Name: subretinal transplantation of human embryonic stem cell-derived retinal tissue in a feline large animal model
Uploaded: 2021-08-05T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Subretinal Transplantation of Human Embryonic Stem Cell-Derived Retinal Tissue in a Feline Large Animal Model at JoVE.com

Dit werk werd gefinancierd door NEI Fast-track SBIR-subsidie R44-EY027654-01A1 en SBIR-subsidie 3 R44 EY 027654 - 02 S1 (I.O.N., Lineage Cell Therapeutics; Dr. Petersen-Jones is een co-PI). De auteurs willen mevrouw Janice Querubin (MSU RATTS) bedanken voor haar hulp bij anesthesie en algemene zorg voor de dieren die in deze studie zijn opgenomen, evenals hulp bij chirurgische instelling en voorbereiding / sterilisatie van instrumenten. De auteurs willen Dr. Paige Winkler bedanken voor de hulp bij het ontvangen van de organoïden en het plaatsen ervan in media op de dag voorafgaand aan de implantatie en voor de hulp op de dag van de implantatie. De auteurs zijn ook de heer Randy Garchar (LCTX) dankbaar voor het ijverig verzenden van retinale organoïden, het assembleren van de verzender en het downloaden van temperatuur- en G-stress-records na elke zending. Dit werk werd uitgevoerd terwijl auteur Igor Nasonkin in dienst was van Biotime (nu Lineage).

De procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de verklaring van de Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) for Use of Animals in Ophthalmic and Vision Research. Ze werden ook goedgekeurd door de Michigan State University Institutional Animal Care and Use Committee. Wild-type en CrxRdy / + katten uit een kolonie katten die worden onderhouden aan de Michigan State University werden gebruikt in deze studie. Dieren werden gehuisvest onder 12 uur: 12 uur licht-donker c...

Implantatie van hPSC-afgeleid retinaal weefsel (retinale organoïden) in de subretinale ruimte is een veelbelovende experimentele benadering voor het herstellen van het gezichtsvermogen voor retinale degeneratieve ziekten in een laat stadium veroorzaakt door PR-celdood (ernstige of terminale blindheid). De gepresenteerde aanpak bouwt voort op een eerder ontwikkelde en met succes geteste experimentele therapie op basis van subretinale transplantatie van een stuk menselijk foetaal netvliesweefsel23,24,25<...

Miljoenen mensen over de hele wereld worden beïnvloed door retinale degeneratie (RD) met als gevolg een visuele beperking of blindheid geassocieerd met verlies van de lichtgevoelige fotoreceptoren (PR's). Leeftijdsgebonden maculaire degeneratie (AMD) is een belangrijke oorzaak van blindheid als gevolg van een combinatie van genetische risicofactoren en omgevings- / levensstijlfactoren. Daarnaast is gebleken dat meer dan 200 genen en loci erfelijke RD (IRD)1 veroorzaken. Retinitis pigmentosa (RP), de meest voorkomende IRD, is genetisch heterogeen met meer dan 3.000 genetische mutaties in ongeveer 70 genen die 2,3,4 worden gerapporteerd. Leber Congenitale Amaurosis (LCA), die blindheid in de kindertijd veroorzaakt, is ook genetisch heterogeen 5,6. Genaugmentatietherapie is ontwikkeld en bevindt zich in klinische onderzoeken voor de behandeling van een klein aantal IRD's 3,7. Er moet echter een afzonderlijke therapie worden ontwikkeld voor de behandeling van elke afzonderlijke genetische vorm van IRD en daarbij slechts een kleine subgroep van patiënten behandelen. Bovendien is genvergroting afhankelijk van de aanwezigheid van een populatie van te redden fotoreceptoren en is daarom niet van toepassing op gevorderde degeneratie.
Er is daarom een dringende en nog onvervulde klinische behoefte aan de ontwikkeling van therapieën die geavanceerde RD's en diepgaande tot terminale blindheid aanpakken en behandelen. In de afgelopen 2 decennia zijn neuroprothetische implantaten ontwikkeld en getest in grote diermodellen, zoals de kat, voorafgaand aan menselijk gebruik 8,9,10,11,12,13,14. Evenzo zijn in de afgelopen 20 jaar retinale vervangingstherapieën met behulp van vellen embryonaal of zelfs volwassen netvlies van zoogdieren die subretinaal zijn getransplanteerd, ontwikkeld 15,16,17,18,19,20,21,22 en zelfs met succes getest bij RD-patiënten 23,24,25. Beide benaderingen maken gebruik van het idee om nieuwe sensoren (fotovoltaïsche siliciumfotodiodes in het geval van neuroprothetische apparaten26,27, en gezonde mutatievrije fotoreceptoren georganiseerd in vellen, in het geval van retinale plaatimplantatie) in het netvlies te introduceren met gedegenereerde PR's. Recente studies hebben het gebruik van op stamcellen gebaseerde benaderingen onderzocht, zoals transplantatie van menselijke pluripotente stamcellen (hPSC)-afgeleide retinale voorlopers28,29, hPSC-fotoreceptoren 30 en hPSC-retinale organoïden31,32,33. Retinale organoïden maken de vorming van netvliesweefsel in een schaal mogelijk en afleiding van fotoreceptorvellen met duizenden mutatievrije PR's, die lijken op de fotoreceptorlaag in het zich ontwikkelende menselijke foetale netvlies 34,35,36,37,38,39,40 . Het transplanteren van hPSC-afgeleid retinaal weefsel (organoïden) in de subretinale ruimte van patiënten met RD-aandoeningen is een van de nieuwe en veelbelovende benaderingen voor experimentele celtherapie, die wordt nagestreefd door een aantal teams31,32,41,42. Vergeleken met transplantatie van de celsuspensie (van jonge fotoreceptoren of retinale voorlopercellen), werd aangetoond dat getransplanteerde vellen foetale fotoreceptoren resulteerden in verbeteringen in het gezichtsvermogen in klinische onderzoeken23,24.
Het hier gepresenteerde protocol beschrijft in detail een transplantatieprocedure voor subretinale toediening van de gehele retinale organoïden (in plaats van organoïde randen33,41) als een potentieel betere manier om intacte retinale vellen met PR's te introduceren, om de overleving van het transplantaat te vergroten en de bladconservering te verbeteren. Hoewel procedures voor het introduceren van een plat stuk menselijk netvlies en ook RPE-pleisters zijn ontwikkeld43,44,45, is transplantatie van grotere 3D-grafts niet onderzocht. Van stamcellen afgeleide retinale organoïden bieden een onuitputtelijke bron van fotoreceptorbladen voor het ontwikkelen van technologieën voor het herstel van het gezichtsvermogen, zijn vrij van ethische beperkingen en worden beschouwd als een uitstekende bron van menselijk netvliesweefsel voor therapieën gericht op de behandeling van gevorderde RD en terminale blindheid46. De ontwikkeling van chirurgische methoden voor nauwkeurige subretinale implantatie van retinale organoïden met minimaal letsel aan de retinale niche van de gastheer (neuraal netvlies, retinaal pigmentepitheel en retinale en choroïdale vasculatuur) is een van de kritieke stappen voor het bevorderen van dergelijke therapie in de richting van klinische toepassingen31,32. Grote diermodellen zoals katten, honden, varkens en apen hebben bewezen goede modellen te zijn voor het onderzoeken van chirurgische toedieningsmethoden en om de veiligheid van geïmplanteerde vellen weefsel (retinale pigmentepitheel (RPE) cellen) aan te tonen en het gebruik van organoïden te onderzoeken 41,44,45,47,48,49,50 . Het grote dierlijke oog heeft een vergelijkbare bolgrootte als de mens en een vergelijkbare anatomie, waaronder de aanwezigheid van een gebied met een hoge fotoreceptordichtheid, inclusief kegeltjes (het centrale gebied), dat lijkt op de menselijke macula 6,51,52.
In dit manuscript wordt een techniek beschreven voor de implantatie van hPSC-afgeleid retinaal weefsel (organoïden) in de subretinale ruimte van katachtige grote diermodellen (zowel wild-type als CrxRdy / + katten), die, samen met veelbelovende werkzaamheidsresultaten32,53, een basis vormt voor verdere ontwikkeling van dergelijke onderzoekstherapie in de richting van klinische toepassingen om RD-aandoeningen te behandelen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m pore syringe filter with PES membrane</td>
			<td>Cameo</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23G subretinal injector with extendable 41 G cannula</td>
			<td>DORC</td>
			<td>1270.EXT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>250 &#181;L hamilton gas tight luer lock syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 Silk suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>707G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0/7-0 polyglactin suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J570G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine maleate 500mg/5mL (Aceproject)</td>
			<td>Henry Schein Animal Health</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine 0.3 mg/mL</td>
			<td>Par Pharmaceutical</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cSLO + SD-OCT</td>
			<td>Heidelberg Engineering</td>
			<td>Spectralis HRA+ OCT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyclosporine</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone 2mg/mL (Azium)</td>
			<td>Vetone</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doxycyline 25mg/5mL</td>
			<td>Cipla</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fatal Plus solution (pentobarnital solution)</td>
			<td>Vortech</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin 20mg/2mL</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass capillary (Thin-Wall Single-Barrel Standard Borosilicate (Schott Duran) Glass Tubing</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>TW150-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylprednisolone actetate 40 mg/mL</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCT medium (Tissue-Tek O.C.T. Compound)</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympic Vac-Pac Size 23</td>
			<td>Natus</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde 16% solution</td>
			<td>EMS</td>
			<td>15719</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine Hydrochloride 10% Ophthalmic Solution</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prednisolone 15mg/5mL</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol 5000mg/50mL (10 mg/mL) (PropoFlo28)</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RetCam II video fundus camera</td>
			<td>Clarity Medical Systems</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triamcinolone 400mg/10 mL (Kenalog-40)</td>
			<td>Bristol -Myers Squibb Company</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide 1% ophthalmic solution</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NA</td>
			<td>can be found by various suppliers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrectomy 23G port</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>Accurus systems</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrectomy machine</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>Accurus systems</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitreo-retinal vertical 80&#176; scissors with squeeze handle</td>
			<td>Frimen</td>
			<td>FT170206T</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

subretinal transplantation of human embryonic stem cell-derived retinal tissue in a feline large animal model

Retinale degeneratieve (RD) aandoeningen geassocieerd met fotoreceptorverlies zoals leeftijdsgebonden maculaire degeneratie (AMD), retinitis pigmentosa (RP) en Leber Congenitale Amaurosis (LCA) veroorzaken progressief en slopend verlies van het gezichtsvermogen. Er is een onvervulde behoefte aan therapieën die het gezichtsvermogen kunnen herstellen zodra fotoreceptoren verloren zijn gegaan. Transplantatie van menselijke pluripotente stamcel (hPSC)-afgeleid retinaal weefsel (organoïden) in de subretinale ruimte van een oog met geavanceerde RD brengt retinale weefselvellen met duizenden gezonde mutatievrije fotoreceptoren en heeft een potentieel om de meeste / alle blinderende ziekten geassocieerd met fotoreceptordegeneratie te behandelen met één goedgekeurd protocol. Transplantatie van foetaal netvliesweefsel in de subretinale ruimte van diermodellen en mensen met gevorderde RD is met succes ontwikkeld, maar kan niet worden gebruikt als een routinetherapie vanwege ethische problemen en beperkte weefseltoevoer. Grote oog erfelijke retinale degeneratie (IRD) diermodellen zijn waardevol voor het ontwikkelen van gezichtshersteltherapieën met behulp van geavanceerde chirurgische benaderingen om retinale cellen / weefsel in de subretinale ruimte te transplanteren. De overeenkomsten in bolgrootte en fotoreceptordistributie (bijv. Aanwezigheid van macula-achtige regiogebiedcentralisten) en beschikbaarheid van IRD-modellen die de menselijke IRD nauw samenvatten, zouden een snelle vertaling van een veelbelovende therapie naar de kliniek vergemakkelijken. Hier wordt een chirurgische techniek gepresenteerd voor het transplanteren van hPSC-afgeleid netvliesweefsel in de subretinale ruimte van een groot diermodel waarmee deze veelbelovende aanpak in diermodellen kan worden beoordeeld.

Deze procedure maakt de succesvolle en reproduceerbare implantatie van hPSC-afgeleide retinale organoïden mogelijk in de subretinale ruimte van een groot oogdiermodel (hier gedemonstreerd aan de hand van 2 voorbeelden: wild-type katten met gezonde fotoreceptoren (PR's) en CrxRdy / + katten met degenererende PR's en netvlies). Bereid met behulp van de stappen in figuur 1 de van hPSC afgeleide retinale organoïden voor en laad deze in de borosilicaatglazen canule ...

Watch this Scientific Journal Video about Subretinal Transplantation of Human Embryonic Stem Cell-Derived Retinal Tissue in a Feline Large Animal Model at JoVE.com

Subretinal Transplantation of Human Embryonic Stem Cell-Derived Retinal Tissue in a Feline Large Animal Model

Hier wordt een chirurgische techniek gepresenteerd voor het transplanteren van van menselijke pluripotente stamcellen (hPSC) afgeleid netvliesweefsel in de subretinale ruimte van een groot diermodel.

Subretinale transplantatie van menselijk embryonaal stamcel-afgeleid retinaal weefsel in een katachtig groot diermodel

Retinal degenerative (RD) conditions associated with photoreceptor loss such as age-related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa (RP) and ...

Het huidige protocol toont in detail subretinale toediening van de gehele retinale organoïden in een groot diermodel, gericht op het ontwikkelen van celtherapiebenaderingen voor retinale degeneratie. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het organoïden rechtstreeks aan het doelweefsel, het netvlies, kan afleveren. De techniek is gericht op de behandeling van geavanceerde blinderende retinale degeneratieve aandoeningen, zoals leeftijdsgebonden maculaire degeneratie, retinitis pigmentosa of leber congenitale amaurosis.De procedure wordt gedemonstreerd door Dr.Peterson Jones. Voor subretinale implantatie van de organoïden, gebruik Stevens Tenotomy Scissors om een 0,5 tot 1 centimeter laterale canthotomie uit te voeren bij een vier maanden oude 's nachts nuchtere verdoofde kat, en plaats een barraquer ooglid speculum van de juiste grootte in de incisie om de oogleden open te houden met een chirurgische assistent die regelmatig het hoornvlies irrigeert met BSS tijdens de procedure. Gebruik 0,5 Castroviejo corneale bindtang en een kleine mug hemostat om het bulbaire bindvlies naast de limbus voorzichtig vast te pakken.Plaats twee 6-0 zijden hechtingen in het bindvlies direct naast de limbus op de posities 4 en 8 uur om het oog in de primaire blik te houden en het derde ooglid in te trekken. Klem de uiteinden van de hechtingen vast met kleine muggenhemostaten om hun manipulatie te helpen en plaats een andere hechting op de positie van 12 uur op de limbus gedeeltelijk door de dikte van de limbus, waarbij ervoor wordt gezorgd dat het oog niet binnendringt. Knoop de hechtdraad losjes vast, knip het uiteinde kort en plaats een hechting in het bindvlies direct naast de limbus op de positie van 4 uur om het oog en de primaire blik vast te houden.Reflecteer het bulbaire bindvlies tussen 10 en 2 uur en gebruik een tenotomieschar om het bindvlies twee tot drie millimeter van de limbus in te snijden. Ondermijn het bindvlies en maak de capsule van de Tenon vrij om de sclera bloot te leggen op de twee en 10 uur vitrectomiepoortplaatsen op drie tot vijf millimeter van de limbus. Gebruik remklauwen om de plaatsen voor sclerotomie te identificeren en vermijd de belangrijkste sclerale vaten die prominent in de kat kunnen zijn.Planning voor een gebied van drie millimeter op de instrumentpoort van 10 uur voor een rechtshandige chirurg, plaats 6-0 of 7-0 polyglactine kruispatroonnaden zonder te binden op de plaatsen van de voorgestelde sclerotomieën. Zodra de hechtingen op hun plaats zijn, laat de assistent de 12 uur durende hechtingen vastpakken om de bol in positie te houden en gebruik je een Castroviejo-tang van 0,12 millimeter om het weefsel naast de sclerotomieplaats te houden. Gebruikt een trocar om een 23 gauge vitrectomiepoort door de sclera te introduceren op zowel de 2 als 10 uur posities schuin naar de oogzenuw om contact met de lens te voorkomen, en gebruik bindtangen om de irrigatiepoort voorzichtig te duwen om te bepalen of de tips in het glasvocht kunnen worden gevisualiseerd.Laat de assistent een Machemer vergrotende irrigerende vitrectomielens op het hoornvlies plaatsen om visualisatie van het achterste segment van het oog mogelijk te maken, en een 23 gauge vitrectomiesondesapper door de instrumentpoort om een gedeeltelijke kernvitrectomie uit te voeren. Breng vervolgens de naald van een spuit van één milliliter met één milliliter triamcinolonoplossing in de instrumentpoort en injecteer 250 tot 500 microliter van de kristalsuspensie. Wanneer de oplossing is afgeleverd, verplaatst u de vitrectomiesonde door de instrumentpoort om dicht bij de oogzenuwkop te komen met de poort weg van het netvliesoppervlak.Gebruik een hoog vacuüm om het vitreale gezicht van het netvlies los te maken, steek de injector door de instrumentpoort naar het netvliesoppervlak en extrudeer de canulepunt. Druk zachtjes op de punt van het netvliesoppervlak en laat de assistent een lichte snelle druk geven op de zuiger van de spuit om de netvliesloslating te starten, waarbij de injectiedruk wordt verlaagd om een langzame toename van de netvliesloslating mogelijk te maken totdat de gewenste grootte is bereikt. Gebruik een canule van 41 gauge van de injector om de loslating iets te vergroten totdat een netvliesschaar kan worden ingebracht en verwijder de sclerale poort van 10 uur.Gebruik vervolgens een recht 2.850 millimeter spleetmes gericht op de oogzenuw om te voorkomen dat u de lens aanraakt om de sclerotomie op deze plaats te vergroten. Maak de retiotomie op de bleb weg van de oogzenuw om te voorkomen dat de netvlieszenuwvezels afkomstig uit het getransplanteerde gebied worden beschadigd en vermijd het snijden van grote retinale vaten om het risico op bloeding te verminderen. Om de organoïden te implanteren, plaatst u een glazen capillair geladen met organoïden door de vergrote sclerotomie naar de retinotomieplaats en gebruikt u de punt van het capillair om de retinomie enigszins te openen om toegang te krijgen tot de subretinale blebopening.Laat de assistent de zuiger van de injector opnieuw langzaam indrukken om de organoïden in de subretinale bleb te injecteren. BSS moet doorgaan met organoïden, de organen, en spoel de retiotomie open. Wanneer alle organoïden zijn afgeleverd, laat u het glazen capillair een paar seconden op zijn plaats voordat u het capillair langzaam uit het oog verwijdert, waarbij u ervoor zorgt dat er geen plotselinge afgifte van vloeistof plaatsvindt.Wanneer het capillair is verwijderd, sluit u de sclerotomie met behulp van de vooraf geplaatste hechting in een kruispatroon. Laat de assistent de infuuspoort verwijderen en snel de sclerotomiehechting binden en de peritomie sluiten met de polyglictine-hechtingen in een eenvoudig continu patroon. Sluit de laterale canthotomie met een 6-0 polyglactine-hechting en figuur-acht huidnaden om de laterale canthus uit te voeren en gebruik eenvoudige onderbroken huidnaden om de rest van de wond te sluiten.Dien vervolgens de juiste postoperatieve steroïde en antibiotische cocktail toe. Menselijke pluripotente stamcel-afgeleide retinale organoïde belasting kan worden bevestigd in de glazen canule van het injectieapparaat en tijdens de operatie door directe visualisatie. De aanwezigheid van de organoïden in de subretinale ruimte kan postoperatief worden bevestigd door oogheelkundig onderzoek en fundusbeeldvorming.Voorafgaand aan euthanasie kunnen confocale scanning laser oftalmoscopie en spectrale domein optische coherentie tomografie beeldvorming ook worden uitgevoerd om de positie van de organoïden te beoordelen. Deze technieken kunnen worden gebruikt om de persistentie van retinale organoïden in de subretinale ruimte tussen het neurale netvlies en het retinale pigmentepitheel van het ontvangende oog aan te tonen. Histologische en immunohistochemische analyses kunnen worden gebruikt om de overleving van de xenogene grafieken in de subretinale ruimte van een groot oog in een immunosuppressief dier te illustreren.Alleen degenen die bekwaam zijn in vitreoretinale chirurgie, zoals opgeleide veterinaire oogartsen of vitreoretinale chirurgen die bekend zijn met de soortverschillen in het kattenoog in vergelijking met het menselijk oog, moeten deze procedure uitvoeren. De techniek die in deze video wordt gepresenteerd, moet van toepassing zijn op andere grote diermodellen die worden gebruikt voor het vertalen van vitreoretinale chirurgische technieken naar de klinieken.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Efficient Derivation of Human Neuronal Progenitors and Neurons from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

Efficiënte Afleiding van de Mens Neuronale voorouders en neuronen van pluripotente menselijke embryonale stamcellen met op kleine moleculen Inductie

There is a large unfulfilled need for a clinically-suitable human neuronal cell source for repair or regeneration of the damaged central nervous system ...

Dissection, Culture, and Analysis of Xenopus laevis Embryonic Retinal Tissue

Dissection, Culture, and Analysis of Xenopus laevis Embryonic Retinal Tissue

Dissection, Cultuur en Analyse van<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryonale netvliesweefsel

The process by which  the anterior region of the neural plate gives rise to the vertebrate retina  continues to be a major focus of both clinical and ...

Limbal Approach-Subretinal Injection of Viral Vectors for Gene Therapy in Mice Retinal Pigment Epithelium

Limbale Aanpak-Subretinal injectie van virale vectoren voor gentherapie in Muizen retinaal pigment epitheel

The eye is a small and enclosed organ which makes it an ideal target for gene therapy. Recently various strategies have been applied to gene therapy in ...

Development of a Refined Protocol for Trans-scleral Subretinal Transplantation of Human Retinal Pigment Epithelial Cells into Rat Eyes

Ontwikkeling van een verfijnde Protocol voor Trans-scleral Subretinal transplantatie van menselijke retinale Pigment epitheliale cellen in de ogen van de Rat

Degenerative retinal diseases such as age-related macular degeneration (AMD) are the leading cause of irreversible vision loss worldwide. AMD is ...

Modelling Zika Virus Infection of the Developing Human Brain In Vitro Using Stem Cell Derived Cerebral Organoids

Modelling Zika Virus Infection of the Developing Human Brain In Vitro Using Stem Cell Derived Cerebral Organoids

Zika Virus infectie van de ontwikkelende hersenen In Vitro met behulp van stamcel modellering afgeleid cerebrale Organoids

The recent emergence of Zika virus (ZIKV) in susceptible populations has led to an abrupt increase in microcephaly and other neurodevelopmental conditions ...

Method for High Speed Stretch Injury of Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Neurons in a 96-well Format

Methode voor hoge snelheid Stretch letsel van mens geïnduceerde pluripotente stamcel afkomstige neuronen in een 96-Wells-indeling

Traumatic brain injury (TBI) is a major clinical challenge with high morbidity and mortality. Despite decades of pre-clinical research, no proven ...

Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Microglia in Immunocompetent Mice Brain via Non-Invasive Transnasal Route

Transplantatie van door de mens geïnduceerde pluripotente stamcel-afgeleide microglia in immunocompetente muizenhersenen via niet-invasieve transnasale route

Microglia are the specialized population of macrophage-like cells of the brain. They play essential roles in both physiological and pathological brain ...

Transplantation of Human Stem Cell-Derived GABAergic Neurons into the Early Postnatal Mouse Hippocampus to Mitigate Neurodevelopmental Disorders

Transplantatie van menselijke stamcel-afgeleide GABAerge neuronen in de vroege postnatale muis hippocampus om neurologische ontwikkelingsstoornissen te verminderen

A reduced number or dysfunction of inhibitory interneurons is a common contributor to neurodevelopmental disorders. Therefore, cell therapy using ...

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Organotypische culturen van volwassen menselijke cortex als een ex vivo model voor menselijke stamceltransplantatie en validatie

Neurodegenerative disorders are common and heterogeneous in terms of their symptoms and cellular affectation, making their study complicated due to the ...

Culturing Human Midbrain Dopaminergic Neurons for Phenotypic Profiling

Phenotypic Profiling of Human Stem Cell-Derived Midbrain Dopaminergic Neurons

Generating Neuronal Phenotypic Profiles - A Protocol to Culture and Image Human Midbrain Dopaminergic Neurons (Video) | JoVE

Fenotypische profilering van dopaminerge neuronen in de middenhersenen van menselijke stamcellen

Parkinson&#39;s disease (PD) is linked to a range of cell biological processes that cause midbrain dopaminergic (mDA) neuron loss. Many current in vitro ...