Name: dry root rot disease assays in chickpea: a detailed methodology
Uploaded: 2021-01-17T13:00:00
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Projekte im M.S.K-Labor werden vom National Institute of Plant Genome Research unterstützt. VI erkennt DBT- JRF an (DBT/2015/NIPGR/430). Wir danken Den Auszubildenden, Miss. Rishika, Mr. Jayachendrayan und Miss. Durgadevi für die technische Hilfe bei Videoaufnahmen und Herrn Sandeep Dixit, Miss. Anjali und Dr. Avanish Rai für die kritische Bewertung von Rohdaten und den Manuskriptakten. Wir danken Herrn Rahim H Tarafdar und Herrn Sunder Solanki für ihre Hilfe im Labor. Wir würdigen das DBT-eLibrary Consortium (DeLCON) und die NIPGR Library für den Zugang zu e-Ressourcen und der NIPGR Plant Growth Facility für die Unterstützung/Raum für das Pflanzenwachstum.

1. Isolierung von R. bataticola und Lagerung
<ol><li>Details zum Kichererbsengenotyp und DRR-Symptomen<ol>
<li>Verwenden Sie Kichererbsenpflanzen (Genotyp, JG 62), die in der Regel typische DRR-Symptome zeigen, wie trockene, spröde Primärwurzel ohne laterale Wurzeln und Mikrosklerotie unter der Rinde und innerhalb der Pith1,3.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Abholung und Waschen<ol>
<li>Entwurzelung stagnieren Pflanzen, die Symptome wie trockene strohfarbene ...

<ol>
	<li>Sharma, M., Ghosh, R., Pande, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+root+rot+(Rhizoctonia+bataticola+(Taub.)+Butler):+an+emerging+disease+of+chickpea+-+where+do+we+stand.">Dry root rot (Rhizoctonia bataticola (Taub.) Butler): an emerging disease of chickpea - where do we stand.</a> Archives of Phytopathology and Plant Protection. 48 (13-16), 797-812 (2015).</li><li>Sinha, R., Irulappan, V., Mohan-Raju, B., Suganthi, A., Senthil-Kumar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+drought+stress+on+simultaneously+occurring+pathogen+infection+in+field-grown+chickpea.">Impact of drought stress on simultaneously occurring pathogen infection in field-grown chickpea.</a> Scientific Reports. 9 (1), (2019).</li><li>Nene, Y., Haware, M., Reddy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chickpea+diseases:+resistance+screening+techniques,+information+bulletins+No.+10.+Patancheru.">Chickpea diseases: resistance screening techniques, information bulletins No. 10. Patancheru.</a> Information Bulletin No. 10. Patancheru, A.P., India: International CroDS Research Institute for the Semi-Arid Tropics. , 1-10 (1981).</li><li>Pande, S., Krishna Kishore, G., Upadhyaya, H. D., Narayana Rao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+sources+of+multiple+disease+resistance+in+mini-core+collection+of+chickpea.">Identification of sources of multiple disease resistance in mini-core collection of chickpea.</a> Plant Disease. , (2006).</li><li>Pandey, P., Irulappan, V., Bagavathiannan, M. V., Senthil-Kumar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+combined+abiotic+and+biotic+stresses+on+plant+growth+and+avenues+for+crop+improvement+by+exploiting+physio-morphological+traits.">Impact of combined abiotic and biotic stresses on plant growth and avenues for crop improvement by exploiting physio-morphological traits.</a> Frontiers in Plant Science. 8, (2017).</li><li>Irulappan, V., Senthil-Kumar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morpho-physiological+traits+and+molecular+intricacies+associated+with+tolerance+to+combined+drought+and+pathogen+stress+in+plants.">Morpho-physiological traits and molecular intricacies associated with tolerance to combined drought and pathogen stress in plants.</a> Biotechnologies of Crop Improvement, Volume 3: Genomic Approaches. , (2018).</li><li>Jensen, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+methods+for+fungal+brood+disease+research.">Standard methods for fungal brood disease research.</a> Journal of Apicultural Research. 52 (1), 1-39 (2013).</li><li>Agrios, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Plant Pathology: Fifth Edition. , 9780080473 (2004).</li><li>Coley-Smith, J. R., Cooke, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+and+germination+of+fungal+sclerotia.">Survival and germination of fungal sclerotia.</a> Annual Review of Phytopathology. , (1971).</li><li>Nagamma, G., Saifulla, M., Sab, J., Pavitra, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Screening of chickpea genotypes against dry root rot caused by Macrophomina phaseolina (tassi) goid. 10 (4), 1795-1800 (2015).</li><li>Infantino, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+techniques+and+sources+of+resistance+to+root+diseases+in+cool+season+food+legumes.">Screening techniques and sources of resistance to root diseases in cool season food legumes.</a> Euphytica. 147 (1-2), 201-221 (2006).</li><li>Khaliq, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+control+of+dry+root+rot+of+chickpea+caused+by+Rhizoctonia+bataticola+under+the+natural+field+condition.">Integrated control of dry root rot of chickpea caused by Rhizoctonia bataticola under the natural field condition.</a> Biotechnology Reports. 25, 00423 (2020).</li></ol>

Die Blotting-Papier-Technik bietet einen einfachen Ansatz, um Kichererbsen-Genotypen unter Laborbedingungen zu untersuchen. Die Dip-Impfung ermöglicht die untersuchung der Wechselwirkung auf zeitlicher Basis mit einfacher Kontrolle der Inokulumbelastung (Zusatzabbildung 1) und erleichtert das In-vitro-Screening. Darüber hinaus können auch junge Sämlinge verwendet werden. Fünf Tage alte Pilzkultur (Abbildung 1B) kann genug Inokulum liefern, um die Pflanzen zu infizieren....

Trockenwurzelfäule (DRR) ist eine der wirtschaftlich signifikanten Krankheiten bei Kichererbsen1,2. Es ist eine wurzelspezifische Krankheit, die durch Rhizoctonia bataticola (Teleomorph, Macrophomina phaseolina)verursacht wird. Infizierte Pflanzen haben seitliche Wurzeln und besitzen spröde Taproots und gelbes Laub1,3. DRR unter Dürrestress wurde berichtet, eine aufkommende Bedrohung für kichererbsenanbau1,2,3. Darüber hinaus wird berichtet, dass die DRR-Inzidenz unter Dürrestress unter Feldbedingungen1,2,3verschlimmert wird. DRR ist in Regengebieten häufiger als in bewässerten Feldern4. Die Verwendung resistenter Sorten ist der Weg, um die Krankheit zu überwinden und Fungizid-Einsatz zu umgehen1,13. Da Kichererbsen-Keimplasma, das auf der ganzen Welt verfügbar ist, genetische Variationen für das Merkmal5aufweist, sind das Screening und die Identifizierung resistenter/anfälliger Genotypen für die molekulare Züchtung für die Verbesserung der Ernte von entscheidender Bedeutung.
Robuste, einfache und kostengünstige Krankheitstests sind unerlässlich, um R. bataticola Infektionsmuster in Kichererbsen zu untersuchen. Die primäre Krankheit Assay verwendet, um die Reaktion von Kichererbsen-Genotypen auf R. Bataticola-Infektion zu beobachten ist die Blotting-Papier-Technik1,4. Es ist eine einfache Technik und kann mit flüssigem Pilzinokulum, Sämlingen mit Wurzeln und sterilem Blotting-Papier ausgeführt werden. Diese Technik wurde jedoch nicht maximal verwendet, da in der Literatur kein Step-by-Step-Protokoll verfügbar ist.
In der Zwischenzeit beinhaltet die Kranke Topftechnik die Vorbereitung einer potentiellen Krankenkultur und die Auferlegung von Dürrestress. Angesichts der Tatsache, dass Dürrestress die InzidenzderDRR-Krankheit 3 verschlimmert, ist es wichtig, die Pflanzen-Pathogen-Wechselwirkung unter Dürrestress zu untersuchen6,7. Die Sick-Topf-Technik bietet die Plattform für eine solche simultane Studie, fördert bessere Möglichkeiten für das Keimplasma-Screening und das Verständnis der mechanistischen Basis der Interaktion. Pathomorphologische Veränderungen wie eine Erhöhung der Wurzellänge und eine Verringerung der lateralen Wurzelzahl – inhärent für DIE DRR-Krankheit – können mit der Krankentopftechnik1,3,7angegangen werden.
Hierin wird ein detailliertes Protokoll zum Blotting von Papier und Krankentopftechniken vorgestellt, mit dem die Wechselwirkung zwischen Kichererbsen und R. Bataticola und Screen-Kichererbsen-Keimplasma untersucht werden kann. Die Einzelheiten der in der Studie verwendeten Materialien sind in der Tabelle der Materialienangegeben.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Fungus- Rhizoctonia bataticola</td>
			<td>Pathogen inoculum</td>
			<td>Indian Type Culture Collection No. 8365</td>
			<td>GenBank: MH509971.1, ITCC 8635 (https://www.iari.res.in/index.php?option=com_content&#38;view=article&#38; id=1251&#38;Itemid=1370)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soilrite mix</td>
			<td>Soil medium in the lab</td>
			<td>Keltech Energies Limited, Bangalore, India</td>
			<td>http://www.keltechenergies.com/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Blotting paper to support the plant growth</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>http://himedialabs.com/catalogue/chemical2017/index.html#374</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pot</td>
			<td>Growing plants</td>
			<td>10 and 30 cm size pots</td>
			<td>Routinely used nursery pots, for example, https://dir.indiamart.com/impcat/nursery-pots.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potato dextrose agar/broth</td>
			<td>Culture and maintain the fungus</td>
			<td>Cat# 213400, DifcoTM, MD, USA</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/bd-difco-dehydrated-culture-media-potato-dextrose-agar-3/p-4901946</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Culture the fungus</td>
			<td>LOM-150-2, S/N AI13082601-38, MRC, incubator, and shaker</td>
			<td>http://www.mrclab.com/productDetails.aspx?pid=91131</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Growth chamber</td>
			<td>Growing plants in controlled condition</td>
			<td>Model No. A1000, Conviron, Canada</td>
			<td>https://www.conviron.com/products/gen1000-reach-in-plant-growth-chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar airflow</td>
			<td>Carrying out aseptic exercises</td>
			<td>Telstar, Bio II advance, Class II cabinet, EN-12469-2000</td>
			<td>https://www.telstar.com/lab-hospitals-equipment/biological-safety-cabinets/bio-ii-advance-plus/, http://www.atlantisindia.co.in/laminar-air-flow.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mesh</td>
			<td>Filtering the fungal mycelia</td>
			<td>Nylon mosquito net</td>
			<td>Mesh with 0.6-1 mm diameter pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave</td>
			<td>Autoclaving media and chickpea seeds</td>
			<td>Autoclave</td>
			<td>http://www.scientificsystems.in/autoclave</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopes</td>
			<td>Visualizing the infection ang fungal mycelia</td>
			<td>SMZ25 / SMZ18, Research Stereomicroscopes, Leica EZ4 educational stereomicroscope</td>
			<td>https://www.microscope.healthcare.nikon.com/products/stereomicroscopes-macroscopes/smz25-smz18 
			https://www.leica-microsystems.com/products/stereo-microscopes-macroscopes/p/leica-ez4/ 
			https://www.microscopyu.com/museum/eclipse-80i</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing balance</td>
			<td>Weighing fungus and chemicals</td>
			<td>Sartorius Electronic Weighing Balance, BSA 4202S-CW</td>
			<td>https://www.sartorius.com/en/products/weighing/laboratory-balances</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WGA-FITC</td>
			<td>Fungus staining</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/l4895?lang=en&#38;region=IN</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aniline blue</td>
			<td>Fungus staining</td>
			<td>Himedia</td>
			<td>http://www.himedialabs.com/intl/en/products/Chemicals/Dyes-Indicators-and-Stains/Aniline-blue-Water-soluble-Practical-grade-GRM901</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dry root rot disease assays in chickpea: a detailed methodology

Die Trockenwurzelfäule (DRR)-Krankheit ist eine sich abzeichnende biotische Stressgefahr für den Kichererbsenanbau auf der ganzen Welt. Es wird durch einen bodengestützten Pilzerreger, Rhizoctonia bataticolaverursacht. In der Literatur sind umfassende und detaillierte Schritt-für-Schritt-Protokolle zu Krankheitsassays spärlich. Dieser Artikel enthält vollständige Details zu den Schritten bei der Einrichtung einer Blotting-Papiertechnik zum schnellen Screening von Genotypen auf DRR-Resistenz. Die Blotting-Papiertechnik ist einfach und kostengünstiger. Eine andere Methode, die auf dem Krankentopfansatz basiert, ist eine Mimik natürlicher Infektion und kann angewendet werden, um die interagierenden Komponenten – Pflanze, Krankheitserreger und Umwelt – zu untersuchen, die am Krankheitsdreieck beteiligt sind.
Darüber hinaus kommt DRR in der Natur vor allem in regengespeisten Kichererbsenanbaugebieten vor, wo die Bodenfeuchtigkeit mit fortschreitendem Pflanzenwachstum abgeht. Dürrestress ist dafür bekannt, Kichererbsenpflanzen für DIE DRR-Krankheit prädisponieren. Das pathomorphologische und molekulare Verständnis der Pflanzen-Pathogen-Interaktion unter Dürrestress kann den Weg für die Identifizierung von ELITE-DRR-resistenten Sorten aus dem Kichererbsen-Keimplasmapool ebnen. Dieser Artikel enthält eine schrittweise Methodik für die Vorbereitung eines Krankentopfs und den anschließenden Krankheitstest. Insgesamt werden die hier vorgestellten Informationen den Forschern helfen, R. bataticola pilzinoculum vorzubereiten, diesen Erreger zu erhalten, die Blotting-Papier-Technik einzurichten, Krankenkultur und Krankentopf vorzubereiten und Krankheitserreger-Infektionen in Kichererbsenpflanzen zu bewerten.

Diese Studie zielte darauf ab, Techniken wie das Bloten von Papier und Kranke Topftechniken zu demonstrieren, um das pathomorphologische und molekulare Verständnis der Pflanzen-Pathogen-Interaktion unter Dürrestress zu erleichtern. Um dies zu erreichen, wurden Pflanzen mit DRR-Symptomen1,3,4 aus einem Kichererbsenfeld gesammelt, und der Pilz wurde mit der Hyphal-Spitzenmethode8isoliert. R. bataticol...

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Dry Root Rot Disease Assays in Chickpea: a Detailed Methodology

Diese Studie stellt Methoden zur Untersuchung der pathomorphologischen und molekularen Mechanismen vor, die der Kichererbsen–Rhizoctonia-Bataticola-Interaktion zugrunde liegen. Die Blotting-Papier-Methode ist nützlich, um Kichererbsen-Genotyp-Antworten schnell zu studieren, während die kranke Topf-basierte Methode verwendet werden kann, um gleichzeitig Dürre und R. Bataticola-Infektion und Bildschirm für tolerante Genotypen aufzuerlegen.

Dry Root Rot Disease Assays in Chickpea: eine detaillierte Methodik

Dry root rot (DRR) disease is an emerging biotic stress threat to chickpea cultivation around the world. It is caused by a soil-borne fungal pathogen, ...

Das Hauptziel dieser Studie ist es, eine detaillierte Methodik der Trockenwurzelfäule-Krankheit Assays zu demonstrieren, wie Blotting Papiertechnik und KrankentopfTechnik. Diese Techniken werden hilfreich sein, um die Wechselwirkung zwischen Kichererbsenpflanze und Rhizoctonia bataticola zu studieren. Das Verständnis der Wechselwirkung von Kichererbsen mit dem Pilzerreger Rhizoctonia bataticola ist landwirtschaftlich wichtig.Dazu werden vielseitige und hochreproduzierbare Assays benötigt. Hier werden zwei Assays gezeigt, die in unserem Labor weit verbreitet sind. Der eine von ihnen ist das Blotting auf Papierbasis, und der andere ist ein kranker Topf-basierter Assay.Um den Blotting-Papier-Test auszuführen, bereiten Sie Den Rhizoctonia bataticola Pilz inoculum vor, indem Sie von der schrägen Kultur zur Petriplatte und dann zur flüssigen Kultur aufsteigen. Bereiten Sie Kichererbsen-Kindergarten durch, Saat Samen in einem großen Topf. Entwurzeln Sie sie und legen Sie sie in das flüssige Inokulum und legen Sie sie auf Fleckpapier.Achten Sie auf Krankheitssymptome, nämlich Nekrose an der Wurzel, Wurzelfäule, und Blattvergilbung acht Tage nach der Impfung. Hier ist eine Nussschale, die Schritte in der Blotting-Papier-Technik. Um den kranken Topf Assay auszuführen, impfen Kichererbsenmehl mit Pilz.Nach der Inkubation bei 30 Grad Celsius für 15 Tage wird eine Krankheitskultur erlangt. Dann pulverieren und mit Topfmischung mischen. Säen Sie Samen auf Kontrolltopf und Krankentopf.Beachten Sie an den folgenden Tagen 10 Tage nach der Aussaat die Symptome, nämlich Nekrose an der Wurzel, Wurzelfäule und Blattvergilbung auf den infizierten Pflanzen. Der Kranke Topf kann verkleinert und für großflächige Screenings verwendet werden. Hier ist eine Nussschale der Schritte in der Krankentopftechnik.Rhizoctonia bataticola ist ein sich entwickelnder Erreger. Dieser Pilz produziert Hyphen und Mikrosklerotie, die während der Pflanzeninfektion als primäres Inuclum fungieren. Die reine Kultur, die durch die isolative Methode angewendet wird, wird für die Assays verwendet.Der Schlüsselpunkt für diese erfolgreichen Assays ist die optimale Inokulumbelastung. Hier beginnt die Demonstration der Blotting-Papiertechnik. Um flüssige Rhizoctonia bataticola inoculum zuzubereiten, impfen Sie die 500 ml Brühe mit dem Pilzagar-Stecker aus drei Tagen alten frischen Tellerkultur und bebrüten den Kolben in einem Brutkasten bei 28 Grad Celsius für fünf Tage.Filtern Sie die dunkelgraue Pilzmycelia mit Mikrosklerotie heraus. Setzen Sie in autoklaviertem Wasser und entfernen Sie die Medien. Wieder filtern Sie die Mycelia heraus und entfernen Sie Feuchtigkeit, indem Sie die Myzelelie für ein paar Minuten trocknen.100 Gramm Pilzinokulum in 200 ml autoklaviertem Wasser in einer Marmeladenflasche aussetzen und richtig mischen. Entwickeln Sie Kichererbsen-Kinderzimmer durch Aussaat von Oberflächen sterilisierten Samen in Solerant. Entwurzeln Sie die Pflanzen acht Tage nach der Aussaat, waschen Sie sie und spülen Sie sie mit autoklavierten RO. Nehmen Sie ein Blotting-Papier und falten Sie es einmal und legen Sie die Hälfte davon auf das Tablett.Machen Sie es nass mit autoklaviertem Wasser. Nehmen Sie Pflanzen und tauchen Sie in das Inokulum für 30 Sekunden mit intermittierenden Auf- und Abbewegung. Legen Sie die Pflanzen so, dass Wurzeln im Blatt bedeckt sind und Dielien draußen bleiben.Falten Sie die andere Hälfte und biegen Sie das Papier. Zur Kontrolle tauchen Sie die Pflanzen in autoklaven Wasser, halten Sie die Schalen acht Tage lang in einer Wachstumskammer. Ergebnisse. Beachten Sie die Symptome wie Blattvergilbung, Wurzelfäule, Nekrose in der Wurzel und Verringerung der seitlichen Wurzelzahl.Hier beginnt die Demonstration der Krankentopftechnik. Nehmen Sie ein Kilogramm kommerzielle Kichererbsensamen. Die Samen mit Leitungswasser waschen und mit dem RO-Wasser wieder waschen.Die Samen fünf Stunden einweichen. Erneut die Samen mit RO-Wasser waschen 300 Gramm in einer Marmeladenflasche hinzufügen. Autoklavieren Sie sie bei 121 LVS für 15 Minuten zweimal kontinuierlich.Nach dem Abkühlen die Flasche durch den laminaren Fluss übertragen. Impfen Sie die Flaschen mit drei Pilzagar-Steckern etwa vier Millimeter quadratische Größen und schütteln Sie es gut, um richtig zu mischen. Die Flaschen einwickeln und 15 Tage lang in einem Brutkasten bei 30 Grad Celsius bebrüten.Beobachten Sie für die Flaschen mit dunklem mycelialwachstum um die Kichererbsensamen und entfernen Sie die Samen. Trocknen Sie sie bei Raumtemperatur und pulverisieren Sie sie. Rhizoctonia bataticola Pulver mit Solorit mischen und fünf Tage bei Raumtemperatur aufbewahren.Oberfläche sterilisieren die GT62 Samen und säen sie in zwei Zentimeter Tiefe. Ergebnisse. Beobachten Sie die 90%-Sterblichkeit im Krankentopf. 10 Tage nach der Aussaat, beobachten Sie die Symptome wie Nekrose in den Wurzeln und Verringerung der seitlichen Wurzelzahl und Blattvergilbung in den folgenden Tagen.Krankentopf kann auch im Feldboden zubereitet werden. Dürre und Rhizoctonia bataticola Infektion. Stellen Sie Dürrestress im Krankentopf auf, indem Sie das Wasser zurückhalten.Hier sind die Pflanzen zu sehen, die der Kontrolle, Trockenheit, Krankheitserreger und gleichzeitiger Dürre und Krankheitserregerstress ausgesetzt sind. Beachten Sie die Symptome, nämlich mehr Nekrose, Wurzelfäule und Reduktion der lateralen Wurzelzahl und Wurzellänge in kombinierter Stressbehandlung im Vergleich zur rein pathogenen Behandlung. Schlussfolgerungen. Blotting Papiertechnik kann In Vitro Bedingungen durchgeführt werden.Kranke Topftechnik kann unter In-Vivo-Bedingungen ausgeführt werden. Im kranken Hafen kann abiotischer Stress, nämlich Dürrestress, zusammen mit der Krankheitserreger-Infektion auferlegt werden. Mit diesen Techniken kann man das Infektionsmuster des Erregers untersuchen.Die meisten physiologischen Veränderungen treten während der Kichererbsen-Rhizoctonia Bataticola Interaktion auf, und auch die Kichererbsen-Genotypen auf Resistenz zu überprüfen. Der Blotting-Papier-Assay ist sehr nützlich, um Qualitätsproben für Mikroskopie- und molekularbiologische Studien zu generieren. Der Kranke Topf-Assay, der die natürlichen Infektionsbedingungen imitiert, ist für das Screening von Kichererbsen-Keimplasma anwendbar.

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