats genetiskt eller farmakologiskt. Protokollet är fördelaktigt i att det är enkelt, snabbt, billigt och känsligt. Dessutom kan det utföras på små möss, även nyfödda.Vi tror att denna metod skulle bidra till förståelsen av outforskade regioner av arytmi i hjärt-området. Demonstrerar proceduren blir Tae Woong Ha från mitt laboratorium. Börja med att öppna analysprogramvaran och ställa in den för EKG-datainsamling.Gå till Inställningar och Kanalinställningar och ställ in Exempelhastigheten på 2 000 samplingar per sekund. Ställ in räckvidden på 20 millivolt och ingångsförstärkaren till 200 Hertz av lågpass. Därefter går du till EKG-analys och EKG-inställningar och väljer sedan Mus i förinställningen för identifiering och analysinställningar.I panelen Medelvärde väljer du att konkatenera och på varandra följande hjärtcykler till en enda genomsnittlig signal eller genomsnittsvy och en tabellvy. Välj Bazett-metoden på QTc-panelen, som definieras som pulsens korrigerade värde för QT-intervall. Placera musen på precisionsskalan och spela in dess vikt.Efter att ha säkerställt att musen är ordentligt sövda infoga elektroder med akupunktur nålar i höger och vänster framben och den vänstra bakbenen. Se till att elektroddjup och position är konsekventa under hela experimenten. Anslut elektrodernas övriga ändar genom att klicka in dem i de tre snäppkontakterna i andra änden av blytrådarna på de tre blybioförstärkkabeln och injicera läkemedel cirka tre minuter efter bedövningsmedlet.10 minuter efter administrering av bedövningsmedel, börja spela in EKG. När inspelningen är avslutad, använd EKG-data från 12 till 17 minuter efter injektion av bedövningsmedel för analys. När du är klar, ta försiktigt bort elektroderna.För att avgöra om denna noninvasive EKG-mätning återspeglar påverkan av autonoma modulering på hjärtats ledningssystem, var normala BALB/c möss utmanas med agonister och antagonister i det autonoma nervsystemet. Jämfört med fordonsstyrning ökade hjärtfrekvensen signifikant hos atropin- och isoprenalinbehandlade möss och föll med carbachol. Dessutom ökade QTc-intervallet i atropin och isoprenalinbehandlade möss och minskade hos carbacholbehandlade möss.Representativa diagramvyer och i genomsnitt vyer av EKG-signalerna i atropin, carbachol och fordonsbehandlade möss visas här. Vid försök med detta protokoll är det viktigaste att se till att EKG-elektroderna sätts in säkert under hela experimentet. Utför flera preliminära experiment tills EKG-signalerna är stabila och konsekventa.Våra tidigare publikationer med möss bekräftade EKG variationer som hade rapporterats i humana genetiska studier, som stöder nyttan av denna metod i kardiovaskulär forskningsområden såsom arytmi.

Research

JoVE Journal

Medicine

In vitro Measurements of Tracheal Constriction Using Mice

In vitro Measurements of Tracheal Constriction Using Mice

In vitro Mätningar av trakeal Sammandragning Använda möss

Transgenic and knockout mice have been powerful tools for the investigation of the physiology and pathophysiology of airways1,2. In vitro tensometry of ...

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Luftstrupsintubation i möss<em&gt; Via</em&gt; Direkt laryngoskopi Använda ett otoskop

Mice, both wildtype and transgenic, are the principal mammalian model in biomedical research currently. Intubation and mechanical ventilation are ...

Multi-electrode Array Recordings of Human Epileptic Postoperative Cortical Tissue

Multi-elektrod Array Inspelningar av Human Epileptic Postoperativ kortikalvävnad

Epilepsy, affecting about 1% of the population, comprises a group of neurological disorders characterized by the periodic occurrence of seizures, which ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Halspulsådern Tinkturer för farmakokinetiska och farmakodynamiska Analys av taxaner i möss

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

Mätning Stigande Aorta Styvhet<em&gt; In Vivo</em&gt; I möss med ultraljud

We present a protocol for measuring in vivo aortic stiffness in mice using high-resolution ultrasound imaging. Aortic diameter is measured by ultrasound ...

Evaluation of Stem Cell Properties in Human Ovarian Carcinoma Cells Using Multi and Single Cell-based Spheres Assays

Utvärdering av stamcells Fastigheter i Human ovarialkarcinomceller Använda Multi och enda cell-baserade Spheres Analyser

Years of research indicates that ovarian cancers harbor a heterogeneous mixture of cells including a subpopulation of so-called &#8220;cancer stem ...

Brain Source Imaging in Preclinical Rat Models of Focal Epilepsy using High-Resolution EEG Recordings

Brain Källa Imaging i preklinisk Rat Modeller av Focal Epilepsi använder Högupplösta EEG Recordings

Electroencephalogram (EEG) has been traditionally used to determine which brain regions are the most likely candidates for resection in patients with ...

Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

Subkutan Angiotensin II Infusion med hjälp av osmotiska pumpar inducerar aortaaneurysm hos möss

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

In Vitro Enzyme Measurement to Test Pharmacological Chaperone Responsiveness in Fabry and Pompe Disease

In Vitro Enzyme Measurement to Test Pharmacological Chaperone Responsiveness in Fabry and Pompe Disease

In Vitro Enzymet mätningar för att Test farmakologiska förkläde lyhördhet i Fabry och Pompes sjukdom

The use of personalized medicine to treat rare monogenic diseases like lysosomal storage disorders (LSDs) is challenged by complex clinical trial designs, ...

Patient Directed Recording of a Bipolar Three-Lead Electrocardiogram using a Smartwatch with ECG Function

Patient riktad inspelning av ett bipolärt Treledselektrokardiogram med hjälp av en SmartWatch med EKG-funktion

Cardiac arrhythmias and cardiovascular diseases are a major public health problem in developed countries. A major goal in preventive medicine is the ...