यूवी-विज़ स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री एक अच्छी तरह से स्थापित, उपयोग में आसान, और नैनोमैटेरियल्स के आकार, एकाग्रता, एकत्रीकरण राज्य और अपवर्तक सूचकांक को मापने के लिए सस्ती तकनीक है। यूवी-विस noninvasive और तेजी से प्रदान करता है, realtime स्क्रीनिंग और सरल अवशोषण माप का उपयोग कर nanomaterial विशेषताओं का मूल्यांकन. यूवी-विज़ असाधारण रूप से सीधा है।
नमूनों को थोड़ी तैयारी की आवश्यकता होती है, और सॉफ़्टवेयर में कुछ चर होते हैं और इसका उपयोग करना आसान होता है। दीपक को गर्म करने की अनुमति देने के लिए कम से कम 20 मिनट के लिए यूवी-विस स्पेक्ट्रोमीटर को चालू करें। सॉफ़्टवेयर लोड करें और उपकरण कनेक्ट करें का चयन करें मोड विंडो से विकल्प स्पेक्ट्रम स्कैन का चयन करें जो ऑपरेटिंग मोड प्रदर्शित करता है।
सॉफ्टवेयर में, इंस्ट्रूमेंट पर क्लिक करें और कमांड बार में सेटिंग्स पर जाएं, स्पेक्ट्रम स्कैन के लिए पैरामीटर का चयन करें, फिर माप के लिए सेटिंग्स को समायोजित करें। इंस्ट्रूमेंट टैब पर जाएं और डेटा मोड के लिए ABS, और 1.5 की स्लिट चौड़ाई का चयन करें। तरंग दैर्ध्य स्कैन टैब पर जाएं और 680 नैनोमीटर की शुरुआती तरंग दैर्ध्य, 380 नैनोमीटर की अंतिम तरंग दैर्ध्य और 400 नैनोमीटर प्रति मिनट की स्कैन गति सेट करें।
पैरामीटर सेट करने के बाद, अल्ट्रा शुद्ध पानी के एक मिलीलीटर के साथ दो क्यूवेट भरें, और उन्हें प्रकाश पथ को कवर करने के लिए संदर्भ और नमूना सेल धारक में रखें। इंस्ट्रूमेंट कवर को बंद करें और कमांड बार से रिक्त का चयन करके रिक्त अंशांकन के साथ जारी रखें, फिर ठीक का चयन करें। प्रत्येक सोने के नैनोपार्टिकल नमूने का 500-माइक्रोलीटर सबसैम्पल लें, और अल्ट्राप्योर पानी के 500 माइक्रोलीटर के साथ एक कमजोर पड़ने की तैयारी करें। 25 माइक्रोग्राम प्रति मिलीलीटर की अंतिम एकाग्रता के साथ एक-मिलीलीटर क्यूवेट में dilutions रखें।
कोई रिक्त अंशांकन चलाएँ. खाली अंशांकन के बाद, एक सोने के nanoparticle नमूने के साथ नमूना सेल धारक में रिक्त cuvettes में से एक को प्रतिस्थापित करें, संदर्भ cuvette अछूता रखने. स्कैन चलाने के लिए कमांड बार में प्रारंभ माप का चयन करें।
प्रत्येक पतला सोने nanoparticle नमूना और अज्ञात नमूने के लिए तीन स्पेक्ट्रम स्कैन चलाएँ। किसी स्प्रेडशीट-संगत फ़ाइल में प्रत्येक माप के लिए कच्चे प्रयोगात्मक डेटा निकालें। स्कैन पर, कमांड बार पर, गुण का चयन करें, मुद्रण/निर्यात टैब पर जाएँ, डेटा, स्पेक्ट्रम और पैरामीटर क्लिक करें, और ठीक दबाएँ. कमांड बार पर सहेजें क्लिक करें और डेटा को xls फ़ाइल के रूप में सहेजें.
प्रत्येक रीडिंग के लिए अधिकतम अवशोषण तरंग दैर्ध्य और लैम्ब्डा नोट करें और उन्हें प्रदान किए गए टेम्पलेट में रिकॉर्ड करें। डेटा का चयन करके nanoparticle आकार के खिलाफ अधिकतम lambda के औसत के साथ एक अंशांकन वक्र प्लॉट प्लॉट, ग्राफ सम्मिलित करें, तितर बितर प्लॉट, trendline जोड़ने, और बहुपद वक्र जोड़ें। अंशांकन वक्र के लिए बहुपद समीकरण शामिल करने के लिए, Trendline विकल्प और आदेश पट्टी से चार्ट पर प्रदर्शन समीकरण का चयन करें।
अंत में, अंशांकन वक्र से बहुपद समीकरण को अलग करके अज्ञात सोने के नैनोपार्टिकल नमूने के आकार की गणना करें ताकि द्विघात सूत्र की व्युत्पत्ति का उपयोग करके अज्ञात अधिकतम लैम्ब्डा के लिए माध्य मान को फिट किया जा सके। छह प्रयोगशालाओं में से, अधिकतम तरंग दैर्ध्य ने करीबी पुनरावृत्ति दिखाई, जबकि अधिकतम अवशोषण परिणामों ने विभिन्न सोने के नैनोपार्टिकल आकारों के लिए डेटा मूल्यों की अधिक बिखरी हुई श्रृंखला का प्रदर्शन किया। प्रत्येक सोने के नैनोपार्टिकल आकार के लिए श्रेणियां और समग्र साधन यहां दिखाए गए हैं।
लैम्ब्डा मैक्स के लिए अधिकतम जेड-स्कोर मूल्य 5-नैनोमीटर-आकार के नैनोकणों के लिए प्रयोगशाला तीन द्वारा सूचित किया गया था, और अधिकतम अवशोषण के लिए उच्चतम जेड-स्कोर 40-नैनोमीटर-आकार के नैनोकणों के लिए प्रयोगशाला एक द्वारा रिपोर्ट किया गया था। अधिकांश भागीदारों ने अज्ञात नैनोपार्टिकल के आकार की गणना 76 से 80 नैनोमीटर होने के लिए की, जिसमें प्रयोगशाला पांच ने 109 नैनोमीटर के बाहरी बड़े आकार की रिपोर्ट की। अज्ञात आकारों के लिए जेड-स्कोर की गणना सभी प्रयोगशालाओं के लिए माइनस 0.25 से माइनस 0.56 के बीच होने के लिए की गई थी, जिसमें प्रयोगशाला पांच द्वारा रिपोर्ट किए गए एकमात्र अपवाद के साथ, जिसने 2.03 के उच्चतम सकारात्मक जेड-स्कोर को प्रदर्शित किया था।
सुनिश्चित करें कि पैरामीटर और सेटिंग्स को सही ढंग से समायोजित किया गया है. यूवी-विज़ के साथ मापने से पहले पतले नमूनों को ताजा तैयार किया जाना चाहिए। यूवी-विज़ को आसानी से अन्य उपकरणों के साथ जोड़ा जा सकता है, जैसे कि TEM, DLS, और AFM विशेषताओं की एक बड़ी विविधता को मापने के लिए यदि उपयोगकर्ता अपने नमूने को अधिक व्यापक रूप से चिह्नित करना चाहते हैं।