Name: orthotopic kidney auto-transplantation in a porcine model using 24 hours organ preservation and continuous telemetry
Uploaded: 2020-08-21T14:00:00
Duration: 7 min 58 s
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저자들은 파스칼 파셴다, 마리케 슐츠, 브리타 분가르트, 안나 퀴메케에게 숙련된 기술 지원에 감사를 표하고 싶습니다.
저자는 의학 학부의 시작 프로그램에서 부분적으로 자금을 선언, RWTH 아헨 대학 (#23/19 Z.C.), B.브라운 재단에서, 멜성겐, 독일 (BBST-S-17-00240 Z.C.), 독일 연구 재단 (도이치 포르슈주메인샤프트 - DFG; for-2591, 542/5-1, 542/6-1; 2016년 - R.T. 및 SFB/TRR57, SFB/TRR219, BO3755/3-1, BO3755/6-1 ~ P.B.) 독일 교육부(BMBF: STOP-FSGS-01GM1901A to P.B.) 연구 설계, 데이터 수집, 데이터 분석, 원고 준비 또는 출판 결정에 펀더의 개입 없이.

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Further evidence for differences between cyclosporin and tacrolimus nephrotoxicities.</a> Nephrology Dialysis and Transplantation. 19 (2), 444-450 (2004).</li><li>Markert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+telemetry-based+system+for+assessing+cardiovascular+function+in+group-housed+large+animals.+Taking+the+3Rs+to+a+new+level+with+the+evaluation+of+remote+measurement+via+cloud+data+transmission.">A new telemetry-based system for assessing cardiovascular function in group-housed large animals. Taking the 3Rs to a new level with the evaluation of remote measurement via cloud data transmission.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 93, 90-97 (2018).</li><li>L&#228;ngin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perioperative+Telemetric+Monitoring+in+Pig-to-Baboon+Heterotopic+Thoracic+Cardiac+Xenotransplantation.">Perioperative Telemetric Monitoring in Pig-to-Baboon Heterotopic Thoracic Cardiac Xenotransplantation.</a> Annals of Transplantation. 23, 491-499 (2018).</li><li>Willens, S., Cox, D. M., Braue, E. H., Myers, T. M., Wegner, M. 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저자는 공개 할 이해상충이 없습니다.

KT의 돼지 모델은 임상적으로 관련된 대형 동물 설정15,17,21에서새로운 치료 접근법 및 의료 기기에 대한 조사를허용합니다. 돼지와 인간 환경 사이의 해부학적, 병리학적 및 외과적-기술적 유사성은 임상 시험15,16,17,18,19,21로의 결과 및 기술의 임상 해석 및 신속한 번역을 용이하게 할 수 있다.
직교성 신장 자동 이식모델은 동종 이식에 비해 필요한 동물의 수를 줄임으로써 3R 원리를 준수할 뿐만 아니라, 예를 들어 별도의 기증자 동물이 필요하지 는 않지만 면역 반응 및 면역 억제약물(17,21)의혼동 효과 없이 IRI 및 보존 상해의 효과를 조사할 수 있는 독특한 기회를 제공한다.
프로토콜의 약간의 수정은 광범위한 임상 상황을 모델링 할 수 있습니다. 순환사멸(DCD) 신장 후 기부를 이용한 KT를 모방하기 위해 혈관 구조는 신장 검색 전 30~60분 동안 신장 회복 전에 고정되며, 감기허혈시간(24시간 이상)을 모델링하여 광범위한 보존상해를 16,17,28,29로모델링할 수 있다.
돼지 KT 모델은 작은 동물(예: 쥐 및마우스)의고체 장기 이식 모델(예: 쥐 및 마우스)보다 수술적으로 덜 도전적이지만, 결과를 개선하고 특정합병증을피하기 위해 여러 가지 기술적 측면과 함정이 존재한다.
기술적 실수 나 해부학적 변화로 인한 이식 검색 또는 이식 중에 열등한 베나 카바 및 대동맥 주위의 큰 림프혈관을 피하지 못하면 고출력 림프누공 및 수술 후 복부 유체 수집, 감염 및 잠재적으로 기술적 실패로 이어질 수 있습니다. 림프관은 수술 중에 완전히 피하거나 5-0 또는 6-0 폴리 프로필렌 봉합사로 닫아야합니다. 림프 누출의 경우 양극성 또는 기타 응고 장치의 사용을 피하는 것이 현명합니다. 그것은 일반적으로 상황의 악화로 이어집니다. 낮은 출력 림프 누출의 경우, 우리 팀은 피브린 기반 콜라겐 패치 (예 : 타초실)30의적용에 대한 좋은 경험을 가지고 있지만, 높은 비용은이 설정에서 자신의 응용 프로그램을 제한합니다.
본 프로토콜에서 우리는 신장 회수 및 자동 이식을 위한 전염 접근을 보여줍니다. 이것은 신장 이식편이 일반적으로 외과적 접근을 사용하여 iliac fossa로 이식되는 임상 상황에 비해 중요한 기술적 차이입니다. 비록, 대부분의 단은 돼지 모델에서 전염 및 정형소 접근법을 사용하지만, 오리악 포사에 이종성 이식도돼지(31)에서가능하다. 그러나, 30-40kg 돼지에서 외부 장악 동맥의 비교적 낮은 직경과 혈관 경련의 경향으로 인해 때로는 외부 장악동맥(31)에신장 동맥의 종단 간 해부학을 수행하기가 어려워진다. 후속 자동 이식을 수행하기 위한 트랜스페리오날 접근법을 통해 왼쪽 신장을 회수한다는 사실에 관해서는, 동일한 절개를 재개하고 성도 성도 교정 접근법을 사용하여 이식을 수행하는 것이 더 가능하며, 특히 프로토콜당 동물이 하나의 전손상된 종류로 만 회복되도록 기본 오른쪽 신장을 제거해야 한다는 것이 더 가능하다. 모델의 가능한 모든 기술적 변화에 대한 포괄적인 설명은 이 프로토콜의 범위를벗어납니다.
이식된 신장 이식편의 탈구및 혈관 성모의 결과적 인꼬는 혈관 KT 모델의 주요 실패원인이며, 외과적 합병증으로 인해 혈관 폐색 및 실험의 완전한 실패로 빠르게 이어집니다. 이를 피하기 위해 자동 이식 후 우리는 3-0 폴리글락틴을 사용하여 실행 봉합사를 사용하여 신장 위에 회중 층을 닫습니다. 더욱이, 피부도플러 초음파는 신장 이식과 복부 폐쇄의 이식 직후에 직접 수행되며, 신장 이식의 좋은 동맥 및 정맥 관류를 보장한다. 초음파는 또한 동물의 임상 성능에 기초하여 매일 및 온디맨드로 사용되며, 신장 관류, 신장 후 문제 (예 : 오줌 카테터의 방해 또는 꼬임) 및 림프 누공, 출혈 또는 감염으로 인한 유체 수집(도 4 및 도 6)에대해 검사합니다. 
감기 허혈의 24 시간은 수시로 기능장애 및 지연된 이식 기능으로 이끌어 내기 때문에, 동물은 수의학 책임자에 의해 필요하다고 여겨지는 경우에 주문형 의학 치료를 요구할 수 있습니다. 여기에는 중앙 정맥 라인을 통해 투여되는 5% 포도당 및/또는 링거 용액을 이용한 주입 요법, furosemide bolus 주사(임상 상태 및 실험실 결과에 따라 올리구리아/무뇨증의 경우), 60-80 mg bolus 주사 최대 200 mg/day), 및 폴리스티렌 설포네이트 나트륨의 경구 투여(리온 아칼레네아)의 경구 투여(리졸레32)의 경구 투여가 포함될 수 있다. 실험적 편견을 피하기 위해, 동물의 이식 후 수의학적 치료를 담당하는 수의장교는 적용된 치료 및 그룹화에 대해 눈을 멀게 해야 합니다.
비록, 신장 동맥의 해부학은 일반적으로 재건 하는 하나의 동맥독일 육종 돼지에서 오히려 간단, 정맥 재건 하는 동안 특정 외과 창의력을 필요로 하는 신장 정맥 분기의 해부학 적 변화의 넓은 스펙트럼이 있다. 빈번하게 2개(또는 그 이상) 신장 정맥 가지는 신장 동개와 열등한 정맥 카바 사이의 다른 수준에 참여합니다. 가장 자주 관찰되는 변형 및 가능한 재구성옵션(17)은 도 3에나와 있다.
첫 번째 외과 적 개입 (일 -15, 원격 측정 이식)에 따라 모든 동물은 실험의 전체 기간 동안 착용 하는 돼지 재킷을 받습니다. 이것은 이식 된 카테터의 우발적 인 부상과 탈구에 대한 우수한 보호를 제공하고 소변 수집 가방의 보관을위한 공간을 제공합니다. 이러한 재킷의 사용은 또한 3R 원리에 따른 정제 방법으로 크레아티닌 클리어런스 의 평가를 위한 신진 대사 케이지의 필요성을 제거하기 위한 실현 가능한 솔루션이다.
당사의 주택 시설은 원격 분석 및 비디오 기반 페리 운영 모니터링의 사용을 통합합니다. 이러한 방법은 수의과 장교와 기술자의 정기적인 방문을 대체할 수는 없지만 신속한 개입을 용이하게 하고 심각도 평가를 개선하여 미래에 대한 실험 설정을 더욱 개선합니다. 대형 동물모델(33)에서이식형 원격 분석 장치의 사용에 대한 광범위한 적응증이 있다. 심전도, 혈압, 온도 등 주요 수술 에 따른 임상 기생충의 면밀한 모니터링은 수술 중집중 및 중간 치료실의 인간 임상 환경에서 표준으로 간주되지만, 실험 수술 모니터링은 동물이마취33,34,35에서깨어나면 대부분 중단된다. 따라서 원격 측정은 이러한 동물의 지속적인 모니터링을 위한 실행 가능한 방법을 제공합니다. 우리는 이 모든 데이터가 가능한 수술 후 합병증의 조기 발견에 정확하고 적시에 기여한다고 믿습니다 (예를 들어, 출혈 성 충격, 또는 온도 증가하여 검출된 패혈증, 저혈압 및 빈맥). 이것은 적시에 개입(예를 들어, 치료 항생제 치료의 도입, 유체 대체, 항응고 중단, 또는 고통을 피하기 위해 동물의 희생)을 촉진할 수 있다. 이러한 "실시간" 모니터링 측면 외에도, 우리 그룹은 현재 동물 실험36,37,38의심각도 평가 및 개선에 초점을 맞추고 있습니다. 이러한 실험에서 수집된 다량의 원격 분석 데이터를 회고분석하면 이러한 종류의 외과 적 개입의 심각성을 더 잘 계층화하고 실험실 동물에서 perioperative care (예 : 진통)를 최적화 할 수 있습니다.
이식형 원격 분석의 관점에서 측정 시스템의 이식 후 최소 12일 의 기간이 안정적이고 최적의 측정 데이터를 보장하는 것이 좋습니다(개인 통신 기준). 다양한 실험 환경에서 이러한 시스템을 사용하는 다른 연구 그룹과 대형 동물을 위한 원격 측정 솔루션을 제공하는 다양한 제조업체와 이 문제를 논의한 후, 원격 측정 이식과 신장 이식 사이에 14일 의 기간을 통합하기로 결정했습니다. 이전 일 동안, 흉터와 치유 과정이 아직 불완전하기 때문에 동물의 움직임으로 인해 편차가 여전히 발생할 수 있습니다.
그 장점에도 불구하고, 위에서 설명 한 모델은 특정 제한이 있습니다. 복잡성과 필수 리소스 및 인프라는 모델의 가장 중요한 제한 사항입니다. 시간이 많이 소요되는 실험 프로토콜, 복잡한 기술 및 강렬한 peri 수술 후속 조치는 상당한 주택 및 OR 용량의 가용성을 필요로하며 박사 동료, 외과 의사, 수의 장교 및 기술자 (표 1)를 포함한 더 큰 팀의 참여가 필요합니다. 따라서, 우리의 경험적 관찰에 따라, 그것은 일반적으로 하루에 두 개 이상의 절차를 수행 하는 것이 불가능. 작은 동물 모델에 비해 돼지 모델의 추가 단점은 기계및 분자 생물학적 조사의 제한된 가능성이다. 본 의정서에서는 5일 간의 후속 조치가 보고되었다. 이것은 모델의 가장 중요한 실험 적 특성을 입증하기에 적합했지만, 이러한 비교적 짧은 후속 조치는 특정 특정 연구 질문 (예 : 기능의 장기 회복 대 급성 손상)에 대답하기에 충분하지 않을 수 있습니다. 따라서 후속 조치의 프로젝트 관련 확장이 필요할 수 있습니다. 이 원고는 돼지 직소 신장 자동 이식의 실험 적인 환경에서 우리의 현재 "모범 사례"를 설명합니다. 특정 단계는 성공적으로이 모델을 확립하는 것이 필수적이지만, 사소한 측면 (예 : 방광 카테터의 수술 내 사용, 대 경동맥에 동맥 카테터 배치)은 양성이며 조사관의 재량에 따라 피할 / 변경 될 수 있습니다. 각 조직적 측면에 대한 설명과 정당성은 현재 프로토콜의 범위를 벗어나다른 31에서논의되었습니다. 마지막으로, 노인 기증자, 급성 신장 손상및 고혈압, 당뇨병 멜리터또는 동맥 경화증과 같은 만성 질환을 가진 기증자가 한계 기증자 풀8,9의주요 부분을 나타내는 돼지 모델에서 ECD KT의 정확한 임상 상황을 복제하기가 어렵다.
위에서 언급한 한계와 기술적, 물류적 과제에도 불구하고, KT의 잘 확립되고 재현가능한 대형 동물 모델은 장기 보존 및 임상 결과를 개선하기 위한 새로운 치료법과 기술을 조사할 수 있는 특별한 기회를 제공하며, 젊은 외과 의사가 대형 동물 모델에서 장기 이식 기술을 습득할 수 있는 훌륭한 플랫폼을 제공합니다.

1954년 노벨상 수상자 인조셉 머레이1의선구적인 그룹에 의해 수행된 일란성 쌍둥이 간의 첫 번째 성공적인 인간 신장 이식 이후, 신장 이식(KT)은 말기 신장 질환(ESRD)2환자를 위한 치료의 주축으로 진화했다. KT는투석2에비해 우수한 장기 임상 결과와 삶의 질을 보여줍니다. KT가 수술기술, 장기보존, 면역억제치료, 중환자치료의 발전으로 지속적으로 개선된 후 단기 및 장기 생존율은 글로벌 척도2,3,4로널리 보급되었다.
중요한 장기 부족으로 인해 동종 이식 공급과 수요3,5,6 사이의 격차가 지속적으로 증가하고있습니다. 2018년에는 약 12,031명의 환자가 독일에서 KT를 기다리고 있었지만, 이식을 위한 장기의 극심한 부족으로 인해 20%(2,291명)만 이내의신장을받을 수 있었다. 불행하게도, 장기 기증자의 절대 수뿐만 아니라 이식을 위해 제공되는 동종 이식의 일반적인 품질은 지난 수십 년 동안 감소했다8,9. 이식(10)을위해 받아들여져야 했던 사전 손상되거나 "한계" 신장 동종 이식의 수에서 증가된 경향을 관찰했다. ECD 동종 이식의 사용은 대기 시간 및 대기자 명단 이환율 및 사망률을 감소시킬 수 있지만, 그러나, 1차 이식비(PNF) 및/또는 지연된 이식 기능(DGF)8,9,10과같은 접목 관련 합병증의 발생률 증가와 관련이 있다. 추가 연구는 동종 이식 활용을 최적화하고, 기증자 풀을 확장하고 궁극적으로 환자 결과를 향상시킬 수있는 한계 동종 이식을 보호하고 재조건하는 데 필수적입니다3,6.
큰 동물 이식 모델의 자원 집약적이고 복잡한 특성으로 인해, 많은 수의 연구가 작은 동물을 사용하거나 전 생체 설정11,12,13,14,15에서수행된다. 이 모형은 중요한 과학적인 데이터를 전달할 수 있더라도, 임상 설정에 이 사실 인정의 번역은 수시로 제한됩니다. 치열 교정 신장 자동 이식의 돼지 모델은 잠재적으로 더 긴 후속 기간과 반복적인 샘플수집16,17에대한 풍부한 가능성과 함께, 잠재적으로 더 긴 후속 기간과 반복적 인 샘플 수집에 대한 풍부한 가능성으로, 생체 내에서 임상적으로 관련된 새로운 혁신적인 치료 접근 방식을 테스트 할 수있는 잘 확립되고 재현 가능한 모델이다. 임상 설정(특히 의료기기 개발 및 약물 투여의 경우)으로 비교적 직접 번역할 수 있는 비교 크기의 장점을 넘어, 허혈-재퍼퓨전 손상(IRI) 반응 및 신장 손상 측면에서 외과-해부학적 및 생리적 유사성을, 번역 연구에서 이 모델의 사용을지원한다 17,18,19. 이 모델은 또한 임상 장기 이식20의기술적 인 도전에 대한 젊은 이식 외과 의사를 준비하는 훌륭한 훈련 기회를 제공한다.
또한 인간 설정에 비해 여러 가지 차이가 있으며 모델의 다양한 기술적 수정은문헌(16,17,19,20,21)에서찾을 수 있다. 이 문서에서는 돼지 치열 교정 신장 자동 이식 모델을 확립하는 데 도움이 될 수 있는 기술적 세부 사항, 함정 및 권장 사항을 포괄적으로 설명합니다. 기술된 원격 분석 및 비디오 모니터링 방법뿐만 아니라 특별히 설계된 하우징 시설은 동물의 클로즈업 심각도 평가 및 임상 관찰을 가능하게 합니다. 경피 오줌 카테터와 지정된 돼지 재킷의 사용은 신진 대사 케이지를 사용하지 않고 신장 기능에 대한 상세한 평가의 가능성을 제공합니다. 이러한 기술적 수정은 3R 원리(교체, 감소 및 정제)의 현대적인 과제를 준수하고 대형 동물모델(22)을사용하여 동물 실험을 개선하는 잠재적 솔루션으로 설명된다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia materials, drugs and medications</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspirin 500mg i.v., powder for solution for injection&#160;</td>
			<td>Bayer Vital AG, Leverkusen, Germany</td>
			<td>4324188</td>
			<td>antiplatelet agents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine sulfate solution for injection, 100mg</td>
			<td>Dr. Franz K&#246;hler Chemie GmbH, Bensheim, Germany&#160;</td>
			<td>1821288</td>
			<td>parasympatholytic agent, premedication</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen ointment for eyes and nose</td>
			<td>Bayer Vital AG, Leverkusen, Germany</td>
			<td>1578675</td>
			<td>eye ointment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Discardit II syringes, 2ml, 5ml, 10ml,20ml</td>
			<td>Becton Dickinson GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>300928, 309050,309110, 300296&#160;</td>
			<td>syringes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Micolance 3 (20G yellow) Cannula</td>
			<td>Becton Dickinson GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>305888</td>
			<td>venous catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Venflon Pro Safety (20G pink)</td>
			<td>Becton Dickinson GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>4491101</td>
			<td>venous catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine (Buprenovet)</td>
			<td>Bayer Vital AG, Leverkusen, Germany</td>
			<td>794-996</td>
			<td>analgesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefuroxime 750mg, powder for preparing&#160; injection solution</td>
			<td>FRESENIUS KABI Deutschland GmbH, Bad Homburg, Germany</td>
			<td>J01DC02</td>
			<td>antibiotics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien Hi-Contour, Endotracheal Tube 7,5 with Cuffed Murphy Eye</td>
			<td>Covidien Deutschland GmbH,Neustadt/Donau, Germany</td>
			<td>COV-107-75E</td>
			<td>endotracheal Tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FENTANYL 0,5 mg Rotexmedica solution for injection&#160;</td>
			<td>Rotexmedica GmbH Arzneimittelwerk, Trittau, Germany</td>
			<td>4993593</td>
			<td>opioide analgetic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Furosemide-ratiopharm 250 mg/25 ml solution for injection</td>
			<td>Ratiopharm GmbH, Ulm, Germany</td>
			<td>1479542</td>
			<td>loop diuretics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose 5% solution for infusion (500ml, 250ml)</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>3705273,03705422</td>
			<td>infusion fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose 20% solution for infusion</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>4164483</td>
			<td>osmotic diuresis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin-Sodium 5000 I.E./ml</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>15782698</td>
			<td>anticoagulant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane-Piramal (Isoflurane)</td>
			<td>Piramal Critical Care Deutschland GmbH, Hallbergmoos, Germany</td>
			<td>9714675</td>
			<td>volatile anaesthetic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketamine hydrochloride) 10%</td>
			<td>Medistar Arzneimittelvertrieb GmbH, Ascheberg, Germany</td>
			<td>0004230</td>
			<td>general anaestetic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MIDAZOLAM 15mg/3ml</td>
			<td>Rotexmedica GmbH Arzneimittelwerk, Trittau, Germany</td>
			<td>828093</td>
			<td>hybnotica, sedative agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0,9% solution for infusion (500ml,1000ml)</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>864671.8779</td>
			<td>infusion fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Norepinephrine (Arterenol)</td>
			<td>Sanofi-Aventis Deutschland GmbH, Frankfurt, Germany</td>
			<td>16180</td>
			<td>increase in blood pressure&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organ preservation solution (e.g. HTK)</td>
			<td>Dr. Franz K&#246;hler Chemie GmbH, Bensheim, Germany&#160;</td>
			<td>should be decided based on preference and experimental design</td>
			<td>organ preservation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pantoprazole 40mg/solution for injection</td>
			<td>Laboratorios Normon,Madrid, Spain</td>
			<td>11068</td>
			<td>proton pump inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paveron N 25mg/ml solution for injection (Papaverine Hydrochloride)</td>
			<td>LINDEN Arzneimittel-Vertrieb-GmbH, Heuchelheim, Germany</td>
			<td>2748990</td>
			<td>spasmolytic agent for vasodilatation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital (Narcoren)</td>
			<td>Boehringer Ingelheim vetmedica GmbH, Ingelheim, Germany</td>
			<td>1,204,924,565</td>
			<td>used for euthanasia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol 1% (10mg/ml) MCT Fresenius</td>
			<td>FRESENIUS KABI Deutschland GmbH, Bad Homburg, Germany</td>
			<td>654210</td>
			<td>general anaesthetic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringer solution</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>1471411</td>
			<td>infusion fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterofundin ISO solution for infusion (1000ml)</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>1078961</td>
			<td>Infusion fluid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stresnil (Azaperone) 40mg/ml</td>
			<td>Elanco</td>
			<td>797-548</td>
			<td>sedative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urine catheter ruffle 12CH&#160;</td>
			<td>Wirutec R&#252;sch 
			Medical Vertriebs GmbH, Sulzbach, Germany</td>
			<td>R&#220;SCH-180605-12</td>
			<td>transurethral urinecatheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Appose ULC Skin Stapler</td>
			<td>Covidien Deutschland GmbH,Neustadt/Donau, Germany</td>
			<td>8886803712</td>
			<td>skin stapler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cavafix Certo 375&#160;</td>
			<td>B. Braun Deutschland GmbH &#38; Co. KG, Melsungen, Germany&#160;</td>
			<td>4153758</td>
			<td>central venous catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMKA Easytel +L-EPTA Transponder</td>
			<td>emka TECHNOLOGIES S.A.S,Paris,France</td>
			<td>L-EEEETA 100</td>
			<td>telemetry transponder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMKA Reciever and Data Analyzer System</td>
			<td>emka TECHNOLOGIES S.A.S,Paris,France</td>
			<td>Reviever&#160;</td>
			<td>telemetry receiver</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Feather Disposable Scapel (11)(21)</td>
			<td>Feather, Japan</td>
			<td>8902305.395</td>
			<td>scapel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 2-0, blue monofil VISI-BLACK, FS needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7038H</td>
			<td>skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 3-0,blue monofil,FS1 needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7694H</td>
			<td>skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 5-0 (simply angulated, C1 needle) blue monofil VISI-BLACK</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7227H</td>
			<td>vascular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 5-0 (double armed, C1 needle) 60cm</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>KBB5661H</td>
			<td>vascular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 6-0 (double armed, C1 needle) 60cm</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>EH7228H</td>
			<td>vascular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sempermed derma PF Surgical Gloves Seril Gr. 7, 7.5, 8&#160;</td>
			<td>Semperit investment Asia Pte Ltd, Singapore</td>
			<td>4200782,4200871,4200894</td>
			<td>surgical gloves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sentinex&#174; PRO Surgical Gowns Spunlace XL 150cm</td>
			<td>Lohmann &#38; Rauscher GmbH &#38; Co. KG, Neuwied, Germany</td>
			<td>19302</td>
			<td>surgical gown</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tachosil</td>
			<td>Takeda Pharma Vertrieb GmbH &#38; Co. KG, Berlin, Germany</td>
			<td>MAXI 9,5 x 4,8 cm</td>
			<td>haemostasis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Telasorp Belly wipes (green 45x45cm)</td>
			<td>PAUL HARTMANN AG,Heidenheim, Germany</td>
			<td>4542437</td>
			<td>abdominal towel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pediatric urine catheter</td>
			<td>Uromed Kurt Drews KG, Oststeinbeck, Germany</td>
			<td>PZN 03280856</td>
			<td>used for the uretero-cutaneus stoma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VICRYL- 0 MH Plus</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>V324</td>
			<td>fascial closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VICRYL - 3-0, SH1 Plus needle, 75cm</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>W9114</td>
			<td>subcutaneous suture, peritoneal suture,&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VICRYL - 3-0, SH1 Plus needle, 4*45cm</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>V780</td>
			<td>subcutaneous suture, peritoneal suture,&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VICRYL - ligatures Sutupak purple braided, 3-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany</td>
			<td>V1215E</td>
			<td>threats for ligature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3M&#8482; Standard Surgical Mask 1810F</td>
			<td>3M Deutschland GmbH, Neuss, Germany</td>
			<td>3M-ID&#160;7000039767</td>
			<td>surgical mask</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anatomical forceps Standard</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>PZ0260</td>
			<td>anatomical forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atraumatic tweezers steel, De Bakey Tip 1,5mm 8&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>GF0840</td>
			<td>anatmical atraumatic forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar forceps 16 cm straight, Branch 0,30 mm pointed, universal fit</td>
			<td>B&#252;hler Instrumente Medizintechnik GmbH,Tuttlingen, Germany</td>
			<td>08/0016-A</td>
			<td>biopolar forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bulldog clamp atraumatic,curved, De bakey 78 mm, 3&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>GF0900</td>
			<td>bulldog clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DE BAKEY-SATINSKY vascular clamp 215mm</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>GF1661</td>
			<td>vascular clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissors Mayo,250 mm, 10&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>SC2232</td>
			<td>&#160; Scissors for dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissors Metzenbaum-Fino, 260 mm, 101/4&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>SC2290</td>
			<td>Scissors for dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Draeger CATO Anesthetic machine with PM8050 Monitor</td>
			<td>Dr&#228;ger, Dr&#228;gerwerk AG &#38; Co. KGaA, L&#252;beck, Germany&#160;</td>
			<td>106782</td>
			<td>Ventilation System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Fine Tweezers, ADSON 180 mm</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>ADSONPZ0571</td>
			<td>fine forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gosset abdomenal wall spreader</td>
			<td>CHIRU-INSTRUMENTE, Kaierstuhl,Germany</td>
			<td>09-621512</td>
			<td>abdominal retractor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HALSTEAD MOSQUITO,curved, surgical 125mm</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>KL2291</td>
			<td>mosquite clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HF surgical device ICC 300, Electrocautery</td>
			<td>Erbe Elektromedizin Gmbh; T&#252;bingen, Germany</td>
			<td>20132-043</td>
			<td>cautery, biopolar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MICRO HALSTED-MOSQUITO 100mm, curved</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>KL2187</td>
			<td>mosquite clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro steel needle holder straight 0,5mm, with spring lock</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>MN1324D</td>
			<td>microsurgical needle holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical/watermaker tweezers LINZ 150mm 6&#34; Ergo round handle</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>MN0087</td>
			<td>fine microsurgical forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holder Mayo-hegar,190 mm, 71/2&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>NH1255</td>
			<td>needle holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Overhold Slimline Fig. 0 8 1/2&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>KL4400</td>
			<td>overholds</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze 10X10</td>
			<td>Paul HaRTMANN AG,Heidenheim, Germany</td>
			<td>401725</td>
			<td>sterile gauze</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suction tip OP-Flex Handpiece Yankauer</td>
			<td>Pfm Medical AG, K&#246;ln, Germany</td>
			<td>33032182</td>
			<td>suction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical forceps Standard 5 3/4&#34;&#160;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>PZ1260</td>
			<td>surgical forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical scissors standard pointed-blunt (thread/cloth scissors)175 mm, 7&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>SC1522</td>
			<td>surgical Scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Titanit vascular scissors POTTS-SMITH,185 mm, 71/4&#34;60&#176;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>SC8562</td>
			<td>Pott scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tunneling instrument</td>
			<td>Marina Medical Instruments Inc,Davies,US</td>
			<td>MM-TUN06025</td>
			<td>subcutaneous tunneling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel loops</td>
			<td>Medline International Germany GmbH,Kleve, Germany</td>
			<td>VLMINB</td>
			<td>hold and adjust the vessel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound spreaders Weitlander, Stump,110 mm, 41/4&#34;</td>
			<td>ASANUS Medizintechnik GmbH, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td>WH5210</td>
			<td>wound care</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Further material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Eickemeyer - Medizintechnik f&#252;r Tier&#228;rzte KG, Tuttlingen, Germany&#160;</td>
			<td> 
			648050 MHP-E1220</td>
			<td>maintain body temperature during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope, customized</td>
			<td>Wittex GmbH, Simbach, Germany</td>
			<td>333222230</td>
			<td>&#160;expose the vocal cord</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectal temperature probe</td>
			<td>Asmuth Medizintechnik, Minden, Germany</td>
			<td>ASD-RA4</td>
			<td>measure body temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spray wound film</td>
			<td>Mepro-Dr. Jaeger und Bergmann GmbH, Vechta, Germany</td>
			<td>2830</td>
			<td>&#160;keep sterile condition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile organ bag</td>
			<td>Raguse Gesellschaft f&#252;r medizinische Produkte, Ascheberg, Germany</td>
			<td>800059</td>
			<td>organ preservation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>swine jacket small, adult Landrasse swine 30-50kg, customized for Emka Telemetry and urinary catheterization&#160;</td>
			<td>Lomir Biomedical Inc., United Kingdom</td>
			<td>SS J1LAPMP</td>
			<td>swine jackets to pretect implanted catheters and store urine bag</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Ultrasound device, Sonosite Edge-II</td>
			<td>FUJIFILM SonoSite GmbH, Frankfurt, Germany</td>
			<td>V21822</td>
			<td>ultrasound and color Doppler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urine bag 2000ml Volume</td>
			<td>ASID BONZ GmbH, Herrenberg, Germany&#160;</td>
			<td>2062578</td>
			<td>disposable urine bag connected to the uretero-cutaneous fistula catheter</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

orthotopic kidney auto-transplantation in a porcine model using 24 hours organ preservation and continuous telemetry

현재 중요한 장기 부족의 장기 이식 시대에는 신장 이식(KT)을 위한 사용 가능한 동종 이식풀을 확대하기 위한 다양한 전략이 사용되고 있습니다. 비록, 확장 된 기준 기증자에서 동종 이식의 사용 (ECD) 부분적으로 장기 기증자의 부족을 완화 수 있습니다., ECD 장기 열등 한 결과 및 수술 후 합병증에 대 한 잠재적으로 높은 위험을 수행. 역동적인 장기 보존 기술, 허혈 재관전 및 보존 상해의 변조, 동종 이식 요법은 KT의 동종 이식 활용 및 환자 결과를 개선하기 위한 노력의 과학적 관심의 스포트라이트에 있습니다.
전임상 동물 실험은 번역 연구에서 필수적인 역할을 하고 있으며, 특히 의료 기기 및 약물 개발에서 중요한 역할을 하고 있습니다. 전 생체 또는 작은 동물 연구에 대한 돼지 치열 교정 자동 이식 모델의 주요 장점은 임상 설정에 대한 외과 해부학 적 및 생리적 유사성 내에 있습니다. 이것은 새로운 치료 방법 및 기술의 조사를 허용하고 사실 인정의 촉진한 임상 번역을 보장합니다. 이 프로토콜은 24시간의 보존 시간 및 원격 측정 모니터링을 사용하여 돼지 직교 신장 자동 이식 모델에 대한 포괄적이고 문제 지향적인 설명을 제공합니다. 정교한 수술 기법과 마취, 동물 하우징, perioperative 후속 및 모니터링의 매우 표준화및 최첨단 방법의 조합은 이 모델의 재현성과 성공을 보장합니다.

우리 그룹은 크고 작은 동물에서 고체 장기 이식 모델에 대한 몇 년의 경험을 가지고 있으며 돼지 치열 교정 신장 자동 이식 모델을 활용하여 다양한 실험 설정16,25,26,27에서재현 가능한 결과를 얻습니다. 실험 용 설정에 따라 전체 실험 팀의 충분한 학습 곡선을 보장하는 예비 실험으로 3 ~5 개의 자동 이식을 수행하는 것이 좋습니다. 현재 설정에서 5 이식은 외과 의사를 양성하는 데 필요했다, 이전 실험의 8 년 - 및 이식 수술 분야에서 임상 수술 경험의 5 년, 이러한 실험을 수행. 이것은 이 기술에 외과 의사의 이전 노출에 따라 다를 수 있습니다.
이 프로토콜의 프레임 워크 내에서, 5 돼지 치열 교정 신장 자동 이식 실험의 세트의 결과가 입증된다. 트랜스폰더 이식은 관찰 기간 내내 충분한 원격 측정 신호를 가진 각 동물에서 성공했습니다 (부분 트랜스 폰더 기능 장애가있는 한 동물을 제외하고). 트랜스폰더 이식용 칼-피부 간격은 85분 ±5분(표1)이었다. 이식 검색 후, 모든 동물은 주택 시설에서 잘 회복. 검색 수술에 대한 칼- 피부 간격은 135 분 ± 32 분이었다 (삽입에 대한 약 30-45 분 포함, 경마 카테터의 터널링 및 고정). 왼쪽 신장은 24시간(24시간 ± 30분)의 고온혈 시간으로 찬수조에 보관하였다. 다음 날, 마취 유도 및 재발 절제술 후, 금단의 (오른쪽) 신장이 제거된 후 감기저장 왼쪽 신장 이식의 직교자가 이전에 설명된 바와 같이 제거되었다. 자동 이식 수술에 대한 칼- 피부 간격은 27 분 ± 168 분 (오른쪽 신장의 절충포함)이었다. 따뜻한 허혈 시간은 34분 ± 7분이었습니다. 각 이식 된 신장 이식편은 레퍼퓨전 다음 최소한의 직접 소변 생산을했다. 복부 폐쇄 에 이어, 색 도플러 초음파는 모든 경우에 신장의 만족스러운 동맥 및 정맥 관류를 보였다(도 4). 모든 동물은 마취에서 회복되었고 관찰 기간 내내 중요한 합병증이 관찰되지 않았습니다. 매일 혈액과 소변 샘플을 수집하였다. 모든 돼지는 후속 기간 동안 양호한 임상 상태에 있었고 5 일 후에 희생되었습니다. 세럼 크레아티닌과 칼륨 값은 POD3-4에 정점을 찍었습니다. 혈액 pH는 정상 범위 내에 남아있다(그림 5). 소변 출력은 처음 4 수술 후 일 동안 정상 값으로 회복. 백혈구 수는 후속기간(도 5)의끝에 약간 증가하였다. 지속적인 원격 분석 모니터링에 의해 측정된 체온은 수술 후 기간 동안 약간의 변동을 보였다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig1.jpg"> 그림 1: 스터디 순서도 및 프로토콜. 약어 사용: POD 수술 후 일; 심전도 - 전기 장학. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig2.jpg"> 그림 2: 최대 6마리의 동물을 실시간으로 지속적으로 원격 측정 모니터링하는 동물주택 시설. (A)최대 6마리의 동물의 주거 및 원격 측정 모니터링에 적합한 시설의 회로도 청사진. 단일 홀딩 박스의 크기는 EU 지침 2010/63 및 ETS 123 부록 A. 패널 A-E쇼의 지침에 따라 결정되었습니다. (B)6마리의 동물을 수용할 수 있는 동물실. (C)원격 분석 데이터의 지속적인 등록에 사용되는 PC가있는 전망실. (D)동물의 실시간 비디오 및 열 영상. (E)개인의 사회적 고립을 피하기 위해 반려동물과 동물의 음향 및 후각 접촉을 보장합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig3.jpg"> 도 3: 직교 신장 자가 이식 및 해부학 적 변이 및 재건 가능성. (A,B)"표준"혈관 해부학의 경우 직교 신장 자동 이식 모델의 단계. (C)변형 1: 하나의 큰 정맥은 기증자 신장과 함께 제공 하는 동안, 받는 사람 측에 두 개의 정맥이 있다. 관리: 더 작은 정맥은 합자에 의해 닫히고 아나스토모증은 신장 정맥 사이 끝까지 수행됩니다. (D)변형 2: 하나의 큰 정맥이 기증자 신장과 함께 제공되지만, 모순쪽에 적합한 수령인 혈관이 없습니다(예: 크기 불일치). 관리: 열등한 베나 카바에 신장 정맥의 측면 아나스토모증을 종료합니다. (E)변형 3: 양쪽에 두 개의 유사한 크기의 정맥. 관리: 두 개의 정맥 해부학에 의한 재건. (F)변형 4: 두 개의 유사한 크기의 정맥이 기증자 신장과 함께 제공되지만, 반대로 적합한 수령인 용기는 없습니다. 관리: 두 개의 신장 정맥의 경우 열등한 베나 카바에 신장 정맥의 측면 아나스토모증을 종료합니다. (G)변이 5: 기증자 신장은 초기 분기를 보여주는 정맥과 함께 제공되며, 반대로 하나의 큰 정맥이 있습니다. 관리: 기증자 신장 정맥의 짧은 공통 채널의 해부학을 종료하는 것은 받는 사람 측에 하나의 큰 정맥을 가진. (H)변형 6: 기증자 신장은 초기 분기와 단일 신장 정맥과 함께 제공 하는 동안, 반대로 측면에 적합한 받는 혈관이 없습니다. 관리: 열등한 베나 카바에 기증자 신장 정맥의 짧은 공통 채널의 측면 아나스토모증을 끝. 이 그림은 더 빈번한 변화의 소수를 묘사하고 독일 육상 돼지에서 가능한 모든 변화의 관점에서 통계적으로 포괄적이지 않습니다. 약어 사용: KG 신장 이식; RK 오른쪽 신장; IVC 열등한 베나 카바; AO-aorta는 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig4.jpg"> 그림 4: 대표적인 색상 도플러 초음파 이미지, 직교 신장 자동 이식 및 복부 폐쇄 직후. (A)색도플러 초음파는 신장 및 복부 폐쇄의 이식 후 직접 수행되며, 신장 이식의 좋은 동맥 및 정맥 관류를 보장하고 잠재적 인 iatrogenic 혈관 꼬임에 대한 검사를 합니다. 초음파는 또한 다양한 문제를 선별하기 위해 동물의 임상 성능에 기초하여 매일 및 주문형으로 사용되었습니다. (B-E) 이식 후 신장 이식의 대표적인 초음파 이미지. 색상도플러(B,C)의신장 이식편의 이미지는 우수한동맥(D)및 정맥 관류(E)를 나타낸다. 이 그림은 같은 동물의 대표적인 이미지를 보여줍니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig5.jpg"> 그림 5: 24h의 감기 허혈 시간을 가진 직교 신장 자동 이식모델의 대표적인 실험실 결과 및 원격 분석 데이터. (A)혈청 칼륨 값(B)혈청 크레아티닌 값(C)pH(D)백혈구 수(WBC)(E)소변 출력. (F)4회 연속 신장 이식(부분 트랜스폰더 기능 장애로 인한5번째 동물로부터 제시된 자료 없음)에서 관찰 기간 전반에 걸쳐 텔레메트릭 모니터링에 의해 등록된 평균 체온. 사용 된 약어 : POD 수술 후 날. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61591/61591fig6.jpg"> 도 6: 가능한 peri 수술 합병증 및 함정의 예. (A-C)이식 된 신장 이식의 수술 후 혼잡 POD3 다음 직교 킨티 자동 이식. (D)혼잡의 원인은 피부 의 수준에 과다조 봉합사로 인해 카테터 꼬임으로 확인되었다. 봉합사를 재조정한 후 24시간(E)에서 거의완전히 해결된 혼잡이 나타나고 있으며, 여기서 는 치열교정 신장 자동 이식에 따른 POD2에 대한 다른 신장 이식이 나타난다. 아스테릭스(*)는 이식편(피 묻은 컬렉션 대 림프구)의 밑장 주위에 유체 컬렉션을 보여줍니다. 신장을 통해 복막의 폐쇄와 우리의 기술 때문에 이러한 수집은 일반적으로 로컬 압축의 유리한 효과로 인해 자기 제한. 동물은 현지 발견, 출혈 또는 감염의 징후의 관점에서 밀접하게 모니터링되어야합니다. (F)주택 시설에서 매일 수행 (및 주문형) 자격을 갖춘 색상 도플러 초음파는 학업 활용 외에 (예를 들어, 문서, 동맥 저항 지수의 등록), 초기 하위 임상 단계에서 잠재적 인 합병증을 인식하는 중요한 진단 역할을 갖는다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61591/61591fig6large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>
<table border="1" fo:font-size="9px" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td rowspan="2">실험 작업/단계</td>
			<td rowspan="2">일</td>
			<td rowspan="2">시간 (분)</td>
			<td rowspan="2">외과 의사</td>
			<td rowspan="2">수의학 책임자</td>
			<td rowspan="2">수의학 기술자</td>
			<td rowspan="2">실험실 기술자</td>
			<td rowspan="2">박사 과정 학생</td>
			<td>총</td>
		</tr>
<tr>
<td>Nr</td>
		</tr>
<tr>
<td>Preopreative 치료</td>
			<td>D-29 ~ D-15</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>원격 분석 이식 수술</td>
			<td>D-15</td>
			<td>85±5</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>원격 분석 이식 후 수술 후 치료</td>
			<td>D-15 ~ D-1</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>접목 검색 수술</td>
			<td>D-1</td>
			<td>135±32</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>8</td>
		</tr>
<tr>
<td>신장 자동 이식 수술</td>
			<td>D 0</td>
			<td>168 ±27</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>8</td>
		</tr>
<tr>
<td>신장 자동 이식 다음 수술 후 치료</td>
			<td>D 0 ~ D5</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td></td>
			<td>2</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>희생</td>
			<td>D 5</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
			<td>2</td>
			<td></td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>4</td>
		</tr>
</tbody></table>표 1. 돼지 신장 자동 이식 모델의 다양한 실험 단계를 수행하기위한 필요한 인적 자원 및 시간 일정에 대한 설명.

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Orthotopic Kidney Auto-Transplantation in a Porcine Model Using 24 Hours Organ Preservation And Continuous Telemetry

대형 동물 모델은 전임상 이식 연구에서 필수적인 역할을 합니다. 임상 설정과의 유사성으로 인해, 본 문서에 기재된 치열 신장 자동 이식의 돼지 모델은 장기 보존 기술 및 치료 내정간섭의 시험을 위한 우수한 생체 내 설정을 제공한다.

24시간 장기 보존 및 지속적인 원격 분석을 사용하여 돼지 모델에서 직소 신장 자동 이식

In the present era of organ transplantation with critical organ shortage, various strategies are employed to expand the pool of available allografts for ...

이 프로토콜은 24시간의 장기 보존 시간 및 peri 수술 텔레메트릭 모니터링을 사용하여 돼지 직소 신장 자동 이식 모델을 성공적으로 확립하는 모든 주요 단계를 설명합니다. 작은 동물 모델에 대한 전 생체 연구보다 이 큰 동물 자동 이식 모델의 주요 장점은 임상 설정에 대한 외과 해부학 및 병리학적 유사성입니다. 대학 병원 RWTH Aachen에 있는 우리 팀은 절차를 시연할 것입니다.하룻밤 동안 금식 성인 여성 돼지에서 적절한 수준의 퇴적물을 확인한 후 사타구니에 3~5센티미터 절개를 하고 대퇴동맥을 360도 방식으로 해부한다. 숫자 11 메스를 사용하여 동맥 절제술을 만들고 원격 분석 장치의 동맥 센서를 삽입하십시오. 왼쪽 측면에 피하 파우치를 만든 후, 측면으로 원격 측정 트랜스 폰더를 터널과 3-O 폴리 프로필렌 단일 매듭 봉합사근육 근막에 트랜스 폰더를 고정.다음으로 흉부의 왼쪽과 오른쪽에 두 개의 작은 절개를 만들고 빨간색과 흰색 ECG 전극을 지정된 위치로 터널링합니다. 전극이 확보되면 원격 분석 데이터의 등록을 시작합니다. 안정적인 신호 획득시 봉합사및 스프레이 필름 드레싱으로 사타구니 절개를 닫고 적절한 크기의 돼지 재킷을 동물에 놓습니다.첫 번째 수술 후 14 일, 마취 동물의 오른쪽에 있는 경정맥에 4~5센티미터 절개를 하고, 피하 및 근육 조직을 해부하여 저글러 정맥을 노출한다. 필링 어웨이 시트 소개자 또는 셀딩거 방법을 사용하여 경마 카테터를 삽입합니다. 5-0 폴리프로필렌 봉합사로 카테터를 고정하고 두 층으로 절개를 닫습니다.외과 소독 및 멸균 드레이핑에 따라 중간 절개 절제술을 수행하여 복부를 열고 표준 복부 리트랙터를 사용하여 수술장을 노출시하십시오. 복막층을 열고 단극성 소작, 양극성 집게 및 미세 가위를 사용하여 모든 부착 된 조직에서 왼쪽 신장과 요료를 해부합니다. 그런 다음 3-0 폴리글락틴 봉합사를 사용하여 왼쪽 요관을 신장 힐룸으로 최소 10센티미터 이상 분할합니다.이식 신장을 검색하려면 혈관 클램프를 사용하여 대동맥과 정맥을 대동맥과 정맥 근처의 정맥을 닫습니다. 그리고 조개 위에 혈관을 잘라. 그런 다음 추가 준비를 위해 백 테이블 팀에 신장을 주고 신장 동맥과 정맥의 그루터기를 닫기 위해 5-0 폴리 프로필렌 봉합사를 사용합니다.검색 직후, 표준 14 게이지 주변 카테터를 사용하여 신장 동맥을 꾸미고 적어도 500 밀리리터의 얼음 차가운 장기 보존 용액으로 신장을 플러시하십시오. 플러시 후, 컴퓨터 제어 냉각 회로를 사용하여 섭씨 4도에서 24 시간의 목표 감기 허혈 시간으로 장기 보존 용액에 보관하기 위해 멸균 장기 가방에 접목을 감쌉니다. 혈관 클램핑 2~5분 전에, 정맥 내 100개의 국제 단위를 낫리움 헤파린킬로그램당 주입하고, 그 후에 입증된 바와 같이 금단성 오른쪽 신장을 제거하고 중앙분리대를 다시 엽니다.혈관 클램핑 2~5분 전에, 정맥 내 100개의 국제 단위를 낫리움 헤파린킬로그램당 주입하고, 그 후에 입증된 바와 같이 반대측 오른쪽 신장을 제거합니다. 보존된 이식성 신장을 수술 분야에 배치하고 효율성을 모니터링하기 위해 평균 동맥 혈압과 심박수를 사용하여 지속적인 주입으로 노르의 분당 0.1~ 1 마이크로그램의 투여를 시작합니다. 신장 정맥의 종단 간 해부학의 경우 5-0 폴리 프로필렌을 사용하여 두 개의 코너 스티치를 배치하고 백 월을 연속 방식으로 봉합하십시오.후면 벽을 완성한 후 두개골 모서리 스티치의 한쪽 끝을 사용하여 앞벽을 두개골 방향으로 봉합하고 Heparinized 식염수 용액의 밀리리터 당 100 개의 국제 단위로 정맥을 플러시하십시오. 신장 동맥의 종단 간 해부학의 경우 낙하산 기술을 사용하여 백 벽을 연속적인 방식으로 봉합하기 전에 6-0 폴리 프로필렌 두개골 코너 스티치를 사용하십시오. 이중 무장 6-0 폴리 프로필렌 봉합사의 다른 쪽 끝으로 전면 벽을 봉합하고 Heparinized 식염수 용액의 밀리리터 당 100 국제 단위로 동맥을 플러시합니다.해부학이 완료된 후, 코달 모서리에 있는 두 개의 실을 묶고 정맥 혈관 및 동맥 클램프를 순차적으로 열어 신장의 재침투를 허용합니다. 레퍼퓨전에 따라, 상류성 동맥의 외부 벽에 파파베린의 5 밀리리터를 국소 투여하고 정맥 관리 250 20% 포도당 용액의 단일 80 밀리그램 복용량푸로즈미드. 다음으로, 복벽과 피부를 통해 12개의 프랑스 소아 소변 카테터를 전달하고 합자를 사용하여 카테터를 요관에게 고정시하십시오.혈관 해부학의 이식 및 꼬임의 탈구를 방지하기 위해 신장 위에 회중 층을 닫습니다. 그리고 입증 된 대로 네 개의 층으로 복부를 닫습니다. 마지막으로, 색상 도플러 초음파를 사용하여 완전히 억류 된 동물을 주택 시설로 되돌리기 전에 신장 이식의 적절한 동맥 및 정맥 관류를 보장하십시오.5개의 돼지 치열 교정 신장 자동 이식 실험의 이 대표적인 세트에서, 트랜스폰더 이식 및 자동 이식 절차는 관찰 기간 동안 등록된 충분한 원격 측정 신호를 가진 각 동물에서 성공적이었다. 복부 폐쇄 에 이어, 컬러 도플러 초음파는 모든 경우에 신장의 만족스러운 동맥 및 정맥 관류를 밝혀. 혈청 칼륨과 크레아틴 값은 수술 후 3~4일에 정점을 찍었으며 그 후 점진적인 회복을 보였습니다.혈액 pH는 정상 범위 내에 남아 있고 소변 출력은 처음 4 수술 후 일 동안 정상 값으로 회복되었습니다. 이 프로토콜은 임상적으로 중요한 큰 동물 모형에 있는 장기 보존 기술 또는 전 생체 내 또는 생체 내 치료의 효력에 관하여 다양한 질문에 대답하기 위하여 이용될 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

구강 편평 세포 암종의 Orthotopic 마우스 모델에서 종양 세포 침략의 다중 광자 이미징

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

연구

의학

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

자궁의 자동 이식하여 수술 유발 Endometriosis의 마우스 모델

Endometriosis is a chronic, painful disease whose etiology remains unknown. Furthermore, treatment of endometriosis can require laparoscopic removal of ...

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활성 포르토 대정맥 션트를 사용하여 돼지 간 조달 및 동소 이식 이식의 기술

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

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