Name: dosimetry for cell irradiation using orthovoltage (40-300 kv) x-ray facilities
Uploaded: 2021-02-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage 40-300 kV X-Ray Facilities at JoVE.com

1. Işınlama platformu ve ışınlama parametrelerinin belirlenmesi
<ol><li>Düşük ila orta enerjili X ışınları sağlayan bir ışınlama platformu kullanın. Radyobiyolojik deneyin sağlamlığını ve tekrarlanabilirliğini sağlamak için deneyin parametrelerini belirleyin: Yüksek gerilim, Yoğunluk, Filtrasyon (doğal ve ek), Yarı Değer Katmanı (HVL), Etkili enerji, Dozimetri ölçümleri için kullanılan dedektör, Kaynak Örnek Mesafesi (SSD), Işınlama alanı (şekil, boyut, geometri), Dozimetri mik...

<ol>
	<li>Zoetelief, J., Broerse, J. J., Davies, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+X-ray+dosimetry+EULEP.+Report+No.+Report+EUR+9507.">Protocol for X-ray dosimetry EULEP. Report No. Report EUR 9507.</a> Commission of the European Communities. , (1985).</li><li>Zoetelief, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+X-ray+dosimetry+in+radiobiology.">Protocol for X-ray dosimetry in radiobiology.</a> International Journal of Radiation Biology. 77 (7), 817-835 (2001).</li><li>Zoetelief, J., Jansen, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calculated+energy+response+correction+factors+for+LiF+thermoluminescent+dosemeters+employed+in+the+seventh+EULEP+dosimetry+intercomparison.">Calculated energy response correction factors for LiF thermoluminescent dosemeters employed in the seventh EULEP dosimetry intercomparison.</a> Physics in Medicine and Biology. 42 (8), 1491-1504 (1997).</li><li>Coleman, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Education+and+training+for+radiation+scientists:+radiation+research+program+and+American+Society+of+Therapeutic+Radiology+and+Oncology+Workshop,+Bethesda,+Maryland.">Education and training for radiation scientists: radiation research program and American Society of Therapeutic Radiology and Oncology Workshop, Bethesda, Maryland.</a> Radiation Research. 160 (6), 729-737 (2003).</li><li>Desrosiers, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+dosimetry+standardization+in+radiobiology.">The importance of dosimetry standardization in radiobiology.</a> Journal of Research of National Institute of Standards and Technology. 118, 403-418 (2013).</li><li>DIN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Klinische+Dosimetrie:+Teil+4.">Klinische Dosimetrie: Teil 4.</a> Anwendung von R&#246;ntgenstrahlen mit R&#246;hrenspannungen von 10 bis 100 kV in der Strahlentherapie und in der Weichteildianostik. , (1988).</li><li>DIN. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Klinische+Dosimetrie:+Teil+5.">Klinische Dosimetrie: Teil 5.</a> Anwendung von R&#246;ntgenstrahlen mit R&#246;hrenspannungen von 100 bis 400 kV in der Strahlentherapie. , (1996).</li><li>NCS. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dosimetry+of+low+and+medium+energy+x-rays:+A+code+of+practice+for+use+in+radiotherapy+and+radiobiology.">Dosimetry of low and medium energy x-rays: A code of practice for use in radiotherapy and radiobiology.</a> NCS. , (1997).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorbed+Dose+Determination+in+External+Beam+Radiotherapy.">Absorbed Dose Determination in External Beam Radiotherapy.</a> International Atomic Energy Agency. , (2000).</li><li>Ma, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAPM+protocol+for+40-300+kV+x-ray+beam+dosimetry+in+radiotherapy+and+radiobiology.">AAPM protocol for 40-300 kV x-ray beam dosimetry in radiotherapy and radiobiology.</a> Medical Physics. 28 (6), 868-893 (2001).</li><li>Peixoto, J. G., Andreo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+absorbed+dose+to+water+in+reference+conditions+for+radiotherapy+kilovoltage+x-rays+between+10+and+300+kV:+a+comparison+of+the+data+in+the+IAEA,+IPEMB,+DIN+and+NCS+dosimetry+protocols.">Determination of absorbed dose to water in reference conditions for radiotherapy kilovoltage x-rays between 10 and 300 kV: a comparison of the data in the IAEA, IPEMB, DIN and NCS dosimetry protocols.</a> Physics in Medicine and Biology. 45 (3), 563-575 (2000).</li><li>Pedersen, K. H., Kunugi, K. A., Hammer, C. G., Culberson, W. S., DeWerd, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiation+biology+irradiator+dose+verification+survey.">Radiation biology irradiator dose verification survey.</a> Radiation Research. 185 (2), 163-168 (2016).</li><li>Draeger, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dose+of+reality:+how+20+years+of+incomplete+physics+and+dosimetry+reporting+in+radiobiology+studies+may+have+contributed+to+the+reproducibility+crisis.">A dose of reality: how 20 years of incomplete physics and dosimetry reporting in radiobiology studies may have contributed to the reproducibility crisis.</a> International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 106 (2), 243-252 (2020).</li><li>Devic, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precise+radiochromic+film+dosimetry+using+a+flat-bed+document+scanner.">Precise radiochromic film dosimetry using a flat-bed document scanner.</a> Medical Physics. 32 (7), 2245-2253 (2005).</li><li>Micke, A., Lewis, D. F., Yu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multichannel+film+dosimetry+with+nonuniformity+correction.">Multichannel film dosimetry with nonuniformity correction.</a> Medical Physics. 38 (5), 2523-2534 (2011).</li><li>Poludniowski, G., Landry, G., DeBlois, F., Evans, P. M., Verhaegen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SpekCalc:+a+program+to+calculate+photon+spectra+from+tungsten+anode+x-ray+tubes.">SpekCalc: a program to calculate photon spectra from tungsten anode x-ray tubes.</a> Physics in Medicine and Biology. 54 (19), 433-438 (2009).</li><li>Hubbell, J. H., Seltzer, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=X-Ray+mass+attenuation+coefficients+-+Tables+of+X-ray+mass+attenuation+coefficients+and+mass+energy-absorption+coefficients+1+keV+to+20+MeV+for+elements+Z+=+1+to+92+and+48+additional+substances+of+dosimetric+interest+(version+1.4).">X-Ray mass attenuation coefficients - Tables of X-ray mass attenuation coefficients and mass energy-absorption coefficients 1 keV to 20 MeV for elements Z = 1 to 92 and 48 additional substances of dosimetric interest (version 1.4).</a> NIST Standard Reference Database. , 126 (1995).</li><li>Wong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution,+small+animal+radiation+research+platform+with+x-ray+tomographic+guidance+capabilities.">High-resolution, small animal radiation research platform with x-ray tomographic guidance capabilities.</a> International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 71 (5), 1591-1599 (2008).</li><li>Trompier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+the+influence+of+calibration+practices+on+cytogenetic+laboratory+performance+for+dose+estimation.">Investigation of the influence of calibration practices on cytogenetic laboratory performance for dose estimation.</a> International Journal of Radiation Biology. , 1-9 (2016).</li><li>Dos Santos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+dosimetry+protocol+for+cell+irradiation+on+a+low+X-rays+facility+and+consequences+for+the+biological+response.">Importance of dosimetry protocol for cell irradiation on a low X-rays facility and consequences for the biological response.</a> International Journal of Radiation Biology. , 1-29 (2018).</li><li>Noblet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Underestimation+of+dose+delivery+in+preclinical+irradiation+due+to+scattering+conditions.">Underestimation of dose delivery in preclinical irradiation due to scattering conditions.</a> Physica Medica. 30 (1), 63-68 (2014).</li><li>Paixao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monte+Carlo+derivation+of+filtered+tungsten+anode+X-ray+spectra+for+dose+computation+in+digital+mammography.">Monte Carlo derivation of filtered tungsten anode X-ray spectra for dose computation in digital mammography.</a> Radiologia Brasileira. 48 (6), 363-367 (2015).</li></ol>

Bu çalışma, düşük enerjili X-ray tesisi kullanılarak hücre ışınlamaları için kullanılan ve uygulanan protokolü sunar. Günümüzde, kullanımı kolay, uygun maliyetli ve çok az radyoproteksyon kısıtlaması ile, örneğin kobalt kaynağına kıyasla, bu tür ışınlayıcı ile birçok radyobiyoloji deneyi yapılmaktadır. Bu kurulumların birçok avantajı olmasına rağmen, düşük bir X-ışını enerji kaynağı kullandıklarından, yalnızca bir ışınlama parametresinin değiştirilmesi dozimetri...

Radyobiyolojinin amacı, teslim edilen doz ile biyolojik etkiler arasında bağlantılar kurmaktır; dozimetri radyobiyolojik deneylerin tasarımında çok önemli bir husustur. 30 yılı aşkın bir süredir, dozimetri standartlarının önemi ve uygulamaların uyumuvurgulanmıştır 1,2,3,4,5. Bir doz oranı referansı oluşturmak için, çeşitli protokollervardır 6,7,8,9,10; bununla birlikte, Peixoto ve Andreo11 tarafından gösterildiği gibi, doz oranı tayini için kullanılan dozimetrik miktara bağlı olarak% 7'ye kadar farklılıklar olabilir. Ayrıca, protokoller olsa bile, varsa belirli bir uygulama için hangi protokolün en uygun olduğunu bilmek bazen zordur, çünkü hücreler için doz oranı hücre kabı, hücre kültürü ortamı miktarı veya ışın kalitesi gibi parametrelere bağlıdır. Bu tür ışınlama için saçılma ve geri saçılma da dikkate alınması gereken çok önemli bir parametredir. Gerçekten de, düşük ve orta enerjili X ışınları için, AAPM TG-61 referans protokolü10'da, sudaki emilen doz bir su hayaletinin yüzeyinde ölçülür. Çok spesifik hücre ışınlama koşulları dikkate alınarak, hava ile çevrili küçük hücre kültürü ortamı hacmi, TG-61 protokolünde olduğu gibi büyük bir suya eşdeğer hayalet ile emilen bir doz için tanımlananlardan kerma koşullarına daha yakındır. Bu nedenle, sudaki kermayı, sudaki emilen doz yerine referans için dozimetrik bir miktar olarak kullanmayı seçtik. Bu nedenle, hücrelere teslim edilen gerçek dozun daha iyi belirlenmesini sağlamak için yeni bir yaklaşım öneriyoruz.
Ayrıca, radyobiyolojik çalışmalar için bir diğer önemli husus, deneysel sonuçları yeniden üretebilmek, yorumlayabilmek ve karşılaştırabilmek için ışınlama için kullanılan yöntem ve protokollerin eksiksiz raporlanmasıdır. 2016 yılında Pedersen ve ark.12, klinik öncesi radyobiyolojik çalışmalarda dozimetrinin yetersiz rapor edildiğini vurgulamıştır. Draeger ve ark.13'ten daha büyük bir yeni çalışma, doz, enerji veya kaynak türü gibi bazı dozimetri parametreleri bildirilse de, ışınlama koşullarını düzgün bir şekilde çoğaltmak için gerekli olan fizik ve dozimetri parametrelerinin büyük bir kısmının eksik olduğunu vurguladı. Son 20 yılı kapsayan 1.000'den fazla yayının bu büyük ölçekli incelemesi, radyobiyolojik çalışmalarda fizik ve dozimetri koşullarının raporlarında önemli bir eksikliği göstermektedir. Bu nedenle, sağlam ve tekrarlanabilir deneylere sahip olmak için protokolün ve radyobiyolojik çalışmalarda kullanılan yöntemin tam bir açıklaması zorunludur.
Bu farklı hususlar dikkate alınarak, IRSN'de (Radyasyondan Korunma ve Nükleer Güvenlik Enstitüsü) gerçekleştirilen radyobiyolojik deneyler için, bir ortovoltage tesisinde hücre ışınlamaları için sıkı bir protokol uygulanmıştır. Bu dozimetri protokolü, gerçek hücre ışınlama koşullarını mümkün olduğunca simüle etmek ve böylece hücrelere teslim edilen gerçek dozu belirlemek için tasarlanmıştır. Bu amaçla, tüm ışınlama parametreleri listelenir ve ışın kalitesi indeksi, AAPM protokolü10'dan standart önerilere uyulmadığı için bazı uyarlamaların yapıldığı yarı değer katmanı (HVL) ölçülerek değerlendirilmiştir. Mutlak doz oranı ölçümü daha sonra hücre ışınlamaları için kullanılan hücre kabının içindeki iyonlaşma odası ile yapıldı ve hücre kültürü ortamlarının zayıflaması ve saçılması da EBT3 radyokromik filmlerle ölçüldü. Protokolün yalnızca bir tek parametresinin değiştirilmesi doz tahminini önemli ölçüde etkileyebileceğinden, her hücre ışınlama yapılandırması için özel bir dozimetri gerçekleştirilir. Ayrıca, her voltaj filtresi kombinasyonu için HVL değeri hesaplanmalıdır. Bu mevcut çalışmada, 220 kV'luk bir voltaj, 3 mA'lık bir yoğunluk ve sırasıyla 0,8 mm ve 0,15 mm'lik bir beryllium ve bakırın doğal ve ek filtrasyonu kullanılmaktadır. Seçilen hücre ışınlama yapılandırması, hücrelerin 5 mL hücre kültürü ortamı ile ışınlandığı bir T25 şişesindedir.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>31010 ionization chamber</td>
			<td>PTW</td>
			<td>ionization Radiation, Detectors including code of practice, catalog 2019/2020, page 14</td>
			<td>https://www.ptwdosimetry.com/fileadmin/user_upload/DETECTORS_Cat_en_16522900_12/blaetterkatalog/index.html?startpage=1#page_14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EBT3 radiochromic films</td>
			<td>Meditest</td>
			<td>quote request</td>
			<td>https://www.meditest.fr/produit/ebt3-8x10/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrometer UNIDOSEwebline</td>
			<td>PTW</td>
			<td>online catalog, quote request</td>
			<td>https://www.ptwdosimetry.com/en/products/unidos-webline/?type=3451&#38;downloadfile=1593&#38; cHash= 6096ddc2949f8bafe5d556e931e6c865</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HVL material (filter, diaphragm)</td>
			<td>PTW</td>
			<td>online catalog, page 70, quote request</td>
			<td>thickness foils: 0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, 5 and 10 mm of copper, https://www.ptwdosimetry.com/fileadmin/user_upload/Online_Catalog/Radiation_Medicine_Cat_en_ 58721100_11/blaetterkatalog/index.html#page_70</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scanner for radiochromic films</td>
			<td>Epson</td>
			<td>quote request</td>
			<td>Epson V700, seiko Epson corporation, Suwa, Japan</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>temperature and pressure measurements, Lufft OPUS20</td>
			<td>lufft</td>
			<td>quote request</td>
			<td>https://www.lufft.com/products/in-room-measurements-291/opus-20-thip-1983/</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dosimetry for cell irradiation using orthovoltage (40-300 kv) x-ray facilities

Radyobiyolojik çalışmalar için dozimetri protokollerinin ve standartlarının önemi kendini göstermektedir. Düşük enerjili X-ray tesisleri kullanılarak doz tespiti için çeşitli protokoller önerilmiştir, ancak ışınlama konfigürasyonlarına, numunelere, malzemelere veya ışın kalitesine bağlı olarak, hangi protokolün kullanılmasının en uygun olduğunu bilmek bazen zordur. Bu nedenle, düşük enerjili X-ışını tesisi kullanarak hücre ışınlamaları için bir dozimetri protokolü öneriyoruz. Bu yöntemin amacı, doz tahminini hücre monolayer düzeyinde gerçekleştirerek gerçek hücre ışınlama koşullarına mümkün olduğunca yakın hale getirmektir. Protokolün farklı adımları şu şekildedir: işınlama parametrelerinin belirlenmesi (yüksek gerilim, yoğunluk, hücre kabı vb.), ışın kalitesi indeksinin belirlenmesi (yüksek voltaj-yarı değer katmanı çifti), hava kerma koşullarında kalibre edilmiş iyonlaşma odası ile doz oranı ölçümü, hücre kültürü ortamının EBT3 radyokromik filmlerle zayıflama ve saçılmalarının ölçülmesi ve hücresel düzeyde doz oranının belirlenmesi. Bu metodoloji, her yeni hücre ışınlama yapılandırması için yapılmalıdır, çünkü sadece bir parametrenin değiştirilmesi, özellikle düşük enerjili X ışınlarını içeren hücre monolayer düzeyinde gerçek doz birikimini güçlü bir şekilde etkileyebilir.

Bu çalışmada, küçük hayvan ışınlama19'aadanmış bir platform kullandık; ancak, bu platform hücreler gibi diğer örnek türlerini ışınlamak için kullanılabilir. Işınlama kaynağı, 0,8 mm'lik bir filtrasyona, 3 mm'lik büyük bir odak sporu boyutuna, yaklaşık 30 ila 225 kV'lık yüksek voltaj aralığına ve 30 mA'lık maksimum yoğunluğa sahip bir Varian X-ışını tüpüdür (NDI-225-22).
Bu çalışma için kullanılan parametreler Tabl...

Watch this Scientific Journal Video about Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage 40-300 kV X-Ray Facilities at JoVE.com

Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage 40-300 kV X-Ray Facilities

Bu belgede, düşük enerjili X-ışını ekipmanı kullanılarak hücre ışınlamaları için yeni bir dozimetri protokolü açıklanmaktadır. Ölçümler, gerçek hücre ışınlama koşullarını mümkün olduğunca simüle eden koşullarda gerçekleştirilir.

Ortovoltage (40-300 kV) X-Ray İmkanları Kullanılarak Hücre Işıtması için Dozimetri

The importance of dosimetry protocols and standards for radiobiological studies is self-evident. Several protocols have been proposed for dose ...

Bu protokol, radyobiyolojik çalışmalar için dozimetri ölçümlerinin gerçek hücre ışınlama koşullarına mümkün olduğunca yakın yapılmasına olanak sağlamak için geliştirilmiştir. Bu protokol ile, hücrelerin aldığı tam dozu belirleyebilir ve birçok x-ışını tesisine uygulanabilir hale getirebilir ve tüm parametreleri dikkate alabilir ve dozimetriye çevirebiliriz. Tüm ışınlama parametreleri, fizikçiler ve radyobiyologlar arasında yakın bir işbirliği gerektiren dozimetri ölçümünün optimal bir şekilde elde edilmesine izin vermek için yukarı akışta ayarlanmalıdır.Işınlama alanı değerlendirmesi yapmak için, ışınlama için kullanılan desteğe kendi kendini geliştiren bir dozimetri filmi yerleştirin ve iyi işaretlenmiş bir ışınlama alanı elde etmek için filmi en az iki gri ile ışınlayın. Özel bir tarayıcı kullanarak kendi kendini geliştiren dozimetri filmini tarayın ve ImageJ'deki doz profilini çizmek için profili analiz edin ve çizin. Ardından, hücre kabının doğru konuma yerleştirileceğine emin olmak için ışınlama destek yüzeyini işaretleyin.Doz oranı ölçümü yapmak için, modifiye edilmiş bir hücre kabını ışınlama destek muhafazasına yerleştirin ve iyonlaşma odasını destek yüzeyinde yapılan işaretlere göre doğru konumda kabın içine yerleştirin. Tüm ışınlama parametrelerinin uygun şekilde ayarlandığını onaylayın ve iyonlaşma odasını beş dakika boyunca önceden ışınlayın. Elektrometreyi sıfırla ve 10 tane bir dakikalık ölçüm elde edin.Ardından, hava kermasındaki ortalama doz oranını belirlemek için formülü kullanın. Tüm filmleri aşağı akış tanımlamaları için numaralayın. Işınlamadan en az 24 saat önce, hücre kabının büyüklüğüne göre kendi kendini geliştiren dozimetri filmi parçalarını kesin.Bir kalibrasyon eğrisi oluşturmak için, ışınlanmamış kontroller için üç parça film ayırın ve ilk filmi hücre kabının içine yerleştirin. Daha sonra, ilk doz noktasını elde etmek için filmi ışınla. Tüm filmler uygun seçilen dozlarda üç taraflı olarak ışınlandığında, bir kalibrasyon eğrisi oluşturulabilir.Hücre kültürü ortamının zayıflamasını ve saçılmasını ölçmek için, tüm ışınlamalar için aynı ışınlama süresini seçin ve su olmadan kapta kendi kendini geliştiren üç parça dozimetri filmini ışınlayın. Ardından, kabın içine tek bir film parçası yerleştirin ve kabı ışınlanacak ortamın hacmiyle aynı miktarda su ile doldurun. Gerektiğinde küçük bant parçaları kullanarak, kabı muhafazanın içine yerleştirin.Işınlama tamamlandığında, filmleri emici kağıtla kurulayın ve filmleri ışıktan korumalı olarak saklayın. Işınlamalarından 24 saat sonra, tarayıcıda TIFF formatını 48 bit kırmızı yeşil maviye ve iletim modunu inç başına 150 noktaya ayarlayın ve görüntü düzeltmesi yok'u seçin. Tarayıcıyı ısıtmak için tarayıcıya ışınlanmamış bir film yerleştirin ve taramanın önizlemesini başlatın.Önizlemenin sonunda, bir zamanlayıcı başlatın ve taramayı başlatmadan önce 30 saniye bekleyin. Taramanın sonunda 90 saniyelik bir zamanlayıcı başlatın. Aynı zamanda, taramayı kaydedin ve görüntüyü ImageJ'de açın.Taramada ilgi çekici kare bir bölgeyi takip edin ve alanın ortalama kırmızı piksel düzeyini ölçün. 90 saniyenin sonunda, tarayıcıyı ısıtmak ve stabilize etmek için tarama önizlemesini en az 30 kez tekrarlayın. Tarayıcı sabitlendikten sonra, tarayıcı yatağının ortasına bir film yerleştirin ve taramanın önizlemesini başlatın.Taramaya başlamadan önce 30 saniye bekleyin. Taramanın sonunda, bir sonraki taramayı başlatmadan önce 90 saniye bekleyin. Daha sonra zayıflayıcı kalınlığını tahmin etmek için ölçümler yapıldı ve ışın yoğunluğunu iki kat azaltan kalınlığı bulmak için farklı zayıflayıcı kalınlıkları test edildi.Bu kalınlık belirlendiğinde sıcaklık ve basınç düzeltme faktörü ile düzeltilen ortalama mRAW değerini değerlendirmek için beş ölçüm yapıldı. Bu konfigürasyon için 0.667 milimetre bakırdan oluşan yarı değerli bir tabaka bulundu. Bu temsili analizde, ışınlama alanının homojen olduğu yüzeyi belirlemek için hücre kabının doğru yerleştirilmesini sağlayan kendi kendini geliştiren bir dozimetri filmi ışınlandı.Hücreler için tam dozu belirlemek için, ölçülen hava kerma doz oranı, bu analiz için dakikada 0.659 gri olduğu belirlenen foton fluans spektrumu üzerinden değerlendirilen su için ortalama kütle enerjisi emme katsayısının havaya oranı kullanılarak su karmasına dönüştürüldü. Bu hücre kültürü orta zayıflama ve saçılma analizinde, kendi kendini geliştiren dozimetri radyokromik filmler ilk olarak sıfır ile üç gri arasında sıfır ile üç gri arasında 0,25 gri adım ve bir ile üç gri arasında 0,5 gri basamak ile kalibre edilmiştir. Doz noktaları daha sonra dördüncü derece polinom eğrisi ile donatılmıştır.Burada günlük ölçüm için kullanılan temsili bir tablo gözlemlenebilir. Yapılandırma parametrelerinin tümüne uyulsun, yapma oranının sağ hücre kapsayıcısı içinde ölçüldüğünden ve hücre kültürü ortamının etkisinin değerlendirildiğinden emin olun. Doz referans ölçümü oluşturmak için çeşitli protokoller vardır.Önemli nokta, özellikle düşük x-ray olanaklarını kullanırken belirli bir uygulama için uygun protokolü seçmektir.

Research

JoVE Journal

Biology

Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage (40-300 kV) X-Ray Facilities

Non-invasive 3D-Visualization with Sub-micron Resolution Using Synchrotron-X-ray-tomography

Sinkrotron-X-ray tomografi Sub-mikron Çözünürlük ile Non-invaziv 3D Görselleştirme

Little is known about the internal organization of many micro-arthropods with body sizes below 1 mm. The reasons for that are the small size and the hard ...

Protein Crystallization for X-ray Crystallography

X-ray Kristalografi Protein Kristalizasyon

Using the three-dimensional structure of biological macromolecules to infer how they function is one of the most important fields of modern biology. The ...

Planarian Immobilization, Partial Irradiation, and Tissue Transplantation

Planarian İmmobilizasyon, Kısmi Işınlama, ve Doku Nakli

The planarian, a freshwater flatworm, has proven to be a powerful system for dissecting metazoan regeneration and stem cell biology1,2. Planarian ...

Cell Tracking Using Photoconvertible Proteins During Zebrafish Development

Zebra balığı Geliştirme Sırasında Photoconvertible Proteinler kullanma Cep Takip

Embryogenesis is a dynamic process that is best studied by using techniques that allow the documentation of developmental changes in vivo. The use of ...

Isolation and Kv Channel Recordings in Murine Atrial and Ventricular Cardiomyocytes

Mürin Atriyal ve Ventriküler kardiyomiyositlerde izolasyonu ve Kv Kanal Kayıtları

KCNE genes encode for a small family of Kv channel ancillary subunits that form heteromeric complexes with Kv channel alpha subunits to modify their ...

3D Printing of Preclinical X-ray Computed Tomographic Data Sets

Preklinik X-ışını bilgisayarlı tomografi Veri 3D Yazdırma Setleri

Three-dimensional printing allows for the production of highly detailed objects through a process known as additive manufacturing.  Traditional, ...

Reconstitution of a Kv Channel into Lipid Membranes for Structural and Functional Studies

Yapısal ve İşlevsel Araştırmalar için Lipid Membranlar bir Kv Kanal Sulandırma

To study the lipid-protein interaction in a reductionistic fashion, it is necessary to incorporate the membrane proteins into membranes of well-defined ...

Production of Human Norovirus Protruding Domains in E. coli for X-ray Crystallography

Production of Human Norovirus Protruding Domains in E. coli for X-ray Crystallography

İnsan Norovirüs çıkıntılı Domains üretimi içinde<em&gt; E. E. coli</em&gt;, X ışını Kristallografi için

The norovirus capsid is composed of a single major structural protein, termed VP1. VP1 is subdivided into a shell (S) domain and a protruding (P) domain. ...

Studying the Protein Quality Control System of D. discoideum Using Temperature-controlled Live Cell Imaging

Studying the Protein Quality Control System of D. discoideum Using Temperature-controlled Live Cell Imaging

Protein Kalite Kontrol Sistemi incelenmesi<em&gt; D. diskodeyum</em&gt; Sıcaklık kontrollü Canlı Hücre Görüntüleme kullanarak

The complex lifestyle of the social amoebae Dictyostelium discoideum makes it a valuable model for the study of various biological processes. Recently, we ...

A Rapid Automated Protocol for Muscle Fiber Population Analysis in Rat Muscle Cross Sections Using Myosin Heavy Chain Immunohistochemistry

Miyosin Ağır Zincir İmünohistokimya kullanma Sıçan kas Çapraz Bölüm kas Elyaf Nüfus Analizi İçin Hızlı Otomatik Protokolü

Quantification of muscle fiber populations provides a deeper insight into the effects of disease, trauma, and various other influences on skeletal muscle ...