Name: dosimetry for cell irradiation using orthovoltage (40-300 kv) x-ray facilities
Uploaded: 2021-02-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage 40-300 kV X-Ray Facilities at JoVE.com

1. Bestrålingsplatform og bestemmelse af bestrålingsparametre
<ol><li>Brug en bestrålingsplatform, der leverer lav til medium energi røntgenstråler. Test parametrene for eksperimentet for at sikre robustheden og reproducerbarheden af det radiobiologiske eksperiment: Højspænding, intensitet, filtrering (iboende og ekstra), halvværdilag (HVL), effektiv energi, detektor, der anvendes til dosimetrimålinger, kildeprøveafstand (SSD), bestrålingsfelt (form, størrelse, geometri), dosimetrimængde, dosimetrimetode, ...

<ol>
	<li>Zoetelief, J., Broerse, J. J., Davies, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+X-ray+dosimetry+EULEP.+Report+No.+Report+EUR+9507.">Protocol for X-ray dosimetry EULEP. Report No. Report EUR 9507.</a> Commission of the European Communities. , (1985).</li><li>Zoetelief, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+X-ray+dosimetry+in+radiobiology.">Protocol for X-ray dosimetry in radiobiology.</a> International Journal of Radiation Biology. 77 (7), 817-835 (2001).</li><li>Zoetelief, J., Jansen, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calculated+energy+response+correction+factors+for+LiF+thermoluminescent+dosemeters+employed+in+the+seventh+EULEP+dosimetry+intercomparison.">Calculated energy response correction factors for LiF thermoluminescent dosemeters employed in the seventh EULEP dosimetry intercomparison.</a> Physics in Medicine and Biology. 42 (8), 1491-1504 (1997).</li><li>Coleman, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Education+and+training+for+radiation+scientists:+radiation+research+program+and+American+Society+of+Therapeutic+Radiology+and+Oncology+Workshop,+Bethesda,+Maryland.">Education and training for radiation scientists: radiation research program and American Society of Therapeutic Radiology and Oncology Workshop, Bethesda, Maryland.</a> Radiation Research. 160 (6), 729-737 (2003).</li><li>Desrosiers, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+dosimetry+standardization+in+radiobiology.">The importance of dosimetry standardization in radiobiology.</a> Journal of Research of National Institute of Standards and Technology. 118, 403-418 (2013).</li><li>DIN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Klinische+Dosimetrie:+Teil+4.">Klinische Dosimetrie: Teil 4.</a> Anwendung von R&#246;ntgenstrahlen mit R&#246;hrenspannungen von 10 bis 100 kV in der Strahlentherapie und in der Weichteildianostik. , (1988).</li><li>DIN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Klinische+Dosimetrie:+Teil+5.">Klinische Dosimetrie: Teil 5.</a> Anwendung von R&#246;ntgenstrahlen mit R&#246;hrenspannungen von 100 bis 400 kV in der Strahlentherapie. , (1996).</li><li>NCS. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dosimetry+of+low+and+medium+energy+x-rays:+A+code+of+practice+for+use+in+radiotherapy+and+radiobiology.">Dosimetry of low and medium energy x-rays: A code of practice for use in radiotherapy and radiobiology.</a> NCS. , (1997).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorbed+Dose+Determination+in+External+Beam+Radiotherapy.">Absorbed Dose Determination in External Beam Radiotherapy.</a> International Atomic Energy Agency. , (2000).</li><li>Ma, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAPM+protocol+for+40-300+kV+x-ray+beam+dosimetry+in+radiotherapy+and+radiobiology.">AAPM protocol for 40-300 kV x-ray beam dosimetry in radiotherapy and radiobiology.</a> Medical Physics. 28 (6), 868-893 (2001).</li><li>Peixoto, J. G., Andreo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+absorbed+dose+to+water+in+reference+conditions+for+radiotherapy+kilovoltage+x-rays+between+10+and+300+kV:+a+comparison+of+the+data+in+the+IAEA,+IPEMB,+DIN+and+NCS+dosimetry+protocols.">Determination of absorbed dose to water in reference conditions for radiotherapy kilovoltage x-rays between 10 and 300 kV: a comparison of the data in the IAEA, IPEMB, DIN and NCS dosimetry protocols.</a> Physics in Medicine and Biology. 45 (3), 563-575 (2000).</li><li>Pedersen, K. H., Kunugi, K. A., Hammer, C. G., Culberson, W. S., DeWerd, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiation+biology+irradiator+dose+verification+survey.">Radiation biology irradiator dose verification survey.</a> Radiation Research. 185 (2), 163-168 (2016).</li><li>Draeger, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dose+of+reality:+how+20+years+of+incomplete+physics+and+dosimetry+reporting+in+radiobiology+studies+may+have+contributed+to+the+reproducibility+crisis.">A dose of reality: how 20 years of incomplete physics and dosimetry reporting in radiobiology studies may have contributed to the reproducibility crisis.</a> International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 106 (2), 243-252 (2020).</li><li>Devic, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precise+radiochromic+film+dosimetry+using+a+flat-bed+document+scanner.">Precise radiochromic film dosimetry using a flat-bed document scanner.</a> Medical Physics. 32 (7), 2245-2253 (2005).</li><li>Micke, A., Lewis, D. F., Yu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multichannel+film+dosimetry+with+nonuniformity+correction.">Multichannel film dosimetry with nonuniformity correction.</a> Medical Physics. 38 (5), 2523-2534 (2011).</li><li>Poludniowski, G., Landry, G., DeBlois, F., Evans, P. M., Verhaegen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SpekCalc:+a+program+to+calculate+photon+spectra+from+tungsten+anode+x-ray+tubes.">SpekCalc: a program to calculate photon spectra from tungsten anode x-ray tubes.</a> Physics in Medicine and Biology. 54 (19), 433-438 (2009).</li><li>Hubbell, J. H., Seltzer, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=X-Ray+mass+attenuation+coefficients+-+Tables+of+X-ray+mass+attenuation+coefficients+and+mass+energy-absorption+coefficients+1+keV+to+20+MeV+for+elements+Z+=+1+to+92+and+48+additional+substances+of+dosimetric+interest+(version+1.4).">X-Ray mass attenuation coefficients - Tables of X-ray mass attenuation coefficients and mass energy-absorption coefficients 1 keV to 20 MeV for elements Z = 1 to 92 and 48 additional substances of dosimetric interest (version 1.4).</a> NIST Standard Reference Database. , 126 (1995).</li><li>Wong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution,+small+animal+radiation+research+platform+with+x-ray+tomographic+guidance+capabilities.">High-resolution, small animal radiation research platform with x-ray tomographic guidance capabilities.</a> International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 71 (5), 1591-1599 (2008).</li><li>Trompier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+the+influence+of+calibration+practices+on+cytogenetic+laboratory+performance+for+dose+estimation.">Investigation of the influence of calibration practices on cytogenetic laboratory performance for dose estimation.</a> International Journal of Radiation Biology. , 1-9 (2016).</li><li>Dos Santos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+dosimetry+protocol+for+cell+irradiation+on+a+low+X-rays+facility+and+consequences+for+the+biological+response.">Importance of dosimetry protocol for cell irradiation on a low X-rays facility and consequences for the biological response.</a> International Journal of Radiation Biology. , 1-29 (2018).</li><li>Noblet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Underestimation+of+dose+delivery+in+preclinical+irradiation+due+to+scattering+conditions.">Underestimation of dose delivery in preclinical irradiation due to scattering conditions.</a> Physica Medica. 30 (1), 63-68 (2014).</li><li>Paixao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monte+Carlo+derivation+of+filtered+tungsten+anode+X-ray+spectra+for+dose+computation+in+digital+mammography.">Monte Carlo derivation of filtered tungsten anode X-ray spectra for dose computation in digital mammography.</a> Radiologia Brasileira. 48 (6), 363-367 (2015).</li></ol>

Dette arbejde præsenterer den protokol, der anvendes og gennemføres for cellebestrålinger ved hjælp af lavenergi røntgenanlæg. I dag udføres mange radiobiologiske eksperimenter med denne type bestråling, da de er nemme at bruge, omkostningseffektive og med meget få radiobeskyttelsesbegrænsninger sammenlignet med f.eks. koboltkilde. Selv om disse opsætninger har mange fordele, da de bruger en lav røntgenenergikilde, kan en ændring af kun én bestrålingsparameter påvirke dosimetrien betydeligt. Flere unders?...

Formålet med radiobiologi er at etablere forbindelser mellem den leverede dosis og de biologiske virkninger; dosimetri er et afgørende aspekt i udformningen af radiobiologiske eksperimenter. I mere end 30 år er betydningen af dosimetristandarder og harmonisering af praksis blevet fremhævet1,2,3,4,5. For at fastlægge en dosishastighedsreference findes der flere protokoller6,7,8,9,10; Som det fremgår af Peixoto og Andreo11 , kan der dog være forskelle på op til 7 % afhængigt af den dosimetriske mængde, der anvendes til bestemmelse af dosishastigheden. Selv om der findes protokoller, er det desuden nogle gange vanskeligt at vide, hvilken protokol der er bedst egnet til en bestemt anvendelse, hvis nogen, fordi dosishastigheden for cellerne afhænger af parametre som cellebeholderen, mængden af cellekulturmedier eller strålekvalitet, for eksempel. Spredning og backscattering for denne type bestråling er også en meget vigtig parameter at tage hensyn til. For røntgenstråler med lav og medium energi i AAPM TG-61-referenceprotokol10måles den absorberede dosis i vand på overfladen af et vandfantom. Under hensyntagen til de meget specifikke cellebestrålingsforhold er den lille mængde cellekulturmedier omgivet af luft tættere på kermaforholdene end dem, der er defineret for en absorberet dosis med et stort vandækvivalent fantom som i TG-61-protokollen. Derfor har vi valgt at bruge kerma i vand som en dosimetrisk mængde til reference snarere end den absorberede dosis i vand. Vi foreslår således en ny tilgang for at sikre en bedre bestemmelse af den faktiske dosis, der leveres til cellerne.
Et andet afgørende aspekt ved radiobiologiske undersøgelser er desuden den fuldstændige rapportering af de metoder og protokoller, der anvendes til bestråling, for at kunne reproducere, fortolke og sammenligne forsøgsresultater. I 2016 fremhævede Pedersen et al.12 den utilstrækkelige indberetning af dosimetri i prækliniske radiobiologiske undersøgelser. En større nylig undersøgelse fra Draeger et al.13 fremhævede, at selv om nogle dosimetriparametre såsom dosis, energi eller kildetype rapporteres, mangler en stor del af fysik- og dosimetriparametrene, der er afgørende for korrekt replikering af bestrålingsbetingelserne. Denne omfattende gennemgang af mere end 1.000 publikationer, der dækker de sidste 20 år, viser en betydelig mangel på rapportering af fysik- og dosimetriforholdene i radiobiologiske undersøgelser. En fuldstændig beskrivelse af protokollen og den metode, der anvendes i radiobiologiske undersøgelser, er således obligatorisk for at få robuste og reproducerbare eksperimenter.
Under hensyntagen til disse forskellige aspekter blev der for de radiobiologiske forsøg, der blev udført på IRSN (Institut for Strålingsbeskyttelse og Nuklear Sikkerhed), indført en streng protokol for cellebestråling i et orthovoltageanlæg. Denne dosimetriprotokol blev udformet med henblik på at simulere de reelle cellebestrålingsforhold så meget som muligt og dermed bestemme den faktiske dosis, der blev leveret til cellerne. Med henblik herpå er alle bestrålingsparametrene anført, og strålekvalitetsindekset blev evalueret ved at måle det halvværdilag (HVL), for hvilket der er foretaget nogle tilpasninger, da standardanbefalingerne fra AAPM-protokol10 ikke kan følges. Den absolutte dosishastighedsmåling blev derefter udført med ioniseringskammeret inde i cellebeholderen, der blev brugt til cellebestråling, og dæmpningen og spredningen af cellekulturmedierne blev også kvantificeret med EBT3-radiokromiske film. Da ændringen af kun én enkelt parameter i protokollen kan påvirke dosisestimeringen betydeligt, udføres der en dedikeret dosimetri for hver cellebestrålingskonfiguration. Desuden skal HVL-værdien beregnes for hver kombination af spændingsfilter. I dette arbejde anvendes en spænding på 220 kV, en intensitet på 3 mA og en iboende og en yderligere filtrering på henholdsvis 0,8 mm og 0,15 mm beryllium og kobber. Den valgte cellebestrålingskonfiguration er på en T25-kolbe, hvor cellerne blev bestrålet med 5 mL cellekulturmedier.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>31010 ionization chamber</td>
			<td>PTW</td>
			<td>ionization Radiation, Detectors including code of practice, catalog 2019/2020, page 14</td>
			<td>https://www.ptwdosimetry.com/fileadmin/user_upload/DETECTORS_Cat_en_16522900_12/blaetterkatalog/index.html?startpage=1#page_14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EBT3 radiochromic films</td>
			<td>Meditest</td>
			<td>quote request</td>
			<td>https://www.meditest.fr/produit/ebt3-8x10/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrometer UNIDOSEwebline</td>
			<td>PTW</td>
			<td>online catalog, quote request</td>
			<td>https://www.ptwdosimetry.com/en/products/unidos-webline/?type=3451&#38;downloadfile=1593&#38; cHash= 6096ddc2949f8bafe5d556e931e6c865</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HVL material (filter, diaphragm)</td>
			<td>PTW</td>
			<td>online catalog, page 70, quote request</td>
			<td>thickness foils: 0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, 5 and 10 mm of copper, https://www.ptwdosimetry.com/fileadmin/user_upload/Online_Catalog/Radiation_Medicine_Cat_en_ 58721100_11/blaetterkatalog/index.html#page_70</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scanner for radiochromic films</td>
			<td>Epson</td>
			<td>quote request</td>
			<td>Epson V700, seiko Epson corporation, Suwa, Japan</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>temperature and pressure measurements, Lufft OPUS20</td>
			<td>lufft</td>
			<td>quote request</td>
			<td>https://www.lufft.com/products/in-room-measurements-291/opus-20-thip-1983/</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dosimetry for cell irradiation using orthovoltage (40-300 kv) x-ray facilities

Betydningen af dosimetriprotokoller og standarder for radiobiologiske undersøgelser er indlysende. Der er foreslået flere protokoller for dosisbestemmelse ved hjælp af røntgenfaciliteter med lav energi, men afhængigt af bestrålingskonfigurationerne, prøverne, materialerne eller strålekvaliteten er det undertiden vanskeligt at vide, hvilken protokol der er den mest hensigtsmæssige at anvende. Vi foreslår derfor en dosimetriprotokol for cellebestrålinger, der anvender røntgenanlæg med lav energi. Formålet med denne metode er at udføre dosisestimeringen på cellemonolayerniveau for at gøre det så tæt som muligt på reelle cellebestrålingsforhold. De forskellige trin i protokollen er som følger: bestemmelse af bestrålingsparametrene (højspænding, intensitet, cellebeholder osv.), bestemmelse af strålekvalitetsindekset (højspændings-halvværdi lagpar), dosishastighedsmåling med ioniseringskammer kalibreret i luft kermaforhold, kvantificering af dæmpning og spredning af cellekulturmediet med EBT3-radiokromiske film og bestemmelse af dosishastigheden på celleniveau. Denne metode skal udføres for hver ny cellebestrålingskonfiguration, da modifikationen af kun én parameter i høj grad kan påvirke den reelle dosisaflejring på cellemonomerens niveau, navnlig ved hjælp af røntgenstråler med lav energi.

I dette arbejde brugte vi en platform dedikeret til bestråling af små dyr19; Denne platform kan dog bruges til at bestråle andre typer prøver såsom celler. Bestrålingskilden er et Varian X-ray rør (NDI-225-22) med en iboende filtrering på 0,8 mm beryllium, en stor brændvidde på 3 mm, et højspændingsområde på ca. 30 til 225 kV og en maksimal intensitet på 30 mA.
De parametre, der anvendes til denne undersøgelse, er angivet i tabel 1. Vi h...

Watch this Scientific Journal Video about Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage 40-300 kV X-Ray Facilities at JoVE.com

Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage 40-300 kV X-Ray Facilities

I dette dokument beskrives en ny dosimetriprotokol for cellebestråling ved hjælp af røntgenudstyr med lav energi. Målinger udføres under forhold, der simulerer reelle cellebestrålingsforhold så meget som muligt.

Dosimetri til cellebestråling ved hjælp af orthovoltage (40-300 kV) røntgenfaciliteter

The importance of dosimetry protocols and standards for radiobiological studies is self-evident. Several protocols have been proposed for dose ...

Denne protokol blev udviklet med henblik på at gøre det muligt at foretage dosimetrimålinger så tæt som muligt på reelle cellebestrålingsbetingelser for radiobiologiske undersøgelser. Med denne protokol kan vi bestemme den nøjagtige dosis, der modtages af celler, hvilket gør den gældende for mange røntgenfaciliteter og kan tage højde for alle parametrene og oversætte til dosimetri. Alle bestrålingsparametre skal opstilles opstrøms for at muliggøre en optimal erhvervelse af dosimetrimålingen, der kræver et tæt samarbejde mellem fysikere og radiobiolog.For at foretage en evaluering af bestrålingsfeltet skal der placeres en selvudslettende dosimetrifilm på den støtte, der anvendes til bestråling, og bestråle filmen med mindst to gråtoner for at opnå et velmærket bestrålingsfelt. Scan den selvudskuende dosimetrifilm ved hjælp af en dedikeret scanner, og brug analyse- og plotprofilen til at plotte dosisprofilen i ImageJ. Marker derefter bestrålingsstøtteoverfladen for at sikre, at cellebeholderen placeres i den korrekte position.For at udføre en dosishastighedsmåling skal du placere en modificeret cellebeholder i bestrålingsstøttekabinettet og placere ioniseringskammeret i beholderen i den korrekte position i overensstemmelse med mærkerne på støttefladen. Bekræft, at alle bestrålingsparametrene er indstillet korrekt, og præ-bestrålingskammeret i fem minutter. Nul nul elektrometeret og opnå 10 et-minuts målinger.Brug derefter formlen til at bestemme den gennemsnitlige dosishastighed i luft kerma. Nummerer alle filmene til deres downstream-identifikation. Mindst 24 timer før bestrålingen skæres stykker selvudsnærrende dosimetrifilm i henhold til cellebeholderens størrelse.For at konstruere en kalibreringskurve skal du afsætte tre stykker film til de ikke-bestrålede kontroller og placere den første film inde i cellebeholderen. Derefter bestråles filmen for at opnå det første dosispunkt. Når alle filmene er blevet bestrålet i tre eksemplarer ved de relevante udvalgte doser, kan der genereres en kalibreringskurve.For at måle cellekulturens middeldæmpning og spredning skal du vælge den samme bestrålingstid for alle bestrålinger og bestråle tre stykker selvudviklings-dosimetrifilm i beholderen uden vand. Placer derefter et enkelt stykke film i beholderen og fyld beholderen med den samme mængde vand som mængden af medium, der vil blive bestrålet. Placer beholderen i kabinettet ved hjælp af små stykker tape efter behov.Når bestrålingen er færdig, skal du tørre filmene med absorberende papir og opbevare filmene beskyttet mod lys. 24 timer efter deres bestråling, på scanneren, indstille TIFF-format til 48-bit rød grøn blå og transmissionstilstand til 150 prikker per tomme og vælg ingen billedkorrektion. Hvis du vil varme scanneren op, skal du placere en ikke-bestrålet film på scanneren og starte et eksempel på scanningen.I slutningen af eksemplet skal du starte en timer og vente 30 sekunder, før du starter scanningen. I slutningen af scanningen skal du starte en 90-sekunders timer. Samtidig skal du registrere scanningen og åbne billedet i ImageJ.Spor et kvadratisk område af interesse inden for scanningen, og mål områdets gennemsnitlige røde pixelniveau. I slutningen af de 90 sekunder skal du gentage scanningseksemplet mindst 30 gange for at varme op og stabilisere scanneren. Når scanneren er stabiliseret, skal du placere en film i midten af scannersengen og starte et eksempel på scanningen.Vent 30 sekunder, før scanningen startes. Vent 90 sekunder, før du starter den næste scanning, når scanningen er afsluttet. Målinger til estimering af dæmpatortykkelsen blev derefter udført, og de forskellige attenuatortykkelser blev testet for at finde den tykkelse, der reducerede stråleintensiteten med en faktor på to.Da denne tykkelse blev bestemt, blev der foretaget fem målinger for at evaluere den gennemsnitlige mRAW-værdi korrigeret med temperatur- og trykkorrektionsfaktoren. Til denne konfiguration blev der fundet et halvværdilag på 0,667 millimeter kobber. I denne repræsentative analyse blev der bestrålet en selvudfoldende dosimetrifilm for at bestemme overfladen, hvor bestrålingsfeltet er homogent, hvilket gjorde det muligt at placere cellebeholderen korrekt.For at bestemme den nøjagtige dosis for cellerne blev den målte luft kermadosishastighed konverteret til vand karma ved hjælp af forholdet mellem den gennemsnitlige masseenergiabsorptionskoefficient for vand til luft evalueret over fotoninfluensspektret, som til denne analyse blev bestemt til at være 0,659 grå i minuttet. I denne cellekultur medium attenuation og spredning analyse, selvudvikling dosimetri radiokromiske film blev først kalibreret mellem nul og tre grå med 0,25 grå trin mellem nul og en grå og 0,5 grå trin mellem en og tre grå. Dosispunkterne blev derefter udstyret med en fjerdegrads polynomisk kurve.Her kan en repræsentativ tabel, der bruges til den daglige måling, observeres. Sørg for, at alle konfigurationsparametrene overholdes, at gør-hastigheden måles inde i den rigtige cellebeholder, og at indflydelsen af cellekulturmediet evalueres. Der findes flere protokoller til fastsættelse af en dosisreferencemåling.Det centrale punkt er at vælge den relevante protokol for en bestemt applikation, især når du bruger lave røntgenfaciliteter.

Research

JoVE Journal

Biology

Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage (40-300 kV) X-Ray Facilities

Non-invasive 3D-Visualization with Sub-micron Resolution Using Synchrotron-X-ray-tomography

Little is known about the internal organization of many micro-arthropods with body sizes below 1 mm. The reasons for that are the small size and the hard ...

Protein Crystallization for X-ray Crystallography

Using the three-dimensional structure of biological macromolecules to infer how they function is one of the most important fields of modern biology. The ...

Planarian Immobilization, Partial Irradiation, and Tissue Transplantation

Planarian Immobilisering, Delvis bestråling og vævstransplantation

The planarian, a freshwater flatworm, has proven to be a powerful system for dissecting metazoan regeneration and stem cell biology1,2. Planarian ...

Cell Tracking Using Photoconvertible Proteins During Zebrafish Development

Cellesporing hjælp Photoconvertible proteiner under zebrafisk Development

Embryogenesis is a dynamic process that is best studied by using techniques that allow the documentation of developmental changes in vivo. The use of ...

Isolation and Kv Channel Recordings in Murine Atrial and Ventricular Cardiomyocytes

Isolering og Kv-optagelser i murine atrielle og ventrikulære cardiomyocytter

KCNE genes encode for a small family of Kv channel ancillary subunits that form heteromeric complexes with Kv channel alpha subunits to modify their ...

3D Printing of Preclinical X-ray Computed Tomographic Data Sets

3D Printing af præklinisk X-ray Computed tomografisk Datasæt

Three-dimensional printing allows for the production of highly detailed objects through a process known as additive manufacturing.  Traditional, ...

Reconstitution of a Kv Channel into Lipid Membranes for Structural and Functional Studies

Rekonstituering af et Kv Channel i lipidmembraner for strukturelle og funktionelle studier

To study the lipid-protein interaction in a reductionistic fashion, it is necessary to incorporate the membrane proteins into membranes of well-defined ...

Production of Human Norovirus Protruding Domains in E. coli for X-ray Crystallography

Production of Human Norovirus Protruding Domains in E. coli for X-ray Crystallography

Produktion af Menneskelige Norovirus fremspringende domæner i<em&gt; E. coli</em&gt; Til røntgenkrystallografi

The norovirus capsid is composed of a single major structural protein, termed VP1. VP1 is subdivided into a shell (S) domain and a protruding (P) domain. ...

Studying the Protein Quality Control System of D. discoideum Using Temperature-controlled Live Cell Imaging

Studying the Protein Quality Control System of D. discoideum Using Temperature-controlled Live Cell Imaging

Undersøgelse af Protein Kvalitetskontrol System af<em&gt; D. discoideum</em&gt; Brug Temperatur-kontrollerede Live-Cell Imaging

The complex lifestyle of the social amoebae Dictyostelium discoideum makes it a valuable model for the study of various biological processes. Recently, we ...

A Rapid Automated Protocol for Muscle Fiber Population Analysis in Rat Muscle Cross Sections Using Myosin Heavy Chain Immunohistochemistry

En hurtig Automatiseret Protokol for muskelfiber Population Analysis i rottemuskel tværsnit Brug af myosin Heavy Chain Immunhistokemi

Quantification of muscle fiber populations provides a deeper insight into the effects of disease, trauma, and various other influences on skeletal muscle ...