Name: orthotopic kidney auto-transplantation in a porcine model using 24 hours organ preservation and continuous telemetry
Uploaded: 2020-08-21T14:00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Kidney Auto-Transplantation in a Porcine Model Using 24 Hours Organ Preservation And Continuous Telemetry at JoVE.com

המחברים רוצים להביע את תודתם לפסקל פשנדה, Mareike שולץ, ברטה Bungardt, אנה Kümmecke על הסיוע הטכני המיומן שלהם.
המחברים מצהירים על מימון בחלקו מתוכנית START של הפקולטה לרפואה, אוניברסיטת RWTH Aachen (#23/19 עד Z.C.), מקרן B.Braun, Melsungen, גרמניה (BBST-S-17-00240 עד Z.C.), קרן המחקר הגרמנית (דויטשה Forschungsgemeinschaft - DFG; ל-2591, ל-542/5-1, ל-542/6-1; 2016 ל- R.T. ו- SFB/TRR57, SFB/TRR219, BO3755/3-1, BO3755/6-1 עד P.B.) ומשרד החינוך והמחקר הגרמני (BMBF: STOP-FSGS-01GM1901A ל-P.B.), ללא מעורבותם של המממנים בעיצוב מחקר, איסוף נתונים, ניתוח נתונים, הכנת כתב יד או החלטה לפרסם.

<ol>
	<li>Watts, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Joseph+Murray:+innovative+surgeon+and+pioneer+of+transplantation.">Joseph Murray: innovative surgeon and pioneer of transplantation.</a> Lancet. 377 (9770), 987 (2011).</li><li>Merion, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deceased-donor+characteristics+and+the+survival+benefit+of+kidney+transplantation.">Deceased-donor characteristics and the survival benefit of kidney transplantation.</a> Journal of the American Medical Association. 294 (21), 2726-2733 (2005).</li><li>Jochmans, I., O'Callaghan, J. M., Pirenne, J., Ploeg, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+machine+perfusion+of+kidneys+retrieved+from+standard+and+high-risk+donors.">Hypothermic machine perfusion of kidneys retrieved from standard and high-risk donors.</a> Transplant International. 28 (6), 665-676 (2015).</li><li>Czigany, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Machine+perfusion+for+liver+transplantation+in+the+era+of+marginal+organs-New+kids+on+the+block.">Machine perfusion for liver transplantation in the era of marginal organs-New kids on the block.</a> Liver International. 39 (2), 228-249 (2018).</li><li>Fabrizii, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient+and+graft+survival+in+older+kidney+transplant+recipients:+does+age+matter.">Patient and graft survival in older kidney transplant recipients: does age matter.</a> Journal of the American Soceity of Nephrology. 15 (4), 1052-1060 (2004).</li><li>Jochmans, I., Nicholson, M. L., Hosgood, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+perfusion:+some+like+it+hot+others+prefer+to+keep+it+cool.">Kidney perfusion: some like it hot others prefer to keep it cool.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 22 (3), 260-266 (2017).</li><li>. DSO Jahresbericht Available from: <a target="_blank" href="https://www.dso.de/SiteCollectionDocuments/DSO_Jahresbericht_2018.pdf">https://www.dso.de/SiteCollectionDocuments/DSO_Jahresbericht_2018.pdf</a> (2018)</li><li>Meister, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+Oxygenated+Machine+Perfusion+of+Extended+Criteria+Kidney+Allografts+from+Brain+Dead+Donors:+Protocol+for+a+Prospective+Pilot+Study.">Hypothermic Oxygenated Machine Perfusion of Extended Criteria Kidney Allografts from Brain Dead Donors: Protocol for a Prospective Pilot Study.</a> JMIR Research Protocols. 8 (10), 14622 (2019).</li><li>Meister, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+oxygenated+machine+perfusion-Preliminary+experience+with+end-ischemic+reconditioning+of+marginal+kidney+allografts.">Hypothermic oxygenated machine perfusion-Preliminary experience with end-ischemic reconditioning of marginal kidney allografts.</a> Clinical Transplantation. 33 (10), 13673 (2019).</li><li>Siedlecki, A., Irish, W., Brennan, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+graft+function+in+the+kidney+transplant.">Delayed graft function in the kidney transplant.</a> American Journal of Transplantation. 11 (11), 2279-2296 (2011).</li><li>Plenter, R., Jain, S., Ruller, C. M., Nydam, T. L., Jani, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Kidney+Transplant+Technique.">Murine Kidney Transplant Technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (105), e52848 (2015).</li><li>Fabry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cold+Preflush+of+Porcine+Kidney+Grafts+Prior+to+Normothermic+Machine+Perfusion+Aggravates+Ischemia+Reperfusion+Injury.">Cold Preflush of Porcine Kidney Grafts Prior to Normothermic Machine Perfusion Aggravates Ischemia Reperfusion Injury.</a> Scientific Reports. 9 (1), 13897 (2019).</li><li>Kalenski, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+preservation+of+warm+ischemia-damaged+porcine+kidneys+after+cold+storage+in+Ecosol,+a+novel+preservation+solution.">Improved preservation of warm ischemia-damaged porcine kidneys after cold storage in Ecosol, a novel preservation solution.</a> Annals of Transplantation. 20, 233-242 (2015).</li><li>Kalenski, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Aerobic+Preservation+by+Venous+Systemic+Oxygen+Persufflation+or+Oxygenated+Machine+Perfusion+of+Warm-Ischemia-Damaged+Porcine+Kidneys.">Comparison of Aerobic Preservation by Venous Systemic Oxygen Persufflation or Oxygenated Machine Perfusion of Warm-Ischemia-Damaged Porcine Kidneys.</a> European Surgical Research. 57 (1-2), 10-21 (2016).</li><li>Kaths, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+Ex+Vivo+Kidney+Perfusion+for+the+Preservation+of+Kidney+Grafts+prior+to+Transplantation.">Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. (101), e52909 (2015).</li><li>Schreinemachers, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+preservation+and+microcirculation+with+POLYSOL+after+transplantation+in+a+porcine+kidney+autotransplantation+model.">Improved preservation and microcirculation with POLYSOL after transplantation in a porcine kidney autotransplantation model.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 24 (3), 816-824 (2009).</li><li>Kaths, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+Renal+Autotransplantation+in+a+Porcine+Model:+A+Step-by-Step+Protocol.">Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53765 (2016).</li><li>De Deken, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postconditioning+effects+of+argon+or+xenon+on+early+graft+function+in+a+porcine+model+of+kidney+autotransplantation.">Postconditioning effects of argon or xenon on early graft function in a porcine model of kidney autotransplantation.</a> British Journal of Surgery. 105 (8), 1051-1060 (2018).</li><li>Faure, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+porcine+model+of+heterotopic+renal+autotransplantation.">An experimental porcine model of heterotopic renal autotransplantation.</a> Transplantation Proceedings. 45 (2), 672-676 (2013).</li><li>Golriz, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+we+need+animal+hands-on+courses+for+transplantation+surgery.">Do we need animal hands-on courses for transplantation surgery.</a> Clinical Transplantation. 27, 6-15 (2013).</li><li>Gallinat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+Cold+Stored+Porcine+Kidneys+After+Controlled+Oxygenated+Rewarming.">Transplantation of Cold Stored Porcine Kidneys After Controlled Oxygenated Rewarming.</a> Artificial Organs. 42 (6), 647-654 (2018).</li><li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).</li><li>Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+the+ARRIVE+guidelines+for+reporting+animal+research.">Improving bioscience research reporting: the ARRIVE guidelines for reporting animal research.</a> PLoS Biology. 8 (6), 1000412 (2010).</li><li>Hagemeister, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severity+assessment+in+pigs+after+partial+liver+resection:+evaluation+of+a+score+sheet.">Severity assessment in pigs after partial liver resection: evaluation of a score sheet.</a> Laboratory Animals. 54 (3), (2019).</li><li>Doorschodt, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+machine+perfusion+of+kidney+grafts:+which+pressure+is+preferred.">Hypothermic machine perfusion of kidney grafts: which pressure is preferred.</a> Annals of Biomedical Engineering. 39 (3), 1051-1059 (2011).</li><li>Czigany, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+Research+Practice+in+Rat+Orthotopic+and+Partial+Orthotopic+Liver+Transplantation:+A+Review,+Recommendation,+and+Publication+Guide.">Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide.</a> European Surgical Research. 55 (1-2), 119-138 (2015).</li><li>Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+procedures+for+a+rat+model+of+partial+orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+arterial+reconstruction.">Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction.</a> Journal of Visualized Experiments. (73), e4376 (2013).</li><li>Doorschodt, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+novel+system+for+hypothermic+oxygenated+pulsatile+perfusion+preservation.">Evaluation of a novel system for hypothermic oxygenated pulsatile perfusion preservation.</a> The Internation Journal of Artificial Organs. 32 (10), 728-738 (2009).</li><li>Kaths, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+Normothermic+Ex+Vivo+Kidney+Perfusion+Is+Superior+to+Brief+Normothermic+Perfusion+Following+Static+Cold+Storage+in+Donation+After+Circulatory+Death+Pig+Kidney+Transplantation.">Continuous Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion Is Superior to Brief Normothermic Perfusion Following Static Cold Storage in Donation After Circulatory Death Pig Kidney Transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 17 (4), 957-969 (2017).</li><li>Tammaro, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+fluid+effusion+in+kidney+transplantation+with+the+use+of+hemostatic+biomaterials.">Prevention of fluid effusion in kidney transplantation with the use of hemostatic biomaterials.</a> Transplantation Proceedings. 46 (7), 2203-2206 (2014).</li><li>Golriz, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pig+kidney+transplantation:+an+up-to-date+guideline.">Pig kidney transplantation: an up-to-date guideline.</a> European Surgical Research. 49 (3-4), 121-129 (2012).</li><li>Higgins, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyponatraemia+and+hyperkalaemia+are+more+frequent+in+renal+transplant+recipients+treated+with+tacrolimus+than+with+cyclosporin.+Further+evidence+for+differences+between+cyclosporin+and+tacrolimus+nephrotoxicities.">Hyponatraemia and hyperkalaemia are more frequent in renal transplant recipients treated with tacrolimus than with cyclosporin. Further evidence for differences between cyclosporin and tacrolimus nephrotoxicities.</a> Nephrology Dialysis and Transplantation. 19 (2), 444-450 (2004).</li><li>Markert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+telemetry-based+system+for+assessing+cardiovascular+function+in+group-housed+large+animals.+Taking+the+3Rs+to+a+new+level+with+the+evaluation+of+remote+measurement+via+cloud+data+transmission.">A new telemetry-based system for assessing cardiovascular function in group-housed large animals. Taking the 3Rs to a new level with the evaluation of remote measurement via cloud data transmission.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 93, 90-97 (2018).</li><li>L&#228;ngin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perioperative+Telemetric+Monitoring+in+Pig-to-Baboon+Heterotopic+Thoracic+Cardiac+Xenotransplantation.">Perioperative Telemetric Monitoring in Pig-to-Baboon Heterotopic Thoracic Cardiac Xenotransplantation.</a> Annals of Transplantation. 23, 491-499 (2018).</li><li>Willens, S., Cox, D. M., Braue, E. H., Myers, T. M., Wegner, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+for+retroperitoneal+implantation+of+telemetry+transmitters+for+physiologic+monitoring+in+G&#246;ttingen+minipigs+(Sus+scrofa+domesticus).">Novel technique for retroperitoneal implantation of telemetry transmitters for physiologic monitoring in G&#246;ttingen minipigs (Sus scrofa domesticus).</a> Comparative Medicine. 64 (6), 464-470 (2014).</li><li>van Dijk, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+of+composite+measure+schemes+for+comparative+severity+assessment+in+animal-based+neuroscience+research:+A+case+study+focussed+on+rat+epilepsy+models.">Design of composite measure schemes for comparative severity assessment in animal-based neuroscience research: A case study focussed on rat epilepsy models.</a> PLoS One. 15 (5), 0230141 (2020).</li><li>Zieglowski, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severity+assessment+using+three+common+behavioral+or+locomotor+tests+after+laparotomy+in+rats:+a+pilot+study.">Severity assessment using three common behavioral or locomotor tests after laparotomy in rats: a pilot study.</a> Laboratory Animals. , (2020).</li><li>Bleich, A., Bankstahl, M., Jirkof, P., Prins, J. B., Tolba, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severity+Assessment+in+animal+based+research.">Severity Assessment in animal based research.</a> Laboratory Animals. 54 (1), 16 (2020).</li></ol>

למחברים אין ניגוד אינטרסים לחשוף.

מודל porcine של KT מאפשר חקירה של גישות טיפוליות חדשניות ומכשירים רפואיים בסביבה חיה גדולה רלוונטיתקלינית 15,17,21. הדמיון האנטומי, הפתופיזיולוגי והכירורגי-טכני בין הסביבה הנסית לבין האדם יכול להקל על הפרשנות הקלינית של הנתונים ועל התרגום המהיר של הממצאים והטכניקותלבדיקות קליניות 15,16,17,18,19,21.
המודל של השתלת כליה אורתוטופית לא רק תואם את עקרון 3R על ידי הפחתת מספר בעלי החיים הנדרשים בהשוואה להשתלת אלו, למשל אין צורך בהשתלת כליה נפרדת, אלא גם מספק הזדמנות ייחודית לחקור את ההשפעות של IRIופציעה בשימורללא ההשפעות המבלבלות של התגובה החיסוניתותרופות דיכוי חיסוניות 17,21 .
שינויים קלים של הפרוטוקול מאפשרים מידול ספקטרום רחב של מצבים קליניים. כדי לחקות KT באמצעות תרומה לאחר מוות במחזור הדם (DCD) כליות, מבני כלי דם מהודקים במשך 30 עד 60 דקות ב situ לפני אחזור כליה, בעוד פעמים איסכמיה קר ממושכת (24 שעות ויותר) ניתן להחיל על מודל פציעה נרחבת שימור16,17,28,29.
למרות, מודל KT porcine הוא מבחינה כירורגית פחות מאתגר מאשר מודלים השתלת איברים מוצקים בבעלי חיים קטנים (למשל חולדות ועכברים)26, ישנם היבטים טכניים מרובים ומלכודות אשר יש לזכור כדי לשפר את התוצאות ולהימנעסיבוכים ספציפיים 17.
אי הימנעות כלי הלימפה הגדול סביב קאווה וחנה נחותה אב העורקים במהלך אחזור שתל או השתלה בשל טעות טכנית או וריאציות אנטומיות, יכול להוביל פיסטולה לימפה גבוהה ואיסוף נוזלי בטן לאחר הניתוח, זיהום, ותקל טכני פוטנציאלי. כלי הלימפה יש להימנע לחלוטין במהלך הניתוח או סגור עם 5-0 או 6-0 תפרים פוליפרופילן. זה חכם גם להימנע משימוש דו קוטבי או כל מכשיר קרישה אחר במקרה של דליפות לימפה. זה בדרך כלל מוביל להחמרה של המצב. במקרה של דליפה בתפוקה נמוכה, לצוות שלנו יש ניסיון טוב עם יישום של מדבקות קולגן מבוססות פיברין (למשל, טכוסיל)30, עם זאת, העלות הגבוהה שלהם מגבילה את היישום שלהם בהגדרה זו.
בפרוטוקול הנוכחי אנו מדגימים גישה טרנספריטוניאלית לאחזור כליות והשתלת כליה. זהו הבדל טכני גדול בהשוואה למצב הקליני, שבו שתלי כליות מושתלים בדרך כלל לתוך פוסה איליאק באמצעות גישה extraperitoneal. למרות שרוב הקבוצות משתמשות בגישה טרנספריטונאלית ובאופן אורתוטופי במודל החזירים, השתלת הטרוטופיה לפוסה הכסלנית אפשרית גם בחזירים31. עם זאת, בשל הקוטר הנמוך יחסית של עורק הכסל החיצוני בחזירים 30-40 ק"ג ונטייתו vasospasm מקשה לפעמים לבצע את האנסטומוזה מקצה לקצה של עורק הכליה לעורק הכסל החיצוני31. לגבי העובדה שאנחנו לאחזר את הכליה השמאלית באמצעות גישה transperitoneal לבצע השתלה אוטומטית הבאה, זה יותר אפשרי לבצע את ההשתלה על ידי פתיחה מחדש של אותו חתך ושימוש בגישה אורתוטופית straigttward, במיוחד כי לפי פרוטוקול זה נדרש גם להסיר את הכליה הימנית המקורית כדי להבטיח כי החיה תתאושש עם סוג אורתוטופי אחד בלבד. התיאור המקיף של כל הווריאציות הטכניות האפשריות של המודל הוא מעבר להיקף פרוטוקול זה, סוכם על ידי אחרים במאמרי סקירה מקיפה31.
נקע של שתל הכליה המושתל וסטיה תוצאתית של anastomoses כלי הדם הוא מקור עיקרי של כישלון במודל KT porcine, מוביל במהירות occular occular וכישלון מוחלט של הניסוי, בשל סיבוך כירורגי. כדי למנוע זאת, לאחר השתלה אוטומטית אנו סוגרים את שכבת צנון מעל הכליה עם תפר פועל באמצעות 3-0 polyglactin. יתר על כן, אולטרסאונד דופלר צבע מבוצע ישירות לאחר ההשתלה של סגירת הכליה והבטן, כדי להבטיח זעום עורקי ורקי טוב של שתל הכליה. אולטרסאונד משמש גם מדי יום ועל פי דרישה, בהתבסס על הביצועים הקליניים של בעל החיים, כדי לסנן את נוזל הכליה, בעיות שלאחר הכליה (למשל חסימה או סטיות של צנתר השתן), ואיסוף נוזלים בשל פיסטולה לימפה, דימום או זיהום(איור 4 ו איור 6).
כמו 24 שעות של איסכמיה קרה לעתים קרובות מוביל ליקוי תפקודי ותפקוד שתל מושהה, בעלי החיים עשויים לדרוש טיפול רפואי לפי דרישה אם זה נחשב הכרחי על ידי הקצין הווטרינרי. זה עשוי לכלול טיפול אינפוזיה באמצעות 5% גלוקוז ו / או תמיסת רינגר מנוהל באמצעות קו ורתי מרכזי, furosemide בולוס זריקות (במקרה של oliguria / אנוריה בהתאם למצב קליני ותוצאות המעבדה, 60-80 מ"ג בולוס זריקות עד 200 מ"ג ליום), ואת הניהול אוראלי של נתרן פוליסטירן Sulfonate (תהודה A) במקרה של היפרקלמיהחמורה 32. כדי להימנע מהטיה ניסיונית, יש לעוור את הקצין הווטרינרי האחראי על הטיפול הווטרינרי שלאחר ההשתלה של בעלי החיים לטיפול ולקבוצה יישומיים.
למרות, האנטומיה של עורק הכליה הוא די פשוט בחזירים landrace גרמנית עם בדרך כלל עורק אחד לשחזר, יש קשת רחבה של וריאציות אנטומיות של ענפי וריר הכליה הדורשים יצירתיות כירורגית מסוימת במהלך שחזור ורדים. לעתים קרובות שני ענפי וריר הכליה (או יותר) מצטרפים לרמות שונות בין הילום הכליה לבין הרקה ירקי ים נחות. הווריאציות הנצפים בתדירות הגבוהה ביותר ואפשרויות השחזורהאפשריות 17 מוצגות באיחות 3.
לאחר ההתערבות הכירורגית הראשונה (יום -15, השתלת טלמטריה), כל בעלי החיים מקבלים ז'קט נקבוביות שהם לובשים לאורך כל תקופת הניסויים. זה מספק הגנה מצוינת מפני פציעות מקריות ונקע של הצנתרים המושתלים ומספק מקום לאחסון שקיות איסוף השתן. השימוש במעילים אלה הוא גם פתרון אפשרי כדי לחסל את הצורך בכלובים מטבוליים להערכת סיווג קריאטינין כשיטת עידון על פי עקרון 3R.
מתקן הדיור שלנו משלב את השימוש בטלמטריה וניטור פרי-אופרטיבי מבוסס וידאו. למרות ששיטות אלה אינן יכולות להחליף את הביקורים הקבועים של הוטרינר והטכנאים, הן מקלות על התערבויות מהירות ומשפרות את הערכת החומרה כדי לחדד עוד יותר את ההגדרות הניסיוניות שלנו לעתיד. יש קשת רחבה של אינדיקציות לשימוש במכשיר טלמטריה מושתל במודלים בעלי חיים גדולים33. למרות, ניטור הדוק של paramters קליניים לאחר ניתוח גדול כגון ECG, לחץ דם, הטמפרטורה נחשבת סטנדרטית בהגדרה הקלינית האנושית של יחידת טיפול נמרץ ובינוני כירורגי, בניטור ניתוח ניסיוני הופסק בעיקר כאשר החיה מתעוררת מהרדמה33,34,35. לכן, טלמטריה מספקת דרך אפשרית לניטור מתמשך של בעלי חיים אלה. אנו מאמינים כי כל הנתונים האלה לתרום לגילוי מוקדם של סיבוך שלאחר הניתוח אפשרי במדויק ובזמן (למשל, הלם דימום, או אלח דם שזוהה על ידי טמפרטורה גוברת, היפוטוניה טכיקרדיה). זה עשוי להקל על התערבות בזמן (למשל, הקדמה של טיפול אנטיביוטי טיפולי, החלפת נוזלים, הפסקת קרישה, או הקרבה של בעל החיים כדי למנוע סבל). מלבד היבט ניטור "בזמן אמת" זה, הקבוצה שלנו מתמקדת כעת בהערכת חומרה ועידון של ניסויים בבעליחיים 36,37,38. ניתוח רטרוספקטיבי של כמות גדולה של נתוני טלמטריה שנאספו בניסויים אלה עשוי לאפשר לנו שכבה טובה יותר של חומרת התערבויות כירורגיות מסוג זה ולייעל טיפול פרי-ניתוחי (למשל, משכך כאבים) בחיות מעבדה.
במונחים של טלמטריה מושתלת, תקופה של לפחות 12 ימים לאחר ההשתלה של מערכת המדידה מומלצת כדי להבטיח נתוני מדידה יציבים ואופטימליים (בהתבסס על תקשורת אישית). לאחר שדנו בנושא זה עם יצרנים שונים המספקים פתרונות טלמטריה לבעלי חיים גדולים, כמו גם עם קבוצות מחקר אחרות המשתמשות במערכות אלה בהגדרות ניסיוניות שונות, החלטנו לשלב תקופה של 14 יום בין השתלת טלמטריה והשתלת כליה. בימים הקודמים, סטיות עדיין עלולות להתרחש בשל התנועה של בעל החיים כמו תהליכי הצטלקות וריפוי עדיין לא שלמים.
למרות יתרונותיו, למודל שתואר לעיל יש מגבלות מסוימות. המורכבות והמשאבים והתשתיות הנדרשים הם המגבלות החשובות ביותר של המודל. הפרוטוקול הניסיוני התוצר זמן רב, טכניקות מורכבות ומעקב אינטנסיבי פרי-אופרטיבי מחייבים את הזמינות של דיור משמעותי וקיבולת OR ודורשים מעורבות של צוות גדול יותר, כולל דוקטורים, מנתחים, קצינים וטרינריים וטכנאים (טבלה 1). לכן, בהתבסס על התצפיות האמפיריות שלנו, בדרך כלל לא ניתן לבצע יותר משני הליכים ביום. חיסרון נוסף של מודל porcine בהשוואה מודלים בעלי חיים קטנים היא האפשרות המוגבלת של חקירות מכניות מולקולריות-ביולוגיות. בפרוטוקול הנוכחי דווח רק על 5 ימים של מעקב. זה היה מתאים להפגין את המאפיינים הניסיוניים החשובים ביותר של המודל, עם זאת, מעקב קצר יחסית זה לא יכול להיות מספיק כדי לענות על שאלת מחקר ספציפית מסוימת (למשל התאוששות לטווח ארוך של פונקציה לעומת נזק אקוטי). לכן, ייתכן שיהיה צורך בהרחבה הקשורה לפרוייקט של המשך ההתבצעות. כתב יד זה מתאר את "שיטות העבודה הטובות ביותר" הנוכחיות שלנו בסביבה ניסיונית של השתלת כליה אורתוטופית פורצין. בעוד צעדים מסוימים הם חובה כדי לבסס בהצלחה מודל זה, היבטים מינוריים (למשל, השימוש התוך-ניתוחי של צנתר שלפוחית השתן, מיקום צנתר עורקי לעצם הירך לעומת עורק ראשי) הם פקולטטיביים, ניתן להימנע / לשנות על פי שיקול דעתם של החוקרים. תיאור והצדקה של כל היבט שיטתי יהיה מעבר להיקף הפרוטוקול הנוכחי ונדון במקום אחר31. לבסוף, זה גם קשה לשכפל את המצב הקליני המדויק של ECD KT במודל porcine שבו תורמים קשישים, allografts עם פגיעה חריפה בכליות ותורמים עם מחלות מפולות ומחלות כרוניות כגון יתרלחץ דם,סוכרת או טרשת עורקים מייצגים חלק מרכזי של מאגרהתורם השולי 8,9 .
למרות המגבלות הנ"ל, כמו גם אתגרים טכניים לוגיסטיים, מודל בעלי חיים גדול מבוסס היטב זה של KT מספק הזדמנות ייחודית לחקור טיפולים חדשניים וטכניקות כדי לשפר את שימור איברים ותוצאות קליניות ומייצג פלטפורמה מצוינת עבור מנתחים צעירים לשלוט בטכניקות השתלת איברים במודל בעלי חיים גדול.

מאז השתלת הכליה האנושית המוצלחת הראשונה בין תאומים זהים בשנת 1954, שבוצעה על ידי הקבוצה החלוצית שלמנתח חתן פרס נובל ג'וזףמוריי 1 , השתלת כליה (KT) התפתחה כמיקום העיקרי של טיפול בחולים עם מחלת כליות בשלב הסופי (ESRD)2. KT מראה תוצאות קליניות מעולות לטווח ארוך ואיכות חיים בהשוואה לדיאליזה2. שיעורי ההישרדות לטווח קצר וארוך לאחר KT השתפר ברציפות, בשל התקדמות בטכניקות כירורגיות, שימור איברים, טיפול חיסוני, וטיפול קריטי, ולכן KT הפך זמין נרחב בקנה מידהעולמי 2,3,4.
בשל מחסור קריטי באיברים, נעשה פער הולך וגדל בין ההיצע לביקוש3,5,6. בשנת 2018, כ 12,031 חולים חיכו KT בגרמניה, עם זאת, רק פחות מ 20% (2,291 חולים) יכול לקבל כליה תורם בשל המחסור הקיצוני באיברים להשתלה7. למרבה הצער, לא רק המספר המוחלט של תורמי איברים, אלא גם האיכות הכללית של allografts המוצעים להשתלה ירדו בעשוריםהאחרונים 8,9. נטייה גוברת נצפתה במספרים של אלוגרפטים כליה predamaged או "שולי" שהיה צריך להתקבל להשתלה10. השימוש allografts ECD עשוי להפחית את זמן ההמתנה ואת רשימת ההמתנה חולות ותמותה, זה, עם זאת, הקשורים שכיחות מוגברת של סיבוכים הקשורים שתל כגון שתל ראשי אי תפקוד (PNF) ו / או פונקציית שתל מושהה (DGF)8,9,10. מחקר נוסף חיוני כדי לייעל את ניצול allograft, להרחיב את מאגר התורמים ולהגן ולגנות מחדש אלוגרפטים שוליים אשר בסופו של דבר עשוי לשפר את תוצאותהמטופל 3,6.
בשל האופי עתיר המשאבים והמורכב של מודלים גדולים להשתלת בעלי חיים, מספר רב של מחקרים מבוצעים באמצעות בעלי חיים קטנים או בהגדרות vivoלשעבר 11,12,13,14,15. למרות מודלים אלה יכולים לספק נתונים מדעיים חשובים, התרגום של ממצאים אלה להגדרה קלינית מוגבל לעתים קרובות. מודל porcine של השתלת כליה אורתוטופית אוטומטית הוא מודל מבוסס היטב לשחזור המאפשר לבדוק גישות טיפול חדשניות חדשות בסביבה רלוונטית קלינית בvivio, עם תקופות מעקב פוטנציאלי ארוך יותר ואפשרויות בשפע עבור איסוף מדגםחוזר 16,17. מעבר ליתרון של הגודל המקביל, המאפשר תרגום ישיר יחסית לתוך ההגדרה הקלינית (במיוחד לפיתוח מכשירים רפואיים ומינון סמים), הדמיון כירורגי-אנטומי ופיזיולוגי במונחים של פגיעה איסכמיה-reperfusion (IRI) תגובה ונזק לכליות, לתמוך בשימוש במודל זהבמחקר תרגום 17,18,19. מודל זה גם מספק הזדמנות הכשרה מצוינת להכין מנתחי השתלה צעירים לאתגרים הטכניים של השתלת איברים קליניים20.
ישנם גם הבדלים מרובים בהשוואה להגדרה האנושית ושינויים טכניים שונים של המודל ניתןלמצוא בספרות 16,17,19,20,21. מאמר זה מתאר באופן מקיף פרטים טכניים, מלכודות, והמלצות אשר יכול לסייע לבסס את המודל של השתלת כליה אורתוטופית porcine. שיטת הטלמטריה וניטור הווידאו המתוארת, כמו גם מתקן הדיור שתוכנן במיוחד, מאפשרת הערכת חומרת תקריב ותצפית קלינית על בעלי החיים. השימוש בצנתר שתן רדיפתי וז'קטים ייעודיים של נקבוביות מספקים אפשרות להערכה מפורטת של תפקוד הכליות ללא שימוש בכלובים מטבוליים. שינויים טכניים אלה מתוארים כפתרונות פוטנציאליים כדי לעמוד באתגרים המודרניים של עקרון 3R (החלפה, הפחתה ועידון) ולשפר ניסויים בבעלי חיים באמצעות מודלים בעלי חייםגדולים 22.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia materials, drugs and medications</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspirin 500mg i.v., powder for solution for injection&#160;</td>
			<td>Bayer Vital AG, Leverkusen, Germany</td>
			<td>4324188</td>
			<td>antiplatelet agents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine sulfate solution for injection, 100mg</td>
			<td>Dr. Franz K&#246;hler Chemie GmbH, Bensheim, Germany&#160;</td>
			<td>1821288</td>
			<td>parasympatholytic agent, premedication</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen ointment for eyes and nose</td>
			<td>Bayer Vital AG, Leverkusen, Germany</td>
			<td>1578675</td>
			<td>eye ointment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Discardit II syringes, 2ml, 5ml, 10ml,20ml</td>
			<td>Becton Dickinson GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>300928, 309050,309110, 300296&#160;</td>
			<td>syringes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Micolance 3 (20G yellow) Cannula</td>
			<td>Becton Dickinson GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>305888</td>
			<td>venous catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Venflon Pro Safety (20G pink)</td>
			<td>Becton Dickinson GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>4491101</td>
			<td>venous catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine (Buprenovet)</td>
			<td>Bayer Vital AG, Leverkusen, Germany</td>
			<td>794-996</td>
			<td>analgesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefuroxime 750mg, powder for preparing&#160; injection solution</td>
			<td>FRESENIUS KABI Deutschland GmbH, Bad Homburg, Germany</td>
			<td>J01DC02</td>
			<td>antibiotics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien Hi-Contour, Endotracheal Tube 7,5 with Cuffed Murphy Eye</td>
			<td>Covidien Deutschland GmbH,Neustadt/Donau, Germany</td>
			<td>COV-107-75E</td>
			<td>endotracheal Tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FENTANYL 0,5 mg Rotexmedica solution for injection&#160;</td>
			<td>Rotexmedica GmbH Arzneimittelwerk, Trittau, Germany</td>
			<td>4993593</td>
			<td>opioide analgetic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Furosemide-ratiopharm 250 mg/25 ml solution for injection</td>
			<td>Ratiopharm GmbH, Ulm, Germany</td>
			<td>1479542</td>
			<td>loop diuretics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose 5% solution for infusion (500ml, 250ml)</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>3705273,03705422</td>
			<td>infusion fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose 20% solution for infusion</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>4164483</td>
			<td>osmotic diuresis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin-Sodium 5000 I.E./ml</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>15782698</td>
			<td>anticoagulant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane-Piramal (Isoflurane)</td>
			<td>Piramal Critical Care Deutschland GmbH, Hallbergmoos, Germany</td>
			<td>9714675</td>
			<td>volatile anaesthetic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketamine hydrochloride) 10%</td>
			<td>Medistar Arzneimittelvertrieb GmbH, Ascheberg, Germany</td>
			<td>0004230</td>
			<td>general anaestetic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MIDAZOLAM 15mg/3ml</td>
			<td>Rotexmedica GmbH Arzneimittelwerk, Trittau, Germany</td>
			<td>828093</td>
			<td>hybnotica, sedative agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0,9% solution for infusion (500ml,1000ml)</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>864671.8779</td>
			<td>infusion fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Norepinephrine (Arterenol)</td>
			<td>Sanofi-Aventis Deutschland GmbH, Frankfurt, Germany</td>
			<td>16180</td>
			<td>increase in blood pressure&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ preservation solution (e.g. HTK)</td>
			<td>Dr. Franz K&#246;hler Chemie GmbH, Bensheim, Germany&#160;</td>
			<td>should be decided based on preference and experimental design</td>
			<td>organ preservation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pantoprazole 40mg/solution for injection</td>
			<td>Laboratorios Normon,Madrid, Spain</td>
			<td>11068</td>
			<td>proton pump inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paveron N 25mg/ml solution for injection (Papaverine Hydrochloride)</td>
			<td>LINDEN Arzneimittel-Vertrieb-GmbH, Heuchelheim, Germany</td>
			<td>2748990</td>
			<td>spasmolytic agent for vasodilatation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital (Narcoren)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim vetmedica GmbH, Ingelheim, Germany</td>
			<td>1,204,924,565</td>
			<td>used for euthanasia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol 1% (10mg/ml) MCT Fresenius</td>
			<td>FRESENIUS KABI Deutschland GmbH, Bad Homburg, Germany</td>
			<td>654210</td>
			<td>general anaesthetic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringer solution</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>1471411</td>
			<td>infusion fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterofundin ISO solution for infusion (1000ml)</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>1078961</td>
			<td>Infusion fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stresnil (Azaperone) 40mg/ml</td>
			<td>Elanco</td>
			<td>797-548</td>
			<td>sedative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urine catheter ruffle 12CH&#160;</td>
			<td>Wirutec R&#252;sch 
			Medical Vertriebs GmbH, Sulzbach, Germany</td>
			<td>R&#220;SCH-180605-12</td>
			<td>transurethral urinecatheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Appose ULC Skin Stapler</td>
			<td>Covidien Deutschland GmbH,Neustadt/Donau, Germany</td>
			<td>8886803712</td>
			<td>skin stapler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cavafix Certo 375&#160;</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>4153758</td>
			<td>central venous catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMKA Easytel +L-EPTA Transponder</td>
			<td>emka TECHNOLOGIES S.A.S,Paris,France</td>
			<td>L-EEEETA 100</td>
			<td>telemetry transponder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMKA Reciever and Data Analyzer System</td>
			<td>emka TECHNOLOGIES S.A.S,Paris,France</td>
			<td>Reviever&#160;</td>
			<td>telemetry receiver</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Feather Disposable Scapel (11)(21)</td>
			<td>Feather, Japan</td>
			<td>8902305.395</td>
			<td>scapel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 2-0, blue monofil VISI-BLACK, FS needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7038H</td>
			<td>skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 3-0,blue monofil,FS1 needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7694H</td>
			<td>skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 5-0 (simply angulated, C1 needle) blue monofil VISI-BLACK</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7227H</td>
			<td>vascular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 5-0 (double armed, C1 needle) 60cm</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>KBB5661H</td>
			<td>vascular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 6-0 (double armed, C1 needle) 60cm</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7228H</td>
			<td>vascular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sempermed derma PF Surgical Gloves Seril Gr. 7, 7.5, 8&#160;</td>
			<td>Semperit investment Asia Pte Ltd, Singapore</td>
			<td>4200782,4200871,4200894</td>
			<td>surgical gloves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sentinex&#174; PRO Surgical Gowns Spunlace XL 150cm</td>
			<td>Lohmann &#38; Rauscher GmbH &#38; Co. KG, Neuwied, Germany</td>
			<td>19302</td>
			<td>surgical gown</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tachosil</td>
			<td>Takeda Pharma Vertrieb GmbH &#38; Co. KG, Berlin, Germany</td>
			<td>MAXI 9,5 x 4,8 cm</td>
			<td>haemostasis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Telasorp Belly wipes (green 45x45cm)</td>
			<td>PAUL HARTMANN AG,Heidenheim, Germany</td>
			<td>4542437</td>
			<td>abdominal towel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pediatric urine catheter</td>
			<td>Uromed Kurt Drews KG, Oststeinbeck, Germany</td>
			<td>PZN 03280856</td>
			<td>used for the uretero-cutaneus stoma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VICRYL- 0 MH Plus</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>V324</td>
			<td>fascial closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VICRYL - 3-0, SH1 Plus needle, 75cm</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>W9114</td>
			<td>subcutaneous suture, peritoneal suture,&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VICRYL - 3-0, SH1 Plus needle, 4*45cm</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>V780</td>
			<td>subcutaneous suture, peritoneal suture,&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VICRYL - ligatures Sutupak purple braided, 3-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>V1215E</td>
			<td>threats for ligature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3M&#8482; Standard Surgical Mask 1810F</td>
			<td>3M Deutschland GmbH, Neuss, Germany</td>
			<td>3M-ID&#160;7000039767</td>
			<td>surgical mask</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anatomical forceps Standard</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>PZ0260</td>
			<td>anatomical forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atraumatic tweezers steel, De Bakey Tip 1,5mm 8&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>GF0840</td>
			<td>anatmical atraumatic forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar forceps 16 cm straight, Branch 0,30 mm pointed, universal fit</td>
			<td>B&#252;hler Instrumente Medizintechnik GmbH,Tuttlingen, Germany</td>
			<td>08/0016-A</td>
			<td>biopolar forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bulldog clamp atraumatic,curved, De bakey 78 mm, 3&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>GF0900</td>
			<td>bulldog clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DE BAKEY-SATINSKY vascular clamp 215mm</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>GF1661</td>
			<td>vascular clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissors Mayo,250 mm, 10&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>SC2232</td>
			<td>&#160; Scissors for dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissors Metzenbaum-Fino, 260 mm, 101/4&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>SC2290</td>
			<td>Scissors for dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Draeger CATO Anesthetic machine with PM8050 Monitor</td>
			<td>Dr&#228;ger, Dr&#228;gerwerk AG &#38; Co. KGaA, L&#252;beck, Germany&#160;</td>
			<td>106782</td>
			<td>Ventilation System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Fine Tweezers, ADSON 180 mm</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>ADSONPZ0571</td>
			<td>fine forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gosset abdomenal wall spreader</td>
			<td>CHIRU-INSTRUMENTE, Kaierstuhl,Germany</td>
			<td>09-621512</td>
			<td>abdominal retractor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HALSTEAD MOSQUITO,curved, surgical 125mm</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>KL2291</td>
			<td>mosquite clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HF surgical device ICC 300, Electrocautery</td>
			<td>Erbe Elektromedizin Gmbh; T&#252;bingen, Germany</td>
			<td>20132-043</td>
			<td>cautery, biopolar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MICRO HALSTED-MOSQUITO 100mm, curved</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>KL2187</td>
			<td>mosquite clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro steel needle holder straight 0,5mm, with spring lock</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>MN1324D</td>
			<td>microsurgical needle holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical/watermaker tweezers LINZ 150mm 6&#34; Ergo round handle</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>MN0087</td>
			<td>fine microsurgical forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder Mayo-hegar,190 mm, 71/2&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>NH1255</td>
			<td>needle holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Overhold Slimline Fig. 0 8 1/2&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>KL4400</td>
			<td>overholds</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze 10X10</td>
			<td>Paul HaRTMANN AG,Heidenheim, Germany</td>
			<td>401725</td>
			<td>sterile gauze</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suction tip OP-Flex Handpiece Yankauer</td>
			<td>Pfm Medical AG, K&#246;ln, Germany</td>
			<td>33032182</td>
			<td>suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical forceps Standard 5 3/4&#34;&#160;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>PZ1260</td>
			<td>surgical forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical scissors standard pointed-blunt (thread/cloth scissors)175 mm, 7&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>SC1522</td>
			<td>surgical Scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Titanit vascular scissors POTTS-SMITH,185 mm, 71/4&#34;60&#176;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>SC8562</td>
			<td>Pott scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tunneling instrument</td>
			<td>Marina Medical Instruments Inc,Davies,US</td>
			<td>MM-TUN06025</td>
			<td>subcutaneous tunneling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel loops</td>
			<td>Medline International Germany GmbH,Kleve, Germany</td>
			<td>VLMINB</td>
			<td>hold and adjust the vessel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound spreaders Weitlander, Stump,110 mm, 41/4&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>WH5210</td>
			<td>wound care</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Further material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Eickemeyer - Medizintechnik f&#252;r Tier&#228;rzte KG, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td> 
			648050 MHP-E1220</td>
			<td>maintain body temperature during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope, customized</td>
			<td>Wittex GmbH, Simbach, Germany</td>
			<td>333222230</td>
			<td>&#160;expose the vocal cord</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectal temperature probe</td>
			<td>Asmuth Medizintechnik, Minden, Germany</td>
			<td>ASD-RA4</td>
			<td>measure body temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spray wound film</td>
			<td>Mepro-Dr. Jaeger und Bergmann GmbH, Vechta, Germany</td>
			<td>2830</td>
			<td>&#160;keep sterile condition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile organ bag</td>
			<td>Raguse Gesellschaft f&#252;r medizinische Produkte, Ascheberg, Germany</td>
			<td>800059</td>
			<td>organ preservation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>swine jacket small, adult Landrasse swine 30-50kg, customized for Emka Telemetry and urinary catheterization&#160;</td>
			<td>Lomir Biomedical Inc., United Kingdom</td>
			<td>SS J1LAPMP</td>
			<td>swine jackets to pretect implanted catheters and store urine bag</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Ultrasound device, Sonosite Edge-II</td>
			<td>FUJIFILM SonoSite GmbH, Frankfurt, Germany</td>
			<td>V21822</td>
			<td>ultrasound and color Doppler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urine bag 2000ml Volume</td>
			<td>ASID BONZ GmbH, Herrenberg, Germany&#160;</td>
			<td>2062578</td>
			<td>disposable urine bag connected to the uretero-cutaneous fistula catheter</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

orthotopic kidney auto-transplantation in a porcine model using 24 hours organ preservation and continuous telemetry

בעידן הנוכחי של השתלת איברים עם מחסור קריטי באיברים, אסטרטגיות שונות מועסקות כדי להרחיב את הבריכה של allografts זמין להשתלת כליה (KT). למרות, השימוש allografts מתורמים קריטריונים מורחבים (ECD) יכול להקל חלקית על המחסור של תורמי איברים, איברי ECD לשאת סיכון גבוה יותר פוטנציאלית לתוצאות נחותות וסיבוכים לאחר הניתוח. טכניקות דינמיות לשימור איברים, אפנון של איסכמיה-reperfusion ופציעה שימור, ו טיפולים allograft נמצאים באור הזרקורים של עניין מדעי במאמץ לשפר את ניצול allograft ותוצאות המטופל ב KT.
ניסויים פרה-קליניים בבעלי חיים משחקים תפקיד חיוני במחקר תרגום, במיוחד במכשיר הרפואי ופיתוח תרופות. היתרון העיקרי של מודל השתלת רכב אורתוטופי porcine על פני ex vivo או מחקרים בבעלי חיים קטנים טמון בדמיון כירורגי-אנטומי ופיזיולוגי להגדרה הקלינית. הדבר מאפשר חקירה של שיטות וטכניקות טיפוליות חדשות ומבטיח תרגום קליני קל של הממצאים. פרוטוקול זה מספק תיאור מקיף ומוכוון בעיות של מודל השתלת כליה אורתוטופית porcine, באמצעות זמן שימור של 24 שעות וניטור טלמטריה. השילוב של טכניקות כירורגיות מתוחכמות עם שיטות מתוקמנות ביותר ושיטות חדשניות ביותר של הרדמה, דיור לבעלי חיים, מעקב פרי-ניתוחי וניטור מבטיחים את הרבייה וההצלחה של מודל זה.

הקבוצה שלנו יש מספר שנים של ניסיון עם מודלים השתלת איברים מוצקים בבעלי חיים קטנים וגדולים, מנוצל מודל השתלת כליה אורתוטופית porcine, קבלת תוצאות לשחזור בהגדרותניסיוניות שונות 16,25,26,27. בהתאם להתקנה הניסיונית, אנו ממליצים לבצע 3 עד 5 השתלות אוטומטיות כניסויים ראשוניים המבטיחים עקומת למידה מספקת של כל הצוות הניסיוני. בהגדרה הנוכחית נדרשו 5 השתלות כדי לאמן מנתח, עם 8 שנים של ניסיון ניסיוני קודם ו-5 שנים של ניסיון כירורגי קליני בתחום ניתוחי ההשתלה, בביצוע ניסויים אלה. זה יכול להשתנות בהתאם לחשיפה הקודמת של המנתח לטכניקות אלה.
בתוך המסגרות של פרוטוקול זה, התוצאות של קבוצה של 5 ניסויי השתלת כליה אורתוטופית פורצין הוכחו. השתלת המשדר הצליחה בכל בעל חיים עם אותות טלמטריה מספקים לאורך כל תקופת התצפית (למעט בעל חיים אחד עם תפקוד חלקי של המשדר). מרווח הסכין לעור עבור השתלת המשדר היה 85 דקות ± 5 דקות(שולחן 1). לאחר אחזור השתל, כל בעלי החיים התאוששו היטב במתקן הדיור. מרווח הסכין לעור לניתוח אחזור היה 135 דקות ± 32 דקות (כולל כ 30-45 דקות עבור הכנסה, מינהור ואבטחה של צנתר הצוואר). הכליה השמאלית אוחסנה באמבט מים קר עם זמן איסכמיה קר היעד של 24 שעות (24 שעות ± 30 דקות). למחרת, לאחר אינדוקציה הרדמה וניתוקה מחדש, הכליה ההפוך (מימין) הוסרה ולאחריה השתלת אוטומטי אורתוטופי של השתלת הכליה השמאלית המאוחסנת בקור כפי שתואר קודם לכן. מרווח סכין לעור לניתוח השתלת רכב היה 168 דקות ± 27 דקות (כולל השתלת הכליה הימנית). זמן איסכמיה חם היה 34 דקות ± 7 דקות. לכל שתל כליה מושתל היה ייצור שתן מינימלי אך ישיר בעקבות התחלה מחדש. לאחר סגירת הבטן, אולטרסאונד דופלר צבע הראה שביעות רצון עורקים ורקיים של הכליה בכל המקרים(איור 4). כל בעלי החיים החלימו מההרדמה ולא נצפו סיבוכים משמעותיים במהלך תקופת התצפית. דגימות דם ושתן יומיות נאספו. כל החזירים היו במצב קליני טוב במהלך המעקב והוקרבו לאחר 5 ימים. ערכי קריאטין ואשלגן סרום הגיעו לשיא ב-POD3-4. רמת הדם נשארה בטווחים נורמליים (איור 5). תפוקת השתן התאוששה לערכים נורמליים בארבעת הימים הראשונים לאחר הניתוח. ספירת תאי הדם הלבנים הוגדלה מעט בסוף תקופת המעקב(איור 5). טמפרטורת הגוף, הנמדדת על ידי ניטור טלמטריה רציף, הראתה תנודות קלות במהלך התקופה שלאחר הניתוח.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig1.jpg"> איור 1: תרשים זרימה של מחקר ופרוטוקול. קיצורים בשימוש: יום POD לאחר הניתוח; אק"ג אלקטרוקרדיוגרפיה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig1large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig2.jpg"> איור 2: מתקן דיור לבעלי חייםעם ניטור טלמטריה בזמן אמת ורציף של עד 6 בעלי חיים. (א)תכנית סכמטית של המתקן שלנו מתאים לניטור דיור וטלמטריה של עד 6 בעלי חיים. גודלן של תיבות ההחזקה הבודדות נקבע בהתבסס על הקווים המנחים של הנחיית האיחוד האירופי 2010/63 ו- ETS 123 נספח א' פאנלים A-E מציגים תמונות מייצגות של ארגון המתקן שלנו. (ב)חדר בעלי חיים לדיור של 6 בעלי חיים. (ג)חדר תצפית עם מחשב המשמש לרישום רציף של נתוני טלמטריה. (ד)וידאו בזמן אמת וצילומים תרמיים של בעלי החיים. (ה)החזקה אישית המבטיחה מגע אקוסטי והריח של בעלי החיים עם בני זוגם כדי להימנע מבידוד חברתי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig2large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig3.jpg"> איור 3: השתלת כליהאורתוטופית ווריאציות אנטומיות ואפשרויות שחזור. (A,ב)השלבים של מודל השתלת כליה אורתוטופית במקרה של אנטומיה "סטנדרטית" של כלי דם. (ג)וריאציה 1: בעוד וריד אחד גדול יותר מגיע עם הכליה התורם, ישנם שני ורידים בצד הנמען. ניהול: הוריד הקטן יותר סגור על ידי קשירה והאנסתומוזיס מבוצע מקצה לקצה בין ורידים של הכליה. (ד)וריאציה 2: בעוד וין אחד גדול יותר מגיע עם הכליה התורם, אין כלי נמען מתאים בצד ההתפלה (למשל, אי התאמה בגודל). ניהול: מקצה לקצה anastomosis של וורין הכליה קאווה וונה נחות. (ה)וריאציה 3: שני ורידים בגודל דומה משני הצדדים. ניהול: שחזור על ידי שני אנסתמוסים וריסטיים. (ו)וריאציה 4: בעוד שני ורידים בגודל דומה מגיעים עם הכליה התורם, אין כלי נמען מתאים בצד ההתפלה. ניהול: מקצה לקצה anastomosis של וריד הכליה קאווה וריד נחות במקרה של שני ורידים כליות. (ז)וריאציה 5: כליה תורמת מגיעה עם וורין מראה bifurcation מוקדם, בעוד יש וין אחד גדול בצד ההאטה-צדדי. ניהול: מקצה לקצה anastomosis של הערוץ המשותף הקצר של וין הכליה התורם עם וין אחד גדול בצד הנמען. (H)וריאציה 6: בעוד הכליה התורם מגיע עם וורין כליות יחיד עם bifurcation מוקדם, אין כלי נמען מתאים בצד ההתקפלות. ניהול: מקצה לקצה anastomosis של הערוץ המשותף הקצר של וורין הכליה התורם קאווה vena נחות. נתון זה מתאר קומץ של וריאציות תכופות יותר והוא אינו מקיף סטטיסטית במונחים של כל הווריאציות האפשריות חזירי landrace הגרמני. קיצורים בשימוש: שתל כליה KG; כליה RK-ימין; קאווה וונה נחות IVC; AO-אב-אבקו <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig3large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של דמות זו.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig4.jpg"> איור 4: תמונות אולטרסאונד דופלר צבע מייצג, מיד לאחר השתלת כליה אורתוטופית וסגירת בטן. (א)אולטרסאונד דופלר צבע מבוצע ישירות לאחר ההשתלה של סגירת הכליה והבטן, כדי להבטיח זביה עורקית וריד טובה של שתל הכליה ולסנן עבור סטיות כלי דם iatrogenic פוטנציאלי. אולטרסאונד שימש גם מדי יום ועל פי דרישה, בהתבסס על הביצועים הקליניים של בעל החיים כדי לסנן בעיות שונות. (ב-ה) מה אתה עושה? תמונות אולטרסאונד מייצגות של שתל כליה לאחר ההשתלה. התמונה של שתל הכליה עם ובלי צבע דופלר (B,C) מראה עורקים מצוינים(D)וחליפה ורקי (E). איור זה מציג תמונות מייצגות מאותה חיה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig4large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig5.jpg"> איור 5: ממצאי מעבדה מייצגים ונתוני טלמטריה של מודל השתלת כליה אורתוטופית עם זמן איסכמיה קר של 24 שעות. (A) ערכי אשלגן סרום (ב)סרום קריאטינין ערכי(C)pH (D) ספירת תאי דם לבנים (WBC) (ה) תפוקת שתן. (F)טמפרטורת גוף ממוצעת הרשומה על ידי ניטור טלמטרי לאורך כל תקופת התצפית בארבע השתלות כליה רצופות (אין נתונים שהוצגו מןהחיה 5 בשל תפקוד חלקי של המשדר). קיצורים בשימוש: יום POD לאחר הניתוח. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig5large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig6.jpg"> איור 6: דוגמאות לסיבוכים אפשריים שלפרי-אופרטיב ומלכודות. (ד)הסיבה לגודש זוהתה כצנתר מתעוות עקב תפר חזק מדי ברמת העור. לאחר תיקון התפר הגודש נפתר כמעט לחלוטין ב 24 שעות (ה)כאן שתל כליה אחר על POD2 בעקבות השתלת כליה אורתוטופית אוטומטית מוצג. אסטריקס (*) מציגה אוסף נוזלים סביב התת-עמוד של השתל (אוסף עקוב מדם לעומת לימפוצילה). בגלל הטכניקה שלנו עם סגירה של צ'מיטונום על הכליה אוספים אלה הם בדרך כלל הגבלת עצמי בשל ההשפעות היתרון של דחיסה מקומית. בעלי חיים צריכים להיות במעקב צמוד במונחים של הממצא המקומי, סימנים של דימום או זיהום. (ו)אולטרסאונד דופלר צבע מוסמך המבוצע מדי יום (ועל פי דרישה) במתקן הדיור יש, מלבד ניצול אקדמי שלה (למשל, תיעוד, רישום של מדדי התנגדות עורקי), תפקיד אבחון מכריע בזיהוי סיבוכים פוטנציאליים בשלב תת-קולי מוקדם. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig6large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<table border="1" fo:font-size="9px" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td rowspan="2">משימה/שלב ניסיוניים</td>
			<td rowspan="2">ימים</td>
			<td rowspan="2">זמן (דקות)</td>
			<td rowspan="2">מנתח</td>
			<td rowspan="2">קצין וטרינרי</td>
			<td rowspan="2">טכנאי וטרינרי</td>
			<td rowspan="2">טכנאי מעבדה</td>
			<td rowspan="2">דוקטורדנט לדוקטורט</td>
			<td>הכולל</td>
		</tr>
<tr>
<td>Nr</td>
		</tr>
<tr>
<td>טיפול טרום-טרום-פרטיבי</td>
			<td>D-29 עד D-15</td>
			<td>נ.א.</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>ניתוח השתלת טלמטריה</td>
			<td>D-15 (D-15)</td>
			<td>85±5</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>טיפול לאחר הניתוח לאחר השתלת טלמטריה</td>
			<td>D-15 עד D-1</td>
			<td>נ.א.</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>ניתוח אחזור שתל</td>
			<td>D-1 (D-1)</td>
			<td>135±32</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>8</td>
		</tr>
<tr>
<td>ניתוח השתלת כליה</td>
			<td>ד' 0</td>
			<td>168 ±27</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>8</td>
		</tr>
<tr>
<td>טיפול לאחר הניתוח לאחר השתלת כליה אוטומטית</td>
			<td>D 0 עד D5</td>
			<td>נ.א.</td>
			<td></td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td></td>
			<td>2</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>הקרבה</td>
			<td>ד5 (ד')</td>
			<td>נ.א.</td>
			<td></td>
			<td>2</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>4</td>
		</tr>
</tbody></table>שולחן 1 . תיאור של משאבי אנוש נדרשים ולוחות זמנים לביצוע שלבים ניסיוניים שונים של מודל השתלת כליה porcine.

Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Kidney Auto-Transplantation in a Porcine Model Using 24 Hours Organ Preservation And Continuous Telemetry at JoVE.com

Orthotopic Kidney Auto-Transplantation in a Porcine Model Using 24 Hours Organ Preservation And Continuous Telemetry

מודלים בעלי חיים גדולים לשחק תפקיד חיוני במחקר השתלה פרה-קלינית. בשל הדמיון שלה להתקנה קלינית, מודל porcine של השתלת כליה אורתוטופית המתוארת במאמר זה מספק מעולה בהגדרת vivo לבדיקת טכניקות לשימור איברים והתערבויות טיפוליות.

השתלת כליה אורתוטופית במודל פורצין באמצעות 24 שעות שימור איברים וטלמטריה רציפה

In the present era of organ transplantation with critical organ shortage, various strategies are employed to expand the pool of available allografts for ...

פרוטוקול זה מתאר את כל השלבים העיקריים כדי להקים בהצלחה מודל השתלת כליה אורתוטופית פורצ'ין באמצעות זמן שימור איברים של 24 שעות ניטור טלמטרי פרי אופרטיבי. היתרון העיקרי של מודל השתלה אוטומטית גדול זה של בעלי חיים על פני מחקרים לשעבר vivo על מודלים בעלי חיים קטנים הם אנטומי כירורגית ואת הדמיון הפתופיזיולוגי להגדרה הקלינית. הצוות שלנו בבית החולים האוניברסיטאי RWTH Aachen ידגים את הנהלים.לאחר אישור הרמה המתאימה של סם בחזיר נקבה בוגרת בצום לילה, לעשות חתך של שלושה עד חמישה סנטימטרים במפשעה ול לנתח את עורק הירך בצורה 360 מעלות. השתמש באזמל מספר 11 כדי לבצע טרשת עורקים ולהכניס את חיישן העורקים של מכשיר הטלמטריה. לאחר ביצוע כיס תת עורי באגף השמאלי, מנהרה משדר טלמטריה לתוך האגף ולתקן את המשדר אל fascia השריר עם תפר 3-O פוליפרופילן קשר יחיד.לאחר מכן, בצע שני חתכים קטנים בצד שמאל ויימין של בית החזה ומנהרה אלקטרודות א.ק.ג אדום ולבן למיקומם המיועד. כאשר האלקטרודות אובטחו, התחל ברישום נתוני הטלמטריה. לאחר רכישת אותות יציבה, סגרו את החתך במפשעה בתפרים וריססו רוטב פילם והניחו על החיה ז'קט פורצ'ין בגודל מתאים.14 ימים לאחר הניתוח הראשון, לבצע חתך ארבעה עד חמישה סנטימטרים בחורב הצוואר בצד ימין של החיה ההרדמה לנתח את רקמת תת עורית ושרירים כדי לחשוף את וריד הלהטוטן. השתמש מבוא גיליון לקלף משם או שיטת סלדינגר כדי להכניס את קטטר הצוואר. אבטחו את הקטטר בתפר פוליפרופילן 5-0 וסגרו את החתך בשתי שכבות.לאחר חיטוי כירורגי ועיון סטרילי, לבצע לפרוטומיה בינונית כדי לפתוח את הבטן ולהשתמש מפשק בטן סטנדרטי לחשוף את השדה הכירורגי. פתח את השכבה ההצפית ולהשתמש צריבה מונופולארית, ממטרות דו קוטביות, ומספריים עדין לנתח את הכליה השמאלית ואת השופכה מכל רקמה חסידה. לאחר מכן השתמש תפר פוליגלקטין 3-0 כדי ligate ולחלק את השופכה השמאלית לפחות 10 ס"מ דיסטלי כדי hilum הכליה.כדי לאחזר את הכליה השתל, להשתמש מלחצי כלי דם כדי לסגור את עורק הכליה ואת וריד קרוב aorta ו vena קאווה. וחותכים את הכלים מעל הצדפות. לאחר מכן לתת את הכליה לצוות השולחן האחורי להכנה נוספת ולהשתמש בתפר פוליפרופילן 5-0 כדי לסגור את הגדם של עורק הכליה ואת וריד הכליה.מיד לאחר האחזור, השתמש קטטר היקפי תקן 14 מד כדי cannulate עורק הכליה לשטוף את הכליה עם לפחות 500 מיליליטר של פתרון שימור איברים קרים כקרח. לאחר הסומק, לעטוף את השתל בשקיות איברים סטריליים לאחסון בתתבר שימור איברים עם זמן איסכמי קר היעד של 24 שעות בארבע מעלות צלזיוס באמצעות מעגל קירור מבוקר מחשב. שתיים עד חמש דקות לפני הידוק כלי הדם, להזריק דרך הווריד 100 יחידות בינלאומיות לקילוגרם של נטריום הפרין ולאחר מכן להסיר את הכליה הימנית ההפונטרלית כפי שהוכח ולפתוח מחדש את לפרוטומיה החציוני.שתיים עד חמש דקות לפני הידוק כלי הדם, להזריק דרך הווריד 100 יחידות בינלאומיות לקילוגרם של נטריום הפרין ולאחר מכן להסיר את הכליה הימנית ההפוכים כפי שהוכח. מניחים את הכליה השתל השתמר לתוך השדה הכירורגי וליזום את הממשל של 0.1 כדי 1 מיקרוגרם לקילוגרם לדקה של נוראדרנלין כמו עירוי מתמשך באמצעות לחץ הדם העורקי הממוצע וקצב הלב כדי לפקח על היעילות. עבור anastomosis מקצה לקצה של וריד הכליה, להשתמש 5-0 פוליפרופילן למקם שני תפרים פינתיים לתפור את הקיר האחורי בצורה רציפה.לאחר השלמת הקיר האחורי, השתמש בקצה אחד של התפר הפינתי הגולגולתי כדי לתפור את הקיר הקדמי בכיוון craniocaudal ולשטוף את הווריד עם יחידה בינלאומית 100 לכל מיליליטר של תמיסת מלח Heparinized. עבור anastomosis מקצה לקצה של עורק הכליה, להשתמש 6-0 תפר פינת גולגולת פוליפרופילן לפני השימוש בטכניקת המצנח לתפור את הקיר האחורי בצורה רציפה כפי שהוכח. תפר את הקיר הקדמי עם הקצה השני של תפר פוליפרופילן 6-0 חמוש כפול לשטוף את העורק עם 100 יחידות בינלאומיות למיליליטר של תמיסת מלח Heparinized.לאחר השלמת anastomosis, לקשור את שני החוטים בפינה caudal ולפתוח ברצף את מהדקי כלי הדם והעורקים הווריד כדי לאפשר התחדשות של הכליה. לאחר ההתרסה, באופן טויף לנהל חמישה מיליליטר של פפברין לקיר החיצוני של עורק הכליה ולנהל דרך הווריד 250 מיליליטר של 20% גלוקוז פתרון במינון יחיד 80 מיליגרם של Furosemide. לאחר מכן, להעביר קטטר שתן צרפתי ילדים דרך דופן הבטן והעור ולהשתמש קשירה כדי לאבטח את הקטטר לשופך.סגור את השכבה צפדית על הכליה כדי למנוע נקע של השתל וקינקיות של anastomosis כלי הדם. ולסגור את הבטן בארבע שכבות כפי שהוכח. לבסוף, השתמש אולטרסאונד דופלר צבע כדי להבטיח זלוב עורקי ורטורי נאותה של השתלת הכליה לפני החזרת החיה שיקום מלא למתקן הדיור.בקבוצה מייצגת זו של חמישה ניסויי השתלת כליה אורתוטופית פורצ'נית, השתלת המשדר ותהליכי ההשתלה האוטומטית הצליחו בכל בעל חיים עם אותות טלמטריה מספיקים שנרשמו במהלך תקופת התצפית. לאחר סגירת הבטן, אולטרסאונד דופלר צבע חשף זלוב עורקי ורידי משביע רצון של הכליה בכל המקרים. ערכי אשלגן וקריאטין בסרום הגיעו לשיאם בימים שלאחר הניתוח 3-4 והראו התאוששות הדרגתית לאחר מכן.ה- pH בדם נשאר בטווח הנורמלי ותפוקת השתן התאוששה לערכים נורמליים בארבעת הימים הראשונים לאחר הניתוח. פרוטוקול זה יכול לשמש כדי לענות על שאלות שונות על ההשפעות של טכניקות שימור איברים או טיפולים לשעבר vivo או in-vivo במודל בעלי חיים גדול משמעותי קלינית.

Research

JoVE Journal

Medicine

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

Multi-פוטון הדמיה של הפלישה תאים סרטניים במודל עכבר orthotopic של קרצינומה של תאים קשקשיים אוראלי

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

עכבר דגם של אנדומטריוזיס בניתוח המושרה על ידי השתלת אוטומטי של רקמות הרחם

Endometriosis is a chronic, painful disease whose etiology remains unknown. Furthermore, treatment of endometriosis can require laparoscopic removal of ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

טכניקה של רכש כבד בשר חזירים והשתלות Orthotopic באמצעות פורטו-caval אנט פעיל

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

טלמטריה תוך רחמי למדידת לחץ עכבר התכווצות<em&gt; In vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Normothermic<em&gt; Ex Vivo</em&gt; זלוף כליות לשימור הכליה שתלים לפני השתלה

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

Heterotopic כליה Autotransplantation במודל חזירי: פרוטוקול צעד-אחר-צעד

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

מודל הפרה-קליני של השתלת לב אורתוטופית

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

אורתובנושא חולדה השתלת כליה: מגישת רומן וכירורגית פשוטה

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...