Name: in vitro wedge slice preparation for mimicking in vivo neuronal circuit connectivity
Uploaded: 2020-08-18T14:00:00
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这项研究得到了国家卫生和宫内研究计划的支持，NIDCD，Z01 DC00091（CJCW）。

所有实验程序都得到国家神经疾病和中风研究所/国家耳聋和其他沟通障碍动物护理和使用委员会的批准。
1. 实验准备
注：有关切片制备的详细信息，包括切片溶液、切片温度、切片孵化温度和装置（等）是本实验中进行脑干制备的特明。切片孵育细节可以根据实验室经验进行更改。
<ol><li>准备用于修补的内部解决方案。<ol>
<li>准备含有（以 mM）76 Cs-甲...

这里描述的楔形切片切片过程对于保持完整的前突触神经元电路是强大的，但脑切片实验的可访问性，用于分析神经元功能。必须注意几个初始步骤，以最大限度地提高电路分析准备的效用。楔形的尺寸应使用组织学检查进行确认，这是确认前突触核及其囊突投影都包含在准备好的楔形切片中不可或缺的。如果投影被切断或几个轴子到达目标核，则切片几何可能需要修改。更一般来说，楔形切片?...

神经回路活动的观察是理想地用原生感官输入和反馈进行的，以及大脑区域之间在体内的完整连接。然而，进行神经回路功能单细胞分辨率的实验仍然受到完整大脑中技术挑战的受限。虽然在体内细胞外电生理学或多光子成像方法可用于调查完整神经系统的活动，但解释不同输入如何集成或测量亚星体突触输入仍然很困难。体内全细胞记录克服了这些限制，但很难执行，即使在大脑区域，很容易访问。单细胞分辨率实验的技术挑战在位于大脑深处的某些神经元群体或空间扩散群体中进一步放大，这些群体需要基因工具来定位体内细胞（例如，与视光记录配对的通道霍多辛的遗传表达）或记录站点标记后（例如具有神经传递特异性标记）后组织化学识别。位于脑干的腹外表面附近，中层胆道（MOC）神经元受到上述限制1，使得它们极难进入体内实验。
脑片（±100-500μm厚度）长期以来一直用于研究脑电路，包括听觉脑干电路，因为同一切片2、3、4、5、6、7、8、9中所含的神经元的物理分离。其他实验室都使用更厚的切片（>1 mm）进行实验，以了解双边输入如何整合在高级橄榄复合物（SOC）区域，包括中层高级橄榄10，11。这些切片的准备，使听觉神经（AN）的轴突保持完好无损的切片内，并受电刺激，启动突触神经递质释放在CN，模仿一阶听觉神经元的活动，因为他们会响应声音。这些厚切片的一个主要缺点是神经元的可见性，用于贴片电生理记录（"修补"）。修补变得越来越困难，因为在这个区域的许多轴突成为骨髓与年龄12，13，14，15，使组织光学密集和模糊神经元，即使在一个典型的，薄的大脑切片。我们的目标是创造体外准备，更类似于体内记录电路连接，但与高通量和高分辨率记录能力视觉引导补丁夹电生理学在脑片。
我们的实验室研究听觉发泡系统神经元的生理学，包括MOC神经元。这些胆碱神经元通过调节外发细胞（OHCs）16、17、18、19、20的活性，为耳蜗提供发向反馈。先前的研究显示，这种调制在耳蜗21、22、23、24、25、26和隔音创伤27、28、29、30、31、32、33等的增益控制中起着一定的作用。在小鼠中，MOC神经元弥漫地位于听觉脑干1中梯形体（VNTB）的腹核。我们组利用与 tdTomato 记者鼠标线交叉的 ChAT-IRES-Cre 鼠标线，在显光照明下瞄准脑干切片中的 MOC 神经元。我们表明，MOC神经元从梯形体（MNTB）的吸管内核接收一个抑制性输入，而梯形体（MNTB）则由反边合体核（CN）34、35、36、37、38中的球状浓密细胞（GBC）的轴突激发。此外，MOC神经元可能从反面CN39、40、41中的T-斯特拉特细胞接收其兴奋性输入。综合起来，这些研究表明，MOC神经元接收来自同一（反向）耳朵的兴奋和抑制性输入。然而，前突触神经元，及其轴突聚集在MOC神经元上，在典型的日冕切片制备中，彼此不够接近，无法完全完好无损。为了研究突触输入与MOC神经元的整合如何影响其作用潜在的射击模式，我们开发了一种制备，我们可以以最生理上现实的方式刺激从一只耳朵对MOC神经元的不同影响，但具有体外脑切片实验的技术益处。
楔形切片是一种经过修改的厚切片制备，用于调查MOC神经元中的电路集成（图1A中所示）。在切片的厚侧，楔子包含听觉神经的被切断轴突（以下简称"听觉神经根"），因为它们从边缘进入脑干，并在CN中突触。听觉神经根可以电刺激，唤起神经递质释放和突触激活完全完整的CN 42，43，44，45，46细胞。这种刺激格式对电路分析具有若干优点。首先，我们刺激的不是直接刺激向MOC神经元提供输入的T-斯特拉特和GBC轴突，而是刺激性，以允许激活CN中丰富的内在电路。这些电路调节CN神经元的输出到他们在整个大脑的目标，包括MOC神经元46，47，48，49，50，51。其次，从安到MOC神经元的CN上游的多合成激活允许更自然的激活时间，使可塑性在这些突触中发生，因为它们在听觉刺激期间在体内发生。第三，我们可以改变我们的刺激模式来模仿一个活动。最后，对MOC神经元的兴奋和抑制单声投影在楔片中完好无损，它们在MOC神经元中可以测量其整合，并精确测量贴片-夹触电生理学。总的来说，与典型的脑切片制备相比，这种激活方案为MOC神经元提供了一个更完整的电路。这种脑干楔形切片也可用于研究其他听觉区域，接受从ipilatermNTB的抑制性输入，包括横向优越的橄榄，优越的橄榄核和中高级橄榄10，11，52，53，54，55，56。除了我们的具体准备，这种切片方法可以使用或修改来评估其他系统，其好处是保持远程输入的连接，并改善神经元的可视化，用于各种单细胞分辨率电生理学或成像技术。
该协议要求使用可倾斜约 15° 的振动台或平台。在这里，我们使用一个市售的两件式磁舞台，"舞台"是一个金属盘，底部弯曲，放置在凹式磁性"舞台基座"中。然后可以移动舞台以调整切片角度。舞台基座上的同心圆用于可重复估计角度。舞台和舞台底座放置在切片室中，其中磁级底座也可以旋转。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Experimental Preparations</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar, powder</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1423500</td>
			<td>4% agar block used to stabilize brain tissue during vibratome sectioning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AlexaFluor Hydrazide 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A10436</td>
			<td>Fluorophore used in internal solution to confirm successful MOC neuron patch</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical Balance</td>
			<td>Geneses Scientific (Intramalls)</td>
			<td>AV114</td>
			<td>Weighing chemicals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double edged razor blade</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>121-6</td>
			<td>Vibratome cutting blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kynurenic acid (5g)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>K3375-5G</td>
			<td>Slicing ACSF additive used to reduce neuron activity during dissection and slicing in order to improve tissue health for patch clamping</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH Meter</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>13-620-451</td>
			<td>Solution pH tester</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic petri dishes 100mm dia X 20mm</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>12-556-002</td>
			<td>4% Agar Prep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stirring Hotplate</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>11-500-150</td>
			<td>Heating for 4% Agar preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection and Slicing</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biocytin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>B4261-250MG</td>
			<td>Chemical used for axonal tracing (conjugated to Streptavidin 488)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Microscope</td>
			<td>Amscope</td>
			<td>SM-1BN</td>
			<td>For precision dissection during brain removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11252-20</td>
			<td>Fine forceps dissection tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Economy tweezers #3</td>
			<td>WPI</td>
			<td>501976</td>
			<td>Forceps dissection tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri Dish 150mm dia x 15mm H</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>08-747E</td>
			<td>Dissection dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Interface paper (203 X 254mm PCTE Membrane 10um)</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>1220823</td>
			<td>Slice incubation/biocytin application</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica VT1200S Vibratome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>1491200S001</td>
			<td>Vibratome for wedge slice sectioning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6872</td>
			<td>Dissection tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single-edged carbon steel blades</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>12-640</td>
			<td>Razor blade for dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Specimen disc, orienting</td>
			<td>Leica</td>
			<td>14048142068</td>
			<td>Specialized vibratome stage for reproducible tilting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spoonula</td>
			<td>FisherSci</td>
			<td>14-375-10</td>
			<td>Dissection tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super Glue</td>
			<td>Newegg</td>
			<td>15187</td>
			<td>Used for glueing tissue to vibratome stage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91500-09</td>
			<td>Dissection tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrophysiology</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A1R Upright Confocal Microscope</td>
			<td>Nikon Instruments</td>
			<td></td>
			<td>Electrophysiology and imaging microscope, can be any microscope compatible with electrophysiology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode Borosilicate glass w/ Filament OD 1.5mm, ID 1.1mm, 10 cm long</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>BF150-110-10</td>
			<td>Patch clamping pipette glass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode Filler MicroFil</td>
			<td>WPI</td>
			<td>CMF20G</td>
			<td>Patch electrode pipette filler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>In-line solution heater</td>
			<td>Warner Instruments (GSAdvantage)</td>
			<td>SH-27B</td>
			<td>Slice perfusion system heater</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-Micromanipulator Systems</td>
			<td>Sutter Intruments</td>
			<td>MPC-200 with MP285</td>
			<td>Micromanipulators for patch clamp and stimulation electrode placement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P-1000 horizontal pipette puller for glass micropipettes</td>
			<td>Sutter instruments</td>
			<td>FG-P1000</td>
			<td>Patch clamp pipetter puller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Patch-clamp amplifier and Software</td>
			<td>HEKA</td>
			<td>EPC-10 / Patchmaster Next</td>
			<td>Can be any amplifier/software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recording Chamber</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>RC26G</td>
			<td>Slice &#34;bath&#34; during recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recording Chamber Harp</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>640253</td>
			<td>Stablizes slice during electrophysiology recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slice Incubation Chamber</td>
			<td>Custom Build</td>
			<td></td>
			<td>Heated, oxygenated holding chamber for slices during recovery after slicing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulus isolation unit</td>
			<td>A.M.P.I.</td>
			<td>Iso-Flex</td>
			<td>Stimulus isolation unit for electrophysiology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 60CC</td>
			<td>Fischer Scientific (Intramalls)</td>
			<td>14-820-11</td>
			<td>Electrophysiology perfusion fluid handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperature controller</td>
			<td>Warner Instruments (GSAdvantage)</td>
			<td>TC-324C</td>
			<td>Slice perfusion system temperature controller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tubing 1/8 OD 1/16 ID</td>
			<td>Fischer Scientific (Intramalls)</td>
			<td>14-171-129</td>
			<td>Electrophysiology perfusion fluid handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tugsten concentric bipolar microelectrode</td>
			<td>WPI</td>
			<td>TM33CCINS</td>
			<td>Stimulating electrode for electrophysiology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histology</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well Plate</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>12-556006</td>
			<td>Histology slice collection and immunostaining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 Streptavidin</td>
			<td>Jackson Immuno labs</td>
			<td>016-540-084</td>
			<td>Secondary antibody for biocytin visualization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning Orbital Shaker</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>CLS6780FP</td>
			<td>Shaker for immunohistochemistry agitation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cresyl Violet Acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich (Intramalls)</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td>Cellular stain for histology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Microtome Blades</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-210-052</td>
			<td>Sliding microtome blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter-syringe Nalgene 4mm Cellulose Acetate 0.2um</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>09-740-34A</td>
			<td>Syringe filter for filling recording pipettes with internal solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoromount-G Slide Mounting Medium</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>OB100-01</td>
			<td>Immunohistochemistry fluorescence mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass slide staining dish with rack</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>08-812</td>
			<td>Cresyl Violet staining chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microm HM450 Sliding Microtome</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>910020</td>
			<td>Freezing microtome for histology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Cover Glasses: Rectangles 50mm X 24mm</td>
			<td>Fisher Scientific (Intramalls)</td>
			<td>12-543D</td>
			<td>Histochemistry slide cover glass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permount mounting medium</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SP15-100</td>
			<td>Cresyl violet section mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Slides</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-034980</td>
			<td>Histology slides</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro wedge slice preparation for mimicking in vivo neuronal circuit connectivity

体外切片电生理学技术以精确的电和时间分辨率测量单细胞活动。脑片必须相对薄，以正确可视化和访问神经元进行贴片夹紧或成像，并且对大脑电路的体外检查仅限于急性切片中物理存在的。为了保持体外切片实验的好处，同时保留大部分前突触核，我们开发了一种新型切片制备。这种"楔形切片"设计用于贴片式电生理学记录，以描述脑干中中层胆汁（MOC）神经元的多种单声道、声驱动输入。这些神经元从由反边耳和相应的耳蜗核（CN）的刺激激活的神经元中接收其主要兴奋和抑制性输入。设计了一个不对称的大脑切片，在一个半球的横向边缘的玫瑰花外域中最厚，然后向相反半球的横向边缘变薄。在厚的一面，该片包含听觉神经根向大脑传递有关听觉刺激的信息，内在的CN电路，以及融合在反向MOC神经元上的脱联兴奋和三联突抑制的通路。记录从片片薄侧的MOC神经元进行，在该实验中，使用DIC光学元件进行典型贴片夹实验。当听觉神经进入听觉脑干时，直接刺激它，允许内在CN电路活性和突触可塑性发生在MOC神经元上游的突触。使用这种技术，可以尽可能密切地模拟切片内的体内电路激活。这种楔形切片制备适用于其他脑电路，其中电路分析将受益于保持上游连接和远程输入，结合体外切片生理学的技术优势。

楔形切片的组织学研究 为了研究听觉脑干神经元功能，楔形切片制剂被设计为包含听觉神经根和CN反面的MOC神经元的目标记录（例如切片如图1B所示）。初步组织学检查的准备是重要的，以确认切片包含电路激活所必需的核，并且与弓投影完好无损。CN 中的两种细胞类型为 MOC 神经元提供声音信息。T-斯特拉特细胞被假设为MOC神经元39，40，41，58提供<sup...

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In Vitro Wedge Slice Preparation for Mimicking In Vivo Neuronal Circuit Connectivity

将不同的突触输入与神经元的整合最好用一种制备来测量，这种制备保留了所有突触前核，以便自然计时和电路可塑性，但大脑切片通常切断许多连接。我们开发了一个经过修改的大脑切片来模拟体内回路活动，同时保持体外实验能力。

体外楔形切片准备模拟在Vivvo神经元电路连接

In vitro slice electrophysiology techniques measure single-cell activity with precise electrical and temporal resolution. Brain slices must be relatively ...

脑片实验允许以高电和时间分辨率来测量神经元功能，但这些切片通常切断许多前突触连接。楔形切片可保持更完整的前突触电路。这种经过改良的大脑切片可维持更完整的体内神经回路，同时提供体外实验的好处，如视觉引导的贴片夹记录、药理学和活动成像。准确的楔形切片几何体可以根据电路中神经元的地图集位置进行估计，但前突触示意图和轴突的完整性应使用组织学确定。首先使用剃刀刀片将头骨中线的皮肤从鼻子切到颈部后面。剥回皮肤，露出头骨，从头骨底部开始，继续向鼻子走去，用小剪刀在头骨中通过中线进行切口。在羔羊缝合时，将头骨从中线横向切向两侧的耳朵，剥回头骨以暴露大脑。从角端开始，用一个小的实验室铲子轻轻地将大脑从头骨上抬起来，让视神经被切断。继续轻轻地向后工作大脑，露出腹体表面，用细钳小心地捏紧脑干心腹表面附近的三叉神经，切开它们。将制剂放在装满冷切片溶液的玻璃培养皿中，然后将盘子放在解剖显微镜下。修剪靠近脑干的面部神经，以暴露前脑神经。使用精细钳子将尖端推入前脑，其中前骨神经尽可能离开头骨。捏断两侧的神经，使神经根附着在脑干上。从梯形体附近的脑干的腹面取出脑和血管。然后捏住剩余的颅神经和结缔组织，使大脑完全从头骨中释放出来，如果可能，注意保留剩余的脊髓。准备大脑表面的夹具到舞台放置大脑腹侧，并使用钝器轻轻地固定脊髓，以稳定脑组织。将打开的钳子以大约 20 度的角度通过大脑插入到盘子的底部，使尖端从脑部到光学切口的后面，并使用剃刀刀片沿钳子切割。接下来，准备一个四分之一厘米的4%的块，并展开一小滴胶水到舞台上的矩形。使用钳子小心地抬起大脑，用纸巾边缘轻轻涂抹多余的液体。然后将阻塞的表面放在胶水上，使腹体表面在切片过程中朝向刀片的方向，并将粘液块轻轻地推到背部表面作为支撑。为了获得楔形片，用耳蜗神经根在厚的一侧和中层寡头神经元和梯形身体的中核在薄的一面，将磁盘与连接的大脑到舞台持有人，并放置在振动器的切片室与大脑的腹腔表面朝向刀片。用冰冷切片溶液填充腔室，将刀片放入碳原气泡溶液中。将切片切割到感兴趣区域，以确保切片是对称的。然后将舞台移向一侧约 15 度。继续小心切开，直到听觉神经根靠近一侧的表面，面部神经在切片的另一侧表面可以看到。将舞台 15 度移回原始位置，然后将刀片从组织上移出。旋转舞台底座 90 度，使薄侧的横向边缘朝向刀片，并降低刀片几百微米，然后慢慢使刀片靠近组织的边缘。刀片缩回后，刀片稍微降低到刀片薄边缘所需的厚度。将刀片从组织移回，然后旋转舞台底座，使腹体表面朝向舞台底座。进行切割以指定楔形切片的轮面表面，然后将切片转移到一平方厘米的界面纸上。面部神经应该在旋转面的切片的两个半球上可见。然后将切片移动到35摄氏度的孵化室，以恢复30分钟。要设置用于电生理学分析的楔形切片，将样品放入连续注入 35 摄氏度 ACSF 的录音室并稳定切片。使用 DIC 光学器件，聚焦切片厚侧的听觉神经根，并使用微操纵器将双极钨刺激电极移动到听觉神经根部，并轻轻地移动到组织表面。将视场移动到薄侧的梯形体体的腹核，并使用 561 纳米发射过滤器选择中层橄榄神经作为荧光下贴片夹电生理学的目标。在记录移液器上为建议的实验和 DIC 光学贴片填充，并在全细胞配置中从中端胆光神经中记录。调整听觉神经根的电刺激幅度，在中枢神经中获得一致的后突触事件。然后运行适当的刺激方案，观察中层胆汁神经元中唤起的突触电流。这种楔形切片制备旨在包含听觉神经根和耳蜗核对等的中层卵石耳神经元进行记录。在这个紫红色染色的楔形切片中，耳蜗核几乎存在于其完全的角体-孔体范围内。听觉神经根进入耳蜗核。此外，楔片包含梯形体异形体中核的神经元，从中层卵细胞状神经元进行记录。要确认楔片中的神经连接，通过两种方式刺激。首先，中线的腹体声学石质受到电刺激，通过球状浓密细胞轴突刺激直接激活T-stte轴突和梯形体神经元的中层核，并产生在中层胆囊神经元上测量的后突触电流。然后刺激听觉神经根激活整个单声道上升脑干回路，并唤起后突触反应。将直接刺激腹外声斯特里亚引起的第一个后突触电流的发作延迟测量与听觉神经刺激引起的电流进行比较，可发现听觉神经刺激事件的延迟明显较长，表明在听觉神经刺激期间激活的额外人工耳蜗核突触引起的突触延迟。使用解剖地标和仔细操纵磁碟阶段对于创建具有完整神经元电路和可靠的突触后唤起反应的楔形切片至关重要。这种切片技术为使用额外的体外电生理学工具提供了一个平台，包括钙或电压成像、光遗传学、神经递质解热以及细胞内和细胞外药理学。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury

海马脑片的器官型检查神经元损伤的文化模式

Organotypic hippocampal slice culture is an in vitro method to examine mechanisms of neuronal injury in which the basic architecture and composition of ...

科研

神经科学

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

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胚胎腹侧中脑器官型片文化：一个系统来研究多巴胺能神经元发展在体外</em

The  mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due  to the abundance of molecular and genetic data. However, the ...

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Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

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