Name: incremental temperature changes for maximal breeding and spawning in astyanax mexicanus
Uploaded: 2021-02-14T12:30:00
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Wir danken David Martasian, Diedre Heyser, Amy Parkhurst, Craig Foote und Mandy Ng für wertvolle Beiträge zur Kultureinrichtung des Jeffery-Labors A. mexicanus. Die Forschung im Jeffery-Labor wird derzeit durch den NIH-Zuschuss EY024941 unterstützt.

Dieses Verfahren wurde von den Institutional Animal Care Guidelines der University of Maryland, College Park (derzeit IACUC 469 #R-NOV-18-59; Projekt 1241065-1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61708/61708fig1.jpg"> Abbildung 1. Kalender während einer Brutwoche und einer Nichtbrutwoche. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61708/61708fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größer...

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	<li>Jeffery, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cavefish+as+a+model+system+in+evolutionary+developmental+biology.">Cavefish as a model system in evolutionary developmental biology.</a> Developmental Biology. 231, 1-12 (2001).</li><li>Jeffery, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+model+systems+in+evo-devo:+cavefish+and+mechanisms+of+microevolution.">Emerging model systems in evo-devo: cavefish and mechanisms of microevolution.</a> Evolution &amp; Development. 10, 265-272 (2008).</li><li>Jeffery, W. 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E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR+mutagenesis+confirms+the+role+of+oca2+in+melanin+pigmentation+in+Astyanax+mexicanus.">CRISPR mutagenesis confirms the role of oca2 in melanin pigmentation in Astyanax mexicanus.</a> Developmental Biology. 441, 313-318 (2018).</li></ol>

Astyanax mexicanus ist ein neuartiges biologisches Modell, das häufig laicht und leicht im Labor gezüchtet werden kann1,2. Da wir uns für die Entwicklungsmechanismen interessieren, die evolutionären Veränderungen bei A. mexicanus-Höhlenfischen zugrunde liegen, ist die Produktion und Verwendung von Embryonen für unsere Forschungsziele von entscheidender Bedeutung. Der Hauptzweck der Erhaltung eines erwachsenen Fischbestandes ist die Produk...

Der Teleost Astyanax mexicanus hat eine augenbewohnende (Oberflächenfische) Form und viele verschiedene blinde Höhlenbewohner (Höhlenfische) Formen1,2. Höhlenfische haben sich in ständiger Dunkelheit und unter Nahrungsbeschränkungen entwickelt, was zum Auftreten neuartiger konstruktiver und regressiver Merkmale führt3. Zu den konstruktiven Merkmalen gehören eine Zunahme der Geschmacksknospen und der Kiefergröße, Sinnesorgane der Seitenlinie und Fettreserven. Zu den regressiven Merkmalen gehören der Verlust oder die Verringerung von Melaninpigmentierung, Augen und Verhaltensweisen wie Schlaf, Schulbildung und Aggression. Ein Attribut des Astyanax-Systems ist die vollständige Fruchtbarkeit zwischen den beiden Formen, die die Verwendung von quantitativen Trait Loci (QTL) ermöglicht, um die genomischen Regionen zu bestimmen, die mit der konstruktiven und regressiven Evolution verbunden sind4,5,6,7. A. mexicanus bietet ein vorteilhaftes System zur Untersuchung der Entwicklung, da es dazu gebracht werden kann, häufig im Labor zu laichen. Die Embryonen von A. mexicanus sind durchscheinend, etwas größer als die von Zebrafischen, werden in großen Mengen produziert und entwickeln sich in etwa 8-12 Monaten zu geschlechtsreifen Erwachsenen. Ihre Maximale Laichkapazität beträgt etwa 5 Jahre. Dieses Protokoll beschreibt den Arbeitsablauf, der in einer A. mexicanus-Kulturanlage während einer typischen Brutwoche benötigt wird, und enthält die Details der Wartung des Fischsystems und des Temperaturkontrollregimes für maximales Laichen.
A. mexicanus ist ein tropischer Fisch, der in Flüssen lebt, die in Kalksteinplateaus (Oberflächenfische) und in Pools in Kalksteinhöhlen (Höhlenfische)entstehen 8. Kalkstein löst sich auf, um hartes Wasser zu produzieren, und A. mexicanus gedeiht in hartem Wasser. Fische, die an harte Wasserbedingungen angepasst sind, können eine Reihe von salzigen Bedingungen tolerieren, brüten aber im Allgemeinen in bestimmten9. Die Induktion des Laichverhaltens wird durch eine Kombination von Faktoren erreicht. Da Fische kaltblütig sind und auf ihre Umgebung angewiesen sind, um die Homöostase aufrechtzuerhalten, reagiert ihr Stoffwechsel empfindlich auf Umweltveränderungen und sie reagieren schneller auf Stressoren10. A. mexicanus sollte in aquatischen Systemen unter sorgfältig regulierten Bedingungen von Wasserfluss, pH-Wert, Leitfähigkeit, osmotischem Druck, Beleuchtung und Wassertemperaturen kultiviert werden.
Im Jeffery-Labor werden Fische in zwei fließenden Wassersystemen gehalten: (1) einem "Babysystem" für junge erwachsene Fische vor der Geschlechtsreife und (2) einem erwachsenen (oder Haupt-) System für geschlechtsreife, brütende Erwachsene. Das "Babysystem" besteht aus 8 L und 15 L Tanks, die mit fließendem Wasser versorgt werden. Das "Babysystem" wird von Jungfischen und jungen metamorphosisierten Jungtieren ausgesät, die aus Larven in kleineren (1-10 L) Tanks gezüchtet werden, in denen wöchentlich Wasser ausgetauscht wird. Larven, Jungtiere und Jungtiere sind extrem nahrungsabhängig und müssen einmal täglich mit Lebendfutter (Solegarnelen) gefüttert werden, um eine hohe Überlebensrate zu gewährleisten. Junge Jungtiere aus dem "Babysystem" werden nach etwa 1-1,5 Jahren in das Erwachsenensystem eingeordnet. Zuerst werden sie mit pulverisierten Tetraflocken gefüttert und nach weiterem Wachstum in das reguläre Fütterungsregime für Erwachsene überführt. Die Geschlechtsreife kann durch das Bauchvolumen bei Frauen beurteilt werden, und Methoden zur Bestimmung des Geschlechts wurden beschrieben11. Im Erwachsenensystem wird das Wasser automatisch in 42-L-Tanks 3 Mal pro 24-Stunden-Zeitraum ausgetauscht. Das Erwachsenensystem wird täglich durch visuelle Inspektion und automatische Temperatur-, pH- und Leitfähigkeitswerte von Sonden überwacht. Der optimale pH-Wert liegt bei etwa 7,4 und kann zwischen 6,8 und 7,5 liegen, die Basistemperatur des Systems beträgt 72/73 ° F und die ideale Leitfähigkeit liegt zwischen 600 und 800 mS. Automatische Messwerte werden auf einem Controller-Bildschirm angezeigt, und visuelle Überprüfungen des Wasserdrucks werden an Imgühlungsmessern abgelesen, die im gesamten System verteilt sind. Unabhängige Überprüfungen der Wasserqualität werden wöchentlich durchgeführt, indem die Temperatur getestet und die Wasserqualitätsparameter für pH-Wert, Ammoniak und Nitrat mit einem kolorimetrischen Test gemessen werden. Der Ammoniak- und Nitratgehalt wird auf oder nahe Null gehalten, indem dem System nützliche Bakterien (z. B. Nutafin Cycle) hinzugefügt werden. Die Raumbeleuchtung wird über einen Timer gesteuert, der auf 14-Stunden-Licht und 10-Stunden-Dunkelzeiten eingestellt ist. Zusätzlich zu den oben genannten allgemeinen Wasserqualitätsparametern müssen die folgenden Überlegungen während einer Brutwoche besonders beachtet werden.
Die erste Überlegung ist die Photoperiode, da Fische (sogar Höhlenfische im Labor) auf Lichtzyklen angewiesen sind, um ihre zirkadiane Uhr einzustellen. Circadiane Rhythmen können alles von der Zucht und Fütterung bis hin zur Gesundheit des Immunsystemsbeeinflussen 12,13 und müssen für maximale gesundheitliche Vorteile konsistent sein. Fische werden in einem Flaufwassersystem auf einer 14-stündigen hellen und 10-stündigen dunklen Fotoperiode gehalten. Die Oberflächenfische beginnen im Allgemeinen eine Stunde nach der Verdunkelung des Systems mit dem Laichen, und das während dieser Zeit eingebrachte Licht kann das Laichen stören und beenden. Das Laichen blinder Höhlenfische wird weniger durch Licht gestört. Im Vergleich zum Laichen von Oberflächenfischen verzögert sich das Laichen von Höhlenfischen und beginnt in der Regel vier bis fünf Stunden nach der Verdunkelung des Systems.
Die zweite Überlegung ist die Ernährung. Erwachsene Fische werden normalerweise einmal täglich mit Tetraflocken gefüttert. Vor dem Laichen werden Fische mit einer proteinreichen Diät gefüttert, die mit zusätzlichen Mengen an Tetraflocken und anderen Lebensmitteln ergänzt wird: Eigelbflocken und gelegentlich lebende kalifornische Schwarzwürmer (Lumbriculus variegatus), um den Proteinverlust aufgrund der Eierproduktion während des vorherigen Laichzyklus auszugleichen. Während der Brutwoche werden die Fische zweimal täglich gefüttert, einmal morgens und wieder nachmittags/abends. Fischfütterung nur einmal täglich, aber mit einer einzigen sehr großen Portion Futter sollte vermieden werden, da dies zu Unterernährung führen kann14.
Die dritte Überlegung ist der Raum. Der Platzbedarf basiert auf der durchschnittlichen Körpermasse eines Erwachsenen sowie Verhaltensüberlegungen, z. B. ob die Fische Schwarmverhalten oder aggressives Verhalten haben. Über- oder unterfüllte Tanks können zu erhöhter Aggression und ständigem Stress führen, was Fische anfällig für Verletzungen durch ihre Tankkameraden macht und nur ungern am Laichen teilnimmt15. Wir beherbergen normalerweise 10-20 Fische pro 42 L Tank.
Die vierte Überlegung ist die Temperatur. Wie oben erwähnt, sind Fische kaltblütige Tiere und auf die Umwelt angewiesen, um die Körpertemperatur aufrechtzuerhalten. Da die Temperatur einen direkten Einfluss auf Stoffwechselprozesse hat, können Temperaturänderungen Verhaltensänderungen bei Fischen auslösen16. Dieses Zuchtprogramm besteht aus zweiwöchigen Temperaturzyklen: Die erste Woche führt zu einem Temperaturanstieg von 78 ° F und die nächste Woche zu einer statischen Temperatur von 72 ° F. Während der ersten (Brut-)Woche werden jeden Abend kunststoffumrandige Zuchtnetze am Boden der Becken platziert. Die Brutnetze dienen als Barriere zwischen den Fischen in den Becken und den laichen Eiern, die sonst verzehrt würden. Die Temperatur wird bis Mitte der Woche um 2 ° F pro Tag auf maximal 78 ° F erhöht, und das Laichen wird entsprechend dem Lichtzyklus in den ersten 2-3 Abenden dieser Woche induziert. Die Temperatur wird dann an den verbleibenden Tagen der Woche um 2 ° F auf 72 ° F gesenkt, und die Basistemperatur wird bis zum Beginn der nächsten Brutwoche beibehalten. Die Zucht wird in der Regel nicht mehr als zweimal im Monat stimuliert, damit sich die Fische erholen können.
Insgesamt ermöglicht diese Methode das Laichen großer Mengen hochwertigster Embryonen über einen längeren Zeitraum.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:874px;" width="875">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Blackworms</td>
			<td style="width:299px;">Eastern Aquatics, Lancaster, PA</td>
			<td style="width:161px;">None</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Breeding Nets</td>
			<td style="width:299px;">Custom made</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Brine shrimp eggs</td>
			<td style="width:299px;">AquaCave Lake Forest, IL.</td>
			<td style="width:161px;">None</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Colorimetric test kit</td>
			<td style="width:299px;">Petco</td>
			<td style="width:161px;">SKU:11916</td>
			<td>API Freshwater pH Test Kit</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Egg yolk flakes</td>
			<td style="width:299px;">Pentair, Minneapolis, MN</td>
			<td style="width:161px;">None</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Fingerbowls</td>
			<td style="width:299px;">Carolina Biological Supply</td>
			<td align="right" style="width:161px;">741004</td>
			<td>Culture dishes, 4.5 in, 250 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Hand held nets</td>
			<td style="width:299px;">Any Pet Store</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Incubator for embryos</td>
			<td style="width:299px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:161px;">51-029-321HPM</td>
			<td>405 L</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Instant Ocean sea salts</td>
			<td style="width:299px;">Spectrum Brands, Blacksburg, VA</td>
			<td style="width:161px;">None</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Methylene Blue</td>
			<td style="width:299px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td style="width:161px;">M9140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Pasteur Pipettes</td>
			<td style="width:299px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:161px;">13-678-20</td>
			<td>5.75 in.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Net soaking solution</td>
			<td style="width:299px;">Any Pet Store</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Nutrafin Cycle</td>
			<td style="width:299px;">Amazon</td>
			<td style="width:161px;">None</td>
			<td>Bacterial boost</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Refrigerator for live feed</td>
			<td style="width:299px;">Any source</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Stereomicroscope</td>
			<td style="width:299px;">Any source</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Thermometer</td>
			<td style="width:299px;">Any source</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:248px;">Tetra Tropical Crisps</td>
			<td style="width:299px;">Spectrum Brands, Blacksburg, VA</td>
			<td style="width:161px;">None</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

incremental temperature changes for maximal breeding and spawning in astyanax mexicanus

Der mexikanische Salmler Astyanax mexicanusist ein aufstrebendes Modellsystem für Entwicklungs- und Evolutionsstudien. Die Existenz von Augenoberflächen- (Oberflächenfischen) und blinden Höhlenmorphen (Höhlenfische) in dieser Art bietet die Möglichkeit, die Mechanismen zu hinterfragen, die der morphologischen und Verhaltensevolution zugrunde liegen. Höhlenfische haben neuartige konstruktive und regressive Eigenschaften entwickelt. Zu den konstruktiven Veränderungen gehören Eine Zunahme der Geschmacksknospen und Kiefer, der Sinnesorgane der Seitenlinie und des Körperfetts. Die regressiven Veränderungen umfassen den Verlust oder die Verringerung der Augen. Melaninpigmentierung, Schulverhalten, Aggression und Schlaf. Um diese Veränderungen experimentell zu untersuchen, ist es entscheidend, eine große Anzahl von erzeugten Embryonen zu erhalten. Seit die ursprünglichen A. mexicanus Oberflächenfische und Höhlenfische in den 1990er Jahren in Texas und Mexiko gesammelt wurden, wurden ihre Nachkommen routinemäßig dazu angeregt, zweimonatlich im Jeffery-Labor eine große Anzahl von Embryonen zu züchten und zu laichen. Obwohl die Zucht durch Nahrungsfülle und -qualität, Hell-Dunkel-Zyklen und Temperatur gesteuert wird, haben wir festgestellt, dass inkrementelle Temperaturänderungen eine Schlüsselrolle bei der Stimulierung des maximalen Laichens spielen. Der allmähliche Temperaturanstieg von 72 ° F auf 78 ° F in den ersten drei Tagen einer Brutwoche bietet zwei bis drei aufeinanderfolgende Laichtage mit einer maximalen Anzahl hochwertiger Embryonen, gefolgt von einem allmählichen Temperaturabfall von 78 ° F auf 72 ° F während der letzten drei Tage der Laichwoche. Die in diesem Video gezeigten Verfahren beschreiben den Arbeitsablauf vor und während einer Laborzuchtwoche für ein inkrementelles temperaturstimuliertes Laichen.

Wir züchten und laichen im Allgemeinen die Nachkommen von Oberflächenfischen, die ursprünglich im Nacimiento del Rio Choy in San Luis Potosi, Mexiko (Rio Choy Oberflächenfisch) und San Solomon Springs im Balmorhea State Park, Texas (Texas Oberflächenfisch) und Höhlenfischen aus Cueva de El Pachón (Pachón Höhlenfisch) in Tamaulipas, Mexiko, und Cueva de los Sabinos (Los Sabinos Höhlenfisch) und Sotano de la Tinaja (Tinaja Höhlenfisch) in San Luis Potosi gesammelt wurden Mexiko.
Währ...

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Incremental Temperature Changes for Maximal Breeding and Spawning in Astyanax mexicanus

Dieser Artikel beschreibt die grundlegenden Laborbedingungen und Protokolle für ein inkrementelles Temperaturregime zur Stimulierung des maximalen Laichens beim mexikanischen Salmler Astyanax mexicanus, einem aufstrebenden Modell für Entwicklungs- und Evolutionsstudien.

Inkrementelle Temperaturänderungen für maximale Brut und Laichzeit bei Astyanax mexicanus

The Mexican tetra, Astyanax mexicanus, is an emerging model system for studies in development and evolution. The existence of eyed surface (surface fish) ...

So wie der Astyanax mexicanas ein kleiner Fisch ist. Sie ist im Nordosten Mexikos und im Süden von Texas beheimheimischt. Das Wichtige daran ist, dass es in zwei Formen existiert.Eine Form ist ein oberflächenbewohnender Fisch mit großen Augen und Pigmentierung, und die andere Form ist ein höhlenbewohnender Fisch, der seine Augen und seine Pigmentierung verloren hat. Sie sind immer noch in der Lage, zu laichen, miteinander zu hybridisieren, so dass sie in einer vorwärts gerichteten genetischen Analyse verwendet werden können, um Genetik und Entwicklung zu studieren. Haben auch große Embryonen, die transparent sind, und sie können verwendet werden, um vergleichende Entwicklungsbiologie zu studieren.Sie werden also seit vielen Jahren als System verwendet, um die Entwicklung der Entwicklung zu verstehen. Einige Tage bevor das Laichen gewünscht wird, beginnen wir, die Fische besser zu füttern. Wir erhöhen auch die Temperatur schrittweise, so dass sie innerhalb der Zeit, in der wir sie laichen sollen, etwa zwei oder drei Tage übermäßig laichen und eine große Anzahl befruchteter Embryonen produzieren, die sich gut und durch die Larvenstadien zu Erwachsenen entwickeln.Nachdem Sie den Fisch um 10:00 Uhr .m mit einer Prise Tetra-Flocken gefüttert haben, überprüfen Sie den Inkubator, in dem Fingerschüsseln mit sich entwickelnden Embryonen untergebracht werden, und wechseln Sie bei Bedarf das Wasser. Überprüfen Sie den Wasserstand in allen Stauseen und fügen Sie Systemwasser zu allen Reservoirs hinzu, die zur Neige gehen.Dann stellen Sie den Inkubator auf 23 Grad Celsius Mindestens 30 Minuten nach der ersten Fütterung füttern Sie die Fische in den Zuchtbecken mit einer Prise Eigelbflocken, genügend schwarzen Wurmclustern, damit jeder Fisch im Tank etwa fünf bis 10 Würmer oder beides verzehren kann. Mindestens eine Stunde nach der zweiten Fütterung die Zuchtbecken nach Bedarf schrubben und vorsichtig Zuchtnetze aufstellen, ohne die Tankluftzufuhr zu beeinträchtigen. Entfernen Sie am nächsten Morgen die Zuchtnetze zwischen 9:00 und 10:00 Uhr von den Böden der Tanks des erwachsenen Systems.m.und verwenden Sie den daran befestigten Schlauch, um die Embryonen vorsichtig in ein Handnetz zu spülen. Drehen Sie das Netz in eine Fingerschüssel mit sauberem Systemwasser um und übertragen Sie etwa 100 Embryonen pro Fingerschüssel in 200 Milliliter sauberes Systemwasser, ergänzt mit 0,00003% Methylenblau. Inszenieren Sie die Embryonen unter einem Lichtmikroskop, um den Zeitpunkt der Befruchtung gemäß dem A-mexicanas-Entwicklungszeitplan abzuschätzen.Nach der Inszenierung die Fingerschalen für fünf bis sieben Tage in einen Inkubator stellen und die Kulturen mit lebenden Solegarnelen füttern. Notieren Sie für jeden Tank, in dem Embryonen abgeworfen wurden, das Datum und die Tanknummer und notieren Sie die Anzahl und Qualität der abgeworfenen Embryonen. Zeichnen Sie die durchschnittliche Laichzeit gemäß der Staging-Tabelle auf und notieren Sie die Temperatur des Systems zum Zeitpunkt des Laichens der Fische.Überwachen Sie die Fingerschüsseln der Embryonen den ganzen Tag über, verwenden Sie eine Weidepipette, um tote oder deformierte Embryonen und Trümmer wie nicht gesöhnte Nahrung oder Kot zu entfernen, und wechseln Sie das blaue Wasser nach Bedarf. Um 13:00 Uhr füttern .m. die Fische in den Zuchtbecken wie vorgeführt und stellen die Wassertemperatur auf 24 Grad Celsius ein.Entfernen Sie dann überschüssige Lebensmittel und Ablagerungen aus den Tanks und schrubben Sie die Tanks, bevor Sie die Netze zurücksetzen. Wiederholen Sie am Mittwoch und Donnerstag die Embryonentnahme und -auswertung, wie für Dienstag gezeigt. Füttern Sie die Fische und stellen Sie das Wasser auf die entsprechende Temperatur ein.Überprüfen Sie die Embryonen im Inkubator und ersetzen Sie das Fingerschüsselwasser durch frisches methylenblau behandeltes Systemwasser. Reinigen Sie dann die Zuchtbecken nach Bedarf und setzen Sie die Netze zurück. Stellen Sie am Freitag nach der Fütterung der Fische die Wassertemperatur auf 23 Grad Celsius ein und überprüfen Sie die Embryonen im Inkubator.Am Samstag und Sonntag füttern Sie die Fische. In dieser Abbildung sind die Brutdaten von Juli 2017 bis März 2020 für die Rio Choy und Texas Surface Fish sowie die Los Sabinos, Tinaha und Pachon Höhlenfische dargestellt. Die Daten wurden nach Brutwoche und der durchschnittlichen Anzahl der Embryonen analysiert, die pro Tag während einer einzigen Brutwoche gesammelt wurden.Die Daten deuten darauf hin, dass die Zucht bei Rio Choy und Texas Surface Fischen sowie bei Pachon Höhlenfischen das ganze Jahr über kontinuierlich war. Die Quantität und Qualität der meisten Rio Choy-Oberflächenfische lag zwischen niedrig und hoch, während die Quantität und Qualität der meisten texanischen Oberflächenfische und Pachon-Höhlenfische zwischen niedrig und mittel lag. Das Laichen war bei Tinaja- oder Los Sabinos-Höhlenfischen nicht kontinuierlich, wobei das Laichen im Spätsommer bis Herbst bei diesen Fischen niedrig oder nicht vorhanden war.Obwohl die niedrigsten Laichraten für Höhlenfische von Los Sabinos verzeichnet wurden, war die Qualität der Embryonen die beste. Insgesamt zeigte dieser Oberflächenfisch eine bessere Laichmenge und -qualität als Höhlenfische. Mit diesem System können wir Hunderte, tatsächlich Tausende von Eiern alle zwei Monate laichen, und diese Eier werden dann verwendet, diese Embryonen werden dann für viele verschiedene Zwecke verwendet.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Incremental Temperature Changes for Maximal Breeding and Spawning in Astyanax mexicanus

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analyse von Zebrafisch-Larven Skelettmuskel Integrität mit Evans Blue Dye

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Forschung

Entwicklungsbiologie

Imaging of Cell Shape Alteration and Cell Movement in Drosophila Gastrulation Using DE-cadherin Reporter Transgenic Flies

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Bildgebung von Zell-Form-Veränderung und Bewegung der Zellen in<em&gt; Drosophila</em&gt; Gastrulation Mit DE-Cadherin Reporter Transgene Flies

Gastrulation is the first set of morphologically dynamic events that occur during the embryonic development of multicellular animals such as Drosophila. ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Eine neuartige Mamma-Fat-Pad-Transplantationstechnik zur Visualisierung der Gefäßerzeugung von vaskulären endothelialen Stammzellen

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

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The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

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Dissektion, Immunofluorescent Färbung der Pilz Körper und Photorezeptor Neuronen im Gehirn Erwachsener Taufliege melanogaster

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

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Anwendung von RNAi und Hitze-Schock-induzierte Transkription Faktor Ausdruck zu programmieren Keimzellen Neuronen in C. elegans

Studying the cell biological processes during converting the identities of specific cell types provides important insights into mechanism that maintain ...

Neurogenesis Using P19 Embryonal Carcinoma Cells

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The P19 cell line derived from a mouse embryo-derived teratocarcinoma has the ability to differentiate into the three germ layers. In the presence of ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Visualisierung der Knoten und Notochordal Platte In Gastrulating Maus-Embryonen mittels Rasterelektronenmikroskopie und ganze Mount Immunfluoreszenz

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

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Tissue immunostaining provides highly specific and reliable detection of proteins of interest within a given tissue. Here we describe a complete and ...

Wholemount In Situ Hybridization for Astyanax Embryos

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In recent years, a draft genome for the blind Mexican cavefish (Astyanax mexicanus) has been released, revealing the sequence identities for thousands of ...