Name: functional isolation of single motor units of rat medial gastrocnemius muscle
Uploaded: 2020-12-26T13:00:00
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Questo lavoro è stato sostenuto dalla sovvenzione del Centro nazionale di ricerca polacco 2018/31/B/NZ7/01028.

Tutte le procedure devono essere approvate dal comitato etico locale e rispettate le linee guida dell'Unione europea sulla cura degli animali e la legge nazionale sulla protezione degli animali.
NOTA: Ogni sperimentatore coinvolto in questa procedura deve essere addestrato nelle procedure chirurgiche di base e deve ottenere una licenza valida per l'esecuzione di esperimenti su animali.
1. Anestesia
<ol><li>Anestetizzare il ratto con un'iniezione intraperitoneale d...

<ol>
	<li>Burke, R. E., Levine, D. N., Tsairis, P., Zajac, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+types+and+histochemical+profiles+in+motor+units+of+the+cat+gastrocnemius.">Physiological types and histochemical profiles in motor units of the cat gastrocnemius.</a> Journal of Physiology. 234, 723-748 (1973).</li><li>Celichowski, J., Drzyma&#322;a-Celichowska, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+number+of+motor+units+in+the+medial+gastrocnemius+muscle+of+male+and+female+rats.">The number of motor units in the medial gastrocnemius muscle of male and female rats.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 58, 821-828 (2007).</li><li>Grottel, K., Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Division+of+motor+units+in+medial+gastrocnemius+muscle+of+the+rat+in+light+of+variability+of+their+principal+properties.">Division of motor units in medial gastrocnemius muscle of the rat in light of variability of their principal properties.</a> Acta Neurobiologiae Experimentalis. 50, 571-588 (1990).</li><li>Celichowski, J., Krutki, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+and+plasticity+of+motor+unit+properties+in+mammalian+skeletal+muscle.">Variability and plasticity of motor unit properties in mammalian skeletal muscle.</a> Biocybernetics and Biomedical Engineering. 32 (4), 33-45 (2012).</li><li>Gardiner, P. F., Olha, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+and+electromyographic+characteristics+of+rat+plantaris+motor+unit+types+during+fatigue+in+situ.">Contractile and electromyographic characteristics of rat plantaris motor unit types during fatigue in situ.</a> Journal of Physiology. 385, 13-34 (1987).</li><li>Drzyma&#322;a-Celichowska, H., Kaczmarek, P., Krutki, P., Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summation+of+slow+motor+unit+forces+at+constant+and+variable+interpulse+intervals+in+rat+soleus+muscle.">Summation of slow motor unit forces at constant and variable interpulse intervals in rat soleus muscle.</a> Journal of Electromyography and Kinesiology. 30, 1-8 (2016).</li><li>Krutki, P., Celichowski, J., &#321;ochy&#324;ski, D., Pogrzebna, M., Mr&#243;wczy&#324;ski, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interspecies+differences+of+motor+units+properties+in+the+medial+gastrocnemius+muscle+of+cat+and+rat.">Interspecies differences of motor units properties in the medial gastrocnemius muscle of cat and rat.</a> Archives Italiennes de Biologie. 144, 11-23 (2006).</li><li>Burke, R. E., Rudomin, P., Zajac, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+activation+history+on+tension+production+by+individual+muscle+units.">The effect of activation history on tension production by individual muscle units.</a> Brain Research. 109, 515-529 (1976).</li><li>Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+underlying+the+regulation+of+motor+unit+contraction+in+the+skeletal+muscle.">Mechanisms underlying the regulation of motor unit contraction in the skeletal muscle.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 51, 17-33 (2000).</li><li>Burke, R. E., Levine, D. N., Salcman, M., Tsairis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+units+in+cat+soleus+muscle:+physiological,+histochemical+and+morphological+characteristics.">Motor units in cat soleus muscle: physiological, histochemical and morphological characteristics.</a> Journal of Physiology. 238, 503-514 (1974).</li><li>Milner-Brown, H. S., Stein, R. B., Yemm, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contractile+properties+of+human+motor+units+during+voluntary+isometric+contractions.">The contractile properties of human motor units during voluntary isometric contractions.</a> Journal of Physiology. 228, 285-306 (1973).</li><li>Taylor, A., Stephens, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+of+human+motor+unit+contractions+by+controlled+intramuscular+microstimulation.">Study of human motor unit contractions by controlled intramuscular microstimulation.</a> Brain Research. 117, 331-335 (1976).</li><li>Westling, G., Johansson, R. S., Thomas, C. K., Bigland-Ritchie, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+contractile+and+electrical+properties+of+single+human+thenar+motor+units+in+response+to+intraneural+motor-axon+stimulation.">Measurement of contractile and electrical properties of single human thenar motor units in response to intraneural motor-axon stimulation.</a> Journal of Neurophysiology. 64, 1331-1338 (1990).</li><li>Burke, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+units:+anatomy,+physiology+and+functional+organization.">Motor units: anatomy, physiology and functional organization.</a> APS Handbook of Physiology Series, Section 1, The Nervous System. 11, 345-422 (1981).</li><li>Celichowski, J., Grottel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dependence+of+the+twitch+course+of+medial+gastrocnemius+muscle+of+the+rat+and+its+motor+units+on+stretching+of+the+muscle.">The dependence of the twitch course of medial gastrocnemius muscle of the rat and its motor units on stretching of the muscle.</a> Archives Italiennes de Biologie. 130, 315-325 (1992).</li><li>Celichowski, J., Grottel, K., Bichler, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+the+profile+of+unfused+tetani+of+fast+motor+units+with+respect+to+their+resistance+to+fatigue+in+the+rat+medial+gastrocnemius+muscle.">Differences in the profile of unfused tetani of fast motor units with respect to their resistance to fatigue in the rat medial gastrocnemius muscle.</a> Journal of Muscle Research and Cell Motility. 20, 681-685 (1999).</li><li>Krutki, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Division+of+motor+units+into+fast+and+slow+on+the+basis+of+profile+of+20+Hz+unfused+tetanus.">Division of motor units into fast and slow on the basis of profile of 20 Hz unfused tetanus.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 59, 353-363 (2008).</li><li>Drzyma&#322;a-Celichowska, H., Krutki, P., Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summation+of+motor+unit+forces+in+the+rat+medial+gastrocnemius+muscle.">Summation of motor unit forces in the rat medial gastrocnemius muscle.</a> Journal of Electromyography and Kinesiology. 20, 599-607 (2010).</li><li>Kaczmarek, P., Celichowski, J., Drzyma&#322;a-Celichowska, H., Kasi&#324;ski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+image+of+motor+unit+architecture+in+the+mechanomyographic+signal+during+single+motor+unit+contraction.+In+vivo+and+simulation+study.">The image of motor unit architecture in the mechanomyographic signal during single motor unit contraction. In vivo and simulation study.</a> Journal of Electromyography and Kinesiology. 19, 553-563 (2009).</li><li>Celichowski, J., Krutki, P., Bichler, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+conduction+velocity+of+motor+units+of+rat's+medial+gastrocnemius+muscle.">Axonal conduction velocity of motor units of rat's medial gastrocnemius muscle.</a> Journal of Physiology (Paris). 90, 75-78 (1996).</li></ol>

Se eseguita correttamente da scienziati esperti, la componente chirurgica del protocollo descritto deve essere completata entro circa due ore. Si dovrebbe prestare particolare attenzione a mantenere condizioni fisiologiche stabili dell'animale durante l'intervento chirurgico, in particolare la temperatura corporea e la profondità dell'anestesia, che dovrebbero essere sistematicamente controllate valutando i riflessi pinna e di astinenza. Dopo l'intervento chirurgico, dovrebbe essere possibile mantenere condizioni di reg...

Le unità motorie (MU) sono le più piccole unità funzionali di muscoli scheletrici. Pertanto, comprendere la loro funzione, plasticità e proprietà contrattili, così come i meccanismi della loro regolazione della forza, è fondamentale per il progresso nella fisiologia muscolare. Le proprietà contrattuali di base delle MU e le proporzioni dei loro tipi fisiologici sono state documentate per numerosi muscoli, prevalentemente i muscoli posteriori negli animali da esperimento. Tuttavia, sia la plasticità delle proprietà MU che i meccanismi di regolazione della forza MU non sono ancora pienamente compresi.
Il principio del metodo descritto è un'ampia denervazione dei muscoli dell'arto posteriore ad eccezione di quello studiato e la laminectomia alle vertebre lombari al fine di preparare sottili radichette ventrali, ognuna contenente un singolo assone motore "funzionale", stimolato elettricamente a registrare la forza e il potenziale d'azione del MU. Usando la tecnica descritta in questo articolo, è possibile isolare più della metà delle MU del muscolo gastrocnomio mediale in un esperimento riuscito. Il gastrocnemio mediale del ratto è composto in media da 52 MUs (femmine) o 57 MUs (maschi) di tre tipi fisiologici: S (lento), FR (resistente veloce) e FF (veloce a favore)1,2e hanno proprietà contrattili variabili3. Per gli esperimenti che confrontano i valori medi delle MU nei gruppi di controllo e sperimentali, sono necessari l'isolamento e la registrazione di 10-30 MU per ciascuno di questi gruppi. Criticamente, le singole MU possono essere accessibili per la stimolazione per periodi di tempo superiori a un'ora. Inoltre, poiché questa tecnica consente di registrare sia la forza MU che i potenziali d'azione, questo metodo è adatto per studiare fenomeni associati alla produzione di forza, valutare l'effetto della fatica e osservare la relazione tra la forza e i potenziali d'azione.
Studi precedenti hanno confermato che le proprietà della contrattile MU sono plastiche e possono essere modulate da numerosi interventi. Esperimenti con la tecnica qui descritta sono stati eseguiti su ratto mediale gastrocnemius4 o altri muscoli posteriori delratto 5,6 cosìcome sui muscoli delgatto 7, utilizzando un metodo simile di isolamento MU singolo. Un'altra serie di esperimenti che utilizzano treni di stimoli forniti a intervalli variabili inter-impulso ha fornito osservazioni riguardanti i processi di controllo motorio, e i risultati in generale rivolgono l'attenzione alla storia della stimolazione, compresi i notevoli effetti di uno spostamento della scala di tempo di uno stesso stimolo, cruciale per la produzione diforza 8,9.
Le MU possono anche essere studiate con metodi alternativi. In primo luogo, un metodo è la stimolazione diretta dei motoneuroni. Burke ha usato la stimolazione intracellulare dei motoneuroni nel gastrocnemio mediale del gatto e nel soleo con microelettrodi di vetro utilizzati in parallelo per determinare le proprietà elettrofisiologiche di questi neuroni1,10. Altri metodi sono stati proposti per studiare le MU nei muscoli umani, che richiedono un intervento notevolmente inferiore. Per tutti questi metodi, gli elettrodi stimolanti e di registrazione vengono inseriti nel muscolo o nel nervo e la forza viene registrata dal dito o dal piede. Il primo di questi metodi è stato usato per studiare le MU nel primo muscolo interosseo dorsale. Per questo muscolo, contraendo con una bassa forza, nell'elettromiogramma registrato con l'elettrodo dell'ago inserito nel muscolo sono stati identificati i potenziali d'azione di una sola unità motoria attiva. Quindi sono stati mediati i frammenti di una forza muscolare registrati in parallelo e seguendo ogni potenziale d'azione (media innescata da spike). Questo metodo consente l'estrazione della forza di un'unità motoria dalla registrazione della forzamuscolare 11. Tuttavia, la debolezza metodologica di questa procedura è che non è stata mediata una singola forza di contrazione, ma piuttosto frammenti di contrazioni tetaniche. Le MU umane possono anche essere studiate utilizzando il secondo metodo di microstimolazione elettrica intramuscolare utilizzando un elettrodoinserito nel muscolo 12, che stimola un frammento di un albero assonale, portando all'attivazione di una singola unità motoria. Il terzo metodo è la microstimolazione con un elettrodo inserito nel nervo. Quando l'elettrodo attiva un solo assone motore nel nervo, solo un'unità motoria si contrae13. Questi ultimi metodi hanno alcune limitazioni, tra cui stabilità e qualità della registrazione, restrizioni etiche e accesso al materiale sperimentale. Questo protocollo è stato ampiamente utilizzato nei gatti negli anni '70 e '8014.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Force transducer</td>
			<td>custom-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11255-20</td>
			<td>Dumont #55 with extra light and fine shanks</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11150-10</td>
			<td>Extra Fine Greafe Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11026-15</td>
			<td>Special cupped pattern for superior grip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11023-10</td>
			<td>Slim 1x2 teeth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11251-20</td>
			<td>Dumont #5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 13003-10</td>
			<td>Hartman</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolation Unit</td>
			<td>Grass Instruments</td>
			<td>S1U5A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Noise Bioamplifer</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>Order code 74030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 12503-15</td>
			<td>With tungsten carbide jaws</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rongeurs</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 16021-14</td>
			<td>Friedman-Pearson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 14101-14</td>
			<td>Straight sharp/blunt with large finger loops</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 14075-11</td>
			<td>Curved blunt/blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 14084-08</td>
			<td>Extra fine bonn</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 15000-00</td>
			<td>Straight, ideal for cutting nerves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulator</td>
			<td>Grass Instruments</td>
			<td>S88</td>
			<td>Dual Output Square Pulse Stimulator</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

functional isolation of single motor units of rat medial gastrocnemius muscle

Questo lavoro delinea l'isolamento funzionale delle unità motorie (MU), un metodo elettrofisiologico standard per determinare le caratteristiche delle unità motorie nei muscoli posteriori (come il gastrocnemio mediale, il soleo o il muscolo plantaris) nei ratti sperimentali. Un elemento cruciale del metodo è l'applicazione di stimoli elettrici consegnati a un assone motore isolato dalla radice ventrale. Gli stimoli possono essere forniti a intervalli inter-impulso costanti o variabili. Questo metodo è adatto per esperimenti su animali in varie fasi della maturità (giovani, adulti o anziani). Inoltre, questo protocollo può essere utilizzato in esperimenti che studiano la variabilità e la plasticità delle unità motorie evocate da un ampio spettro di interventi. I risultati di questi esperimenti possono aumentare le conoscenze di base nella fisiologia muscolare ed essere tradotti in applicazioni pratiche. Questa procedura si concentra sulla preparazione chirurgica per la registrazione e la stimolazione delle MU, con particolare attenzione ai passaggi necessari per raggiungere la stabilità della preparazione e la riproducibilità dei risultati.

I parametri delle contrazioni delle unità motorie e dei potenziali d'azione possono essere calcolati sulla base di registrazioni quando sono garantite condizioni stabili di registrazioni. La figura 1 presenta una registrazione rappresentativa della singola contrazione di un MU veloce. La traccia superiore mostra il potenziale di azione dell'unità motore. Il ritardo tra l'erogazione dello stimolo e l'inizio del potenziale di azione dell'unità motore è dovuto al tempo di conduzione dalla r...

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Functional Isolation of Single Motor Units of Rat Medial Gastrocnemius Muscle

Questo metodo consente la registrazione della forza di contrazioni e contrazioni tetaniche e potenziali d'azione in tre tipi di unità motorie nel muscolo gastrocnemio mediale del ratto. L'isolamento funzionale di una singola unità motoria è indotto dalla stimolazione elettrica dell'assone.

Isolamento funzionale di unità motorie singole del muscolo gastrocnomio mediale del ratto

This work outlines functional isolation of motor units (MUs), a standard electrophysiological method for determining characteristics of motor units in ...

Questo metodo consente l'isolamento funzionale di singole unità motorie nella manipolazione di masse di animali da esperimento. Il principale vantaggio di questa tecnica è la registrazione dei potenziali di forza e azione delle singole unità motorie di tipo fisiologico identificato. A contribuire alla dimostrazione della procedura sarà il professor Jan Celichowski, capo del dipartimento di neurobiologia.Inizia tagliando la pelle lungo la colonna vertebrale, dall'osso sacro fino alle vertebre toraciche, con forbici affilate contundenti. Identificare la vertebra S1 come segmento più basso. Quindi tagliare e rimuovere i muscoli del longissimus e i processi spinosi dalle vertebre L6 a L2.Utilizzare rongeurs fini per rimuovere i processi trasversali da L6 a L2 ed eseguire una laminectomia sui segmenti da L6 a L2 per esporre i segmenti lombari del midollo spinale coperti dal dura mater. Usando forbici affilate, tagliare il midollo spinale e le radici dorsali e ventrali nel segmento delle vertebre L2, livellare al bordo superiore della laminectomia. Posizionare piccoli pezzi di schiuma di gel secco per fermare il sanguinamento.Successivamente, utilizzare forbici affilate per fare una coccola longitudinale sul lato posteriore dell'arto posteriore sinistro, dal tendine d'Achille all'anca. Individuare la fossa poplitea nella parte posteriore dell'articolazione del ginocchio, coperta dal muscolo bicipite femoris, e fare una tazza tra la parte anteriore e posteriore di questo muscolo. Spostandosi verso l'alto, tagliare le due teste del bicipite femoris fino all'anca per esporre il nervo sciatico.Usando forcep smussate e forbici, separare il laterale dalla testa mediale del muscolo gastrocnemio e tagliare l'inserimento distale del muscolo gastrocnemio mediale. Identificare il nervo gastrocnemio mediale o MG, quindi usare forcep e forbici per tagliare tutti i collaterali rimanenti del nervo sciatico, compresi i collaterali ai bicipiti posteriori e semitendinosi. Allevato una legatura non elastica attraverso il tendine d'Achille e fare tre nodi.Quindi fare un'incisione di due centimetri nella pelle e nel tessuto connettivo sottostante lungo il lato anteriore dell'arto posteriore sinistro per una mobilitazione con un clan centrale. Fissare l'arto posteriore sinistro mettendo un morsetto d'acciaio sulla tibia. Posizionare il topo in un telaio regolabile su misura.Tirare i lembi della pelle intorno alla laminectomia con quattro legature. E suturarli al telaio per formare una piscina per olio di paraffina sul midollo spinale esposto. Utilizzare una costrizione Dumont 55 per sollevare la dura madre all'intersezione del midollo spinale.Quindi tagliarlo caudally fino all'osso sacrale e ritrarlo. Separare le radici dorsali e ventrali sinistra e destra a livelli successivi con un'asta di vetro smussato. Riempire la piscina sul midollo spinale con olio di paraffina caldo, coprendo le radici ventrali e dorsali esposte.Posizionare il topo su una piastra di alluminio su misura con una piscina per i suoi arti posteriori, collegata al sistema di riscaldamento a circuito chiuso. Fissare il morsetto sull'arto posteriore sinistro con la barra metallica per immobilizzarlo. Fissare la colonna vertebrale mettendo i morsetti d'acciaio all'osso sacrale e alla vertebra L1.Quindi collegare il muscolo gastrocnemio mediale sinistro con la legatura non elastica al trasduttore di forza attraverso il tendine d'Achille. Inserire un filo d'argento bipolare o un elettrodo attraverso la parte centrale del muscolo, perpendicolare al suo lungo asse, e riempire la camera per gli arti posteriori con olio di paraffina caldo per coprire il muscolo gastrocnemio mediale. Allungare il muscolo operato a una tensione passiva di 100 millinewton, controllata dal trasduttore di forza.Quindi utilizzare forbici affilate per fare un'incisione di due centimetri nella pelle dell'arto posteriore destro e inserire un elettrodo di filo d'argento da utilizzare come elettrodo di riferimento. Posizionare e fissare una piastra metallica isolata su misura sopra le radici spinali esposte. Metti le coppie sinistra di radici ventrali e dorsali sul piatto.E aggiungere salina alla piscina formata dalla pelle intorno alla laminectomia. Posizionare un elettrodo stimolante del filo d'argento sulle radici spinali esposte, quindi posizionare un palo positivo tre millimetri sopra la piastra nell'olio e il polo negativo nella salina. Stimola le radici ventrali con impulsi rettangolari elettrici, evocando la contrazione dei muscoli.Usa un paio di forcep Dumont 55 e lenti d'ingrandimento per dividere le radici ventrali L5 o L4 in fasci molto fini di assoni. Posizionare uno di questi fasci su un elettrodo di filo d'argento e stimolarlo a osservare l'attività di una singola unità motore. Aumentando progressivamente l'intensità dello stimolo, identificare una singola unità motoria sulla base del carattere tutto o nessuno evocato della contrazione della contrazione della contrazione e dello stimolo potenziale d'azione.I parametri delle contrazioni dell'unità motore e dei potenziali d'azione possono essere calcolati utilizzando registrazioni quando sono assicurate condizioni stabili di registrazioni. Qui viene mostrata una registrazione rappresentativa della singola contrazione di un'unità motore veloce. I vassoi superiori mostrano il potenziale d'azione dell'unità motore.Il ritardo tra l'erogazione dello stimolo e l'inizio del potenziale di azione dell'unità motore è dovuto al tempo di conduzione dalla radice ventrale al muscolo. Qui viene mostrata una registrazione rappresentativa della forza del tetano nonfusa di un'unità motore veloce e di un treno di potenziali d'azione dell'unità motore insieme alle posizioni di tempo degli stimoli applicati. Prima di tentare questa procedura, tieni presente che la divisione della radice ventrale in filamenti sottili richiede un po 'di allenamento ed esperienza.

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