UV-Vis spektrofotometri er en veletablert, enkel å bruke og billig teknikk for måling av størrelse, konsentrasjon, aggregeringstilstand og brytningsindeks for nanomaterialer. UV-Vis gir ikke-invasive og raske sanntidsscreening og evaluering av nanomaterialer ved hjelp av enkle absorpsjonsmålinger. UV-Vis er usedvanlig grei.
Prøvene krever lite forberedelse, og programvaren har få variabler og er enkel å bruke. Slå på UV-Vis-spektrometeret i minst 20 minutter slik at lampen kan varmes opp. Last inn programvaren og velg Koble til instrumentet Velg alternativet Spectrum Scan fra modusvinduet som viser driftsmodusene.
I programvaren klikker du på Instrument og går til Innstillinger på kommandolinjen, velger Parametere for Spectrum Scan, og justerer deretter innstillingene for måling. Gå til Instrument-fanen og velg ABS for datamodus, og spaltebredde på 1,5. Gå til Wavelength Scan-fanen og angi en Start-bølgelengde på 680 nanometer, Sluttbølgelengde på 380 nanometer og skannehastighet på 400 nanometer per minutt.
Etter å ha satt parametrene, fyll to cuvettes med en milliliter ultra rent vann, og plasser dem i referansen og prøvecelleholderen for å dekke lysbanen. Lukk instrumentdekselet og fortsett med blank kalibrering ved å velge tom fra kommandolinjen, og velg deretter OK. Ta en 500-mikroliter subsample av hver gull nanopartikkelprøve, og lag en fortynning med 500 mikroliter ultrarent vann. Plasser fortynningene i en milliliter cuvettes med en endelig konsentrasjon på 25 mikrogram per milliliter.
Kjør en tom kalibrering. Etter den tomme kalibreringen erstatter du en av de tomme dråpene i prøvecelleholderen med en gull nanopartikkelprøve, og holder referansekrovetten urørt. Velg Mål start på kommandolinjen for å kjøre skanningen.
Kjør tre spektrumskanninger for hver fortynnet gull nanopartikkelprøve og ukjent prøve. Pakk ut rå eksperimentelle data for hver måling i en regnearkkompatibel fil. Velg Egenskap på skanningen, gå til fanen Skriv ut / eksporter på kommandolinjen, klikk Data, Spektrum og parametere, og trykk OK. Klikk Lagre på kommandolinjen, og lagre dataene som en xls-fil.
Legg merke til maksimal absorpsjonsbølgelengde og lambda for hver av målingene og registrer dem i den medfølgende malen. Tegn en kalibreringskurve med gjennomsnittet av maksimal lambda mot nanopartikkelstørrelse ved å velge data, sette inn graf, punktplott, legge til trendlinje og polynomkurve. Hvis du vil inkludere den polynomiske formelen for kalibreringskurven, velger du Alternativer for trendlinje og Vis formel på diagram fra kommandolinjen.
Til slutt beregner du størrelsen på den ukjente nanopartikkelprøven i gull ved å isolere den polynomiske ligningen fra kalibreringskurven for å passe til gjennomsnittsverdien for den ukjente maksimale lambdaen ved hjelp av en avledning av kvadratisk formel. Blant de seks laboratoriene viste Maksimal bølgelengde nær repeterbarhet, mens de maksimale absorbansresultatene viste et mer spredt utvalg av dataverdier for forskjellige gull nanopartikkelstørrelser. Områdene og generelle midler for hver gull nanopartikkelstørrelse vises her.
Den maksimale Z-scoreverdien for lambda max ble rapportert av laboratorie tre for nanopartikler i 5 nanometerstørrelse, og den høyeste z-skåren for maksimal absorbans ble rapportert av laboratoriet en for 40 nanometer-størrelse nanopartikler. De fleste av partnerne beregnet størrelsen på den ukjente nanopartikkelen til å være 76 til 80 nanometer, og laboratorie fem rapporterte en ytre større størrelse på 109 nanometer. Z-skårene for ukjente størrelser ble beregnet til å være mellom minus 0,25 og minus 0,56 for alle laboratoriene, med det eneste unntaket rapportert av laboratorie fem, som viste den høyeste positive Z-poengsummen på 2,03.
Kontroller at parameterne og innstillingene er riktig justert. De fortynnede prøvene må tilberedes friskt før måling med UV-Vis. UV-Vis kan enkelt kombineres med andre verktøy, for eksempel TEM, DLS og AFM for å måle et stort utvalg av attributter hvis brukerne ønsker å karakterisere prøven mer omfattende.