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•
08:24 min
July 27th, 2021
DOI :
10.3791/61689-v
Chapters
0:04
Introduction
0:51
Cell Preparation
3:58
Proximity Ligation Assay (PLA)
6:20
Results: Representative Replisome Encounter Visualization
7:52
Conclusion
Transcript
この技術は、レプリソーム抗原タグ付きDNA付加体との遭遇の視覚化を容易にし、免疫検出に適したDNA構造または病変を持つ任意のタンパク質との相互作用に拡張することができます。この方法は、集団全体ではなく個々の細胞内の相互作用頻度を評価するために使用でき、細胞に損傷を与えることなく、細胞周期依存的な相互作用をその場で視覚化することができます。手順を実演するのは、サイドマン研究所のポスドクであるイシャニ・マジュムダールです。
実験の前日に、細胞接着溶液で前処理した35ミリリットルのガ
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Summary
DNA付加体との複製フォーク衝突は二本鎖切断を誘発する可能性がありますが、レプリソームとブロッキング病変の間の相互作用についてはあまり知られていません。近接ライゲーションアッセイを使用して、これらの遭遇を視覚化し、レプリソーム組成の結果を特徴付けました。
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