Name: crystallization of proteins on chip by microdialysis for in situ x-ray diffraction studies
Uploaded: 2021-04-11T13:00:00
Duration: 12 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Crystallization of Proteins on Chip by Microdialysis for In Situ X-ray Diffraction Studies at JoVE.com

MBS признает поддержку MI / CNRS по контракту Инструменты в пределах 2014-2015. NJ признает CEA Международная докторская исследовательская программа (Irtelis) для phD стипендий. MBS и SJ признают финансирование программы исследований и инноваций «Горизонт 2020» Европейского союза в рамках грантового соглашения Мари Склодовской и Кюри No 722687. MBS, SJ и NJ благодарят LIPhy (UGA) за создание чистой комнаты для экспериментов по микрофабрикации. IBS признает интеграцию в Междисциплинарный научно-исследовательский институт Гренобля (IRIG, CEA).

Авторов нечего раскрывать.

Для кристаллизации белка на чипе с помощью метода микродиализа и экспериментов по рентгеновской дифракции на месте при комнатной температуре разработано микрофлюидное устройство. NoA 81 чипов интеграции RC диализ мембран любого MWCO для того, чтобы использовать микродиализ для кристаллизации белка на чипе могут быть изготовлены. Были использованы материалы для изготовления с относительно высокой рентгеновской прозрачностью, что сделало чипы совместимыми для кристаллографии белка in situ. Материалы изготовления, которые составляют отсек для кристаллизации белка устройства (PMMA, Kapton, RC диализ мембраны) были оценены для создания низкого фонового шума. В частности, фоновый шум, генерируемый чипом диализа, в основном наблюдается при низком разрешении (> 6 евро) и не влияет на обработку данных дифракции высокого разрешения больших кристаллов лизозима, необходимых для определения структуры белка. Автоматизация сбора данных усиливается с помощью 3D печатной поддержки, которая может быть установлена непосредственно в макромолекулярных кристаллических лучах и нести до трех микрочипов одновременно. Таким образом, избегается ручная уборка и манипуляция хрупкими кристаллами белка. Кроме того, сбор данных происходит при комнатной температуре, избегая необходимости криопротекторизации, которая может быть связана с конформативными изменениями отродной белковой структуры 2,3.
Использование микродиализа в качестве метода выращивания кристаллов на чипе позволяет точно контролировать и контролировать процесс кристаллизации. Как обсуждалось во введении, большинство обычных методов кристаллизации белка были реализованы с использованием микрофлюидныхустройств 11,14. Однако преимущества диализа для кристаллизации белка еще не были полностью использованы в микромасштабе. Микродиализ on-chip предоставляет возможность изучения фазовых диаграмм и проведения скрининга и оптимизации условий кристаллизации с тем же образцом белка19. Для прототипов, представленных в этой работе, потребление белка на чип ограничено до 0,1 или 0,3 мл. Основываясь на экспериментальной работе до сих пор, наиболее важные шаги протокола вытекают не из процедуры изготовления чипов, а из процесса кристаллизации. Протокол изготовления включает в себя много шагов, но он прост и позволяет изготовить многочисленные устройства (от 20 до 30 фишек) в течение одного дня в чистой комнате, с относительно недорогими материалами. Тем не менее, кристаллизация белков на чипе может быть деликатной процедурой из-за внутренней стохастичной природы нуклеации и роста кристаллов, особенно в микромасштабе. Было описано пример, в котором были использованы устоявшиеся условия для кристаллизации лизозима, который дал надежные, четко определенные кристаллы, пригодные для сбора данных о дифракции на месте. Тем не менее, трудности могут возникнуть из-за использования более сложных целей белка, таких как мембранные белки, где среда кристаллизации гораздо сложнее, фазовые диаграммы не известны и хорошо работающие условия кристаллизации еще не хорошо установлены. Чип диализа дает возможность превзойти эти трудности и изучить фазовые диаграммы на чипе, не утилизируя ценный и часто дорогостоящий образец белка, просто обмениваясь раствором кристаллизации в микрофлюидальном канале.
Универсальность микрофлюидных устройств проистекает из использования микродиализа для кристаллизации белка на чипе, чтобы обратимо контролировать условия кристаллизации и картировать концентрацию и температуру различных фазовых диаграмм с использованием низкого объема белка. Кроме того, устройство совместимо с экспериментами по рентгеновской дифракции на месте, а прототипирование устройств является недорогим и быстрым. Многочисленные, изоморфные кристаллы растворимых и мембранных белков (в процессе подготовки) могут быть выращены на чипе, и ожидается, что все эти функции могут быть использованы для серийных рентгеновских кристаллических исследований сложных целей белка на синхротронных и XFEL объектов. Наконец, выполнение исследований, проведенных на чипе и на месте, является будущей возможностью, которая может быть представляет значительный интерес для кристаллографического сообщества. Поэтому, выращивая кристаллы на диализном чипе и вводя реагенты в микрофлюидный канал, либо вручную (с помощью шприца), либо автоматически (с системой жидкости контроля давления или шприц-насосом), будущие усилия будут сосредоточены на доказательстве того, что микрофлюидные чипы могут быть успешно использованы для запуска экспериментов по синхронизации синхротронных лучей.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3 in wafer</td>
			<td>Silicon Materials Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Silicon wafer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>Minispin</td>
			<td>Bench-top centrifuge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CleWin 3.0</td>
			<td>WieWeb software</td>
			<td></td>
			<td>Designing software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epoxy glue</td>
			<td>Devcon</td>
			<td></td>
			<td>5 minutes epoxy glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluidic connectors</td>
			<td>Cluzeau Info Lab</td>
			<td>N-333</td>
			<td>NanoPort kit for 1/16&#34; OD tubing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hen egg-white lysozyme</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10 837 059 001</td>
			<td>Lyophilized protein powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-vacuum silicone grease</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z273554</td>
			<td>Dow Corning&#160;high-vacuum silicone grease</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HMDS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440191</td>
			<td>Silane, chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate</td>
			<td>Sawatec</td>
			<td>HP-200-Z-HMDS BM</td>
			<td>Hot plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropyl alcohol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Solvent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kapton tape</td>
			<td>DuPont</td>
			<td></td>
			<td>Polyimide tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mask aligner</td>
			<td>SUSS MicroTec</td>
			<td>MJB4</td>
			<td>Mask aligner, UV source</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Membrane filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>GSWP04700</td>
			<td>0.22 &#956;m pore size filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope glass slide</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12164682</td>
			<td>3 x 1 in glass slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOA81</td>
			<td>Norland Products Inc.&#160;</td>
			<td>NOA81</td>
			<td>Photocurable resin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oven</td>
			<td>Memmert</td>
			<td></td>
			<td>Oven</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6543</td>
			<td>Parafilm M roll size 20&#160;in. &#215; 50&#160;ft</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDMS</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>Sylgard 184</td>
			<td>Silicone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEG 400</td>
			<td>Hampton Research</td>
			<td>HR2-603</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5731</td>
			<td>100 x 15 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGMEA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>484431</td>
			<td>Developer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma equipment</td>
			<td>Diener Electronic</td>
			<td>ZEPTO</td>
			<td>Plasma treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMMA</td>
			<td>Goodfellow</td>
			<td>137-745-63</td>
			<td>PMMA sheets 150x150 mm, 0.175 mm thickness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure driven system</td>
			<td>Elveflow</td>
			<td>OB1 MK3+</td>
			<td>Pressure/vacuum controller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PTFE tubing</td>
			<td>Elveflow/Darwin microfluidics</td>
			<td>LVF-KTU-15</td>
			<td>PTFE tubing roll 1/16&#34; OD X 1/32&#34; ID</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RC dialysis membrane</td>
			<td>Spectra/Por</td>
			<td></td>
			<td>Various MWCOs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td></td>
			<td>Carbon steel surgical blades</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium acetate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2889</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>746398</td>
			<td>Chemical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solidworks</td>
			<td>Dassault Systemes</td>
			<td></td>
			<td>3D-CAD designing software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spin coater</td>
			<td>SPS</td>
			<td>Spin150</td>
			<td>Wafer spinner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU-8 3000 series</td>
			<td>MicroChem Corp.</td>
			<td>SU-8 3050</td>
			<td>Photoresist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td>1 mL Luer-Lok syringe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV crosslinker</td>
			<td>Uvitec</td>
			<td>CL-508</td>
			<td>UV crosslinker</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

crystallization of proteins on chip by microdialysis for in situ x-ray diffraction studies

Этот протокол описывает изготовление воспроизводимых и недорогих микрофлюидных устройств, охватывающих весь трубопровод для кристаллизации белков на чипе с помощью метода диализа и позволяющих на месте однокристаллических или серийных экспериментов кристаллографии при комнатной температуре. Протокол подробно процесс изготовления микрочипов, манипуляции на чипе кристаллизации экспериментов и лечения на месте собраны рентгеновские данные дифракции для структурного выяснения образца белка. Основная особенность этой процедуры микрофабрикации заключается в интеграции коммерчески доступной, полупроницаемой регенерируемой целлюлозной диализной мембраны между двумя слоями чипа. Молекулярное снижение веса встроенной мембраны варьируется в зависимости от молекулярного веса макромолекулы и обрывов. Устройство использует преимущества микрофлюидной технологии, такие как использование мельчайших объемов образцов (<1 МЛ) и тонкая настройка транспортных явлений. Чип соединил их с методом диализа, обеспечивая точный и обратимый контроль над процессом кристаллизации и может быть использован для исследования фазовых диаграмм белков в масштабе микролитеров. Устройство узорчато с использованием фотокурируемой смолы на основе тиолена с мягкой литографией отпечатков на оптически прозрачном полимерном субстрате. Кроме того, было оценено фоновое рассеяние материалов, сочиняющих микрочипы и генерирующих фоновый шум, что сделало чип совместимым для экспериментов по рентгеновской дифракции на месте. После того, как кристаллы белка выращиваются на чипе до адекватного размера и однородности популяции, микрочипы могут быть установлены непосредственно перед рентгеновским лучом с помощью 3D печатного держателя. Этот подход решает проблемы, связанные с использованием криопротекторов и ручной уборки в обычных экспериментах по кристаллографии белка простым и недорогим способом. Полные рентгеновские наборы данных дифракции из нескольких, изоморфных кристаллов лизозима, выращенных на чипе, были собраны при комнатной температуре для определения структуры.

Watch this Scientific Journal Video about Crystallization of Proteins on Chip by Microdialysis for In Situ X-ray Diffraction Studies at JoVE.com

Crystallization of Proteins on Chip by Microdialysis for In Situ X-ray Diffraction Studies

В этой статье подробно измышления протокола микрофлюидных чипов, разработанных для кристаллизации белка на чипе с помощью метода диализа и экспериментов по рентгеновской дифракции на месте. Процесс микрофабрикации позволяет интегрировать полупроницаемую регенерируемую целлюлозную диализную мембрану с любым молекулярным вырезом веса, между двумя слоями чипа.

Кристаллизация белков на чипе с помощью микродиализа для рентгеновских исследований In Situ

This protocol describes the manufacturing of reproducible and inexpensive microfluidic devices covering the whole pipeline for crystallizing proteins ...

В этой статье описывается протокол изготовления микрофлюидных чипов, разработанных для кристаллизации белка на чипе с помощью метода диализа и экспериментов по рентгеновской дифракции на месте при комнатной температуре. Одним из основных преимуществ этих микрочипов является выбор производственных материалов, что делает чипы совместимыми для сбора данных рентгеновской дифракции in situ при комнатной температуре. Эксперименты по кристаллизации на чипе требуют небольших объемов образца белка, снижая общую стоимость работы с этими макромолекулами высокой стоимости.Кристаллизация на чипе также устраняет ручную уборку хрупких кристаллов белка, часто применяемых в сочетании с криоохлажданием во время обычных экспериментов по кристаллографии. Кроме того, наши микрочипы используют микродиализ для кристаллизации белка, который является методом на основе диффузии, направленным на эквилибрирование резкой концентрации через полупроницаемую мембрану, для того, чтобы приблизиться к концентрации кромулента для кристаллизации белка, и позволяет точно и обратимо контролировать условия кристаллизации. Микродиализ в сочетании с контролем температуры может быть использован для разъединения нуклеации от роста кристалла для исследования фазовых диаграмм, путем изменения концентрации осадков при использовании того же образца белка.Сначала приготовьте 50 граммов силикона PDMS базы, и это лечение агента в соотношении 10 к одной массе. Смешайте два ингредиента в стакане с помощью шпателя. После смешивания поместите смесь в вакуумную камеру, чтобы удалить все пузырьки воздуха.Положите 25 граммов предварительно смешанных PDMS в первый SU8 освоить содержащие модели микрофлюидного канала и столбов, до высоты около пяти миллиметров. Затем вылейте оставшиеся 25 граммов PDMS во второй мастер SU8, содержащий только узоры столбов. Лечить два слоя PDMS в духовке на 338 кельвинов в течение одного часа.Вырежьте вылеченные слои PDMS вокруг узоров мастеров SU8 скальпелем и аккуратно снимите формы PDMS с силиконовых мастеров. Поместите форму PDMS, показывая как каналы, так и столбы на жестком стеклянном слайде микроскопа с узорами, обращенные вверх. Вырезать небольшой кусочек регенерированных целлюлозы диализной мембраны для того, чтобы покрыть центральный столп формы PDMS, который предназначен для белковой камеры.Молекулярное отрезание веса мембраны диализа выбрано соответственно к молекулярному весу образца протеина, и обрывам раствора кристаллизации. Затем тщательно отделить сухой кусок регенерированных целлюлозной диализной мембраны. Вырежьте небольшой кусочек отделенной диализной мембраны.Размер этого куска мембраны зависит от конструкции чипа. И, в частности, это зависит от размеров центральной опоры. Депозит кусок мембраны диализа на центральном столбе формы PDMS, которая поддерживается на стеклянной горке, с ее столбом и каналами, обращенными вверх.Затем поместите вторую форму PDMS с изображением только столбов, обращенных вниз, на верхней части формы PDMS, которая уже поддерживается на стеклянной горке. Выровнять все столбы двух форм PDMS. Кусок регенерированных целлюлозно-диализной мембраны зажат между двумя центральными столпами форм PDMS.Этот этап процедуры изготовления может быть проведен под оптическим микроскопом или просто путем визуального осмотра тщательного выравнивания всех столбов. Поместите сборку в вакуумную камеру и высасывай в течение 30 минут для того, чтобы удалить захваченные пузырьки воздуха в формы PDMS, и для повышения вставки фотокуримой смолы NOA, которые будут описаны на следующем этапе этого протокола. Удалите сборку из вакуумной камеры и заполните пустое пространство между двумя формами PDMS с фотокабельной смолой на основе тиолина, NOA 81, капиллярной впитываемой смолой.Нанесите смолу на три из четырех сторон сборки. Поместите сборку в поперечный связующий и вылечить смолы NOA, подвергая УЛЬТРА-излучения в течение восьми секунд, используя коллимированные УФ-лампы 35 милливатт на квадратный сантиметр. Вырезать 175 микрометров толщиной PMMA кусок в стандартных размерах микроскопа стеклянный слайд, и снять пластиковую защиту с каждой стороны части PMMA.После того, как первый УФ-облучения завершена, удалить верхнюю форму PDMS с частично кросс-связанных NOA смолы застрял на нем из нижней формы PDMS и стеклянный слайд. Нажмите осторожно сборки верхней формы PDMS и частично вылечить noA смолы на Кусок PMMA. Поместите новую сборку в кросс-линкер и вылечить снова смолы NOA путем воздействия УФ-излучения в течение 60 секунд.Удалите тщательно верхней формы PDMS. Диализ чип из полностью кросс-ссылка NOA смолы встраивания регенерированных целлюлозно-диализной мембраны и поддерживается на PMMA кусок готов. Связь коммерчески доступных разъемов на входе и розетке точек микрофлюидного канала с быстрым эпоксидным клеем.Для обработки жидкости выберите диаметр труб PTFE в зависимости от размера разъемов. Трубки используются для введения раствора кристаллизации в жидком канале чипа диализа. Пипетка вручную капля образца белка внутри белкового резервуара, расположенного прямо на мембране диализа.Объем капли белка зависит от конструкции используемого микрочипа. А конкретно, это зависит от объема центральной опоры, а может быть 0,1 или 0,3 микролитера. Аккуратно нанесите тонкий слой высокой вакуумной силиконовой смазки по всему белковому резервуару.Вырезать небольшой кусочек PMMA и аккуратно поместите его над тонким слоем силиконовой смазки. Вырезать кусок ленты Kapton, достаточно большой, чтобы покрыть PMMA кусок размещены над резервуаром белка и придерживаться на чипе NOA по всем краям. Образец белка инкапсулирован в резервуаре и чип может быть использован для экспериментов кристаллизации.Сначала подготовите около 500 микролитров раствора кристаллизации, смешивая соответствующие объемы буфера и выжидающие растворы. Введите раствор кристаллизации в точку диализного чипа через жидкие разъемы, либо вручную со шприцем, либо с помощью автоматизированной системы, управляемой давлением. После того, как жидкий канал заполнен раствором кристаллизации и нет воздуха в ловушке внутри, печать вход и выход порты чипа с Parafilm ленты.Pipette соответствующий объем белкового раствора в белковом резервуаре и инкапсулировать образец белка, как уже было описано. Рост белкового кристалла можно визуализировать и записывают с помощью цифровой камеры. Для изготовления микрочипов диализа мы выбрали оптически прозрачные и биологически инертные материалы, демонстрируя высокую совместимость для экспериментов по рентгеновской дифракции на месте.Оценивается фоновый шум, генерируемый материалами, состоящими из белкового отсека чипа, который находится на прямом пути рентгеновского луча. Белковый отсек состоит из регенерированную целлюлозную диализную мембрану, ленту Kapton и два слоя PMMA, один из них используется в качестве субстрата микрочипов, а другой используется для инкапсуляции образца белка. На этом снимке иллюстрируется фоновый шум, порожденный лентой Kapton, регенерированная целлюлозная диализная мембрана, слой PMMA и их сборка.Несмотря на то, что фотосываемая смола NOA состоит из основного тела микрочипов, не входит в эти измерения, поскольку она не является частью белковой камеры. Диффузные кольца, приписываемые взаимодействию рентгеновских лучей с материалами, можно увидеть для ленты Kapton в разрешении ниже четырех ангстремов, PMMA от четырех до восьми ангстремов и диализной мембраны от четырех до пяти ангстремов. Общий фоновый шум, генерируемый чипом, в основном наблюдается при разрешении ниже шести ангстремов, что указывает на то, что обработка данных дифракции с высоким разрешением лизозима не влияет.Микрочипы были установлены перед рентгеновским лучом с 3D печатной поддержкой, которую мы разработали для экспериментов по рентгеновской дифракции на месте, и он может в содержать до трех фишек одновременно. Эксперименты проводились для оценки эффективности микрочипов для кристаллизации модельно-растворимых белков методом микродиализа. Кристаллы лизозима были выращены на 293 кельвинах в двух разных условиях.Первое состояние кристаллизации содержало 1,5 хлорида натрия натрия и 0,1 ацетата натрия. Второе состояние кристаллизации содержало один хлорид натрия моляра, 0,1 ацетата натрия натрия и 30% полиэтиленгликоль 400, и было выбрано, чтобы показать совместимость микрочипов и метода микродиализа, с осадками высокого молекулярного веса и вязкими растворами. Эксперименты по кристаллизации проводились в статических условиях.После того, как кристаллы лизозима были выращены на микрочипе, они использовались для экспериментов по рентгеновской дифракции на месте при комнатной температуре. Микрочипы были установлены на линии луча с помощью 3D печатной поддержки и полные рентгеновские наборы данных дифракции были собраны из двух кристаллов лизозима. После обработки рентгеновских данных дифракции карта плотности электронов одного кристалла лизозима была получена в разрешении 1,95 ангстрема, как показано на рисунке A.Figure B, на карте плотности электронов, полученной при разрешении 1,85 ангстрема.После слияния двух наборов данных, полученных из двух различных кристаллов лизозима, обе карты плотности электро показывают подробную структурную информацию, которая может быть получена с помощью экспериментов по дифракции на месте, проводимых непосредственно на микрочипах диализа при комнатной температуре, из одиночных или нескольких кристаллов белка. Мы продемонстрировали процедуру изготовления микрофлюидных устройств, предназначенных для кристаллизации белка на чипе методом микродиализа, а также эксперименты по дифракции на месте при комнатной температуре. Мы использовали производственные материалы с высокой рентгеновской прозрачностью, совместимые для кристаллографии белка in situ.Сбор данных дифракции автоматизирован с использованием 3D печатной поддержки чипов, которые могут быть установлены непосредственно в макромолекулярных линиях кристаллического луча. Универсальность этого микрочипа проистекает из использования микродиализа для обратимого контроля условий кристаллизации и картовых фазовых диаграмм с использованием небольшого объема белка. Прототип устройства прост, что позволяет изготовить до 30 микрочипов в течение одного дня в чистой комнате, с относительно недорогими материалами.Мы ожидаем, что эти особенности чипов могут быть использованы для серийных рентгеновских кристаллических исследований более сложных целей белка.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Crystallization of Proteins on Chip by Microdialysis for In Situ X-ray Diffraction Studies

Preparing Adherent Cells for X-ray Fluorescence Imaging by Chemical Fixation

Подготовка прилипшие клетки для рентгеновской флуоресценции изображений по химической фиксации

X-ray fluorescence imaging allows us to non-destructively measure the spatial distribution and concentration of multiple elements simultaneously over ...

Dynamic Electrochemical Measurement of Chloride Ions

Динамический Электрохимический Измерение ионы хлора

This protocol describes the dynamic measurement of chloride ions using the transition time of a silver silver chloride (Ag/AgCl) electrode. Silver silver ...

In Situ Characterization of Hydrated Proteins in Water by SALVI and ToF-SIMS

In Situ Characterization of Hydrated Proteins in Water by SALVI and ToF-SIMS

Непосредственное определение характеристик гидратированных белков в воде SALVI и TOF-SIMS

This work demonstrates in situ characterization of protein biomolecules in the aqueous solution using the System for Analysis at the Liquid Vacuum ...

X-ray Powder Diffraction in Conservation Science: Towards Routine Crystal Structure Determination of Corrosion Products on Heritage Art Objects

Рентгеновская дифракция в порошок по сохранению науки: На пути к Обычной кристаллической структуры Определение продуктов коррозии на наследие предметов искусства

The crystal structure determination and refinement process of corrosion products on historic art objects using laboratory high-resolution X-ray powder ...

Quantifying X-Ray Fluorescence Data Using MAPS

Количественная оценка рентгеновской флуоресценции данных с использованием карты

The quantification of X-ray fluorescence (XRF) microscopy maps by fitting the raw spectra to a known standard is crucial for evaluating chemical ...

Measurements of Long-range Electronic Correlations During Femtosecond Diffraction Experiments Performed on Nanocrystals of Buckminsterfullerene

Измерения на большие расстояния электронной корреляции во время Фемтосекундный дифракции эксперименты, проведенные на нанокристаллов Бакминстерфуллерен

The precise details of the interaction of intense X-ray pulses with matter are a topic of intense interest to researchers attempting to interpret the ...

Microfluidic Chips for In Situ Crystal X-ray Diffraction and In Situ Dynamic Light Scattering for Serial Crystallography

Microfluidic Chips for In Situ Crystal X-ray Diffraction and In Situ Dynamic Light Scattering for Serial Crystallography

Microfluidic чипы для In Situ кристалл рентгеновской дифракции и на месте Динамическое рассеяние света для последовательного кристаллографии

This protocol describes fabricating microfluidic devices with low X-ray background optimized for goniometer based fixed target serial crystallography. The ...

Essential Metal Uptake in Gram-negative Bacteria: X-ray Fluorescence, Radioisotopes, and Cell Fractionation

Основные металлические поглощения в грамотрицательных бактерий: рентгеновская флюоресценция, радиоизотопов и клеточной фракционирования

We demonstrate a scalable method for the separation of the bacterial periplasm from the cytoplasm. This method is used to purify periplasmic protein for ...

Elemental-sensitive Detection of the Chemistry in Batteries through Soft X-ray Absorption Spectroscopy and Resonant Inelastic X-ray Scattering

Элементаль чувствительных обнаружение химии в батареи через мягкие рентгеновской спектроскопии поглощения и резонансных неупругого рентгеновского рассеяния

Energy storage has become more and more a limiting factor of today's sustainable energy applications, including electric vehicles and green electric grid ...

Biological Samples Preparation for Speciation at Cryogenic Temperature using High-Resolution  X-Ray Absorption Spectroscopy

Подготовка биологических образцов к видообразованию при криогенной температуре с использованием рентгеновской абсорбционной спектроскопии высокого разрешения

The study of elements with X-ray absorption spectroscopy (XAS) is of particular interest when studying the role of metals in biological systems. Sample ...