UV-Vis spektrofotometri är en väletablerad, lättanvänd och billig teknik för att mäta nanomaterialens storlek, koncentration, aggregeringstillstånd och brytningsindex. UV-Vis ger icke-invasiv och snabb screening i realtid och utvärdering av nanomaterialegenskaper med enkla absorptionsmätningar. UV-Vis är exceptionellt enkelt.
Proverna kräver lite förberedelse, och programvaran har få variabler och är lätt att använda. Slå på UV-Vis-spektrometern i minst 20 minuter så att lampan kan värmas upp. Ladda programvaran och välj Anslut instrumentet Välj alternativet Spectrum Scan i lägesfönstret som visar driftlägena.
I programvaran klickar du på Instrument och går till Inställningar i kommandofältet, väljer Parametrar för spektrumsökning och justerar sedan inställningarna för mätning. Gå till fliken Instrument och välj ABS för dataläge och Slitsbredd på 1,5. Gå till fliken Våglängdsskanning och ställ in en startvåglängd på 680 nanometer, slutvåglängd på 380 nanometer och skanningshastighet på 400 nanometer per minut.
När parametrarna har ställts in fyller du två cuvettes med en milliliter ultrarent vatten och placerar dem i referens- och provcellhållaren för att täcka ljusbanan. Stäng instrumentkåpan och fortsätt med tom kalibrering genom att välja tomt i kommandofältet och välj sedan OK. Ta ett 500-mikroliter undersampel av varje guldnanopartiklar och förbered en utspädning med 500 mikroliter ultrapurvatten. Placera utspädningarna i en milliliter cuvettes med en slutlig koncentration på 25 mikrogram per milliliter.
Kör en tom kalibrering. Efter den tomma kalibreringen, byt ut en av de tomma cuvettesna i provcellshållaren med ett guldnanopartiklar, håll referens-cuvetten orörd. Välj Mät Start i kommandofältet för att köra genomsökningen.
Kör tre spektrumskanningar för varje utspädd guldnanopartiklar och okänt prov. Extrahera råa experimentella data för varje mätning i en kalkylbladskompatibel fil. Välj Egenskap vid genomsökningen, gå till fliken Skriv ut/exportera i kommandofältet, klicka på Data, Spektrum och parametrar och tryck på OK. Klicka på Spara i kommandofältet och spara data som en xls-fil.
Notera den maximala absorptionsvåglängden och lambda för var och en av avläsningarna och registrera dem i den angivna mallen. Rita en kalibreringskurva med medelvärdet av maximal lambda mot nanopartikelstorlek genom att välja data, infoga diagram, punktdiagram, lägga till trendlinje och polynomkurva. Om du vill inkludera polynomekvationen för kalibreringskurvan väljer du Trendlinjealternativ och Visa ekvation i diagrammet i kommandofältet.
Slutligen beräknar du storleken på det okända guldnanopartiklarna genom att isolera den polynomiska ekvationen från kalibreringskurvan för att passa medelvärdet för den okända maximala lambda med hjälp av en härledning av den kvadratiska formeln. Bland de sex laboratorierna visade den maximala våglängden nära repeterbarhet, medan de maximala absorbansresultaten uppvisade ett mer utspritt utbud av datavärden för olika guldnanopartiklar. Intervallen och de övergripande medlen för varje guldnanopartiklars storlek visas här.
Det maximala Z-poängvärdet för lambda max rapporterades av laboratorium tre för nanopartiklar i 5-nanometerstorlek, och den högsta z-poängen för maximal absorbans rapporterades av laboratorium ett för 40-nanometerstora nanopartiklar. De flesta av partnerna beräknade storleken på den okända nanopartikeln till 76 till 80 nanometer, där laboratorie fem rapporterade en avvikande större storlek på 109 nanometer. Z-poängen för okända storlekar beräknades vara mellan minus 0,25 till minus 0,56 för alla laboratorier, med det enda undantaget som rapporterades av laboratorium fem, som visade den högsta positiva Z-poängen på 2,03.
Kontrollera att parametrarna och inställningarna har justerats korrekt. De utspädda proverna skall beredas färska före mätning med UV-Vis. UV-Vis kan enkelt kombineras med andra verktyg, till exempel TEM, DLS och AFM för att mäta ett stort antal attribut om användare vill karakterisera sitt prov mer omfattande.