Name: organ ischemia-reperfusion injury by simulating hemodynamic changes in rat liver transplant model
Uploaded: 2021-03-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model at JoVE.com

Мы хотели бы отметить полезные предложения д-ра Вэнь-тао Ли и д-ра Цзи-хуа Ву из Второй аффилированной больницы Гуанси-Медицинского университета. Авторы хотели бы поблагодарить наших товарищей по команде за полезные комментарии и дискуссии. Авторы также хотели бы поблагодарить анонимных рецензентов и редакторов JoVE за их комментарии. Особая благодарность должна идти к родителям доктора Yuan для их непрерывной поддержки и ободрения. Работа была поддержана Фондом естественных наук Нинбо (2014A610248).

Комитет по этике животных одобрил эксперимент Гуанси-Медицинского университета (No20190920). Все животные были поставлены Центром экспериментов на животных Гуанси медицинского университета. Мы использовали SPF мужчин Sprague Доули крыс (200-250 г, 10-12 недель), хранится под комнатной температурой 25 ?...

<ol>
	<li>Dar, W. A., Sullivan, E., Byon, J. S., Eltzschig, H., Ju, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischaemia+reperfusion+injury+in+liver+transplantation:+Cellular+and+molecular+mechanisms.">Ischaemia reperfusion injury in liver transplantation: Cellular and molecular mechanisms.</a> Liver International. 39 (5), 788-801 (2019).</li><li>Qiao, P. F., Yao, L., Zhang, X. C., Li, G. D., Wu, D. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+pretreatment+improves+stem+cell+repair+following+ischemia-reperfusion+injury+via+autophagy.">Heat shock pretreatment improves stem cell repair following ischemia-reperfusion injury via autophagy.</a> World Journal of Gastroenterology. 21 (45), 12822-12834 (2015).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+YAP+attenuates+hepatic+damage+and+fibrosis+in+liver+ischemia-reperfusion+injury.">Activation of YAP attenuates hepatic damage and fibrosis in liver ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Hepatology. 71 (4), 719-730 (2019).</li><li>Hirao, H., Dery, K. J., Kageyama, S., Nakamura, K., Kupiec-Weglinski, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+Oxygenase-1+in+liver+transplant+ischemia-reperfusion+injury:+From+bench-to-bedside.">Heme Oxygenase-1 in liver transplant ischemia-reperfusion injury: From bench-to-bedside.</a> Free Radical Biology and Medicine. 157, 75-82 (2020).</li><li>Moti&#241;o, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+hepatocyte+cyclooxygenase-2+expression+against+liver+ischemia-reperfusion+injury+in+mice.">Protective role of hepatocyte cyclooxygenase-2 expression against liver ischemia-reperfusion injury in mice.</a> Hepatology. 70 (2), 650-665 (2019).</li><li>Guo, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+search+for+a+magic+bullet+to+fight+multiple+organ+failure+secondary+to+ischemia/reperfusion+injury+and+abdominal+compartment+syndrome.">The search for a magic bullet to fight multiple organ failure secondary to ischemia/reperfusion injury and abdominal compartment syndrome.</a> Journal of Surgical Research. 184 (2), 792-793 (2013).</li><li>Elham, M., Mahmoudi, M., Nassiri-Toosi, M., Baghfalaki, T., Zeraati, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post+liver+transplantation+survival+and+related+prognostic+factors+among+adult+recipients+in+tehran+liver+transplant+center;+2002-2019.">Post liver transplantation survival and related prognostic factors among adult recipients in tehran liver transplant center; 2002-2019.</a> Archives of Iranian Medicine. 1 (23), 326-334 (2020).</li><li>Kim, E. H., Ko, J. S., Gwak, M. S., Lee, S. K., Kim, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+clinical+significance+of+hyperfibrinolysis+during+living+donor+liver+transplantation.">Incidence and clinical significance of hyperfibrinolysis during living donor liver transplantation.</a> Blood Coagulation and Fibrinolysis. 29 (3), 322-326 (2018).</li><li>Czig&#225;ny, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+research+practice+in+rat+orthotopic+and+partial+orthotopic+liver+transplantation:+a+review,+recommendation,+and+publication+guide.">Improving research practice in rat orthotopic and partial orthotopic liver transplantation: a review, recommendation, and publication guide.</a> European Surgical Research. 55 (1-2), 119-138 (2015).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28 (1), 47-50 (1979).</li><li>Zimmermann, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts.">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts.</a> Transplantation Proceedings. 11 (1), 571-577 (1979).</li><li>Miyata, M., Fischer, J. H., Fuhs, M., Isselhard, W., Kasai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Cuff+technique+for+three+vascular+anastomoses.">A simple method for orthotopic liver transplantation in the rat. Cuff technique for three vascular anastomoses.</a> Transplantation. 30 (5), 335-338 (1980).</li><li>Kamada, N. A., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+experience+with+five+hundred+thirty+liver+transplants+in+the+rat.">Surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.</a> Surgery. 93 (1), 64-69 (1983).</li><li>Yang, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+orthotopic+liver+transplantation+using+a+novel+magnetic+anastomosis+technique+for+suprahepatic+vena+cava+reconstruction.">A rat model of orthotopic liver transplantation using a novel magnetic anastomosis technique for suprahepatic vena cava reconstruction.</a> Journal of Visualized Experiments. 19 (133), e56933 (2018).</li><li>Liu, L. X., He, C., Huang, T., Gu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+new+technique+for+reconstruction+of+hepatic+artery+during+liver+transplantation+in+sprague-dawley+rat.">Development of a new technique for reconstruction of hepatic artery during liver transplantation in sprague-dawley rat.</a> PLoS One. 10 (12), 0145662 (2015).</li><li>Paller, M. S., Hoidal, J. R., Ferris, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen+free+radicals+in+ischemic+acute+renal+failure+In+the+rat.">Oxygen free radicals in ischemic acute renal failure In the rat.</a> Journal of Clinical Investigation. 74 (4), 1156-1164 (1984).</li><li>Schmidt, J., Lewandrowsi, K., Warshaw, A. L., Compton, C. C., Rattner, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometric+characteristics+and+homogeneity+of+a+new+model+of+acute+pancreatitis+in+the+rat.">Morphometric characteristics and homogeneity of a new model of acute pancreatitis in the rat.</a> International Journal of Pancreatology. 12 (1), 41-51 (1992).</li><li>Chui, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+mucosal+lesion+in+low-flow+states.+I.+A+morphological,+hemodynamic,+and+metabolic+reappraisal.">Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal.</a> Archives of Surgery. 101 (4), 478-483 (1970).</li><li>Kozian, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-lung+ventilation+induces+hyperfusion+and+alveolar+damage+in+the+ventilated+lung:an+experimental+study.">One-lung ventilation induces hyperfusion and alveolar damage in the ventilated lung:an experimental study.</a> British Journal of Anaesthesia. 100 (4), 549-559 (2008).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heavy+water+(D2O)+containing+preservation+solution+reduces+hepatic+cold+preservation+and+reperfusion+injury+in+an+isolated+perfused+rat+liver+(IPRL)+model.">Heavy water (D2O) containing preservation solution reduces hepatic cold preservation and reperfusion injury in an isolated perfused rat liver (IPRL) model.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (11), 1818 (2019).</li><li>Nakamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sirtuin+1+attenuates+inflammation+and+hepatocellular+damage+in+liver+transplant+ischemia/reperfusion:+from+mouse+to+human.">Sirtuin 1 attenuates inflammation and hepatocellular damage in liver transplant ischemia/reperfusion: from mouse to human.</a> Liver Transplantation. 23 (10), 1282-1293 (2017).</li><li>Blaire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+Considerations+of+Hilar+Cholangiocarcinoma.">Surgical Considerations of Hilar Cholangiocarcinoma.</a> Surgical Oncology Clinics of North America. 28 (4), 601-617 (2019).</li></ol>

OLT у крыс является идеальной моделью для изучения сохранения органов в области трансплантации печени, ИРИ, отторжения трансплантата, иммунной толерантности, патологии трансплантации и фармакологии, гомотрансплантации и ксенотрансплантации. В настоящее время он широко используется в ...

Ишемия-реперфузия травмы (ИРИ) является распространенным осложнением после трансплантации печени. Печеночная ИРИ является патологическим процессом, включающим ишемию опосредованное повреждение клеток и ненормальное ухудшение реперфузии печени. Печеночная ИРИ и местный врожденный иммунный ответ можно разделить на горячие и холодные ИРИ, в соответствии с различиями в клиническойсреде 1. Горячая ИРИ вызвана травмой стволовых клеток, как правило, в результате трансплантации печени, шока и травмы2. Холодный ИРИ является осложнением трансплантации печени, вызванной эндотелиальных клеток и периферической циркуляции3. Клинические отчеты показали, что печеночная ИРИ связана с 10% ранних отказов органов и может увеличить заболеваемость острым и хроническимотторжением 4,5. Кроме того, печеночная ИРИ может также вызвать синдромы множественной дисфункции органов или синдром системной воспалительной реакции, с высокойсмертностью 6. Пациенты с экстрагепатической участия органа, как правило, остаются дольше в больнице, тратить больше денег, и хуже прогноз7. Развитие осложнений тесно связано с продолжительностью анхепатической фазы трансплантации печени8.
Ортотопическая трансплантация печени (OLT) у крыс была впервые зарегистрирована американским профессором Ли в 1973 году. Экспериментальная операция смоделировала этапы клинической трансплантации печени и анатомоза кровеносных сосудов и общего желчного протока (КБР) с использованием шовного метода. Процедура трудна и занимает много времени с низким уровнем успеха9. В 1979 году Kamada и др. сделал значительное улучшение OLT у крыс, творчески используя "двух-манжеты метод" для анатомоза портала вены для управления анхепатической фазы в течение 26 минут10. В том же году Циммерманн предложил «метод единого желчного стента». На основе работы Ли Циммерманн использовал полиэтиленовые трубки для непосредственной анатомозы КБР донора и реципиента, упростил реконструкцию КБР и сохранил функцию сфинктера, и этот метод стал стандартом для желчной реконструкцииOLT-моделей 11. В 1980 году Miyata et al. предложили «метод с тремя манжетами», в котором порталная вена (PV), супрагепатическая кава вены (SVC) и внутрицепатическая кава вены (IVC) были анастомозированы методом манжеты. Тем не менее, существует риск искажения канюлы с помощью этого метода, который может привести к обструкции нижней вены кавы рефлюкс12. В 1983 году «метод двух наручников» был предложен с использованием метода манжеты для анатомоза фотоэлектрических и IVC, но принятие метода шва для SVC13. Этот метод был принят учеными во всем мире для создания OLT-моделей. С тех пор, манжеты анатомоз шаги были улучшены, чтобы сократить анхепатической фазы и улучшить выживаемость крыс14. Аналогичным образом, улучшенные методы используются в клинической практике, чтобы сократить анхепатическойфазы 15. Однако фундаментальные исследования ИРИ после трансплантации печени показали, что выживаемость обратно связана со степенью повреждения внегепатических органов. Поэтому необходимы дальнейшие исследования, и для имитации ИРИ после трансплантации печени необходима простая и воспроизводимая модель животных.
Основываясь на определении анхепатической фазы, мы смоделировали гемодинамические изменения в трансплантации печени, в результате чего ИРИ экстрагепатических органов у крыс. В этом случае мы предоставляем подробное описание того, как построить животное модель анхепатической фазы (ишемия печени) у крыс, чтобы облегчить фундаментальные исследования иРИ после трансплантации печени.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde solution</td>
			<td>Shanghai Macklin Biochemical Co.,Ltd</td>
			<td>P804536</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>air drying oven</td>
			<td>Shanghai Binglin Electronic Technology Co., Ltd.</td>
			<td>BPG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alanine aminotransferase (ALT)Kit</td>
			<td>Elabscience Biotechnology Co.,Ltd</td>
			<td>E-BC-K235-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ammonia</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>10002118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>amylase Kit</td>
			<td>Elabscience Biotechnology Co.,Ltd</td>
			<td>E-BC-K005-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anhydrous ethanol</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>100092183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal anesthesia machine</td>
			<td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd</td>
			<td>R640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aspartate aminotransferase (AST)kit</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>S03040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>automatic biochemical analyzer.</td>
			<td>SIEMENS AG FWB:SIE, NYSE:SI Co., Ltd.</td>
			<td>2400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosystems (when nessary)</td>
			<td>Chengdu Taimeng Electronics Co., Ltd.</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Baiyang Medical Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>BY-600A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co. Ltd</td>
			<td>10212432C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>creatinine Kit</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>S03076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dewatering machine</td>
			<td>Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd</td>
			<td>Donatello Series 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>embedding machine</td>
			<td>Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.</td>
			<td>KH-BL1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>frozen machine</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-L5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hematoxylin-eosin dye solution</td>
			<td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>G1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>high-efficiency paraffin wax</td>
			<td>Shanghai huayong paraffin wax co., Ltd</td>
			<td>Q/YSQN40-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hydrochloric acid</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>10011018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>intraocular lens (IOL)forceps</td>
			<td>Guangzhou Guangmei Medical Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>JTZRN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micro Scissors(when nessary)</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>WA1010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holders</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J32010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neutral gum</td>
			<td>Shanghai Huashen Healing Equipment Co.,Ltd.</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>normal optical microscope</td>
			<td>Nikon Instrument Shanghai Co., Ltd</td>
			<td>Nikon Eclipse CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J3CO30</td>
			<td>straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>JD1060</td>
			<td>bending</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J1E0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological slicer</td>
			<td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td>
			<td>RM2016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pipettes</td>
			<td>Dragon Laboratory Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>7010101008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>retractors</td>
			<td>Beijing Jinuotai Technology Development Co.,Ltd.</td>
			<td>JNT-KXQ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scanner</td>
			<td>Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd</td>
			<td>Pannoramic 250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>slide</td>
			<td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>G6004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylene</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

organ ischemia-reperfusion injury by simulating hemodynamic changes in rat liver transplant model

Ортопедическая трансплантация печени (OLT) у крыс является проверенной и проверенной моделью животных, используемой для предоперационных, интраоперационных и послеоперационных исследований, включая ишемию-реперфузию (ИРИ) внегепатических органов. Эта модель требует многочисленных экспериментов и устройств. Продолжительность анхепатической фазы тесно связана со временем развития ИРИ после трансплантации. В этом эксперименте мы использовали гемодинамические изменения, чтобы вызвать экстрагепатические повреждения органов у крыс и определили максимальное время толерантности. Время до самой тяжелой травмы органа варьировалось для различных органов. Этот метод можно легко воспроизвести, а также может быть использован для изучения ИРИ внегепатических органов после трансплантации печени.

Толерантность крыс к ишемии печени В этой модели животных, сайты, на которых кровеносные сосуды были лигатированы во время работы показаны на рисунке 1. Крысы были случайным образом разделены на 5 групп для ишемии в течение 15 минут (I15 группы), 30 минут (I30 группы), ...

Watch this Scientific Journal Video about Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model at JoVE.com

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

В настоящем документе приводится подробное описание того, как построить животное модель анхепатической фазы (ишемия печени) у крыс, чтобы облегчить фундаментальные исследования ишемии-реперфузии травмы после трансплантации печени.

Травма ишемии-реперфузии органов путем моделирования гемодинамических изменений в модели трансплантации печени крыс

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

Травма ишемии органов, имитирующая гемодинамические изменения в модели пересадки печени крыс. Ишемия-реперфузия травмы является общим применением после трансплантации печени. Пациенты с экстрагепатической функции органа, как правило, остаются дольше в больнице, тратят больше и имеет худший прогноз.Развитие осложнения тесно связано с продолжительностью анхепатической фазы трансплантации печени. Однако фундаментальные исследования травмы ишемии-реперфузии после трансплантации печени показали, что выживаемость после трансплантации печени обратно связана со степенью повреждения внехапличных органов. Основываясь на определении анхаптической фазы, мы смоделировали гемодинамические изменения в трансплантации печени, что привело к ишемии-реперфузии травмы внехапличных органов.Из этой работы заключается в том, чтобы предоставить подробное описание того, как построить животное модель анхатитической фазы у крыс, фундаментальные исследования в ишемии-кратии травмы после трансплантации печени. Д-р Yuan Yuan несет ответственность за все видео животных операций. Два офтальмологических типса, прямые и изгибающиеся, и межглазные линзы, IOL типсы, офтальмологические ножницы, от одного до двух втягивателей, ватные тампоны, 3-0 хирургических швов, иодоформная марля, швовые иглы, биосистемы, когда это необходимо, и межглазные линзы, IOL миппы используется для отдельных кровеносных сосудов из-за круглых голов.Аппарат для анестезии животных, де-полива машины, встраивание машины, патологические срез, замороженные машины, ткани слайсер, сушка воздуха печь, нейронный оптический микроскоп, сканер, enflurane для общей анестезии, 4%paraformaldehyde раствор, anyhydrous этанол, ксилен, высокая эффективность парафин воска, гематоксилин-эозин краситель раствор, соляная кислота, Пипетки, центрифуга, автоматический биохимический анализатор, аланиновая амино-трансфераза, комплект ALT, аспартат, амино-трансфераза, комплект АСТ, комплект креатинина. После взвешивания крысы обезболились изофлюраном с помощью аппарата анестезии животных.После дезинфекции брюшной полости сделайте средний разрез на три сантиметра ниже процесса кифоида с помощью типсов и ножниц. Откройте брюшную полость, разоблачите печень с помощью ретрактора и мобилизуйте гепатогастрическую связку. Используйте ватные тампоны, чтобы аккуратно перевернуть среднюю долей печени и повернуть ее вверх, чтобы разоблачить porta habitis.Определите желчный проток, портальный вену и печеночную артерию. Нажмите тонкой кишки к левой нижней брюшной полости с помощью хлопчатобумажных свопов и переместить нижнюю полую полую вену вену, изолировать портал вены, печеночной артерии и нижней полой вены над правой почечной вены с внутриглазной линзы, IOL, тибры отмечены 3-0 шелковой нитью каждый со скольжением узла. Разрежьте кожу левой и правой нижних конечностей и выставить бедренную вену с помощью офтальмологических типсов.Медленно введать низкий молекулярный вес гепарина 625 МЕ/кг через бедренную вену, чтобы гепаринизировать все тело. Ligate вены портала, печеночным артерии, и нижней вены кавы выше правой почечной вены с номером 3-0 швов, продолжительностью 45 минут. Замените тонкий кишечник в брюшной полости и накройте его марлей.В эти периоды снижается ингаляционная анестезия. Через 45 минут отпустите порталную вену, печеночную артерию и нижняя вена кавы выше правой почечной вены. Шов мышцы и кожи слой за слоем и прекратить ингаляционную анестезию.Обеспечить послеоперационную анальгезию с использованием подкожного морфина 5 мг/кг каждые четыре часа Наблюдать за крысой до бодрствования и не кормить при температуре 25 плюс-минус два градуса по Цельсию и влажности 50 плюс-минус 10%Животные нагревательные лампы необходимо. В этой модели животных, крысы были случайным образом разделены на пять групп в соответствии с ишемией в течение 15 минут, я 15 группы, 30 минут, Я 30 группы, 45 минут, Я 45 группы, 60 минут, я 60, и фиктивной группы с 10 крыс в каждой группе. Их выживаемость в каждой группе наблюдалась через 14 дней после операции.Все крысы выжили в I 15, I 30 и фиктивных групп. Восемь выжили в течение 14 дней в группе I 45 и только двое выжили в группе I 60. Результаты показали, что крысы могут терпеть анхепатической фазы в течение 45 минут в не более чем.В ходе эксперимента, Биосистемы были использованы для записи изменений сердечного ритма и артериального давления, право внутренней сонной артерии intubation до и после анхепатической фазы. Мы обнаружили, что пульс и среднее артериальное давление, MAP крыс, резко изменилась после сосудистой перевязки. После перевязки, печеночная ишемия, заторы и отеки в кишечнике, желудочные варикозные и splenomegaly были очевидны.80 крыс были случайным образом разделены на восемь групп, включая ишемию в течение 45 минут, T0, reperfusion в течение шести часов, T6, 12 часов, T12, 24 часов, T24, 48 часов, T48, 72 часов, T72, семь дней, T7, в 14 дней, T14, соответственно. Почки, поджелудочная железа, тонкой кишки, сердца и легких ткани были приняты и окрашенные с ним после крыс были принесены в жертву. За исключением сердца, патологические баллы были даны в соответствии со ссылками, соответственно.Результаты показали, что время максимальной травмы внегепатических органов варьировалось. Это было от шести до 24 часов после операции на поджелудочной железе и от 24 до 48 часов для легких. Наиболее серьезно пострадали желудочно-кишечный тракт и почки после 45 минут ишемии.Через 24 часа после операции явных нарушений слизистой оболочки кишечника не было, и через 48 часов почки восстановились. Что касается сердца, то с течением времени после лечения через 24-48 часов после операции в тканях были обнаружены местный наркоз клеток миокарда, фрагментация клеток и растворение, инфильтрация воспалительных клеток, а также местное вазодилатация и заторы. Сыворотка была собрана и уровни ALT, AST, креатинина и амилазы были обнаружены автоматическим биохимическим анализатором.Все показатели достигли максимума в 24-48 часов, в отличие от патологических изменений. Хотя уровни были в основном нормальные 48 часов после операции, патологические повреждения по-прежнему продолжается. Подводя итог, можно сказать, что модель у крыс проста и проще в использовании без микрохирургии и обеспечивает основу для фундаментальных исследований ишемии-реперфузии травмы экстрагепатических органов после печеночных ишемий.

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Нормотермической остановку сердца и сердечно-легочной реанимации: мышиной модели ишемии-реперфузии

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

На месте Прямая мышца живота Поперечная мышечно-кожный щитка: крысиной модели реперфузионных повреждений мышечно-кожный ишемии

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ишемии-реперфузии Модель острого почечного повреждения и фиброза после травмы у мышей

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Методика свиной печени закупок и Ортотопическая трансплантации с использованием активного Порто-Caval шунт

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Индукция и оценка ишемии-реперфузии в Лангендорфа-перфузии сердца крыс

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Мышиной модели кишечная ишемия-реперфузии

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Мышь Модель Ретинального ишемией реперфузии через Elevation внутриглазного давления

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Метод прямых Сегментные Intra-печеночной доставка с помощью модели печени крысы Hilar зажима

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

Мелких животных модель Ex Vivo нормотермических печени перфузии

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Оценка коронарного потока резерва после миокарда ишемия Реперфузия у крыс

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...