Name: organ ischemia-reperfusion injury by simulating hemodynamic changes in rat liver transplant model
Uploaded: 2021-03-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model at JoVE.com

Guangxi Tıp Üniversitesi İkinci Bağlı Hastanesi'nden Dr. Wen-tao Li ve Dr. Ji-hua Wu tarafından verilen yararlı önerileri kabul etmek istiyoruz. Yazarlar yararlı yorumlar ve tartışmalar için ekip arkadaşlarımıza teşekkür eder. Yazarlar ayrıca JoVE'nin anonim yorumcularına ve editörlerine yorumları için teşekkür eder. Sürekli destekleri ve teşvikleri için Dr. Yuan'ın ailesine özel teşekkürler verilmelidir. Çalışma Ningbo Doğa Bilimleri Vakfı (2014A610248) tarafından desteklendi.

Hayvan Etik Kurulu, Guangxi Tıp Üniversitesi'nin (No20190920) deneyini onayladı. Tüm hayvanlar Guangxi Tıp Üniversitesi Hayvan Deney Merkezi tarafından tedarik edildi. 25 ± 2°C oda sıcaklığında tutulan ve %50 ± 10 nem oranına sahip SPF erkek Sprague Dawley sıçanları (200-250 g, 10-12 hafta) kullandık. Beslenme operasyondan 24 saat önce durduruldu; ancak su sağlandı.
NOT: Bir operatör tüm ameliyatları mikrocerrahi temeli veya cerrahi mikroskop olmadan gerçekleştirebil...

<ol>
	<li>Dar, W. A., Sullivan, E., Byon, J. S., Eltzschig, H., Ju, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischaemia+reperfusion+injury+in+liver+transplantation:+Cellular+and+molecular+mechanisms.">Ischaemia reperfusion injury in liver transplantation: Cellular and molecular mechanisms.</a> Liver International. 39 (5), 788-801 (2019).</li><li>Qiao, P. F., Yao, L., Zhang, X. C., Li, G. D., Wu, D. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+pretreatment+improves+stem+cell+repair+following+ischemia-reperfusion+injury+via+autophagy.">Heat shock pretreatment improves stem cell repair following ischemia-reperfusion injury via autophagy.</a> World Journal of Gastroenterology. 21 (45), 12822-12834 (2015).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+YAP+attenuates+hepatic+damage+and+fibrosis+in+liver+ischemia-reperfusion+injury.">Activation of YAP attenuates hepatic damage and fibrosis in liver ischemia-reperfusion injury.</a> Journal of Hepatology. 71 (4), 719-730 (2019).</li><li>Hirao, H., Dery, K. J., Kageyama, S., Nakamura, K., Kupiec-Weglinski, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+Oxygenase-1+in+liver+transplant+ischemia-reperfusion+injury:+From+bench-to-bedside.">Heme Oxygenase-1 in liver transplant ischemia-reperfusion injury: From bench-to-bedside.</a> Free Radical Biology and Medicine. 157, 75-82 (2020).</li><li>Moti&#241;o, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+hepatocyte+cyclooxygenase-2+expression+against+liver+ischemia-reperfusion+injury+in+mice.">Protective role of hepatocyte cyclooxygenase-2 expression against liver ischemia-reperfusion injury in mice.</a> Hepatology. 70 (2), 650-665 (2019).</li><li>Guo, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+search+for+a+magic+bullet+to+fight+multiple+organ+failure+secondary+to+ischemia/reperfusion+injury+and+abdominal+compartment+syndrome.">The search for a magic bullet to fight multiple organ failure secondary to ischemia/reperfusion injury and abdominal compartment syndrome.</a> Journal of Surgical Research. 184 (2), 792-793 (2013).</li><li>Elham, M., Mahmoudi, M., Nassiri-Toosi, M., Baghfalaki, T., Zeraati, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post+liver+transplantation+survival+and+related+prognostic+factors+among+adult+recipients+in+tehran+liver+transplant+center;+2002-2019.">Post liver transplantation survival and related prognostic factors among adult recipients in tehran liver transplant center; 2002-2019.</a> Archives of Iranian Medicine. 1 (23), 326-334 (2020).</li><li>Kim, E. H., Ko, J. S., Gwak, M. S., Lee, S. K., Kim, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+clinical+significance+of+hyperfibrinolysis+during+living+donor+liver+transplantation.">Incidence and clinical significance of hyperfibrinolysis during living donor liver transplantation.</a> Blood Coagulation and Fibrinolysis. 29 (3), 322-326 (2018).</li><li>Czig&#225;ny, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+research+practice+in+rat+orthotopic+and+partial+orthotopic+liver+transplantation:+a+review,+recommendation,+and+publication+guide.">Improving research practice in rat orthotopic and partial orthotopic liver transplantation: a review, recommendation, and publication guide.</a> European Surgical Research. 55 (1-2), 119-138 (2015).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28 (1), 47-50 (1979).</li><li>Zimmermann, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts.">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts.</a> Transplantation Proceedings. 11 (1), 571-577 (1979).</li><li>Miyata, M., Fischer, J. H., Fuhs, M., Isselhard, W., Kasai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Cuff+technique+for+three+vascular+anastomoses.">A simple method for orthotopic liver transplantation in the rat. Cuff technique for three vascular anastomoses.</a> Transplantation. 30 (5), 335-338 (1980).</li><li>Kamada, N. A., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+experience+with+five+hundred+thirty+liver+transplants+in+the+rat.">Surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.</a> Surgery. 93 (1), 64-69 (1983).</li><li>Yang, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+orthotopic+liver+transplantation+using+a+novel+magnetic+anastomosis+technique+for+suprahepatic+vena+cava+reconstruction.">A rat model of orthotopic liver transplantation using a novel magnetic anastomosis technique for suprahepatic vena cava reconstruction.</a> Journal of Visualized Experiments. 19 (133), e56933 (2018).</li><li>Liu, L. X., He, C., Huang, T., Gu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+new+technique+for+reconstruction+of+hepatic+artery+during+liver+transplantation+in+sprague-dawley+rat.">Development of a new technique for reconstruction of hepatic artery during liver transplantation in sprague-dawley rat.</a> PLoS One. 10 (12), 0145662 (2015).</li><li>Paller, M. S., Hoidal, J. R., Ferris, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen+free+radicals+in+ischemic+acute+renal+failure+In+the+rat.">Oxygen free radicals in ischemic acute renal failure In the rat.</a> Journal of Clinical Investigation. 74 (4), 1156-1164 (1984).</li><li>Schmidt, J., Lewandrowsi, K., Warshaw, A. L., Compton, C. C., Rattner, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometric+characteristics+and+homogeneity+of+a+new+model+of+acute+pancreatitis+in+the+rat.">Morphometric characteristics and homogeneity of a new model of acute pancreatitis in the rat.</a> International Journal of Pancreatology. 12 (1), 41-51 (1992).</li><li>Chui, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+mucosal+lesion+in+low-flow+states.+I.+A+morphological,+hemodynamic,+and+metabolic+reappraisal.">Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal.</a> Archives of Surgery. 101 (4), 478-483 (1970).</li><li>Kozian, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-lung+ventilation+induces+hyperfusion+and+alveolar+damage+in+the+ventilated+lung:an+experimental+study.">One-lung ventilation induces hyperfusion and alveolar damage in the ventilated lung:an experimental study.</a> British Journal of Anaesthesia. 100 (4), 549-559 (2008).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heavy+water+(D2O)+containing+preservation+solution+reduces+hepatic+cold+preservation+and+reperfusion+injury+in+an+isolated+perfused+rat+liver+(IPRL)+model.">Heavy water (D2O) containing preservation solution reduces hepatic cold preservation and reperfusion injury in an isolated perfused rat liver (IPRL) model.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (11), 1818 (2019).</li><li>Nakamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sirtuin+1+attenuates+inflammation+and+hepatocellular+damage+in+liver+transplant+ischemia/reperfusion:+from+mouse+to+human.">Sirtuin 1 attenuates inflammation and hepatocellular damage in liver transplant ischemia/reperfusion: from mouse to human.</a> Liver Transplantation. 23 (10), 1282-1293 (2017).</li><li>Blaire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+Considerations+of+Hilar+Cholangiocarcinoma.">Surgical Considerations of Hilar Cholangiocarcinoma.</a> Surgical Oncology Clinics of North America. 28 (4), 601-617 (2019).</li></ol>

Sıçanlarda OLT karaciğer nakli, IRI, nakil reddi, immün tolerans, transplantasyon patolojisi ve farmakoloji, homotransplantasyon ve ksenotransplantasyonda organ koruma çalışmaları için ideal bir modeldir. Günümüzde karaciğer naklinin deneysel araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.
Pilot çalışmalar sırasında ilk olarak pentobarbital sodyum intraperitoneal anestezi uyguladık ve bunun yüksek postoperatif mortaliteye ve hemodinamik değişikliklere kısa toleran...

İskemi-reperfüzyon hasarı (IRI) karaciğer nakli sonrası sık görülen bir komplikasyondur. Hepatik IRI, iskemi aracılı hücre hasarı ve karaciğer reperfüzyonunun anormal bozulmasını içeren patolojik bir süreçtir. Hepatik IRI ve lokal doğuştan gelen immün yanıt, klinik ortamdaki farklılıklara göre sıcak ve soğuk IRI olarak ayrılabilir1. Sıcak IRI, genellikle karaciğer nakli, şok ve travma sonucu kök hücre yaralanması ile indüklenmiştir2. Soğuk IRI, endotel hücrelerinin ve periferik dolaşımın neden olduğu karaciğer naklinin bir komplikasyonudur3. Klinik raporlar hepatik IRI'nın erken organ yetmezliklerinin% 10'unun ile ilişkili olduğunu ve akut ve kronik ret insidansını artırabileceğini göstermiştir4,5. Ek olarak, hepatik IRI ayrıca yüksek mortalite ile çoklu organ disfonksiyonu sendromlarına veya sistemik inflamatuar yanıt sendromuna neden olabilir6. Ekstrahepatik organ tutulumu olan hastalar hastanede daha uzun süre kalma, daha fazla para harcama ve daha kötü bir prognoza sahip olma eğilimindedir7. Komplikasyonların gelişimi karaciğer naklinin anhepatik fazının uzunluğu ile yakından ilgilidir8.
Sıçanlarda ortotopik karaciğer nakli (OLT) ilk olarak 1973 yılında Amerikalı profesör Lee tarafından bildirilmiştir. Deneysel operasyon, dikiş yöntemini kullanarak klinik karaciğer naklinin adımlarını ve kan damarlarının anastomozini ve ortak safra kanalını (CBD) simüle etti. Prosedür zor ve zaman alıcıdır düşük bir başarı oranı ile9. 1979'da Kamada ve arkadaşları, 26 dakika içinde anhepatik fazı kontrol etmek için portal damarın anastomoz için 'iki manşet yöntemini' yaratıcı bir şekilde kullanarak sıçanlarda OLT'de önemli bir gelişme yaptı10. Aynı yıl Zimmermann 'tek safra stenti yöntemini' önerdi. Lee'nin çalışmalarına dayanarak Zimmermann, donörün ve alıcının CBD'sini doğrudan anastomoz etmek için polietilen tüpler kullandı, CBD'nin yeniden inşasını basitleştirdi ve sfinkterin işlevini korudu ve bu yöntem OLT modellerinin safra rekonstrüksiyonu için standart haline geldi11. 1980'de Miyata ve arkadaşları portal damar (PV), suprahepatik vena kava (SVC) ve intrahepatik vena kavanın (IVC) manşet yöntemiyle anastomoz edildiği 'üç manşet yöntemini' önerdi. Bununla birlikte, bu yöntemle damarın bozulma riski vardır, bu da inferior vena kava reflüsünün tıkanmasına yol açabilir12. 1983'te, PV ve IVC'nin anastomoz için manşet yöntemi kullanılarak, ancak SVC13için dikiş yönteminin benimsenmesi için 'iki manşet yöntemi' önerildi. Bu yöntem olt modelleri oluşturmak için küresel olarak akademisyenler tarafından benimsenmiştir. O zamandan beri, manşet anastomoz adımları anhepatik fazı kısaltmak ve sıçanların hayatta kalma oranını iyileştirmek için geliştirilmiştir14. Benzer şekilde, klinik uygulamada anhepatik faz15'ikısaltmak için geliştirilmiş yöntemler kullanılır. Bununla birlikte, karaciğer naklinden sonra IRI'ya yapılan temel araştırmalar, sağkalım oranının ekstrahepatik organların yaralanma derecesi ile ters ilişkili olduğunu göstermiştir. Bu nedenle, daha fazla araştırma yapılması ve karaciğer naklinden sonra IRI'yı simüle etmek için basit ve tekrarlanabilir bir hayvan modeline ihtiyaç vardır.
Anhepatik fazın tanımına dayanarak, karaciğer transplantasyonundaki hemodinamik değişiklikleri simüle ettik ve sıçanlarda ekstrahepatik organların IRI'sı ile sonuçlandı. Burada, karaciğer naklinden sonra IRI ile ilgili temel araştırmaları kolaylaştırmak için sıçanlarda anhepatik fazın (karaciğer iskemisi) bir hayvan modelinin nasıl inşa edeceğine dair ayrıntılı bir açıklama sunuyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde solution</td>
			<td>Shanghai Macklin Biochemical Co.,Ltd</td>
			<td>P804536</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>air drying oven</td>
			<td>Shanghai Binglin Electronic Technology Co., Ltd.</td>
			<td>BPG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alanine aminotransferase (ALT)Kit</td>
			<td>Elabscience Biotechnology Co.,Ltd</td>
			<td>E-BC-K235-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ammonia</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>10002118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>amylase Kit</td>
			<td>Elabscience Biotechnology Co.,Ltd</td>
			<td>E-BC-K005-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anhydrous ethanol</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>100092183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal anesthesia machine</td>
			<td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd</td>
			<td>R640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aspartate aminotransferase (AST)kit</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>S03040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>automatic biochemical analyzer.</td>
			<td>SIEMENS AG FWB:SIE, NYSE:SI Co., Ltd.</td>
			<td>2400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosystems (when nessary)</td>
			<td>Chengdu Taimeng Electronics Co., Ltd.</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Baiyang Medical Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>BY-600A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cover glass</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co. Ltd</td>
			<td>10212432C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>creatinine Kit</td>
			<td>Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd.</td>
			<td>S03076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dewatering machine</td>
			<td>Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd</td>
			<td>Donatello Series 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>embedding machine</td>
			<td>Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd.</td>
			<td>KH-BL1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>frozen machine</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-L5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hematoxylin-eosin dye solution</td>
			<td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>G1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>high-efficiency paraffin wax</td>
			<td>Shanghai huayong paraffin wax co., Ltd</td>
			<td>Q/YSQN40-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hydrochloric acid</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>10011018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>intraocular lens (IOL)forceps</td>
			<td>Guangzhou Guangmei Medical Equipment Co., Ltd.</td>
			<td>JTZRN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micro Scissors(when nessary)</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>WA1010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>needle holders</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J32010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neutral gum</td>
			<td>Shanghai Huashen Healing Equipment Co.,Ltd.</td>
			<td>&#8212;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>normal optical microscope</td>
			<td>Nikon Instrument Shanghai Co., Ltd</td>
			<td>Nikon Eclipse CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J3CO30</td>
			<td>straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>JD1060</td>
			<td>bending</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ophthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Surgical Instrument Factory</td>
			<td>J1E0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological slicer</td>
			<td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td>
			<td>RM2016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pipettes</td>
			<td>Dragon Laboratory Instruments Co., Ltd.</td>
			<td>7010101008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>retractors</td>
			<td>Beijing Jinuotai Technology Development Co.,Ltd.</td>
			<td>JNT-KXQ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scanner</td>
			<td>Hungary 3DHISTECH Co.,Ltd</td>
			<td>Pannoramic 250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>slide</td>
			<td>Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>G6004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylene</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd</td>
			<td>1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

organ ischemia-reperfusion injury by simulating hemodynamic changes in rat liver transplant model

Sıçanlarda ortotopik karaciğer nakli (OLT), ekstrahepatik organların iskemi-reperfüzyon yaralanması (IRI) da dahil olmak üzere ameliyat öncesi, intraoperatif ve postoperatif çalışmalar için kullanılan denenmiş ve kanıtlanmış bir hayvan modelidir. Bu model çok sayıda deney ve cihaz gerektirir. Anhepatik fazın süresi transplantasyon sonrası IRI geliştirme süresi ile yakından ilgilidir. Bu deneyde, sıçanlarda ekstrahepatik organ hasarına neden olmak için hemodinamik değişiklikler kullandık ve maksimum tolerans süresini belirledik. En ağır organ yaralanmasına kadar geçen süre farklı organlar için farklıydı. Bu yöntem kolayca çoğaltılabilir ve karaciğer naklinden sonra ekstrahepatik organların IRI'sını incelemek için de kullanılabilir.

Sıçanların karaciğer iskemisine toleransı Bu hayvan modelinde, ameliyat sırasında kan damarlarının lige edildiği bölgeler Şekil 1'de gösterilmiştir. Sıçanlar rastgele 15 dakika (I15 grubu), 30 dakika (I30 grubu), 45 dakika (I45 grubu), 60 dakika (I60) ve sham grubu için 5 gruba ayrıldı ve her grupta 10 sıçan vardı. Her grubun sağkalım oranı operasyondan 14 gün sonra gözlendi. Tüm sıçanlar I15 grubunda, I30 grubunda ve sahte grupta hayatta kal...

Watch this Scientific Journal Video about Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model at JoVE.com

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Bu makale, karaciğer naklinden sonra iskemi-reperfüzyon hasarı ile ilgili temel araştırmaları kolaylaştırmak için sıçanlarda anhepatik fazın (karaciğer iskemisi) bir hayvan modelinin nasıl inşaılacağına dair ayrıntılı bir açıklama sunmaktadır.

Sıçan Karaciğer Nakli Modelinde Hemodinamik Değişiklikleri Simüle Ederek Organ İskemi-Reperfüzyon Yaralanması

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

Sıçan karaciğer nakli modelinde hemodinamik değişiklikler simüle ederek organ iskemi-reperfüzyon yaralanması. İskemi-reperfüzyon hasarı karaciğer naklinden sonra sık görülen bir uygulamadır. Ekstrahepatik organ tutulumu olan hastalar hastanede daha uzun süre kalma eğilimindedir, daha fazla harcama eğilimindedir ve daha kötü bir prognoza sahiptir.Komplikasyonun gelişimi karaciğer naklinin anhepatik fazının uzunluğu ile yakından ilgilidir. Bununla birlikte, karaciğer naklinden sonra iskemi-reperfüzyon yaralanması ile ilgili temel araştırmalar, karaciğer nakli sonrası sağkalım oranının, ekstrahaptik organların yaralanma derecesi ile ters ilişkili olduğunu göstermiştir. Anhaptik fazın tanımına dayanarak, karaciğer transplantasyonundaki hemodinamik değişimi simüle ettik ve bu da ekstrahaptik organların iskemi-reperfüzyon yaralanması ile sonuçlandı.Bu makalenin, sıçanlarda anhaptik fazın bir hayvan modelinin nasıl inşaılacağına dair ayrıntılı bir açıklama sağlamak, karaciğer naklinden sonra iskemi-reperfüzyon hasarı hakkında temel araştırma yapmaktır. Dr. Yuan Yuan tüm video hayvan operasyonlarından sorumludur. İki oftalmik toparlama, düz ve bükme ve interoküler lens, IOL toparlama, oftalmik makas, bir ila iki retraktör, pamuklu çubuk, 3-0 cerrahi dikiş, iodoform gazlı bez, dikiş iğneleri, Gerektiğinde biyosistemler ve gözlerarası lens, IOL tokaları yuvarlak başlılıklar nedeniyle kan damarlarını ayırmak için kullanılır.Hayvan anestezi makinesi, susuzlaştırma makinesi, gömme makinesi, patolojik dilimleyici, dondurulmuş makine, doku dilimleyici, hava kurutma fırını, nöral optik mikroskop, tarayıcı, genel anestezi için enfluran, %4 paraformaldehit çözeltisi, anyhidroz etanol, ksilen, yüksek verimli parafin balmumu, hematoksilin-eozin boya çözeltisi, hidroklorik asit, amonyak, slayt, kapak camı, nötr sakız ve ölmekte olan reaktifler ve sarf malzemeleri. Pipetler, santrifüj, otomatik biyokimyasal analizör, alanin amino transferaz, ALT kiti, aspartat, amino transferaz, AST kiti, kreatinin kiti. Tartımdan sonra, sıçanlar bir hayvan anestezi makinesi tarafından izofluran ile uyuşturulur.Karın dezenfeksiyonunu takiben, antips ve makas kullanarak xiphoid işleminin üç santimetre altında ortanca bir kesi yapın. Karın boşluğunu açın, karaciğeri bir retraktör kullanarak ortaya çıkarın ve hepatogastrik bağı harekete geçirin. Karaciğerin orta lobunun hafifçe çevrilmek ve porta habitis'i açığa çıkarmak için yukarı doğru çevirmek için pamuklu çubuklar kullanın.Safra kanalını, portal damarı ve hepatik arteri tanımlayın. Pamuk takasları kullanarak ince bağırsağı sol alt karın boşluğuna doğru itin ve alt vena kavasını sağ böbrek damarına taşıyın, portal damarı, hepatik arteri ve alt vena kavayı göz içi lens, IOL, her biri kayma düğümü ile 3-0 ipek iplikle işaretlenmiş tokmaklarla sağ böbrek damarının üzerinde izole edin. Sol ve sağ alt ekstremitenin derisini kesin ve oftalmik dikseps kullanarak femoral damarı ortaya çıkar.Tüm vücudu heparize etmek için femoral damardan düşük moleküler ağırlıklı heparin 625 IU/ kg'ı yavaşça enjekte edin. Portal damarı, hepatik arteri ve alt vena kavasını 45 dakika süren 3-0 dikiş sayısı ile sağ böbrek damarının üzerinde lige edin. Karın boşluğundaki ince bağırsağı değiştirin ve gazlı bezle örtün.Bu dönemlerde inhalasyon anestezisi azalır. 45 dakika sonra, portal damarı, hepatik arteri ve sağ böbrek damarının üstündeki alt vena kavayı serbest bırakın. Kas ve cildi katman katman dikin ve inhalasyon anestezisini sonlandırın.Her dört saatte bir 5 mg/kg'lık deri altı morfin kullanarak ameliyat sonrası analjezi sağlayın Sıçanı uyanana kadar gözlemleyin ve 25 artı veya eksi iki santigrat derece sıcaklık altında beslenin ve 50 artı veya eksi% 10 nem Hayvansal ısıtma lambaları gereklidir. Bu hayvan modelinde sıçanlar rastgele 15 dakika iskemiye göre beş gruba ayrıldı, ben 15 grup, 30 dakika, I 30 grup, 45 dakika, ben 45 grup, 60 dakika, I 60 ve her grupta 10 sıçan ile bir şem grubu. Her grubun sağkalım oranları operasyondan 14 gün sonra gözlendi.I 15, I 30 ve sham gruplarında tüm sıçanlar hayatta kaldı. Sekizi I 45 grubunda 14 gün hayatta kaldı ve sadece ikisi I 60 grubunda hayatta kaldı. Sonuçlar, sıçanların anhepatik fazı en fazla 45 dakika tolere edebileceğini öne sürdü.Deney sırasında Biyosistemler, anhepatik fazdan önce ve sonra kalp atış hızı ve kan basıncı, sağ iç karotid arter entübasyonundaki değişiklikleri kaydetmek için kullanıldı. Kalp atış hızı ve ortalama arteriyel basıncın, sıçanların MAP'inin vasküler ligasyondan sonra önemli ölçüde değiştiğini bulduk. Ligasyondan sonra hepatik iskemi, tıkanıklık ve bağırsaklarda ödem, mide varisleri ve splenomegali belirgindi.80 sıçan rastgele 45 dakika iskemi, T0, altı saat reperfüzyon, T6, 12 saat, T12, 24 saat, T24, 48 saat, T48, 72 saat, T72, yedi gün, T7, 14 günde, T14 dahil olmak üzere sekiz gruba ayrıldı. Sıçanlar kurban edildikten sonra böbrek, pankreas, ince bağırsak, kalp ve akciğer dokuları alındı ve HE ile lekelendi. Kalp dışında patolojik skorlar sırasıyla referanslara göre verilmiştir.Sonuçlar, ekstrahepatik organların maksimum yaralanma süresinin değiştiğini gösterdi. Pankreas için ameliyattan 6 ila 24 saat sonra ve akciğerler için 24 ila 48 saatti. Bağırsak sistemi ve böbrek 45 dakikalık iskemiden sonra en ağır şekilde yaralandı.Ameliyattan 24 saat sonra bağırsak mukozasının belirgin bir anormalliği yoktu ve böbrekler 48 saat sonra iyileşti. Kalbe gelince, reperfüzyondan sonra zamanın geçmesiyle birlikte, ameliyattan 24 ila 48 saat sonra dokuda lokal miyokard hücre narkozu, hücre parçalanması ve çözünmesi, inflamatuar hücre infiltişi ve lokal vazodilasyon ve tıkanıklık bulundu. Serum toplandı ve otomatik biyokimyasal analizör tarafından ALT, AST, kreatinin ve amilaz düzeyleri saptandı.Tüm göstergeler patolojik değişikliklerin aksine 24 ila 48 saat arasında zirve yaptı. Ameliyattan 48 saat sonra seviyeler temelde normal olmasına rağmen patolojik hasar hala devam ediyordu. Özetlemek gerekirse, sıçanlardaki model mikrocerrahi olmadan basit ve kullanımı daha kolaydır ve hepatik iskemi sonrası ekstrahepatik organların iskemi reperfüzyon hasarının temel araştırmasına temel bir temel sağlar.

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Normotermik Kardiyak Arrest ve Kardiyopulmoner Resusitasyon: İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury

Miyokutanöz İskemi Reperfüzyon Hasarı Rat Modeli: in situ Enine Rektus abdominis kas deri Flap

Free tissue transfer is the gold standard of reconstructive surgery to repair complex defects not amenable to local options or those requiring composite ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

Active Porto-Caval Shunt kullanarak Domuz Karaciğer Tedarik ve Ortotopik Nakli Tekniği

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Langendorff-perfüze sıçan Hearts indüksiyon ve İskemi-reperfüzyon Hasarı Değerlendirilmesi

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Göz İçi Basıncı Yükselmesi ile Retina İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Bir Sıçan Karaciğer Hilar Kelepçe Modeli Kullanılarak Doğrudan Segmental İçi hepatik Dağıtım Yöntemi

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

Ex Vivo Normothermic karaciğer perfüzyon küçük bir hayvan Model

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Farelerde miyokardiyal Iskemi reperfüzyon sonrası koroner akış rezervi değerlendirilmesi

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...