Name: a three-dimensional model of spheroids to study colon cancer stem cells
Uploaded: 2021-01-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Three-dimensional Model of Spheroids to Study Colon Cancer Stem Cells at JoVE.com

우리는 이미징 및 애니패스가 조직학 플랫폼(CRCL, CLB)을 재구성한다는 것을 인정합니다. 우리는 FOLFOX와 FOLFIRI의 친절한 선물을 위해 센터 레옹 베라드 (CLB) 병원의 약국에 빚지고 있습니다. 우리는 또한 원고의 비판적 독서에 대한 브리기테 맨십감사합니다. 이 작품은 FRM(Equipes FRM 2018, DEQ20181039598)과 Inca(PLBIO19-289)에 의해 지원되었습니다. MVG와 LC는 FRM의 지원을 받았고 CF는 ARC 재단과 센터 레옹 베라드의 지원을 받았습니다.

참고: 모든 시약 및 재료의 세부 정보는 재료 표에나열됩니다.
1. 스페로이드 형성
<ol><li>스페로이드 문화 미디어<ol>
<li>덜벡코의 수정독수리 매체(DMEM)로 구성된 기저형 매체를 4m L-alanyl-L-글루타민 디펩티드로 보충한다.</li>
		<li>1.1.1단계에서 기저 배지에서 10% 태아 소 혈청(FBS)과 1% 페니실린-스트렙토마이신(Pen/Strep)을 함유한 DMEM 완전 배지를 준비한다.</li>
		<li>?...

<ol>
	<li>Bray, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+cancer+statistics+2018:+GLOBOCAN+estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries.">Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 68 (6), 394-424 (2018).</li><li>Fearon, E. R., Vogelstein, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+genetic+model+for+colorectal+tumorigenesis.">A genetic model for colorectal tumorigenesis.</a> Cell. 61 (5), 759-767 (1990).</li><li>Rao, C. V., Yamada, H. 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J., Dormond, O., Nowak-Sliwinska, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short-term+3D+culture+systems+of+various+complexity+for+treatment+optimization+of+colorectal+carcinoma.">Short-term 3D culture systems of various complexity for treatment optimization of colorectal carcinoma.</a> Scientific Reports. 9 (1), 7103 (2019).</li><li>Garcia-Mayea, Y., Mir, C., Masson, F., Paciucci, R., Leonart, M. 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체외 3D 모델은 2D 암 세포 배양의 주요 실험적 단점을 극복, 그들은 미세 환경 과 세포 이질성을 포함한 전형적인 종양 기능을 다시 항복에 더 신뢰할 것으로 보인다. 일반적으로 사용되는 3D 스푸로이드 모델은 스캐폴드가 없는(저부착 조건에서 배양됨) 또는 스캐폴드 기반(생체 물질을 배양 세포에 사용)이다. 이러한 방법은 사용되는 비계의 특성에 의존하거나 구조와 크기가 가변적인 스페로이?...

대장암(CRC)은 세계1에서암 관련 사망의 두 번째 주요 원인으로 남아 있다. CRC의 발달은 종양 억제 유전자3,4의온코진 활성화 및 불활성화를 포함하는 유전 돌연변이 및/또는 후성유전학 적 변경2,3의점진적 습득 및 축적의 결과입니다. 더욱이, 비유전적 요인(예를 들어, 마이크로환경)은 종양성 변혁에 기여하고 촉진하여 CRC5의진화에 참여할 수 있다. 중요한 것은, CRC는 정상 결장 토굴6,7에서상피의 조직을 연상시키는 계층 구조를 구성하는 일부 분화 된 CSC 및 벌크 종양 세포를 포함한 상이한 세포 집단으로 구성된다.
CSC는 종양 출현8,유지 보수 및 성장, 전이성 용량 및 종래의 치료법에 대한 내성을 담당하는 것으로 간주됩니다6,7. 종양 내에서, CSC를 포함한 암세포는 그들의 명백한 돌연변이 및 후성 유전학 단면도, 형태학 및 표현성 다름, 유전자 발현, 물질 대사, 증식 비율 및 전이성 전위9의관점에서 이질성과 복잡성의 높은 수준을 표시합니다. 따라서, 암 생물학, 종양 진행, 효과적인 치료법으로의 내성 획득, 이 암 이질성 및 계층 구조를 포착하는 인간 전임상 모델은10,11에중요하다.
체외 2D 암 세포주에서 는 오랫동안 사용되어 왔으며 종양 발달과 치료 분자의 효능의 근간이 되는 메커니즘에 대한 귀중한 통찰력을 제공합니다. 그러나, 본래 종양에서 발견되는 현상및 유전적 이질성의 부족에 대하여 그들의 한계는 지금 널리 인식된다12. 더욱이, 영양분, 산소, pH 그라데이션 및 종양 미세환경은 재현되지 않으며, 마이크로환경은CSC(11,12)를포함한 상이한 세포 유형의 유지에 특히 중요하다. 이러한 주요 단점을 극복하기 위해 여러 3D 모델이 실험적으로 암의 복잡성과 이질성을 해결하고 재현하기 위해 개발되었습니다. 실제로, 이들 모델은 생체 내12,13,14에서관찰된 것과 유사한 종양 세포 이질성, 세포 세포 상호 작용 및 공간아키텍처를재구성한다. 신선한 종양뿐만 아니라 세포 주 유래 스페로이드에서 확립된 1차 종양 오르가노이드는 주로15,16으로채용된다.
스페로이드는 세포가 세포 응집체에서 형성되고 성장하도록 강제하기 위해 비계가 없거나 스캐폴드 기반 방식으로 배양될 수 있다. 스캐폴드 프리 방법은 비부착 조건(예를 들어, 매달려 드롭 방법 또는 초저부착 플레이트)의 세포 배양에 기초한 반면, 스캐폴드 기반 모델은 천연, 합성 또는 하이브리드 생체 재료에 의존하여배양세포(12,13,14)에의존한다. 스캐폴드 계 스페로이드는 최종 스페로이드 형성이 사용되는 (바이오) 물질의 성질과 조성에 따라 달라지기 때문에 상이한 단점을 제시한다. 지금까지 사용할 수있는 스캐폴드프리 스페로이드 방법은 기판의 특성에 의존하지 않지만 구조및 크기17,18에따라 달라지는 스페로이드를 생성한다.
이 연구는 CSC 생물학을 공부하기 위하여 Caco2 결장 선암 세포로 구성된 크기에서 균질한 spheroids의 견고하고 재현가능한 3D 배양 시스템을 설계하는 것을 목표로 했습니다. Caco2 세포는 시간이 지남에 따라 분화 하는 그들의 능력에 때문에 특히 관심19,20,강하게 줄기 같은 잠재력을 제안. 이에 따라, 스페로이드의 장기 문화는 화학요법에 다른 반응을 가진 다른 CSC 인구의 존재를 밝혔습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>37 &#181;m Reversible Strainer, Large&#160;</td>
			<td>STEMCELL Technologies</td>
			<td>27250</td>
			<td>To be used with 50 mL conical tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-Fluorouracil</td>
			<td>Gift from Pharmacy of the Centre Leon Berard (CLB)</td>
			<td>-</td>
			<td>stock solution, 5 mg/100 mL; final concentration, 50 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aggrewell 400 24-well plates</td>
			<td>STEMCELL Technologies</td>
			<td>34411</td>
			<td>1,200 microwells per well for spheroid formation and growth</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Caspase3 - Rabbit</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>9661</td>
			<td>dilution 1:200</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti Musashi-1 (14H1) - Rat</td>
			<td>eBioscience/Thermo Fisher</td>
			<td>14-9896-82</td>
			<td>dilution 1:500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Adherence Rinsing Solution x 100 mL</td>
			<td>STEMCELL Technologies</td>
			<td>07010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD133 (13A4) - Rat</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>14-133-82</td>
			<td>dilution 1:100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD44 -Rabbit</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab157107</td>
			<td>dilution 1:2000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-PCNA - Mouse</td>
			<td>Dako</td>
			<td>M0879</td>
			<td>dilution 1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-&#946;-catenin - Mouse</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-7963</td>
			<td>dilution 1:50</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black multiwell plates</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>237108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric Acid Monohydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C1909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CLARIOstar apparatus&#160;</td>
			<td>BMG Labtech</td>
			<td></td>
			<td>microplate reader</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako pen</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>marker pen to mark circles on slides for creating barriers for liquids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A21202</td>
			<td>dilution 1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, Alexa Fluor 568</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A10037</td>
			<td>dilution 1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A21206</td>
			<td>dilution 1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor 568</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A10042</td>
			<td>dilution 1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium (DMEM) Glutamax (L-alanyl-L-glutamine dipeptide)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10569010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16000044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorogel mounting medium with DAPI</td>
			<td>Interchim</td>
			<td>FP-DT094B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rat IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor 568</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A11077</td>
			<td>dilution 1:1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Spheroid image analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Irinotecan&#160;</td>
			<td>Gift from Pharmacy CLB</td>
			<td>-</td>
			<td>stock solution, 20 mg/mL; final concentration, 100 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iScript reverse transcriptase&#160;</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>1708891</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leucovorin</td>
			<td>Gift from Pharmacy CLB</td>
			<td>-</td>
			<td>stock solution, 50 mg/mL; final concentration, 25 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel Basement Membrane Matrix</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354234</td>
			<td>Basement membrane matrix</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nucleospin RNA XS Kit</td>
			<td>Macherey-Nagel</td>
			<td>740902 .250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxaliplatin</td>
			<td>Gift from Pharmacy CLB</td>
			<td>-</td>
			<td>stock solution, 100 mg/20 mL;final concentration, 10 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Saline (PBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR qPCR Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)</td>
			<td>Takara</td>
			<td>RR420B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYTOX- Green</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>S7020</td>
			<td>nucleic acid stain; dilution 1:5000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.05&#160;%)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25300062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss-Axiovert microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>inverted microscope for acquiring images of spheroids</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a three-dimensional model of spheroids to study colon cancer stem cells

대장암은 종양 발달, 유지 보수 및 약물에 대한 내성을 담당하는 암 줄기세포(CSC)의 인구를 포함하는 이질성 및 계층적 조직을 특징으로 한다. 그들의 특정 표적을 위한 CSC 속성의 더 나은 이해는, 그러므로, 효과적인 치료를 위한 전제 조건입니다. 그러나 심층 조사에 적합한 전임상 모델이 부족합니다. 시험관 내 2차원 (2D) 암 세포주가 종양 생물학에 귀중한 통찰력을 제공하지만, 그들은 현상및 유전 종양 이질성을 복제하지 않습니다. 대조적으로, 3차원 (3D) 모형은 거의 생리적인 암 복잡성 및 세포 이질성을 해결하고 재현합니다. 이 작업의 목적은 CSC 생물학을 연구하기 위해 강력하고 재현 가능한 3D 문화 시스템을 설계하는 것이었습니다. 본 방법론은 장기 배양에 사용될 수 있는 모델인 Caco2 결장 아데노암종 세포로부터 동질적인 3D 스페로이드를 생성하는 조건의 개발 및 최적화를 설명합니다. 중요한 것은, 스페로이드 내에서, 루멘과 같은 구조물을 중심으로 조직된 세포는, 차동 세포 증식 패턴및 마커 패널을 표현하는 CSC의 존재에 의해 특징지어졌다. 이러한 결과는 화학요법에 대한 반응을 포함하여 세포 이질성 및 CSC 생물학을 연구하기 위한 이 3D 접근법의 적합성을 위한 첫 번째 개념 증명을 제공합니다.

스페로이드의 크기에서 균질성의 부재가 현재 사용 가능한 3D 스페로이드 배양시스템(13)의주요 단점 중 하나이기 때문에, 이 작업의 목적은 균일한 스페로이드를 얻기 위해 신뢰할 수 있고 재현 가능한 프로토콜을 설정하는 것이었습니다. 첫째, 이상적인 작업 조건을 확립하기 위해, 전용 플레이트(표 1)를 사용하여 마이크로웰/스페로이드당 50~2,000세포?...

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A Three-dimensional Model of Spheroids to Study Colon Cancer Stem Cells

이 프로토콜은 Caco2 결장 아데노암종 세포에서 3차원 스페로이드를 생성하고 성장시키는 새로운 견고하고 재현 가능한 배양 시스템을 제공합니다. 결과는 화학요법에 대한 반응을 포함하여 암 줄기 세포 생물학을 공부하는 이 접근의 적합성을 위한 개념증명을 제공합니다.

대장암 줄기세포를 연구하는 스페로이드의 3차원 모델

Colorectal cancers are characterized by heterogeneity and a hierarchical organization comprising a population of cancer stem cells (CSCs) responsible for ...

이러한 새로운 스페로이드 배양 방법은 암 줄기세포의 상이한 집단의 존재를 분석하기 위해 종양유발성을 연구하는 데 사용될 수 있으며, 또한 신약에 대한 높은 퍼팅 스크린을 통해 잘 적용될 수 있다. 이것은 균일하게 크기의 스페로이드의 많은 수를 생성하기위한 강력하고 반복배양 시스템입니다. 더욱이, 이 스페로이드는 암 줄기 세포를 공부하기 위하여 이용될 수 있습니다.이 방법은 만성 암 생물학을 연구하기 위하여 설치됩니다 그러나 3D 배양 조건을 변경하여 그밖 암을 공부하기 위하여 쉽게 설치될 수 있습니다. 스페로이드 형성 중에 접시를 너무 많이 움직이지 말고 스페로이드를 스트레이너로 수확할 때주의하십시오. 잘 당 안티 준수 헹구는 용액의 500 마이크로 리터와 24 웰 플레이트의 우물을 미리 처리하여 시작합니다.몇 초 원심 분리 후 스윙 버킷 로터에서 플레이트를 헹구고 따뜻한 바질 매체 2 밀리리터로 각각 잘 헹구습니다. 현미경 아래의 플레이트를 관찰하여 마이크로 우물에서 거품이 완전히 제거되었는지 확인합니다. 거품이 관찰되지 않으면 각 우물에 따뜻한 DMEM 지하 막 매트릭스 배지의 1 밀리리터를 추가하기 전에 우물을 다시 헹구십시오.스페로이드 형성을 유도하기 위해, 10%FBS 및 1%항생제로 보충된 DMEM의 10센티미터 접시에서 2D 모노 층에서 Caco-2 세포의 원하는 농도를 참조하십시오. 가습 된 대기에서 섭씨 37도 및 이산화탄소 5 %의 문화. 80%의 합류에 도달하면 PBS5 밀리리터로 세포를 세척한 후 트립신-EDTA 2밀리리터로 배양을 섭씨 37도에서 2~5분 동안 치료합니다.세포가 분리되면 트립신을 완전한 DMEM의 4 밀리리터로 중화시다. 계산 후, 원심분리에 의해 세포를 수집하고 잘 당 중간 의 1 밀리리터에서 세포의 원하는 농도를 달성하기 위해 DMEM 지하 막 매트릭스 매체의 적절한 부피에서 팔레트를 다시 중단. 선불 24 웰 플레이트의 각 웰에 세포의 1 밀리리터를 추가한 다음, DMEM 지하 막 매트릭스 배지의 1밀리리터를 각 웰에 첨가한다.파종 후 즉시 플레이트를 원심분리하고 가벼운 현미경을 사용하여 세포가 마이크로 우물을 통해 균등하게 분포되었는지 확인합니다. 그런 다음 세포를 방해하지 않고 48 시간 동안 세포 배양 인큐베이터에 플레이트를 놓습니다. 구문 류를 수확하려면, 잠복기의 끝에, 부드럽게 마이크로 우물에서 스페로이드를 제거하기 위해 각 우물에 세로지 피펫과 슈퍼 나탄의 절반을 사용합니다.모든 스페로이드가 분리되면 파이펫을 사용하여 3D 배양을 각 웰에서 15 밀리리터 원내 튜브 위에 37 미크로너 가역 스트레이너로 조심스럽게 전송합니다. 세척당 예온 된 기초 매체 1 밀리리터로 각각 세 번 씻고 나머지 스페로이드를 수집하고 스트레이너에 이러한 추가 스페로이드를 추가하십시오. 마지막 세척 후 현미경의 밑에 접시를 확인하여 모든 스페로이드가 마이크로 우물에서 제거되었는지 확인합니다.그런 다음 새로운 15 밀리리터 튜브를 통해 여과기를 반전하고 튜브에 스페로이드를 수집하기 위해 신선한 DMEM 지하 막 매트릭스 매체로 여과자의 바닥을 세척합니다. 스페로이드는 500 세포에서 상승하고 시간이 지남에 따라 크기가 가장 균일한 증가를 보여줍니다. 스페로이드 당 500 및 600 세포와 좋은 성장과 낮은 가변성을 달성 할 수있는 세포의 최적 수로 결정.지하 멤브레인 매트릭스의 첨가는 스페로이드 성장과 균질성을 향상시킵니다. 장기 배양에서 세포는 3일째에 조밀한 다층으로 나타납니다. 모노 층으로 배열된 평평한 셀은 10일째에 선명하게 보입니다.흥미롭게도, 루멘은 5 일째부터 스페로이드 안에 나타납니다. 또한, 세포 핵항균 양성세포의 명확한 증가는 10일째에 감소하는 5일과 7일에 관찰된다. 놀랍게도, 활성화된 Caspace 3는 3일과 5일에만 극소수의 세포에서 관찰된다.베타 카세닌 발현의 높은 수준은 매 지점에서 관찰됩니다. 안테로 사이트로 분화하는 스페로이드의 잠재력은 알칼리성 포스파타제와 솔루트 캐리어 가족 2A5 mRNA 발현에 의해 입증된다. 또한, 이러한 스페로이드는 전형적인 암 줄기세포 마커를 발현하고 대장암 환자에게 일상적으로 투여되는 조합 화학요법 치료에 반응한다.그래서 스페로이드는 다른 세포 집단으로 구성됩니다. 그(것)들은 그 때 굴절제와 같은 자극에 세포 특이적 반응을 분석하고 결국 약 반응을 위해 잘 이용될 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Study of Viral Vectors in a Three-dimensional Liver Model Repopulated with the Human Hepatocellular Carcinoma Cell Line HepG2

인간의 간세포 암 세포주 인 HepG2와 3 차원 간 모델 다시 채워에서 바이러스 성 벡터의 연구

This protocol describes the generation of a three-dimensional (3D) ex vivo liver model and its application to the study and development of viral vector ...

연구

암 연구학

The Colon-26 Carcinoma Tumor-bearing Mouse as a Model for the Study of Cancer Cachexia

콜론-26 암 종양 베어링 암 악액질의 연구를위한 모델로 마우스를

Cancer cachexia is the progressive loss of skeletal muscle mass and adipose tissue, negative nitrogen balance, anorexia, fatigue, inflammation, and ...

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

위쪽으로 이동: 간단 하 고 유연한 생체 외에서 3 차원 침공 분석 실험 프로토콜

Although 3D invasion assays have been developed, the challenge remains to study cells without affecting the integrity of their microenvironment. ...

A Method to Define the Effects of Environmental Enrichment on Colon Microbiome Biodiversity in a Mouse Colon Tumor Model

마우스 결 장 종양 모델에서 콜론 미생물 생물 다양성에 환경 농축의 효과 정의 하는 방법

Several recent studies have illustrated the beneficial effects of living in an enriched environment on improving human disease. In mice, environmental ...

Generation of High-Throughput Three-Dimensional Tumor Spheroids for Drug Screening

마약 검사에 대 한 높은 처리량 3 차원 종양 Spheroids의 생성

Cancer cells have routinely been cultured in two dimensions (2D) on a plastic surface. This technique, however, lacks the true environment a tumor mass is ...

A Three-dimensional Thymic Culture System to Generate Murine Induced Pluripotent Stem Cell-derived Tumor Antigen-specific Thymic Emigrants

뮤린 유도 만능 줄기 세포 유래 종양 항원 특이적 흉선 유이주자를 생성하는 3차원 흉선 배양 시스템

The inheritance of pre-rearranged T cell receptors (TCRs) and their epigenetic rejuvenation make induced pluripotent stem cell (iPSC)-derived T cells a ...

Longitudinal Morphological and Physiological Monitoring of Three-dimensional Tumor Spheroids Using Optical Coherence Tomography

경도 형태 및 생리 적인 광학 일관성 단층 촬영을 사용 하 여 3 차원 종양 Spheroids의 모니터링

Tumor spheroids have been developed as a three-dimensional (3D) cell culture model in cancer research and anti-cancer drug discovery. However, currently, ...

Three-Dimensional Bone Extracellular Matrix Model for Osteosarcoma

다리에 대 한 3 차원 뼈 세포 외 매트릭스 모델

Osteosarcoma (OS) is the most common and a highly aggressive primary bone tumor. It is characterized with anatomic and histologic variations along with ...

Physiologic Patient Derived 3D Spheroids for Anti-neoplastic Drug Screening to Target Cancer Stem Cells

암 줄기 세포를 표적으로 하는 반대로 신 생물 성 약 검열을 위한 생리학 환자 파생된 3D Spheroids

In this protocol, we outline the procedure for generation of tumor spheroids within 384-well hanging droplets to allow for high-throughput screening of ...

Evaluating Cell Death Using Cell-Free Supernatant of Probiotics in Three-Dimensional Spheroid Cultures of Colorectal Cancer Cells

대장암세포의 3차원 스페로이드 배양에서 프로바이오틱스의 세포없는 슈퍼네탄을 사용하여 세포 사멸 평가

This manuscript describes a protocol to evaluate cancer cell deaths in three dimensional (3D) spheroids of multicellular types of cancer cells using ...