Name: organ ischemia-reperfusion injury by simulating hemodynamic changes in rat liver transplant model
Uploaded: 2021-03-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model at JoVE.com

Nous tenons à souligner les suggestions utiles faites par le Dr Wen-tao Li et le Dr Ji-hua Wu du deuxième hôpital affilié de l’Université médicale du Guangxi. Les auteurs remercient nos coéquipiers pour leurs commentaires et discussions utiles. Les auteurs aimeraient également remercier les critiques anonymes et les éditeurs de JoVE pour leurs commentaires. Nous remercions tout remercie tout œux les parents du Dr Yuan pour leur soutien et leurs encouragements continus. Les travaux ont été soutenus par la Ningbo Natural Science Foundation (2014A610248).

Le Comité d’éthique animale a approuvé l’expérience de l’Université médicale du Guangxi (No20190920). Tous les animaux ont été fournis par le Animal Experiment Center de l’Université médicale du Guangxi. Nous avons utilisé des rats Sprague Dawley mâles fpS (200-250 g, 10-12 semaines), maintenus sous la température ambiante de 25 ± 2 °C et l’humidité de 50 ± 10 %. L’alimentation a été interrompue 24 heures avant l’opération; toutefois, de l’eau a été fournie.
<p class="jove_conten...

<ol>
	<li>Dar, W. A., Sullivan, E., Byon, J. S., Eltzschig, H., Ju, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischaemia+reperfusion+injury+in+liver+transplantation:+Cellular+and+molecular+mechanisms.">Ischaemia reperfusion injury in liver transplantation: Cellular and molecular mechanisms.</a> Liver International. 39 (5), 788-801 (2019).</li><li>Qiao, P. F., Yao, L., Zhang, X. C., Li, G. D., Wu, D. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+pretreatment+improves+stem+cell+repair+following+ischemia-reperfusion+injury+via+autophagy.">Heat shock pretreatment improves stem cell repair following ischemia-reperfusion injury via autophagy.</a> World Journal of Gastroenterology. 21 (45), 12822-12834 (2015).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+YAP+attenuates+hepatic+damage+and+fibrosis+in+liver+ischemia-reperfusion+injury.">Activation of YAP attenuates hepatic damage and fibrosis in liver ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Hepatology. 71 (4), 719-730 (2019).</li><li>Hirao, H., Dery, K. J., Kageyama, S., Nakamura, K., Kupiec-Weglinski, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+Oxygenase-1+in+liver+transplant+ischemia-reperfusion+injury:+From+bench-to-bedside.">Heme Oxygenase-1 in liver transplant ischemia-reperfusion injury: From bench-to-bedside.</a> Free Radical Biology and Medicine. 157, 75-82 (2020).</li><li>Moti&#241;o, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+hepatocyte+cyclooxygenase-2+expression+against+liver+ischemia-reperfusion+injury+in+mice.">Protective role of hepatocyte cyclooxygenase-2 expression against liver ischemia-reperfusion injury in mice.</a> Hepatology. 70 (2), 650-665 (2019).</li><li>Guo, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+search+for+a+magic+bullet+to+fight+multiple+organ+failure+secondary+to+ischemia/reperfusion+injury+and+abdominal+compartment+syndrome.">The search for a magic bullet to fight multiple organ failure secondary to ischemia/reperfusion injury and abdominal compartment syndrome.</a> Journal of Surgical Research. 184 (2), 792-793 (2013).</li><li>Elham, M., Mahmoudi, M., Nassiri-Toosi, M., Baghfalaki, T., Zeraati, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post+liver+transplantation+survival+and+related+prognostic+factors+among+adult+recipients+in+tehran+liver+transplant+center;+2002-2019.">Post liver transplantation survival and related prognostic factors among adult recipients in tehran liver transplant center; 2002-2019.</a> Archives of Iranian Medicine. 1 (23), 326-334 (2020).</li><li>Kim, E. H., Ko, J. S., Gwak, M. S., Lee, S. K., Kim, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+clinical+significance+of+hyperfibrinolysis+during+living+donor+liver+transplantation.">Incidence and clinical significance of hyperfibrinolysis during living donor liver transplantation.</a> Blood Coagulation and Fibrinolysis. 29 (3), 322-326 (2018).</li><li>Czig&#225;ny, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+research+practice+in+rat+orthotopic+and+partial+orthotopic+liver+transplantation:+a+review,+recommendation,+and+publication+guide.">Improving research practice in rat orthotopic and partial orthotopic liver transplantation: a review, recommendation, and publication guide.</a> European Surgical Research. 55 (1-2), 119-138 (2015).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28 (1), 47-50 (1979).</li><li>Zimmermann, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts.">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts.</a> Transplantation Proceedings. 11 (1), 571-577 (1979).</li><li>Miyata, M., Fischer, J. H., Fuhs, M., Isselhard, W., Kasai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Cuff+technique+for+three+vascular+anastomoses.">A simple method for orthotopic liver transplantation in the rat. Cuff technique for three vascular anastomoses.</a> Transplantation. 30 (5), 335-338 (1980).</li><li>Kamada, N. A., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+experience+with+five+hundred+thirty+liver+transplants+in+the+rat.">Surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.</a> Surgery. 93 (1), 64-69 (1983).</li><li>Yang, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+orthotopic+liver+transplantation+using+a+novel+magnetic+anastomosis+technique+for+suprahepatic+vena+cava+reconstruction.">A rat model of orthotopic liver transplantation using a novel magnetic anastomosis technique for suprahepatic vena cava reconstruction.</a> Journal of Visualized Experiments. 19 (133), e56933 (2018).</li><li>Liu, L. X., He, C., Huang, T., Gu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+new+technique+for+reconstruction+of+hepatic+artery+during+liver+transplantation+in+sprague-dawley+rat.">Development of a new technique for reconstruction of hepatic artery during liver transplantation in sprague-dawley rat.</a> PLoS One. 10 (12), 0145662 (2015).</li><li>Paller, M. S., Hoidal, J. R., Ferris, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen+free+radicals+in+ischemic+acute+renal+failure+In+the+rat.">Oxygen free radicals in ischemic acute renal failure In the rat.</a> Journal of Clinical Investigation. 74 (4), 1156-1164 (1984).</li><li>Schmidt, J., Lewandrowsi, K., Warshaw, A. L., Compton, C. C., Rattner, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometric+characteristics+and+homogeneity+of+a+new+model+of+acute+pancreatitis+in+the+rat.">Morphometric characteristics and homogeneity of a new model of acute pancreatitis in the rat.</a> International Journal of Pancreatology. 12 (1), 41-51 (1992).</li><li>Chui, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+mucosal+lesion+in+low-flow+states.+I.+A+morphological,+hemodynamic,+and+metabolic+reappraisal.">Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal.</a> Archives of Surgery. 101 (4), 478-483 (1970).</li><li>Kozian, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-lung+ventilation+induces+hyperfusion+and+alveolar+damage+in+the+ventilated+lung:an+experimental+study.">One-lung ventilation induces hyperfusion and alveolar damage in the ventilated lung:an experimental study.</a> British Journal of Anaesthesia. 100 (4), 549-559 (2008).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heavy+water+(D2O)+containing+preservation+solution+reduces+hepatic+cold+preservation+and+reperfusion+injury+in+an+isolated+perfused+rat+liver+(IPRL)+model.">Heavy water (D2O) containing preservation solution reduces hepatic cold preservation and reperfusion injury in an isolated perfused rat liver (IPRL) model.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (11), 1818 (2019).</li><li>Nakamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sirtuin+1+attenuates+inflammation+and+hepatocellular+damage+in+liver+transplant+ischemia/reperfusion:+from+mouse+to+human.">Sirtuin 1 attenuates inflammation and hepatocellular damage in liver transplant ischemia/reperfusion: from mouse to human.</a> Liver Transplantation. 23 (10), 1282-1293 (2017).</li><li>Blaire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+Considerations+of+Hilar+Cholangiocarcinoma.">Surgical Considerations of Hilar Cholangiocarcinoma.</a> Surgical Oncology Clinics of North America. 28 (4), 601-617 (2019).</li></ol>

OLT chez les rats est un modèle idéal pour étudier la préservation des organes dans la transplantation hépatique, IRI, rejet de greffe, tolérance immunitaire, pathologie de transplantation et pharmacologie, homotransplantation, et la xénotransplantation. À l’heure actuelle, il est largement utilisé dans la recherche expérimentale de la transplantation hépatique.
Au cours d’études pilotes, nous avons d’abord administré l’anesthésie intraperitoneal pentobarbital de sodium e...

La lésion d’Ischemia-reperfusion (IRI) est une complication commune après transplantation de foie. L’IRI hépatique est un processus pathologique impliquant des dommages cellulaires ischémiques et une détérioration anormale de la réperfusion hépatique. L’IRI hépatique et la réponse immunitaire innée locale peuvent être divisés en IRI chaud et froid, selon les différences dans l’environnement clinique1. L’IRI chaud est induit par des dommages de cellules souches, habituellement en raison de la transplantation de foie, du choc, et du trauma2. L’IRI froid est une complication de la transplantation hépatique provoquée par des cellules endothéliales et la circulationpériphérique 3. Les rapports cliniques ont prouvé que l’IRI hépatique est associé à 10% des échecs tôt d’organe et peut augmenter l’incidence du rejet aigu etchronique 4,5. En outre, l’IRI hépatique peut également induire les syndromes multiples de dysfonctionnement d’organe ou le syndrome inflammatoire systémique de réponse, avec la mortalitéélevée 6. Les patients présentant la participation extrahepatic d’organe tendent à rester plus longtemps à l’hôpital, dépensent plus d’argent, et ont un pronosticplus mauvais 7. Le développement des complications est étroitement lié à la longueur de la phase anhepatic de la transplantation hépatique8.
La transplantation orthotopique de foie (OLT) chez les rats a été rapportée pour la première fois par le professeur américain Lee en 1973. L’opération expérimentale a simulé les étapes de la transplantation clinique de foie et de l’anastomosis des vaisseaux sanguins et du canal biliaire commun (CBD) utilisant la méthode de suture. La procédure est difficile et longue avec un faible taux de succès9. En 1979, Kamada et coll. ont apporté une amélioration significative à l’OLT chez les rats en utilisant de façon créative la « méthode à deux poignets » pour l’anastomose de la veine portail pour contrôler la phase anhépatique dans les 26 minutes10. La même année, Zimmermann proposa la « méthode unique de l’en-avant biliaire ». Sur la base des travaux de Lee, Zimmermann a utilisé des tubes de polyéthylène pour anastomoser directement la CDB du donneur et du receveur, a simplifié la reconstruction de la CDB et préservé la fonction du sphincter, et cette méthode est devenue la norme pour la reconstruction biliaire des modèles OLT11. En 1980, Miyata et coll. ont proposé la « méthode des trois poignets » où la veine portail (PV), le véna cava suprahépatique (SVC) et le véna cava intrahépatique (IVC) étaient anastomosés par la méthode du brassard. Cependant, il y a un risque de distorsion de la canule avec cette méthode, qui peut mener à l’obstruction du reflux inférieur de cava de vena12. En 1983, la « méthode à deux poignets » a été proposée en utilisant la méthode du brassard pour l’anastomose du PV et de l’IVC, mais en adoptant la méthode de suture pour le SVC13. Cette méthode a été adoptée par les chercheurs du monde entier pour établir des modèles olt. Depuis lors, les étapes d’anastomose de manchette ont été améliorées pour raccourcir la phase anhepatic et améliorer le taux de survie des rats14. De même, des méthodes améliorées sont utilisées dans la pratique clinique pour raccourcir la phase anhépatique15. Cependant, la recherche fondamentale sur IRI après transplantation hépatique a montré que le taux de survie est inversement lié au degré de blessure aux organes extrahépatiques. Par conséquent, d’autres recherches sont nécessaires, et un modèle animal simple et reproductible est nécessaire pour simuler iri après la transplantation hépatique.
Basé sur la définition de la phase anhepatic, nous avons simulé les changements hémodynamiques dans la transplantation de foie ayant pour résultat IRI des organes extrahépatiques chez les rats. Ci-dessous, nous fournissons une description détaillée de la façon de construire un modèle animal de la phase anhépatique (ischémie hépatique) chez les rats pour faciliter la recherche fondamentale sur iri après transplantation hépatique.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde solution</td>
			<td>Shanghai Macklin Biochemical Co.,Ltd</td>
			<td>P804536</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>air drying oven</td>
			<td>Shanghai Binglin Electronic Technology Co., Ltd.</td>
			<td>BPG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alanine aminotransferase (ALT)Kit</td>
			<td>Elabscience Biotechnology Co.,Ltd</td>
			<td>E-BC-K235-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ammonia</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>10002118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>amylase Kit</td>
			<td>Elabscience Biotechnology Co.,Ltd</td>
			<td>E-BC-K005-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anhydrous ethanol</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>100092183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal anesthesia machine</td>
			<td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd</td>
			<td>R640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aspartate aminotransferase (AST)kit</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>S03040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>automatic biochemical analyzer.</td>
			<td>SIEMENS AG FWB:SIE, NYSE:SI Co., Ltd.</td>
			<td>2400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosystems (when nessary)</td>
			<td>Chengdu Taimeng Electronics Co., Ltd.</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Baiyang Medical Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>BY-600A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co. Ltd</td>
			<td>10212432C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>creatinine Kit</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>S03076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dewatering machine</td>
			<td>Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd</td>
			<td>Donatello Series 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>embedding machine</td>
			<td>Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.</td>
			<td>KH-BL1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>frozen machine</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-L5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hematoxylin-eosin dye solution</td>
			<td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>G1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>high-efficiency paraffin wax</td>
			<td>Shanghai huayong paraffin wax co., Ltd</td>
			<td>Q/YSQN40-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hydrochloric acid</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>10011018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>intraocular lens (IOL)forceps</td>
			<td>Guangzhou Guangmei Medical Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>JTZRN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micro Scissors(when nessary)</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>WA1010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holders</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J32010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neutral gum</td>
			<td>Shanghai Huashen Healing Equipment Co.,Ltd.</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>normal optical microscope</td>
			<td>Nikon Instrument Shanghai Co., Ltd</td>
			<td>Nikon Eclipse CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J3CO30</td>
			<td>straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>JD1060</td>
			<td>bending</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J1E0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological slicer</td>
			<td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td>
			<td>RM2016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pipettes</td>
			<td>Dragon Laboratory Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>7010101008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>retractors</td>
			<td>Beijing Jinuotai Technology Development Co.,Ltd.</td>
			<td>JNT-KXQ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scanner</td>
			<td>Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd</td>
			<td>Pannoramic 250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>slide</td>
			<td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>G6004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylene</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

organ ischemia-reperfusion injury by simulating hemodynamic changes in rat liver transplant model

La transplantation orthotopique de foie (OLT) chez les rats est un modèle animal éprouvé utilisé pour des études préopératoires, peropératoires, et postopératoires, y compris des dommages d’ischémie-reperfusion (IRI) des organes extrahépatiques. Ce modèle nécessite de nombreuses expériences et dispositifs. La durée de la phase anhépatique est étroitement liée au temps de développement de l’IRI après transplantation. Dans cette expérience, nous avons employé des changements hémodynamiques pour induire des dommages extrahepatic d’organe chez les rats et avons déterminé le temps maximum de tolérance. Le temps jusqu’à ce que la blessure d’organe la plus grave variait pour différents organes. Cette méthode peut facilement être reproduite et peut également être utilisée pour étudier l’IRI des organes extrahépatiques après la transplantation hépatique.

Tolérance des rats à l’ischémie hépatique Dans ce modèle animal, les sites où les vaisseaux sanguins ont été ligatés pendant l’exploitation sont indiqués à la figure 1. Les rats ont été répartis au hasard en 5 groupes pour l’ischémie pendant 15 minutes (groupe I15), 30 minutes (groupe I30), 45 minutes (groupe I45), 60 minutes (I60) et un groupe factice, avec 10 rats dans chaque groupe. Le taux de survie de chaque groupe a été observé 14 jours aprè...

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Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Cet article fournit une description détaillée de la façon de construire un modèle animal de la phase anhépatique (ischémie hépatique) chez les rats pour faciliter la recherche fondamentale sur les lésions ischémiques-reperfusion après la transplantation hépatique.

Lésion d’ischémie-reperfusion d’organe en simulant des changements hémodynamiques dans le modèle de greffe de foie de rat

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

Lésion d’ischémie-reperfusion d’organe en simulant des changements hémodynamiques dans le modèle de greffe de foie de rat. Les dommages d’ischemia-reperfusion sont une application commune après transplantation de foie. Les patients présentant la participation extrahepatic d’organe tendent à rester plus longtemps à l’hôpital, dépensent plus et ont un pronostic plus mauvais.Le développement de la complication est étroitement lié à la longueur de la phase anhepatic de la transplantation de foie. Cependant, la recherche fondamentale sur les dommages d’ischémie-reperfusion après transplantation de foie a prouvé que le taux de survie après transplantation de foie est inversement lié au degré de blessure aux organes extrahaptiques. Basé sur la définition de la phase anhaptique, nous avons simulé le changement hémodynamique dans la transplantation de foie ayant pour résultat des dommages d’ischémie-reperfusion des organes extrahaptiques.De cet article est de fournir une description détaillée de la façon de construire un modèle animal de la phase anhaptique chez les rats, la recherche fondamentale sur les lésions ischémiques-reperfusion après la transplantation du foie. Le Dr Yuan Yuan est responsable de toutes les opérations vidéo sur animaux. Deux forceps ophtalmiques, droits et flexion, et lentille interoculaire, forceps IOL, ciseaux ophtalmiques, un à deux rétracteurs, coton-tiges, sutures chirurgicales 3-0, gaze iodoforme, aiguilles de suture, biosystèmes si nécessaire, et lentille interoculaire, forceps IOL est utilisé pour séparer les vaisseaux sanguins en raison de têtes rondes.Machine d’anesthésie animale, machine de désarroiement, machine d’intégration, trancheur pathologique, machine congelée, trancheur de tissu, four de séchage à l’air, microscope optique neural, le scanner, enflurane pour l’anesthésie générale, solution de paraformaldéhyde de 4%, éthanol anyhydrous, xylène, cire de paraffine à haut rendement, solution de colorant d’hématoxyline-éosin, acide chlorhydrique, ammoniac, glissière, verre de couverture, gomme neutre et rééconts mourants, et matériaux consommables. Pipettes, centrifugeuse, analyseur biochimique automatique, alanine amino transferase, kit ALT, aspartate, amino transferase, kit AST, kit créatinine. Après pesage, les rats sont anesthésiés à l’isoflurane par une machine d’anesthésie animale.Après la désinfection abdominale, faire une incision médiane de trois centimètres au-dessous du processus xiphoïde à l’aide de forceps et ciseaux. Ouvrez la cavité abdominale, exposez le foie à l’aide d’un rétracteur et mobilisez le ligament hépatogastrique. Utilisez des cotons-tiges pour retourner doucement le lobe moyen du foie et le tourner vers le haut pour exposer la porta habitis.Identifiez le canal biliaire, la veine portail et l’artère hépatique. Poussez l’intestin grêle vers la cavité abdominale inférieure gauche à l’aide d’échanges de coton et déplacez le cava vena inférieur vers la veine rénale droite, isolez la veine portail, l’artère hépatique et le cava vena inférieur au-dessus de la veine rénale droite avec une lentille intraoculaire, IOL, forceps marqués d’un fil de soie 3-0 chacun avec un noeud de glissement. Coupez la peau de l’extrémité inférieure gauche et droite et exposez la veine fémorale à l’aide de forceps ophtalmiques.Injectez lentement de l’héparine de faible poids moléculaire de 625 UI/kg par la veine fémorale pour hépariniser tout le corps. Ligate la veine portail, artère hépatique, et cava vena inférieur au-dessus de la veine rénale droite avec le nombre de sutures 3-0, d’une durée de 45 minutes. Remplacer l’intestin grêle dans la cavité abdominale et le couvrir de gaze.L’anesthésie par inhalation est réduite pendant ces périodes. Après 45 minutes, relâchez la veine portail, l’artère hépatique et le cava vena inférieur au-dessus de la veine rénale droite. Suture le muscle et la peau couche par couche et mettre fin à l’anesthésie par inhalation.Fournir une analgésie postopératoire à l’aide de morphine sous-cutanée de 5 mg/kg toutes les quatre heures Observez le rat jusqu’à ce qu’il soit éveillé et nourri sous une température de 25 plus ou moins deux degrés Celsius et une humidité de 50 plus ou moins 10 % Lampes de chauffage pour animaux est nécessaire. Dans ce modèle animal, les rats ont été répartis au hasard en cinq groupes selon l’ischémie pendant 15 minutes, je 15 groupe, 30 minutes, je 30 groupe, 45 minutes, je 45 groupe, 60 minutes, je 60, et un groupe factice avec 10 rats dans chaque groupe. Leur taux de survie de chaque groupe a été observé 14 jours après l’opération.Tous les rats ont survécu dans les groupes I 15, I 30 et sham. Huit ont survécu pendant 14 jours dans le groupe I 45 et seulement deux ont survécu dans le groupe I 60. Les résultats ont suggéré que les rats pourraient tolérer la phase anhépatique pendant 45 minutes tout au plus.Pendant l’expérience, Biosystems a été employé pour enregistrer les changements de la fréquence cardiaque et de la tension artérielle, l’intubation interne droite d’artère carotide avant et après la phase anhepatic. Nous avons constaté que la fréquence cardiaque et la pression artérielle moyenne, MAP des rats, ont changé de façon spectaculaire après ligature vasculaire. Après ligature, l’ischémie hépatique, la congestion, et l’oedème dans les intestins, les varices gastriques et la splendeur étaient évidents.80 rats ont été répartis au hasard en huit groupes, y compris l’ischémie pendant 45 minutes, T0, reperfusion pendant six heures, T6, 12 heures, T12, 24 heures, T24, 48 heures, T48, 72 heures, T72, sept jours, T7, en 14 jours, T14, respectivement. Les tissus rénaux, pancréatique, intestin grêle, coeur et poumon ont été pris et tachés avec HE après que des rats aient été sacrifiés. À l’exception du cœur, des scores pathologiques ont été donnés selon les références, respectivement.Les résultats ont prouvé que le temps de la blessure maximale des organes extrahepatic variait. C’était six à 24 heures après opération pour le pancréas et 24 à 48 heures pour les poumons. Le tractus intestinal et le rein ont été les plus gravement blessés après 45 minutes d’ischémie.Il n’y avait aucune anomalie évidente de la muqueuse intestinale 24 heures après l’opération et les reins récupérés après 48 heures. Quant au coeur, avec le passage du temps après la reperfusion, la narcose locale de cellules myocardiques, la fragmentation et la dissolution cellulaires, l’infiltration inflammatoire de cellules, et la vasodilatation et la congestion locales ont été trouvées dans le tissu par 24 à 48 heures après l’opération. Le sérum a été rassemblé et les niveaux d’ALT, d’AST, de créatinine, et d’amylase ont été détectés par un analyseur biochimique automatique.Tous les indicateurs ont culminé à 24 à 48 heures, contrairement aux changements pathologiques. Bien que les niveaux aient été fondamentalement normaux 48 heures après l’opération, les dommages pathologiques continuaient toujours. Pour résumer, le modèle chez les rats est simple et plus facile à utiliser sans microchirurgie et fournit la base à la recherche fondamentale de la lésion ischémique-reperfusion des organes extrahépatiques après ischémie hépatique.

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