Name: functional isolation of single motor units of rat medial gastrocnemius muscle
Uploaded: 2020-12-26T13:00:00
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이 작품은 폴란드 국립 연구 센터 보조금 2018/31/B/NZ7/01028에 의해 지원되었습니다.

모든 절차는 지역 윤리위원회의 승인을 받아야 하며 동물 보호에 관한 유럽 연합(EU) 지침과 동물 보호에 관한 국가법률을 준수해야 합니다.
참고: 이 절차에 관여하는 각 실험자는 기본적인 외과 적 수술로 훈련을 받아야하며 동물 실험을 수행하기위한 유효한 라이센스를 받아야합니다.
1. 마취
<ol><li>나트륨 pentobarbital의 관면 주사로 쥐를 마취 (60mg·...

<ol>
	<li>Burke, R. E., Levine, D. N., Tsairis, P., Zajac, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+types+and+histochemical+profiles+in+motor+units+of+the+cat+gastrocnemius.">Physiological types and histochemical profiles in motor units of the cat gastrocnemius.</a> Journal of Physiology. 234, 723-748 (1973).</li><li>Celichowski, J., Drzyma&#322;a-Celichowska, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+number+of+motor+units+in+the+medial+gastrocnemius+muscle+of+male+and+female+rats.">The number of motor units in the medial gastrocnemius muscle of male and female rats.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 58, 821-828 (2007).</li><li>Grottel, K., Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Division+of+motor+units+in+medial+gastrocnemius+muscle+of+the+rat+in+light+of+variability+of+their+principal+properties.">Division of motor units in medial gastrocnemius muscle of the rat in light of variability of their principal properties.</a> Acta Neurobiologiae Experimentalis. 50, 571-588 (1990).</li><li>Celichowski, J., Krutki, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+and+plasticity+of+motor+unit+properties+in+mammalian+skeletal+muscle.">Variability and plasticity of motor unit properties in mammalian skeletal muscle.</a> Biocybernetics and Biomedical Engineering. 32 (4), 33-45 (2012).</li><li>Gardiner, P. F., Olha, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+and+electromyographic+characteristics+of+rat+plantaris+motor+unit+types+during+fatigue+in+situ.">Contractile and electromyographic characteristics of rat plantaris motor unit types during fatigue in situ.</a> Journal of Physiology. 385, 13-34 (1987).</li><li>Drzyma&#322;a-Celichowska, H., Kaczmarek, P., Krutki, P., Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summation+of+slow+motor+unit+forces+at+constant+and+variable+interpulse+intervals+in+rat+soleus+muscle.">Summation of slow motor unit forces at constant and variable interpulse intervals in rat soleus muscle.</a> Journal of Electromyography and Kinesiology. 30, 1-8 (2016).</li><li>Krutki, P., Celichowski, J., &#321;ochy&#324;ski, D., Pogrzebna, M., Mr&#243;wczy&#324;ski, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interspecies+differences+of+motor+units+properties+in+the+medial+gastrocnemius+muscle+of+cat+and+rat.">Interspecies differences of motor units properties in the medial gastrocnemius muscle of cat and rat.</a> Archives Italiennes de Biologie. 144, 11-23 (2006).</li><li>Burke, R. E., Rudomin, P., Zajac, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+activation+history+on+tension+production+by+individual+muscle+units.">The effect of activation history on tension production by individual muscle units.</a> Brain Research. 109, 515-529 (1976).</li><li>Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+underlying+the+regulation+of+motor+unit+contraction+in+the+skeletal+muscle.">Mechanisms underlying the regulation of motor unit contraction in the skeletal muscle.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 51, 17-33 (2000).</li><li>Burke, R. E., Levine, D. N., Salcman, M., Tsairis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+units+in+cat+soleus+muscle:+physiological,+histochemical+and+morphological+characteristics.">Motor units in cat soleus muscle: physiological, histochemical and morphological characteristics.</a> Journal of Physiology. 238, 503-514 (1974).</li><li>Milner-Brown, H. S., Stein, R. B., Yemm, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contractile+properties+of+human+motor+units+during+voluntary+isometric+contractions.">The contractile properties of human motor units during voluntary isometric contractions.</a> Journal of Physiology. 228, 285-306 (1973).</li><li>Taylor, A., Stephens, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+of+human+motor+unit+contractions+by+controlled+intramuscular+microstimulation.">Study of human motor unit contractions by controlled intramuscular microstimulation.</a> Brain Research. 117, 331-335 (1976).</li><li>Westling, G., Johansson, R. S., Thomas, C. K., Bigland-Ritchie, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+contractile+and+electrical+properties+of+single+human+thenar+motor+units+in+response+to+intraneural+motor-axon+stimulation.">Measurement of contractile and electrical properties of single human thenar motor units in response to intraneural motor-axon stimulation.</a> Journal of Neurophysiology. 64, 1331-1338 (1990).</li><li>Burke, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+units:+anatomy,+physiology+and+functional+organization.">Motor units: anatomy, physiology and functional organization.</a> APS Handbook of Physiology Series, Section 1, The Nervous System. 11, 345-422 (1981).</li><li>Celichowski, J., Grottel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dependence+of+the+twitch+course+of+medial+gastrocnemius+muscle+of+the+rat+and+its+motor+units+on+stretching+of+the+muscle.">The dependence of the twitch course of medial gastrocnemius muscle of the rat and its motor units on stretching of the muscle.</a> Archives Italiennes de Biologie. 130, 315-325 (1992).</li><li>Celichowski, J., Grottel, K., Bichler, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+the+profile+of+unfused+tetani+of+fast+motor+units+with+respect+to+their+resistance+to+fatigue+in+the+rat+medial+gastrocnemius+muscle.">Differences in the profile of unfused tetani of fast motor units with respect to their resistance to fatigue in the rat medial gastrocnemius muscle.</a> Journal of Muscle Research and Cell Motility. 20, 681-685 (1999).</li><li>Krutki, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Division+of+motor+units+into+fast+and+slow+on+the+basis+of+profile+of+20+Hz+unfused+tetanus.">Division of motor units into fast and slow on the basis of profile of 20 Hz unfused tetanus.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 59, 353-363 (2008).</li><li>Drzyma&#322;a-Celichowska, H., Krutki, P., Celichowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Summation+of+motor+unit+forces+in+the+rat+medial+gastrocnemius+muscle.">Summation of motor unit forces in the rat medial gastrocnemius muscle.</a> Journal of Electromyography and Kinesiology. 20, 599-607 (2010).</li><li>Kaczmarek, P., Celichowski, J., Drzyma&#322;a-Celichowska, H., Kasi&#324;ski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+image+of+motor+unit+architecture+in+the+mechanomyographic+signal+during+single+motor+unit+contraction.+In+vivo+and+simulation+study.">The image of motor unit architecture in the mechanomyographic signal during single motor unit contraction. In vivo and simulation study.</a> Journal of Electromyography and Kinesiology. 19, 553-563 (2009).</li><li>Celichowski, J., Krutki, P., Bichler, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+conduction+velocity+of+motor+units+of+rat's+medial+gastrocnemius+muscle.">Axonal conduction velocity of motor units of rat's medial gastrocnemius muscle.</a> Journal of Physiology (Paris). 90, 75-78 (1996).</li></ol>

숙련된 과학자들에 의해 올바르게 수행되는 경우, 설명된 프로토콜의 수술 구성 요소는 약 2시간 이내에 완료되어야 합니다. 하나는 수술 중 동물의 안정적인 생리 조건을 유지하기 위해 특별한주의를 기울여야한다, 특히 체온과 마취의 깊이, 이는 체계적으로 피나 및 철수 반사 신경을 평가하여 제어되어야한다. 수술 후, 적어도 6 시간 동안 안정적인 기록 조건을 유지할 수 있어야합니다.
<p cl...

모터 유닛(MUs)은 골격 근육의 가장 작은 기능 성 단위입니다. 따라서, 그들의 기능 이해, 가소성 및 수축 속성, 뿐만 아니라 그들의 힘 조절의 메커니즘, 근육 생리학에 진행에 대 한 중요 한. MUs의 기본 수축 속성과 생리 적 유형의 비율은 수많은 근육에 대 한 문서화 되었습니다., 주로 실험 동물에 뒷다리 근육. 그러나 MU 특성의 가소성과 MU 힘 규제 메커니즘은 여전히 완전히 이해되지 않습니다.
상기 기법의 원리는 얇은 복부 뿌리를 제조하기 위해 요추 척추에서 조사된 하나 및 라미네절을 제외한 뒷다리 근육의 광범위한 기질이며, 각각 하나의 "기능적" 모터 축축이를 함유하고, MU의 힘과 작용 잠재력을 기록하기 위해 전기적으로 자극된다. 본 논문에 기재된 기술을 이용하여, 성공적인 실험에서 내측 위트로테미즘 근육의 MUs의 절반 이상을 분리할 수 있다. 쥐 내측 위질혈은 S(느린), FR(빠른 내성) 및 FF(빠른 지방)1,2의3가지 생리적 유형의 평균 52개의 MUs(여성) 또는 57개의 무스(남성)로 구성되며, 가변 수축 특성3을갖는다. 제어 및 실험 그룹에서 M의 평균 값을 비교하는 실험의 경우 이러한 각 그룹에 대해 10-30 개의 MUs를 격리하고 기록하는 것이 필요합니다. 비판적으로, 개별 MUs는 1 시간을 초과하는 기간 동안 자극에 접근할 수 있습니다. 더욱이,이 기술은 MU 힘과 행동 잠재력을 모두 기록 할 수 있기 때문에,이 방법은 힘 생산과 관련된 현상을 연구피로의 효과를 평가하고, 힘과 행동 잠재력 사이의 관계를 관찰하는 데 적합합니다.
이전 연구는 MU 수축 특성이 플라스틱이며 수많은 개입에 의해 변조 될 수 있음을 확인했습니다. 여기에 기재된 기술을 이용한 실험은 쥐 내측 위트로뉴미에 4 또는 래트 의 다른 뒷다리 근육에 수행되어5,6뿐만 아니라 고양이 근육7에서,단일 MU 절연의 유사한 방법을 이용하여 수행되었다. 가변 간 펄스 간격으로 전달되는 자극의 열차를 이용한 또 다른 일련의 실험은 모터 제어 공정에 관한 관찰을 제공했으며, 그 결과는 일반적으로 한 자극의 시간 척도의 변화의 상당한 효과를 포함하여 자극의 역사에 주의를 돌리며, 힘 생산8,9에결정적인 영향을 미칩니다.
또한 다른 방법을 사용하여 연구될 수 있습니다. 첫째, 하나의 방법은 모토 뉴런의 직접 자극이다. 버크는 이러한 뉴런1,10의전기 생리학적 특성을 결정하기 위해 병렬로 사용되는 유리 미세 전극을 사용하여 고양이 내측 위트로뉴미와 솔레루스에서 모토뉴런의 세포내 자극을 사용했다. 다른 방법은 상당히 낮은 개입을 필요로 인간의 근육에 있는 MUs를 공부하기 위하여 제안되었습니다. 이러한 모든 방법에 대해 자극 및 기록 전극이 근육이나 신경에 삽입되고 손가락이나 발에서 힘이 기록됩니다. 이러한 방법의 첫 번째는 첫 번째 등간 중내 근육에 있는 MUs를 공부하기 위하여 이용되었습니다. 이 근육의 경우, 저력으로 수축하고, 근육에 삽입된 바늘 전극으로 기록된 전극에서 단 하나의 활성 모터 유닛의 작용 전위가 확인되었다. 그런 다음 병렬로 기록된 근육력의 파편과 각 동작 잠재력에 따라 평균화되었습니다(스파이크 트리거 평균). 이 방법은 근육력기록(11)으로부터하나의 모터 유닛의 힘을 추출할 수 있게 한다. 그러나 이 절차의 방법론적 약점은 단일 트위치 힘이 아니라 파탄 수축의 파편을 평균화했다는 것입니다. 인간 구는 또한근육(12)에삽입된 전극을 이용하여 근육 내 전기 미세 자극의 제2 방법을 사용하여 연구될 수 있으며, 이는 축산나무의 단편을 자극하여 단일 모터 유닛의 활성화로 이어진다. 세 번째 방법은 신경에 삽입된 전극을 이용한 미세 자극이다. 전극이 신경에서 하나의 모터 축축만 활성화하면 하나의 모터 유닛만13을계약합니다. 이러한 마지막 방법은 기록의 안정성과 품질, 윤리적 제한 및 실험 재료에 대한 액세스를 포함하여 몇 가지 제한이 있습니다. 이 프로토콜은 70 대와 80 의14에서 고양이에 광범위하게 사용되었습니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Force transducer</td>
			<td>custom-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11255-20</td>
			<td>Dumont #55 with extra light and fine shanks</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11150-10</td>
			<td>Extra Fine Greafe Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11026-15</td>
			<td>Special cupped pattern for superior grip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11023-10</td>
			<td>Slim 1x2 teeth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 11251-20</td>
			<td>Dumont #5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 13003-10</td>
			<td>Hartman</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolation Unit</td>
			<td>Grass Instruments</td>
			<td>S1U5A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Noise Bioamplifer</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>Order code 74030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holders</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 12503-15</td>
			<td>With tungsten carbide jaws</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rongeurs</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 16021-14</td>
			<td>Friedman-Pearson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 14101-14</td>
			<td>Straight sharp/blunt with large finger loops</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 14075-11</td>
			<td>Curved blunt/blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 14084-08</td>
			<td>Extra fine bonn</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>No. 15000-00</td>
			<td>Straight, ideal for cutting nerves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulator</td>
			<td>Grass Instruments</td>
			<td>S88</td>
			<td>Dual Output Square Pulse Stimulator</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

functional isolation of single motor units of rat medial gastrocnemius muscle

이 작품은 실험적인 쥐에서 힌다리 근육(내측 위트로네미에, 솔레우스 또는 발바닥 근육과 같은)에서 모터 유닛의 특성을 결정하는 표준 전기 생리학적 방법인 모터 유닛(MUs)의 기능적 절연을 간략하게 설명합니다. 이 방법의 중요한 요소는 복부 뿌리에서 분리된 모터 축록소에 전달된 전기 자극의 적용입니다. 자극은 일정한 또는 가변 간 펄스 간격으로 전달될 수 있다. 이 방법은 성숙의 다양한 단계에서 동물에 대한 실험에 적합합니다 (젊은, 성인 또는 노인). 더욱이, 이 프로토콜은 많은 스펙트럼의 내정간섭에 의해 연상되는 모터 단위의 가변성 그리고 가소성을 연구하는 실험에서 이용될 수 있습니다. 이러한 실험의 결과 근육 생리학에 기본 지식을 증강 하 고 실용적인 응용 프로그램으로 번역 될 수 있습니다. 이 절차는 결과의 준비 안정성 및 재현성을 달성하기 위해 필요한 단계에 중점을 두고, MUs의 기록 및 자극을위한 수술 준비에 초점을 맞추고 있습니다.

모터 유닛 수축 및 작업 잠재력의 매개 변수는 녹음의 안정적인 조건이 보장될 때 기록에 기초하여 계산될 수 있습니다. 도 1은 빠른 MU의 단일 트위치의 대표 기록을 제시한다. 위쪽 추적은 모터 유닛 작업 잠재력을 보여줍니다. 자극 전달과 모터 단위 작용 잠재력의 발병 사이의 지연은 복부 뿌리에서 근육까지의 전도 시간 때문입니다. 도 2는 빠른 MU?...

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Functional Isolation of Single Motor Units of Rat Medial Gastrocnemius Muscle

이 방법은 쥐 내측 위트로테미에미근 근육의 3가지 유형의 모터 단위로 트위치 및 파탄 수축 및 작용 잠재력을 기록할 수 있게 한다. 단일 모터 장치의 기능적 절연은 축축의 전기 자극에 의해 유도된다.

쥐 내측 위트로테미즘 근육의 단일 모터 단위의 기능적 격리

This work outlines functional isolation of motor units (MUs), a standard electrophysiological method for determining characteristics of motor units in ...

이 방법을 사용하면 실험 동물의 질량을 처리하는 단일 모터 유닛의 기능적 절연을 허용합니다. 이 기술의 주요 장점은 식별 된 생리 적 유형의 개별 모터 단위의 힘과 행동 잠재력을 기록하는 것입니다. 절차를 입증하는 데 도움이 교수 얀 셀리코스키, 신경 생물학의 부서의 머리입니다.먼저 천골에서 흉부 척추까지 날카로운 무딘 가위로 척추를 따라 피부를 절단하는 것으로 시작합니다. S1 척추를 가장 낮은 세그먼트로 식별합니다. 그런 다음 장경근 근육을 잘라 내고 제거하고 L6에서 L2 척추로 가시 공정을 제거합니다.L6에서 L2로 의 횡단 공정을 제거하고 L6에서 L2 세그먼트에 대한 라미네절제술을 수행하여 두라 메이트에 의해 덮인 척수의 요추 세그먼트를 노출하기 위해 미세 한 rongeurs를 사용합니다. 날카로운 가위를 사용하여, L2 척추 세그먼트에서 척수와 등쪽 및 복부 뿌리를 잘라, 라미네절제술의 상부 경계에서 수준. 출혈을 막기 위해 작은 마른 젤 폼을 놓습니다.다음으로, 날카로운 무딘 가위를 사용하여 아킬레스 건에서 엉덩이에 이르기까지 왼쪽 뒷다리의 후면에 세로 포옹을 합니다. 이두근 페모리스 근육으로 덮인 무릎 관절 의 뒷면에 있는 포라이트 포사를 찾아이 근육의 전방과 후방 부분 사이에 컵을 만듭니다. 위쪽으로 이동, 이두근 의 두 머리를 잘라 모든 방법을 엉덩이에 신경을 노출.무딘 집게와 가위를 사용하여, 위트론혈증 근육의 내측 머리에서 측면을 분리하고 내측 위장관 근육의 탈면 삽입을 잘라. 내측 위트로네미우스 또는 MG 신경을 식별한 다음 집게와 가위를 사용하여 후부 이두근및 세미텐디노스에 대한 담보를 포함한 좌골 신경의 모든 남은 담보를 잘라냅니다. 아킬레스 건을 통해 비탄성 합자를 사육하고 세 개의 매듭을 만듭니다.그런 다음 피부에 2센티미터 절개를 하고 중앙 일족과의 동원을 위해 왼쪽 뒷다리의 전방 측면을 따라 기본 결합 조직을 만듭니다. 경골에 강철 클램프를 넣어 왼쪽 뒷다리를 고정합니다. 쥐를 사용자 정의 조정 가능한 프레임에 놓습니다.네 개의 합자로 라미네절제술 주위에 피부 플랩을 당깁니다. 그리고 노출 된 척수 위에 파라핀 오일풀을 형성하기 위해 프레임에 봉합하십시오. 두몬트 55 개 구집체를 사용하여 척수의 교차로에서 듀라 마터를 들어 올립니다.그런 다음 성골뼈까지 소인을 자르고 철회하십시오. 무딘 유리 막대로 왼쪽과 오른쪽 등대와 복부 뿌리를 연속된 레벨로 분리합니다. 노출된 복부와 등대 뿌리를 덮고 있는 따뜻한 파라핀 오일로 척수 위에 수영장을 채웁니다.닫힌 루프 가열 시스템에 연결된 뒷다리용 수영장이 있는 맞춤형 알루미늄 플레이트에 쥐를 놓습니다. 왼쪽 뒷다리의 클램프를 금속 막대로 고정하여 고정합니다. 성골 뼈와 L1 척추에 강철 클램프를 넣어 척추 컬럼을 수정합니다.그런 다음 왼쪽 내측 위트로네미에이즘 근육을 비탄성 합자와 아킬레스 건을 통해 힘 변환기에 연결합니다. 근육의 중간 부분을 통해 양극성 실버 와이어 또는 전극을 삽입하고 긴 축에 수직으로, 내측 위로테미즘 근육을 커버하기 위해 따뜻한 파라핀 오일로 뒷다리에 대한 챔버를 채웁니다. 작동된 근육을 100 밀리뉴턴의 수동 장력으로 스트레칭하여 힘 트랜스듀서에 의해 제어됩니다.그런 다음 날카로운 무딘 가위를 사용하여 오른쪽 뒷다리의 피부에 2센티미터 절개를 하고, 은철 전극을 사용하여 기준 전극으로 사용한다. 노출 된 척추 뿌리 위에 사용자 정의 만든 절연 금속 판을 배치하고 수정합니다. 접시에 복부와 등색 뿌리의 왼쪽 쌍을 넣어.그리고 라미네절제술 주위의 피부에 의해 형성된 수영장에 식염수를 추가합니다. 노출된 척추 뿌리 위에 전극을 자극하는 은선을 놓고, 기름판 위에 3밀리미터 의 양극을 놓고, 식염수에 음극을 놓습니다. 전기 직사각형 펄스로 복부 뿌리를 자극하여 근육의 수축을 불러일으킨다.Dumont 55 집게와 돋보기 안경을 사용하여 L5 또는 L4 복부 뿌리를 매우 미세한 축축으로 분할합니다. 이 번들 중 하나를 실버 와이어 전극에 놓고 단일 모터 장치의 활동을 관찰하도록 자극합니다. 자극의 강도를 점진적으로 증가시킴으로써, 트위치 수축 및 작용 잠재적 자극의 모든 또는 없음 특성을 기준으로 단일 모터 유닛을 식별합니다.모터 유닛 수축 및 작업 잠재력의 매개 변수는 레코딩의 안정적인 조건이 보험에 가입될 때 기록을 사용하여 계산할 수 있습니다. 고속 모터 유닛의 단일 트위치의 대표 기록이 여기에 표시됩니다. 상부 트레이는 모터 유닛 작업 잠재력을 보여줍니다.자극 전달과 모터 유닛 동작 잠재력의 발병 사이의 지연은 복부 뿌리에서 근육까지의 전도 시간 때문입니다. 고속 모터 유닛의 파상풍력과 모터 유닛 액션 잠재력의 열차에 대한 대표적인 레코딩이 적용된 자극의 시간 위치와 함께 여기에 표시됩니다. 이 절차를 시도하기 전에 복부 뿌리를 얇은 필라멘트로 분할하려면 약간의 훈련과 경험이 필요합니다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Axoplasm Isolation from Rat Sciatic Nerve

쥐 좌골 신경에서 Axoplasm 격리

Isolation of pure axonal cytoplasm (axoplasm) from peripheral nerve is crucial for biochemical studies of many biological processes. In this article, we ...

연구

신경과학

Paired Patch Clamp Recordings from Motor-neuron and Target Skeletal Muscle in Zebrafish

모터 신경 세포의 이점 패치 클램프 레코딩과 Zebrafish의 대상 골격근

Larval zebrafish represent the first vertebrate model system to allow simultaneous patch clamp recording from a spinal motor-neuron and target muscle.  ...

A Functional Motor Unit in the Culture Dish: Co-culture of Spinal Cord Explants and Muscle Cells

문화 접시에있는 기능성 모터 단위 : 척수의 Explants와 근육 세포의 공동 문화

Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

Extracellularly의 근육 모터 풀에 모터 뉴런을 확인<em&gt; Aplysia californica</em

In animals with large  identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using  intracellular techniques1,2,3,4. Recently,  we developed ...

Functional and Morphological Assessment of Diaphragm Innervation by Phrenic Motor Neurons

횡격막 모터 뉴런에 의해 다이어프램 신경 분포의 기능 및 형태 학적 평가

This protocol specifically focuses on tools for assessing phrenic motor neuron (PhMN) innervation of the diaphragm at both the electrophysiological and ...

Isolation of Adult Spinal Cord Nuclei for Massively Parallel Single-nucleus RNA Sequencing

대규모 병렬 단일 핵 RNA 시퀀싱에 대 한 성인 척수 핵의 절연

Probing an individual cell&#39;s gene expression enables the identification of cell type and cell state. Single-cell RNA sequencing has emerged as a ...

Isolation of Primary Murine Skeletal Muscle Microvascular Endothelial Cells

기본 Murine 골격 근육 Microvascular 내 피 세포의 고립

The endothelial cells of skeletal muscle capillaries (muscle microvascular endothelial cells, MMEC) build up the barrier between blood stream and skeletal ...

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

Sciatic 신경 호감 상해의 쥐 모형에 있는 기능 평가를 위한 3D 운동학 분석

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...

Maximum Isometric Tetanic Force Measurement of the Tibialis Anterior Muscle in the Rat

쥐의 티비아리스 전방 근육의 최대 동면 성 파타닉 힘 측정

Traumatic nerve injuries result in substantial functional loss and segmental nerve defects often necessitate the use of autologous interposition nerve ...