Name: a minimally invasive method for intratracheal instillation of drugs in neonatal rodents to treat lung disease
Uploaded: 2021-08-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Minimally Invasive Method for Intratracheal Instillation of Drugs in Neonatal Rodents to Treat Lung Disease at JoVE.com

تم دعم هذا العمل جزئيا بواسطة R01HD090887-01A1 من NICHD إلى AH. يعترف المؤلفون أيضا بالتسهيلات التي يقدمها مختبر الدكتور بيتر ماك فارلين مثل نظام التخدير بالاستنشاق / وسادة التدفئة. وتحظى السيدة كاثرين ماير بالتقدير للمساعدة القيمة التي قدمتها في إنشاء النظام. ولم تقم هيئة التمويل بأي دور في تصميم الدراسة وجمع البيانات وتحليلها وتفسيرها أو في كتابة المخطوطة.

تمت الموافقة على جميع التجارب من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (البروتوكول رقم 2020-0035) في جامعة كيس ويسترن ريزيرف. عوملت جميع الحيوانات وفقا لإرشادات المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام المختبر.
1. الحيوانات
<ol><li>تجاريا الحصول على الفئران Sprague Dawley الحوا?...

<ol>
	<li>Pulmonary Cell Biology Lab: Neonatal Lung Disease. Mayo Clinic Available from: <a target="_blank" href="https://www.mayo.edu/research/labs/pulmonary-cell-biology/projects/neonatal=lung-disease">https://www.mayo.edu/research/labs/pulmonary-cell-biology/projects/neonatal=lung-disease</a> (2020)</li><li>Mart&#237;nez-Burnes, J., L&#243;pez, A., Lemke, K., Dobbin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transoral+intratracheal+inoculation+method+for+use+with+neonatal+rats.">Transoral intratracheal inoculation method for use with neonatal rats.</a> Comparative Medicine. 51 (2), 134-137 (2001).</li><li>Pinkerton, K. E., Crapo, J. D., Witschi, H., Brain, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometry+of+the+alveolar+region+of+the+lung.">Morphometry of the alveolar region of the lung.</a> Toxicology of Inhaled Materials Handbook of Experimental Pharmacology. 95, 259-285 (1985).</li><li>Nardiello, C., Mi&#382;&#237;kov&#225;, I., Morty, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Looking+ahead:+where+to+next+for+animal+models+of+bronchopulmonary+dysplasia.">Looking ahead: where to next for animal models of bronchopulmonary dysplasia.</a> Cell and Tissue Research. 367 (3), 457-468 (2017).</li><li>Sugimoto, M., Ando, M., Senba, H., Tokuomi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+defenses+in+neonates:+Effects+of+bronchial+lavage+fluids+from+adult+and+neonatal+rabbits+on+superoxide+production+by+their+alveolar+macrophages.">Lung defenses in neonates: Effects of bronchial lavage fluids from adult and neonatal rabbits on superoxide production by their alveolar macrophages.</a> Journal of the Reticuloendothelial Society. 27 (6), 595-606 (1980).</li><li>Grayson, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controls+for+lung+dendritic+cell+maturation+and+migration+during+respiratory+viral+infection.">Controls for lung dendritic cell maturation and migration during respiratory viral infection.</a> Journal of Immunology. 179 (3), 1438-1448 (2007).</li><li>Moreira, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+of+human+umbilical+cord+Wharton's+jelly+mesenchymal+stromal+cells+restores+lung+alveolarization+and+vascularization+in+experimental+bronchopulmonary+dysplasia.">Intranasal delivery of human umbilical cord Wharton's jelly mesenchymal stromal cells restores lung alveolarization and vascularization in experimental bronchopulmonary dysplasia.</a> Stem Cells Translational Medicine. 9 (2), 221-234 (2020).</li><li>Bar-Haim, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interrelationship+between+dendritic+cell+trafficking+and+Francisella+tularensis+dissemination+following+airway+infection.">Interrelationship between dendritic cell trafficking and Francisella tularensis dissemination following airway infection.</a> PLoS Pathogens. 4 (11), 1000211 (2008).</li><li>Linderholm, A. L., Franzi, L. M., Bein, K. J., Pinkerton, K. E., Last, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+comparison+of+intranasal+and+intratracheal+administration+of+coarse+PM+in+the+mouse.">A quantitative comparison of intranasal and intratracheal administration of coarse PM in the mouse.</a> Integrative Pharmacology, Toxicology and Genotoxicology. 1 (1), 5-10 (2015).</li><li>Guerra, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-tracheal+administration+of+a+naked+plasmid+expressing+stromal+derived+factor-1+improves+lung+structure+in+rodents+with+experimental+bronchopulmonary+dysplasia.">Intra-tracheal administration of a naked plasmid expressing stromal derived factor-1 improves lung structure in rodents with experimental bronchopulmonary dysplasia.</a> Respiratory Research. 20 (1), 255 (2019).</li><li>Thomas, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+particle+size+on+the+pathology+and+efficacy+of+vaccination+in+a+murine+model+of+inhalational+anthrax.">Influence of particle size on the pathology and efficacy of vaccination in a murine model of inhalational anthrax.</a> Journal of Medical Microbiology. 59, 1415-1427 (2010).</li><li>Sakurai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+combination+of+the+aerosolized+PPAR-&#947;+agonist+pioglitazone+and+a+synthetic+surfactant+protein+B+peptide+mimic+prevents+hyperoxia-induced+neonatal+lung+injury+in+rats.">A combination of the aerosolized PPAR-&#947; agonist pioglitazone and a synthetic surfactant protein B peptide mimic prevents hyperoxia-induced neonatal lung injury in rats.</a> Neonatology. 113 (4), 296-304 (2018).</li><li>Rayamajhi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-surgical+intratracheal+instillation+of+mice+with+analysis+of+lungs+and+lung+draining+lymph+nodes+by+flow+cytometry.">Non-surgical intratracheal instillation of mice with analysis of lungs and lung draining lymph nodes by flow cytometry.</a> Journal of Visualized Experiments. (51), e2702 (2011).</li><li>Brain, J. D., Knudson, D. E., Sorokin, S. P., Davis, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+distribution+of+particles+given+by+intratracheal+instillation+or+by+aerosol+inhalation.">Pulmonary distribution of particles given by intratracheal instillation or by aerosol inhalation.</a> Environmental Research. 11 (1), 13-33 (1976).</li><li>Pritchard, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+distribution+of+dust+in+the+rat+lung+following+administration+by+inhalation+and+by+single+intratracheal+instillation.">The distribution of dust in the rat lung following administration by inhalation and by single intratracheal instillation.</a> Environmental Research. 36 (2), 268-297 (1985).</li><li>Ruzinski, J. T., Skerrett, S. J., Chi, E. Y., Martin, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deposition+of+particles+in+the+lungs+of+infant+and+adult+rats+after+direct+intratracheal+administration.">Deposition of particles in the lungs of infant and adult rats after direct intratracheal administration.</a> Laboratory Animal Science. 45 (2), 205-210 (1995).</li><li>Sun, B., Curstedt, T., Song, G. W., Robertson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surfactant+improves+lung+function+and+morphology+in+newborn+rabbits+with+meconium+aspiration.">Surfactant improves lung function and morphology in newborn rabbits with meconium aspiration.</a> Biology of the Neonate. 63 (2), 96-104 (1993).</li><li>Nicholson, J. W., Kinkead, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+device+for+intratracheal+injections+in+rats.">A simple device for intratracheal injections in rats.</a> Laboratory Animal Science. 32 (5), 509-510 (1982).</li><li>Carlon, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+gene+transfer+into+the+mouse+lung+by+fetal+intratracheal+injection+of+rAAV2/6.2.">Efficient gene transfer into the mouse lung by fetal intratracheal injection of rAAV2/6.2.</a> Molecular Therapy: The Journal of the American Society of Gene Therapy. 18 (12), 2130-2138 (2010).</li><li>Chen, C. -. M., Chen, Y. -. J., Huang, Z. -. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratracheal+Instillation+of+Stem+Cells+in+Term+Neonatal+Rats.">Intratracheal Instillation of Stem Cells in Term Neonatal Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (159), e61117 (2020).</li><li>Reynolds, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preventing+maternal+cannibalism+in+rats.">Preventing maternal cannibalism in rats.</a> Science. 213 (4512), 1146 (1981).</li><li>Park, C. M., Clegg, K. E., Harvey-Clark, C. J., Hollenberg, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+techniques+for+successful+neonatal+rat+surgery.">Improved techniques for successful neonatal rat surgery.</a> Laboratory Animal Science. 42 (5), 508-513 (1992).</li><li>Cleary, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exudative+lung+injury+is+associated+with+decreased+levels+of+surfactant+proteins+in+a+rat+model+of+meconium+aspiration.">Exudative lung injury is associated with decreased levels of surfactant proteins in a rat model of meconium aspiration.</a> Pediatrics. 100 (6), 998-1003 (1997).</li><li>Das, S., MacDonald, K., Chang, H. -. Y. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+of+mouse+lung+intubation.">A simple method of mouse lung intubation.</a> Journal of Visualized Experiments. (73), e50318 (2013).</li><li>Oka, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reliable+method+for+intratracheal+instillation+of+materials+to+the+entire+lung+in+rats.">A reliable method for intratracheal instillation of materials to the entire lung in rats.</a> Journal of Toxicologic Pathology. 19 (2), 107-109 (2006).</li><li>Watanabe, A., Hashimoto, Y., Ochiai, E., Sato, A., Kamei, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+confirming+correct+endotracheal+intubation+in+mice.">A simple method for confirming correct endotracheal intubation in mice.</a> Laboratory Animals. 43 (4), 399-401 (2009).</li><li>Kim, J. -. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+automatic+video+instillator+for+intratracheal+instillation+in+the+rat.">An automatic video instillator for intratracheal instillation in the rat.</a> Laboratory Animals. 44 (1), 20-24 (2010).</li><li>Lawrenz, M. B., Fodah, R. A., Gutierrez, M. G., Warawa, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intubation-mediated+intratracheal+(IMIT)+instillation:+a+noninvasive,+lung-specific+delivery+system.">Intubation-mediated intratracheal (IMIT) instillation: a noninvasive, lung-specific delivery system.</a> Journal of Visualized Experiments. (93), e52261 (2014).</li><li>Ordodi, V. L., Mic, F. A., Mic, A. A., Sandesc, D., Paunescu, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+device+for+intubation+of+rats.">A simple device for intubation of rats.</a> Lab Animal. 34 (8), 37-39 (2005).</li><li>Cleary, G. M., Wiswell, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meconium-stained+amniotic+fluid+and+the+meconium+aspiration+syndrome.+An+update.">Meconium-stained amniotic fluid and the meconium aspiration syndrome. An update.</a> Pediatric Clinics of North America. 45 (3), 511-529 (1998).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+rapid+intubation+of+the+trachea+in+mice.">An improved method for rapid intubation of the trachea in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Litvin, D. G., Dick, T. E., Smith, C. B., Jacono, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung-injury+depresses+glutamatergic+synaptic+transmission+in+the+nucleus+tractus+solitarii+via+discrete+age-dependent+mechanisms+in+neonatal+rats.">Lung-injury depresses glutamatergic synaptic transmission in the nucleus tractus solitarii via discrete age-dependent mechanisms in neonatal rats.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 70, 398-422 (2018).</li><li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice.">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Laboratory Animals. 41 (1), 128-135 (2007).</li><li>Kim, Y. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratracheal+transplantation+of+mesenchymal+stem+cells+simultaneously+attenuates+both+lung+and+brain+injuries+in+hyperoxic+newborn+rats.">Intratracheal transplantation of mesenchymal stem cells simultaneously attenuates both lung and brain injuries in hyperoxic newborn rats.</a> Pediatric Research. 80 (3), 415-424 (2016).</li><li>Chang, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratracheal+transplantation+of+human+umbilical+cord+blood-derived+mesenchymal+stem+cells+dose-dependently+attenuate+hyperoxia-induced+lung+injury+in+neonatal+rats.">Intratracheal transplantation of human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells dose-dependently attenuate hyperoxia-induced lung injury in neonatal rats.</a> Cell Transplantation. 20 (11-12), 1843-1854 (2011).</li><li>Chang, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Timing+of+umbilical+cord+blood+derived+mesenchymal+stem+cells+transplantation+determines+therapeutic+efficacy+in+the+neonatal+hyperoxic+lung+injury.">Timing of umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells transplantation determines therapeutic efficacy in the neonatal hyperoxic lung injury.</a> PloS One. 8 (1), 52419 (2013).</li><li>Mowat, V., Alexander, D. J., Pilling, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+rodent+and+nonrodent+laryngeal+and+tracheal+bifurcation+sensitivities+in+inhalation+toxicity+studies+and+their+relevance+for+human+exposure.">A comparison of rodent and nonrodent laryngeal and tracheal bifurcation sensitivities in inhalation toxicity studies and their relevance for human exposure.</a> Toxicologic Pathology. 45 (1), 216-222 (2017).</li></ol>

التقطير داخل القصبة الهوائية هو طريقة ممتازة توفر العديد من المزايا على الطرق الحالية للتدخلات في أمراض الجهاز التنفسي وكذلك تطوير نموذج المرض. إنها طريقة سريعة وذات خبرة ، يمكن تنفيذها بمتوسط سرعة 2-3 دقائق لكل. الاعتبارات الرئيسية للتنبيب الناجح هي التخدير السليم للحيوان ، وهو تحديد الم...

حديثي الولادة المولودين قبل الأوان لديهم رئتان ضعيفتان النمو تتطلبان العديد من العلاجات التداخلية مثل التهوية طويلة الأجل. هذه التدخلات تضع المواليد الجدد الباقين على قيد الحياة في خطر كبير من العواقب اللاحقة1. تعمل النماذج الحيوانية التجريبية كأداة مهمة في محاكاة الظروف المرضية المختلفة ، ودراسة البيولوجيا المرضية للأمراض ، وتقييم التدخلات العلاجية. على الرغم من توفر مجموعة واسعة من النماذج الحيوانية من الفئران والجرذان والأرانب إلى الحملان والخنازير قبل الأوان ، إلا أن الفئران والجرذان هي الأكثر استخداما. 
الميزة الأساسية لاستخدام الفئران والجرذان هي فترة الحمل القصيرة نسبيا والتكلفة المنخفضة. كما أنها متاحة بسهولة ، وسهلة الصيانة في بيئات خالية من الأمراض ، ومتجانسة وراثيا ولها اهتمام أخلاقي أقل نسبيا 2,3. ميزة رئيسية أخرى لنموذج القوارض هي أنه عند الولادة يكون الجرو الوليد في مرحلة متأخرة من تطور الرئة الكناليكية / العجزية المبكرة التي تعادل مورفولوجيا رئة طفل بشري حديث الولادة قبل الأوان لمدة 24 أسبوعا يستمر في تطوير خلل التنسج القصبي الرئوي4. بالإضافة إلى ذلك ، مع تقدم نمو الرئة بسرعة إلى الانتهاء خلال الأسابيع الأربعة الأولى من الحياة ، من الممكن دراسة نضج الرئة بعد الولادة في إطار زمني معقول4. على الرغم من هذه المزايا ، فإن صغر حجم الفئران والجراء الفئران هو مصدر قلق لمختلف التدخلات ، مما يجبر معظم الباحثين على استخدام الحيوانات البالغة بدلا من الجراء5. الرئتين حديثي الولادة في مرحلة النمو وتختلف استجابة الوليد لعامل تحريض عن استجابة الشخص البالغ. وهذا يجعل من المناسب استخدام النماذج الحيوانية لحديثي الولادة لدراسة حالات أمراض الأطفال حديثي الولادة البشرية.
هناك طرق مختلفة لإدارة الأدوية / العوامل البيولوجية إلى الرئة. وهذا يشمل تقطير داخل الأنف 6,7 أوداخل القصبة الهوائية 8,9,10 وكذلك استنشاق الهباء الجوي11,12. لكل نهج تحدياته التقنية الخاصة به ومزاياه ، بالإضافة إلى القيود13. يفضل الطريق داخل القصبة الهوائية لإدارة العوامل العلاجية لدراسة التأثير العلاجي المباشر في العضو متجاوزا الآثار الجهازية. يمكن أيضا استخدام هذا الطريق لدراسة أمراض الرئة الناجمة عن العوامل التحريضية. هناك تقنيات غازية وطفيفة التوغل للقيام بذلك ومن السهل القيام بها لدى البالغين. ومع ذلك ، في الجراء ، بسبب صغر حجم الحيوان ، هناك تحديات تقنية مرتبطة بعملية التنبيب. تقدم الدراسة الحالية طريقة بسيطة ومتسقة وغير جراحية للتقطير داخل القصبة الهوائية (ITI) في جراء الفئران التي يمكن استخدامها لدراسة فعالية مختلف التدخلات العلاجية لحديثي الولادة وكذلك لإنشاء نماذج حيوانية تحاكي أمراض الجهاز التنفسي لحديثي الولادة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Evans Blue dye</td>
			<td>Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA</td>
			<td>314-13-6</td>
			<td>Confirmation of drug administration into lungs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine Hydrochloride</td>
			<td>Hospira. Inc, Lake Forest, IL, USA</td>
			<td>Dispensed from Animal care facility</td>
			<td>For sedation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Otoscope</td>
			<td>Welch Allyn, Hillrom, Chicago, IL, USA</td>
			<td>21770- 3.5V</td>
			<td>For visualization of vocal cords</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Otoscope Rechargeable Handle</td>
			<td>Welch Allyn, Hillrom, Chicago, IL, USA</td>
			<td>71050-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tip (Gel loading)</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>02-707-139</td>
			<td>Administering the drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platform for restraining (inclined plane)</td>
			<td>Animal care facility</td>
			<td>Dispensed from Animal care facility</td>
			<td>Wired roof of mice cage can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3M Micropore Surgical White Paper (sticking tape)</td>
			<td>3M, St. Paul, MN, USA</td>
			<td>1530-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock SyringeSyringes (1 ml)</td>
			<td>BD Franklin Lakes, NJ , USA</td>
			<td>NBD2515</td>
			<td>Administering the drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Hospira. Inc, Lake Forest, IL, USA</td>
			<td></td>
			<td>For sedation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a minimally invasive method for intratracheal instillation of drugs in neonatal rodents to treat lung disease

يمكن أن يكون علاج القوارض حديثي الولادة بالعقاقير التي يتم غرسها مباشرة في القصبة الهوائية بمثابة أداة قيمة لدراسة تأثير الدواء الذي يتم إعطاؤه محليا. هذا له تأثير انتقالي مباشر لأن الفاعل بالسطح والأدوية تدار محليا في الرئتين. على الرغم من أن الأدبيات تحتوي على العديد من المنشورات التي تصف التنبيب عبر الفم بأقل قدر من التدخل الجراحي للفئران والجرذان البالغة في التجارب العلاجية ، إلا أن هذا النهج في الجراء الفئران حديثي الولادة غير موجود. إن صغر حجم منطقة القصبة الهوائية / البلعوم في الجراء يجعل تصور تجويف الحنجرة (الحبال الصوتية) صعبا ، مما يساهم في معدل النجاح المتغير لتوصيل الدواء داخل القصبة الهوائية. نظهر هنا التنبيب الفموي الفعال لجرو الفئران حديثي الولادة - وهي تقنية غير مؤلمة وطفيفة التوغل ، بحيث يمكن استخدامها للإدارة التسلسلية للأدوية. استخدمنا منظار الأذن التشغيلي مع نظام إضاءة وعدسة مكبرة لتصور فتحة القصبة الهوائية لحديثي الولادة من الفئران. ثم يتم غرس الدواء باستخدام حقنة 1 مل متصلة بطرف ماصة. تم إثبات دقة طريقة التسليم باستخدام إدارة الصبغة الزرقاء إيفانز. من السهل التدريب على هذه الطريقة ويمكن أن تكون بمثابة وسيلة فعالة لغرس المخدرات في القصبة الهوائية. يمكن أيضا استخدام هذه الطريقة لإعطاء اللقاح أو العوامل لمحاكاة الظروف المرضية في الحيوانات ، وكذلك لاستراتيجيات العلاج القائمة على الخلايا لمختلف أمراض الرئة.

كشف تقطير إيفانز الأزرق عن توزيع متعدد البؤر للصبغة يشمل جميع الفصوص الرئوية (الشكل 4A ، B). توضح نتيجتنا كما هو موضح في الشكل 4 فعالية التوزيع على جميع الفصوص. يتم التقاط الصورة مباشرة بعد ITI للصبغة في القصبة الهوائية. تم تحقيق فعالية 100٪ في غرس الصبغة...

Watch this Scientific Journal Video about A Minimally Invasive Method for Intratracheal Instillation of Drugs in Neonatal Rodents to Treat Lung Disease at JoVE.com

A Minimally Invasive Method for Intratracheal Instillation of Drugs in Neonatal Rodents to Treat Lung Disease

هذه التقنية لغرس الأدوية مباشرة في القصبة الهوائية للقوارض حديثي الولادة مهمة في دراسة تأثير الأدوية أو البيولوجيا التي تدار محليا على أمراض الرئة حديثي الولادة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أيضا استخدام هذه الطريقة للحث على إصابة الرئة في النماذج الحيوانية.

طريقة طفيفة التوغل لتقطير الأدوية داخل القصبة الهوائية في القوارض حديثي الولادة لعلاج أمراض الرئة

Treatment of neonatal rodent with drugs instilled directly into the trachea could serve as a valuable tool to study the impact of a locally administered ...

يوضح هذا البروتوكول أنه من الممكن غرس مواد بحثية في القصبة الهوائية لجراء الفئران حديثي الولادة ، الذين يبلغ عمرهم خمسة أيام ، عن طريق التصور المباشر. تعمل هذه الطريقة على تحسين موثوقية إدارة المواد البحثية أو الدواء في القصبة الهوائية عن طريق التصور المباشر. من خلال تجنب الحقن في القصبة الهوائية ، تقلل هذه الطريقة من الألم ، والأهم من ذلك ، النزيف في القصبة الهوائية ، مما يسمح بتحسين البقاء على قيد الحياة.مطلوب تطوير المهارات الدقيقة لتنفيذ هذا البروتوكول ، بما في ذلك تحديد المواقع المناسبة للحيوان ، والاستخدام الصحيح للمنظار الآلي التشغيلي لتصور الحبال الصوتية ، وفعالية الإدارة في الرئتين. ستوضح الإجراء تارا سوداديفي ، زميلة ما بعد الدكتوراه من مختبري ، وأليسون ها ، طالبة الدراسات العليا. قبل البدء في التجربة، تأكد من فقدان منعكس الذيل والدواسة في جرو فئران عمره خمسة أيام مخدر واستخدم شريط وضع العلامات المختبري لكبح جماح الجرو في وضع ضعيف على منصة مسطحة مائلة عند 45 درجة.استخدم ملقط حاد لسحب اللسان بلطف إلى جانب واحد ، وبمساعدة منظار منظار الأذن الذي يبلغ قطره مليمترين ، أمسك اللسان بلطف في مكانه بحيث تكون الحنجرة مرئية. باستخدام منظار الأذن العامل مع المنظار الصحيح الحجم، حدد موقع الحبال الصوتية من خلال العدسة المكبرة لمنظار الأذن. بالنسبة للتقطير داخل القصبة الهوائية ، قم بتحميل حقنة سعة ملليلتر واحد مزودة بطرف ماصة طويل الزاوية محمل بالهلام مع 0.9 سم مكعب من الهواء ، متبوعا ب 30 إلى 50 ميكرولتر من المادة محل الاهتمام.ثني طرف الماصة إلى زاوية 30 درجة وأدخل طرف الماصة المحمل عبر المنظار إلى حوالي مليمترين وراء الحبال الصوتية. ادفع مكبس المحقنة لإدارة المادة ذات الأهمية والهواء عبر المنظار إلى الحبال الصوتية. عندما يتم تسليم جميع المواد ، ضع الجرو على وسادة تسخين سائل دائرية مدمجة بزاوية 38 درجة مئوية مع المراقبة حتى التنفس المنتظم ، قبل إعادة توحيد الجرو مع السد.لتقييم توزيع المادة داخل عينة أنسجة الرئة ، امسح الصدر والبطن من الجراء الفئران التي تم قتلها بالكحول الإيثيلي بنسبة 70٪ واستخدم تقنية معقمة لإزالة الرئتين وفقا للبروتوكولات القياسية لتقييمها البصري. في هذه الدراسة ، تم تقييم فعالية تقنية التقطير داخل القصبة الهوائية من خلال الفحص البصري لأنسجة الرئة التي تم جمعها من جرو فئران عمره خمسة أيام تم غرسه بصبغة إيفانز الزرقاء. كان التقطير فعالا بنسبة 100٪ تقريبا ، حيث انتشرت الصبغة في الرئة فور تناولها وتوزيعها عبر جميع فصوص أنسجة الرئة.لم يتم ملاحظة الصبغة داخل أي أنسجة خارج الرئتين ، مما يؤكد قدرة التقنية على استخدامها في التسليم الانتقائي لعلاج يهم الرئتين. يعد وضع الحيوان في البداية بالزاوية الصحيحة على سطح صلب أمرا ضروريا لنجاح الخطوة التالية المتمثلة في تصور الحبال الصوتية باستخدام المنظار الآلي التشغيلي.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Minimally Invasive Establishment of Murine Orthotopic Bladder Xenografts

مؤسسة المناظير الفئران مثلي المثانة Xenografts

Orthotopic bladder cancer xenografts are the gold standard to study molecular cellular manipulations and new therapeutic agents&#160;in vivo. Suitable ...

Intubation-mediated Intratracheal (IMIT) Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubation-mediated Intratracheal IMIT Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

بوساطة التنبيب داخل الرغامى (IMIT) تقطير: وموسع والرئة محدد نظام تسليم

Respiratory disease studies typically involve the use of murine models as surrogate systems. However, there are significant physiologic differences ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

طريقة معزولة<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; الإرواء الرئة في الفئران نموذج: الدروس المستفادة من تطوير برنامج EVLP الجرذ

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

A Minimally Invasive Model to Analyze Endochondral Fracture Healing in Mice Under Standardized Biomechanical Conditions

نموذج مينيملي لتحليل الكسر Endochondral الشفاء في الفئران تحت ظروف النشاط الحيوي موحدة

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an ...

Electromagnetic Navigation Transthoracic Nodule Localization for Minimally Invasive Thoracic Surgery

الملاحة الكهرومغناطيسية توطين العقيدات عبر الصدر لجراحة الصدر طفيفة التوغل

The increased use of chest computed tomography (CT) has led to an increased detection of pulmonary nodules requiring diagnostic evaluation and/or ...

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

نموذج انصباب الجنبي في الفئران بتقطير تحسن من بولياكريلاتي/نانوسيليكا

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

Inducing Acute Lung Injury in Mice by Direct Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation

إحداث إصابات الرئة الحادة في الفئران عن طريق التبيل المباشر للكيس الشحمي داخل الرغامى

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

نموذج الفئران قبل السريرية لدراسة نقص التروية-ضخ الاصابه في جراحه المجهرية الترميمية

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Intratracheal Instillation of Stem Cells in Term Neonatal Rats

تقطير داخل الجسم للخلايا الجذعية في فئران حديثي الولادة

Prolonged exposure to high concentrations of oxygen leads to inflammation and acute lung injury, which is similar to human bronchopulmonary dysplasia ...