Name: organ ischemia-reperfusion injury by simulating hemodynamic changes in rat liver transplant model
Uploaded: 2021-03-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model at JoVE.com

ونود أن نُقرّ بالاقتراحات المفيدة التي قدمها الدكتور وين تاو لي والدكتور جي هوا وو من المستشفى الثاني التابع لجامعة غوانغشي الطبية. ويود المؤلفون أن يشكروا زملاءنا في الفريق على التعليقات والمناقشات المفيدة. كما يود المؤلفون أن يشكروا المراجعين ومحرري JoVE المجهولين على تعليقاتهم. وينبغي توجيه شكر خاص إلى والدي الدكتور يوان على دعمهما وتشجيعهما المستمرين. وقد دعم العمل مؤسسة نينغبو للعلوم الطبيعية (2014A610248).

وافقت لجنة أخلاقيات الحيوان على تجربة جامعة قوانغشي الطبية (No20190920). تم تزويد جميع الحيوانات من قبل مركز التجارب الحيوانية في جامعة قوانغشى الطبية. استخدمنا SPF الذكور Sprague الفئران داولي (200-250 غرام، 10-12 أسابيع)، أبقى تحت درجة حرارة الغرفة من 25 ± 2 درجة مئوية والرطوبة من 50 ± 10٪. تم إيقاف التغذية ق...

<ol>
	<li>Dar, W. A., Sullivan, E., Byon, J. S., Eltzschig, H., Ju, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischaemia+reperfusion+injury+in+liver+transplantation:+Cellular+and+molecular+mechanisms.">Ischaemia reperfusion injury in liver transplantation: Cellular and molecular mechanisms.</a> Liver International. 39 (5), 788-801 (2019).</li><li>Qiao, P. F., Yao, L., Zhang, X. C., Li, G. D., Wu, D. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+pretreatment+improves+stem+cell+repair+following+ischemia-reperfusion+injury+via+autophagy.">Heat shock pretreatment improves stem cell repair following ischemia-reperfusion injury via autophagy.</a> World Journal of Gastroenterology. 21 (45), 12822-12834 (2015).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+YAP+attenuates+hepatic+damage+and+fibrosis+in+liver+ischemia-reperfusion+injury.">Activation of YAP attenuates hepatic damage and fibrosis in liver ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Hepatology. 71 (4), 719-730 (2019).</li><li>Hirao, H., Dery, K. J., Kageyama, S., Nakamura, K., Kupiec-Weglinski, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+Oxygenase-1+in+liver+transplant+ischemia-reperfusion+injury:+From+bench-to-bedside.">Heme Oxygenase-1 in liver transplant ischemia-reperfusion injury: From bench-to-bedside.</a> Free Radical Biology and Medicine. 157, 75-82 (2020).</li><li>Moti&#241;o, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+hepatocyte+cyclooxygenase-2+expression+against+liver+ischemia-reperfusion+injury+in+mice.">Protective role of hepatocyte cyclooxygenase-2 expression against liver ischemia-reperfusion injury in mice.</a> Hepatology. 70 (2), 650-665 (2019).</li><li>Guo, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+search+for+a+magic+bullet+to+fight+multiple+organ+failure+secondary+to+ischemia/reperfusion+injury+and+abdominal+compartment+syndrome.">The search for a magic bullet to fight multiple organ failure secondary to ischemia/reperfusion injury and abdominal compartment syndrome.</a> Journal of Surgical Research. 184 (2), 792-793 (2013).</li><li>Elham, M., Mahmoudi, M., Nassiri-Toosi, M., Baghfalaki, T., Zeraati, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post+liver+transplantation+survival+and+related+prognostic+factors+among+adult+recipients+in+tehran+liver+transplant+center;+2002-2019.">Post liver transplantation survival and related prognostic factors among adult recipients in tehran liver transplant center; 2002-2019.</a> Archives of Iranian Medicine. 1 (23), 326-334 (2020).</li><li>Kim, E. H., Ko, J. S., Gwak, M. S., Lee, S. K., Kim, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+clinical+significance+of+hyperfibrinolysis+during+living+donor+liver+transplantation.">Incidence and clinical significance of hyperfibrinolysis during living donor liver transplantation.</a> Blood Coagulation and Fibrinolysis. 29 (3), 322-326 (2018).</li><li>Czig&#225;ny, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+research+practice+in+rat+orthotopic+and+partial+orthotopic+liver+transplantation:+a+review,+recommendation,+and+publication+guide.">Improving research practice in rat orthotopic and partial orthotopic liver transplantation: a review, recommendation, and publication guide.</a> European Surgical Research. 55 (1-2), 119-138 (2015).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28 (1), 47-50 (1979).</li><li>Zimmermann, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts.">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts.</a> Transplantation Proceedings. 11 (1), 571-577 (1979).</li><li>Miyata, M., Fischer, J. H., Fuhs, M., Isselhard, W., Kasai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Cuff+technique+for+three+vascular+anastomoses.">A simple method for orthotopic liver transplantation in the rat. Cuff technique for three vascular anastomoses.</a> Transplantation. 30 (5), 335-338 (1980).</li><li>Kamada, N. A., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+experience+with+five+hundred+thirty+liver+transplants+in+the+rat.">Surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.</a> Surgery. 93 (1), 64-69 (1983).</li><li>Yang, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+orthotopic+liver+transplantation+using+a+novel+magnetic+anastomosis+technique+for+suprahepatic+vena+cava+reconstruction.">A rat model of orthotopic liver transplantation using a novel magnetic anastomosis technique for suprahepatic vena cava reconstruction.</a> Journal of Visualized Experiments. 19 (133), e56933 (2018).</li><li>Liu, L. X., He, C., Huang, T., Gu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+new+technique+for+reconstruction+of+hepatic+artery+during+liver+transplantation+in+sprague-dawley+rat.">Development of a new technique for reconstruction of hepatic artery during liver transplantation in sprague-dawley rat.</a> PLoS One. 10 (12), 0145662 (2015).</li><li>Paller, M. S., Hoidal, J. R., Ferris, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen+free+radicals+in+ischemic+acute+renal+failure+In+the+rat.">Oxygen free radicals in ischemic acute renal failure In the rat.</a> Journal of Clinical Investigation. 74 (4), 1156-1164 (1984).</li><li>Schmidt, J., Lewandrowsi, K., Warshaw, A. L., Compton, C. C., Rattner, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometric+characteristics+and+homogeneity+of+a+new+model+of+acute+pancreatitis+in+the+rat.">Morphometric characteristics and homogeneity of a new model of acute pancreatitis in the rat.</a> International Journal of Pancreatology. 12 (1), 41-51 (1992).</li><li>Chui, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+mucosal+lesion+in+low-flow+states.+I.+A+morphological,+hemodynamic,+and+metabolic+reappraisal.">Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal.</a> Archives of Surgery. 101 (4), 478-483 (1970).</li><li>Kozian, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-lung+ventilation+induces+hyperfusion+and+alveolar+damage+in+the+ventilated+lung:an+experimental+study.">One-lung ventilation induces hyperfusion and alveolar damage in the ventilated lung:an experimental study.</a> British Journal of Anaesthesia. 100 (4), 549-559 (2008).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heavy+water+(D2O)+containing+preservation+solution+reduces+hepatic+cold+preservation+and+reperfusion+injury+in+an+isolated+perfused+rat+liver+(IPRL)+model.">Heavy water (D2O) containing preservation solution reduces hepatic cold preservation and reperfusion injury in an isolated perfused rat liver (IPRL) model.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (11), 1818 (2019).</li><li>Nakamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sirtuin+1+attenuates+inflammation+and+hepatocellular+damage+in+liver+transplant+ischemia/reperfusion:+from+mouse+to+human.">Sirtuin 1 attenuates inflammation and hepatocellular damage in liver transplant ischemia/reperfusion: from mouse to human.</a> Liver Transplantation. 23 (10), 1282-1293 (2017).</li><li>Blaire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+Considerations+of+Hilar+Cholangiocarcinoma.">Surgical Considerations of Hilar Cholangiocarcinoma.</a> Surgical Oncology Clinics of North America. 28 (4), 601-617 (2019).</li></ol>

OLT في الفئران هو نموذج مثالي لدراسة الحفاظ على الأعضاء في زراعة الكبد، IRI، رفض زرع، التسامح المناعي، زرع الأمراض والصيدلة، homotransplantation، وxenotransplantation. في الوقت الحاضر، ويستخدم على نطاق واسع في البحوث التجريبية لزرع الكبد.
خلال الدراسات التجريبية قمنا أولاً بإعطاء التخدير داخل...

إصابة الإقفاري بالوريد (IRI) هي من المضاعفات الشائعة بعد زراعة الكبد. IRI الكبد هي عملية مرضية تنطوي على تلف الخلايا بوساطة الإقفاريات وتدهور غير طبيعي في تكاثر الكبد. يمكن تقسيم IRI الكبدية والاستجابة المناعية الفطرية المحلية إلى IRI الساخنة والباردة، وفقا للاختلافات في البيئة السريرية1. يتم حث IRI الساخنة من قبل إصابة الخلايا الجذعية، وعادة نتيجة لزرع الكبد، صدمة، والصدماتالنفسية 2. IRI الباردة هو من مضاعفات زرع الكبد الناجمة عن الخلايا البطانية والدورة الدموية الطرفية3. وقد أظهرت التقارير السريرية أن يرتبط IRI الكبدي مع 10٪ من فشل الجهاز المبكر، ويمكن أن تزيد من حدوث الرفض الحاد والمزمن4,5. بالإضافة إلى ذلك ، قد يؤدي IRI الكبدي أيضًا إلى متلازمات خلل وظيفي متعددة في الأعضاء أو متلازمة الاستجابة الالتهابية النظامية ، مع ارتفاع معدل الوفيات6. المرضى الذين يعانون من مشاركة الجهاز خارج الكبد تميل إلى البقاء لفترة أطول في المستشفى، تنفق المزيد من المال، ويكون أسوأ التكهن7. ويرتبط تطور المضاعفات ارتباطا وثيقا بطول المرحلة الالكبدة من زرع الكبد8.
تم الإبلاغ عن زراعة الكبد التقويمي (OLT) في الفئران لأول مرة من قبل البروفيسور الأمريكي لي في عام 1973. تحاكي العملية التجريبية خطوات زراعة الكبد السريرية وosistomosis الأوعية الدموية والقناة الصفراوية المشتركة (CBD) باستخدام طريقة الغرز. الإجراء صعب وتستغرق وقتا طويلا مع معدل نجاح منخفض9. في عام 1979، أدلى كامادا وآخرون تحسنا كبيرا OLT في الفئران باستخدام خلاق 'طريقة اثنين الكفة' لالتموخ من الوريد المدخل للسيطرة على المرحلة anhepatic في غضون 26 دقيقة10. في العام نفسه، اقترح زيمرمان "طريقة الدعامة الصفراوية الفردية". على أساس عمل لي، استخدم زيمرمان أنابيب البولي إيثيلين إلى أنستيوميوس مباشرة اتفاقية التنوع البيولوجي للمتبرع والمتلقي، وتبسيط إعادة بناء اتفاقية التنوع البيولوجي، والحفاظ على وظيفة العضلة العاصرة، وأصبحت هذه الطريقة المعيار لإعادة بناء الصفراوية من نماذج OLT11. في عام 1980، اقترح مياتا وآخرون "طريقة الكفة الثلاثية" حيث تم استئصال الوريد البوّلي (PV) و vena cava (SVC) وداخلي الكبدي (IVC) بواسطة طريقة الكفة. ومع ذلك ، هناك خطر تشويه القنية مع هذه الطريقة ، والتي يمكن أن تؤدي إلى عرقلة السفلية فينا كافا الجزر12. في عام 1983، تم اقتراح "طريقة الكفتين" باستخدام طريقة الكفة لتمتُس الفلطائن من الفلطائية الضوئية و IVC، ولكن اعتماد طريقة خياطة SVC13. وقد اعتمد العلماء هذه الطريقة على الصعيد العالمي لإنشاء نماذج OLT. ومنذ ذلك الحين، تم تحسين الخطوات تانوميسيس الكفة لتقصير المرحلة anhepatic وتحسين معدل البقاء على قيد الحياة من الفئران14. وبالمثل، يتم استخدام أساليب محسنة في الممارسة السريرية لتقصير المرحلة anhepatic15. ومع ذلك، أظهرت الأبحاث الأساسية في IRI بعد زرع الكبد أن معدل البقاء على قيد الحياة يرتبط عكسيا لدرجة إصابة الأعضاء خارج الكبد. لذلك، هناك حاجة إلى مزيد من البحوث، ونموذج حيواني بسيط ويمكن استنساخه مطلوب لمحاكاة IRI بعد زرع الكبد.
استنادا إلى تعريف المرحلة anhepatic، ونحن محاكاة التغيرات الديناميكية الدموية في زرع الكبد مما أدى إلى IRI من الأجهزة خارج الكبد في الفئران. هنا، نقدم وصفا مفصلا لكيفية بناء نموذج حيواني للمرحلة anhepatic (نقص التروية الكبد) في الفئران لتسهيل البحوث الأساسية في IRI بعد زرع الكبد.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde solution</td>
			<td>Shanghai Macklin Biochemical Co.,Ltd</td>
			<td>P804536</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>air drying oven</td>
			<td>Shanghai Binglin Electronic Technology Co., Ltd.</td>
			<td>BPG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alanine aminotransferase (ALT)Kit</td>
			<td>Elabscience Biotechnology Co.,Ltd</td>
			<td>E-BC-K235-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ammonia</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>10002118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>amylase Kit</td>
			<td>Elabscience Biotechnology Co.,Ltd</td>
			<td>E-BC-K005-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anhydrous ethanol</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>100092183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal anesthesia machine</td>
			<td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd</td>
			<td>R640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aspartate aminotransferase (AST)kit</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>S03040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>automatic biochemical analyzer.</td>
			<td>SIEMENS AG FWB:SIE, NYSE:SI Co., Ltd.</td>
			<td>2400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosystems (when nessary)</td>
			<td>Chengdu Taimeng Electronics Co., Ltd.</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Baiyang Medical Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>BY-600A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co. Ltd</td>
			<td>10212432C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>creatinine Kit</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>S03076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dewatering machine</td>
			<td>Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd</td>
			<td>Donatello Series 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>embedding machine</td>
			<td>Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.</td>
			<td>KH-BL1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>frozen machine</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-L5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hematoxylin-eosin dye solution</td>
			<td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>G1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>high-efficiency paraffin wax</td>
			<td>Shanghai huayong paraffin wax co., Ltd</td>
			<td>Q/YSQN40-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hydrochloric acid</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>10011018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>intraocular lens (IOL)forceps</td>
			<td>Guangzhou Guangmei Medical Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>JTZRN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micro Scissors(when nessary)</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>WA1010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holders</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J32010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neutral gum</td>
			<td>Shanghai Huashen Healing Equipment Co.,Ltd.</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>normal optical microscope</td>
			<td>Nikon Instrument Shanghai Co., Ltd</td>
			<td>Nikon Eclipse CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J3CO30</td>
			<td>straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>JD1060</td>
			<td>bending</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J1E0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological slicer</td>
			<td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td>
			<td>RM2016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pipettes</td>
			<td>Dragon Laboratory Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>7010101008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>retractors</td>
			<td>Beijing Jinuotai Technology Development Co.,Ltd.</td>
			<td>JNT-KXQ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scanner</td>
			<td>Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd</td>
			<td>Pannoramic 250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>slide</td>
			<td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>G6004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylene</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

organ ischemia-reperfusion injury by simulating hemodynamic changes in rat liver transplant model

زرع الكبد التقويمي (OLT) في الفئران هو نموذج حيواني مجربة ومثبتة يستخدم في الدراسات قبل الجراحة، وفيما بين العمليات، و ما بعد العملية الجراحية، بما في ذلك إصابة الإقفاريات-إعادة الحقن (IRI) للأعضاء خارج الجسم. يتطلب هذا النموذج العديد من التجارب والأجهزة. ترتبط مدة المرحلة الوهنية ارتباطًا وثيقًا بالوقت الذي يتم تطويره بعد الزرع. في هذه التجربة، استخدمنا التغيرات الديناميكية الدموية للحث على تلف الأعضاء خارج الكبد في الفئران وحددنا أقصى وقت للتسامح. الوقت حتى أشد إصابة الجهاز تختلف لمختلف الأجهزة. يمكن بسهولة تكرار هذه الطريقة ويمكن استخدامها أيضا لدراسة IRI من الأعضاء خارج الكبد بعد زرع الكبد.

الجرذان' التسامح إلى نقص التروية الكبد في هذا النموذج الحيواني، تظهر المواقع التي تم ربط الأوعية الدموية فيها أثناء التشغيل في الشكل 1. تم تقسيم الجرذان بشكل عشوائي إلى 5 مجموعات لـ ISCHEMIA لمدة 15 دقيقة (مجموعة I15) و30 دقيقة (مجموعة I30) و45 دقيقة (مجموعة I45) و60 دقيقة (I60) وم?...

Watch this Scientific Journal Video about Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model at JoVE.com

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

تقدم هذه الورقة وصفاً مفصلاً لكيفية بناء نموذج حيواني للمرحلة الـ"هيبد" (نقص التروية في الكبد) في الفئران لتسهيل البحوث الأساسية في إصابة الإقفار في الدم بعد زرع الكبد.

إصابة الجهاز الإقصاب الإقفاري-Reperfusion عن طريق محاكاة التغيرات الديناميكية الدموية في نموذج زراعة كبد الفئران

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

إصابة الإقفار-reperfusion الجهاز عن طريق محاكاة التغيرات الديناميكية الدموية في نموذج زرع كبد الفئران. إصابة الإقفاري بالوريد هو تطبيق شائع بعد زراعة الكبد. المرضى الذين يعانون من مشاركة الجهاز خارج الكبد تميل إلى البقاء لفترة أطول في المستشفى، وقضاء المزيد ويكون أسوأ التكهن.يرتبط تطور المضاعفات ارتباطًا وثيقًا بطول المرحلة الوهنية لزراعة الكبد. ومع ذلك، أظهرت الأبحاث الأساسية في إصابة الإقفار- reperfusion بعد زرع الكبد أن معدل البقاء على قيد الحياة بعد زرع الكبد يرتبط عكسيا لدرجة إصابة الأعضاء خارج الشهية. استنادا إلى تعريف المرحلة anhaptic، قمنا محاكاة تغيير ديناميكا الدم في زرع الكبد مما أدى إلى إصابة الإقفاريات- reperfusion من الأجهزة خارج الجسم.من هذه الورقة هو تقديم وصف مفصل لكيفية بناء نموذج حيواني للمرحلة anhaptic في الفئران ، والبحوث الأساسية في إصابة نقص التروية - reperfusion بعد زرع الكبد. الدكتور يوان يوان هو المسؤول عن جميع العمليات الحيوانية الفيديو. اثنين من ملقط العيون، مستقيم والانحناء، وعدسة بينوية، ملقط IOL، مقص العيون، واحد إلى اثنين من الداخرات، مسحات القطن، 3-0 الغرز الجراحية، الشاش الودودفورم، الإبر خياطة، النظم الحيوية عند الضرورة، والعدسة بينات، وتستخدم لمصاصات IOL لفصل الأوعية الدموية بسبب الرؤوس المستديرة.آلة تخدير الحيوان، آلة دي سقي، آلة تضمين، تقطيع اللحمة المرضية ، آلة متجمدة ، تقطيع الأنسجة ، فرن تجفيف الهواء ، المجهر البصري العصبي ، الماسح الضوئي ، enflurane للتخدير العام ، محلول 4٪ paraformaldehyde ، الإيثانول الأنهيدروس ، الزيلين ، شمع البارافين عالي الكفاءة ، محلول صبغ الهماوكسيلين - إيوسين ، حمض الهيدروكلوريك ، الأمونيا ، الشريحة ، الزجاج المغطى ، العلكة المحايدة والكواشف المُحتَضرة . الميصات، الطرد المركزي، محلل الكيمياء الحيوية التلقائي، ألانين نقل أميني، عدة ALT، الأسبارتات، نقل الأمينية، مجموعة AST، طقم الكرياتينين. بعد وزنها ، يتم تخدير الفئران مع isoflurane بواسطة آلة تخدير الحيوان.بعد تطهير البطن، وجعل شق متوسط من ثلاثة سنتيمترات تحت عملية xiphoid باستخدام ملقط ومقص. فتح تجويف البطن، وفضح الكبد باستخدام الداخر وتعبئة الرباط الكبدي. استخدام مسحات القطن لقلب الفص الأوسط للكبد بلطف وتحويلها إلى أعلى لفضح الـ porta habitis.تحديد القناة الصفراوية، الوريد المدخل، والشريان الكبدي. دفع الأمعاء الدقيقة نحو تجويف البطن السفلي الأيسر باستخدام مبادلات القطن ونقل الوريد السفلي cava إلى الوريد الكلوي الأيمن، وعزل الوريد المدخل، الشريان الكبدي والكافا السفلي فوق الوريد الكلوي الأيمن مع عدسة داخل العين، IOL، ملقط ملحوظ مع 3-0 خيط حرير كل عقدة زلة. قطع فتح الجلد من الطرفين السفلي الأيسر والأيمن وفضح الوريد الفخذي باستخدام ملقط العيون.حقن ببطء منخفض الوزن الجزيئي الهيبارين 625 وحدة دولية / كغ من خلال الوريد الفخذي ل heparinize الجسم كله. Ligate الوريد المدخل، الشريان الكبدي، والكافا السفلية فوق الوريد الكلوي الأيمن مع عدد 3-0 الغرز، وتستمر لمدة 45 دقيقة. استبدل الأمعاء الدقيقة في تجويف البطن واغطيها بالشاش.يتم تقليل التخدير الاستنشاقي خلال هذه الفترات. بعد 45 دقيقة، حرر الوريد المدخل، الشريان الكبدي، والكافا السفلية فوق الوريد الكلوي الأيمن. خياطة العضلات والجلد طبقة من طبقة وإنهاء التخدير الاستنشاقي.توفير مسكن بعد العملية الجراحية باستخدام المورفين تحت الجلد من 5 ملغ / كغ كل أربع ساعات مراقبة الفئران حتى مستيقظا والحفاظ على تغذية تحت درجة حرارة 25 زائد أو ناقص درجتين مئويتين والرطوبة من 50 زائد أو ناقص 10 ٪ مصابيح التدفئة الحيوانية ضروري. في هذا النموذج الحيواني، تم تقسيم الجرذان بشكل عشوائي إلى خمس مجموعات وفقا لاقفوية لمدة 15 دقيقة، وأنا 15 مجموعة، 30 دقيقة، أنا 30 مجموعة، 45 دقيقة، أنا 45 مجموعة، 60 دقيقة، أنا 60، ومجموعة صورية مع 10 فئران في كل مجموعة. ولوحظ معدل بقائهم على قيد الحياة لكل مجموعة بعد 14 يوما من العملية.جميع الفئران نجت في I 15، أنا 30 والجماعات الصورية. نجا ثمانية لمدة 14 يوما في المجموعة I 45 واثنين فقط على قيد الحياة في المجموعة I 60. وتشير النتائج إلى أن الفئران يمكن أن تتسامح مع المرحلة anhepatic لمدة 45 دقيقة على الأكثر.خلال التجربة، تم استخدام النظم الحيوية لتسجيل التغيرات في معدل ضربات القلب وضغط الدم، والحق الداخلي الشريان النوب قبل وبعد المرحلة anhepatic. وجدنا أن معدل ضربات القلب ويعني ضغط الشرايين، خطة الفئران، تغيرت بشكل كبير بعد ربط الأوعية الدموية. بعد الربط، نقص التروية الكبدي، والاحتقان، وذمة في الأمعاء، وسبوالي المعدة وsplenomegaly كانت واضحة.تم تقسيم 80 الفئران عشوائيا إلى ثماني مجموعات بما في ذلك نقص التروية لمدة 45 دقيقة، T0، reperfusion لمدة ست ساعات، T6، 12 ساعة، T12، 24 ساعة، T24، 48 ساعة، T48، 72 ساعة، T72، سبعة أيام، T7، في 14 يوما، T14، على التوالي. تم أخذ الكلى والبنكرياس والأمعاء الدقيقة وأنسجة القلب والرئة وملطخة بـ HE بعد التضحية بالجرذان. باستثناء القلب ، تم إعطاء درجات مرضية وفقًا للإشارات ، على التوالي.وأظهرت النتائج أن وقت الإصابة القصوى للأعضاء خارج الكبد تختلف. كانت ست إلى 24 ساعة بعد العملية في البنكرياس و 24 إلى 48 ساعة للرئتين. أصيب الجهاز المعوي والكلى بجروح بالغة بعد 45 دقيقة من نقص التروية.لم يكن هناك أي شذوذ واضح في الغشاء المخاطي المعوي بعد 24 ساعة من العملية وتم شفاء الكلى بعد 48 ساعة. أما بالنسبة للقلب ، مع مرور الوقت بعد إعادة ضخ ، تم العثور على مخدار الخلايا عضلة القلب المحلية ، وتفتيت الخلايا وانحلالها ، وتسلل الخلايا الالتهابية ، والامتدنة والازدحام الموضعي في الأنسجة من 24 إلى 48 ساعة بعد العملية. تم جمع المصل وتم الكشف عن مستويات ALT و AST والكرينينين والأميليز بواسطة محلل كيميائي حيوي تلقائي.بلغت جميع المؤشرات ذروتها في 24 إلى 48 ساعة ، على عكس التغيرات المرضية. على الرغم من أن المستويات كانت طبيعية بشكل أساسي بعد 48 ساعة من العملية ، فإن الضرر المرضي كان لا يزال مستمرًا. لتلخيص, النموذج في الفئران بسيطة وأسهل للاستخدام دون microsurgery ويوفر أساسا للبحوث الأساسية للإصابة الإقفاريات-reperfusion من الأجهزة خارج الكبد بعد نقص التروية الكبدي.

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

توقف القلب والإنعاش القلبي Normothermic : نموذج الفأر من نقص التروية ، إعادة إشباع الخلايا الإصابات

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

في الموقع المستقيمة البطنية عرضية عضلي جلدي رفرف: نموذج الفئران من الاصابة ضخه الإسكيمية عضلي جلدي

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

نقص التروية-ضخه نموذج من إصابة الكلى الحاد والتليف آخر الاصابات في الفئران

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

تقنية المشتريات الكبد الخنازير وزرع مثلي باستخدام أحدث بورتو الأجوف التحويلة

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

الاستقراء وتقييم الإصابة الإسكيمية-ضخه في Langendorff perfused لالجرذ القلوب

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

نموذج الفئران من المعوية الإسكيمية-ضخه إصابة

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

نموذج الفأر من الشبكية الإسكيمية-ضخه إصابة خلال ارتفاع ضغط العين

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

طريقة التسليم المباشر القطاعي البينية الكبد باستخدام نموذج الفأر الكبد نقيري المشبك

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

نموذج حيوانات صغيرة من نضح الكبد نورموثيرميك السابقين فيفو

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

تقييم احتياطي التدفق التاجي بعد إعادة ضخ الإقفارية عضلة القلب في الفئران

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...