Name: a non-coding small rna micc contributes to virulence in outer membrane proteins in salmonella enteritidis
Uploaded: 2021-01-27T14:00:00
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इस अध्ययन को चीनी राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (संख्या 31972651 और 31101826), जियांग्सू उच्च शिक्षा विज्ञान फाउंडेशन (नंबर 14केजेबी 230002), पशु चिकित्सा जैव प्रौद्योगिकी की राज्य कुंजी प्रयोगशाला (संख्या एसकेएलवीबीएफ 201509), नेचर साइंस फाउंडेशन ग्रांट ऑफ यंग्जोउ (नंबर वाईजेड 2014019), जियांग्सू उच्च शिक्षा संस्थानों (पीएपीडी) के प्राथमिकता शैक्षणिक कार्यक्रम विकास द्वारा वित्त पोषित एक परियोजना से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था।

सभी प्रयोग राष्ट्रीय अनुसंधान परिषद के प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड के अनुसार आयोजित किए गए थे। यंगज़ौ विश्वविद्यालय की पशु देखभाल और उपयोग समिति ने जानवरों पर लागू सभी प्रयोगों...

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	<li>J&#248;rgensen, M. G., Pettersen, J. S., Kallipolitis, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=sRNA-mediated+control+in+bacteria:+An+increasing+diversity+of+regulatory+mechanisms.">sRNA-mediated control in bacteria: An increasing diversity of regulatory mechanisms.</a> Biochimica et Biophysica Acta-Gene Regulatory Mechanisms. 1863 (5), 194504 (2020).</li><li>Wagner, E. G. 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E., Belfort, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Riboregulation+in+Escherichia+coli:+DsrA+RNA+acts+by+RNA:RNA+interactions+at+multiple+loci.">Riboregulation in Escherichia coli: DsrA RNA acts by RNA:RNA interactions at multiple loci.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 95 (21), 12456-12461 (1998).</li><li>Sharma, C. M., Darfeuille, F., Plantinga, T. H., Vogel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+small+RNA+regulates+multiple+ABC+transporter+mRNAs+by+targeting+C/A-rich+elements+inside+and+upstream+of+ribosome-binding+sites.">A small RNA regulates multiple ABC transporter mRNAs by targeting C/A-rich elements inside and upstream of ribosome-binding sites.</a> Genes and Development. 21 (21), 2804-2817 (2007).</li><li>Boisset, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Staphylococcus+aureus+RNAIII+coordinately+represses+the+synthesis+of+virulence+factors+and+the+transcription+regulator+Rot+by+an+antisense+mechanism.">Staphylococcus aureus RNAIII coordinately represses the synthesis of virulence factors and the transcription regulator Rot by an antisense mechanism.</a> Genes and Development. 21 (11), 1353-1366 (2007).</li><li>Mass&#233;, E., Vanderpool, C. K., Gottesman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+RyhB+small+RNA+on+global+iron+use+in+Escherichia+coli.">Effect of RyhB small RNA on global iron use in Escherichia coli.</a> Journal of Bacteriology. 187 (20), 6962-6971 (2005).</li><li>Papenfort, K., Vogel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulatory+RNA+in+bacterial+pathogens.">Regulatory RNA in bacterial pathogens.</a> Cell Host &amp; Microbe. 8 (1), 116-127 (2010).</li></ol>

एस। एंटरिटिडिस एक महत्वपूर्ण संकाय इंट्रासेल्युलर रोगज़नक़ है जो युवा मुर्गियों को संक्रमित कर सकता है और आंत्रशोथ से लेकर प्रणालीगत संक्रमण और मृत्यु17,18 तक के लक्षण पैदा करता <sup class="xref...

गैर-कोडिंग छोटे आरएनए (एसआरएनए) लंबाई में 40-400 न्यूक्लियोटाइड होते हैं, जो आम तौर पर प्रोटीन को एन्कोड नहीं करते हैं, लेकिन बैक्टीरिया क्रोमोसोम 1,2,3 में स्वतंत्र रूप से स्थानांतरित किए जा सकते हैं। अधिकांश एसआरएनए जीन-कोडिंग क्षेत्रों के बीच इंटरजेनिक क्षेत्रों (आईजीआर) में एन्कोड किए जाते हैं और बेस-पेयरिंग क्रियाओं के माध्यम से लक्ष्य एमआरएनए के साथ बातचीत करते हैं, और पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल स्तर 4,5 पर लक्ष्य जीन अभिव्यक्ति को विनियमित करते हैं। वे पदार्थ चयापचय, बाहरी झिल्ली प्रोटीन संश्लेषण, कोरम सेंसिंग और विषाणु जीन अभिव्यक्ति 5 में महत्वपूर्ण विनियमन भूमिकानिभाते हैं।
MicC एक 109-न्यूक्लियोटाइड छोटा आरएनए प्रतिलेख है जो एस्चेरिचिया कोलाई और साल्मोनेला एंटरिका सेरोवर टाइफिमुरियम में मौजूद है, जो कई बाहरी झिल्ली प्रोटीन अभिव्यक्ति को विनियमित कर सकता है जैसे कि ओएमपीसी, ओएमपीडी, ओएमपीएन, ओएमपी 35 और ओएमपी36 6,7,8,9। एमआईसीसी इन विट्रो में ओएमपीसी एमआरएनए लीडर के लिए राइबोसोम बाइंडिंग को रोककर ओएमपीसी की अभिव्यक्ति को नियंत्रित करता है और इसे एस्चेरिचिया कोलाई6 में इसके कार्य के लिए एचएफक्यू आरएनए चैपरोन की आवश्यकता होती है। साल्मोनेला टाइफिमुरियम में, एमआईसीसी कोडिंग अनुक्रम (कोडन 23-26) के भीतर ≤12-बीपी आरएनए डुप्लेक्स के माध्यम से ओएमपीडी एमआरएनए को शांत करता है और फिर एंडोन्यूक्लियोलाइटिक एमआरएनए 7 को अस्थिर करताहै। इस विनियमन प्रक्रिया को चैपरोन प्रोटीन एचएफक्यू10 द्वारा सहायता प्रदान की जाती है। ओएमपीसी एक प्रचुर मात्रा में बाहरी झिल्ली प्रोटीन है जिसे उन वातावरणों में महत्वपूर्ण माना जाता था जहां पोषक तत्व और विष सांद्रता अधिक थी, जैसे कि आंत6। ओएमपीडी पोरिन साल्मोनेला टाइफिमुरियम में सबसे प्रचुर मात्रा में बाहरी झिल्ली प्रोटीन है और कुल सेल प्रोटीन 11 का लगभग1% का प्रतिनिधित्व करता है। ओएमपीडी मानव मैक्रोफेज और आंतों के उपकला कोशिकाओंके पालन में शामिल है। एमआईसीसी ओएमपीसी और ओएमपीडी पोरिन दोनों की अभिव्यक्ति को भी दबाता है। यह माना जाता है कि एमआईसीसी विषाणु को नियंत्रित कर सकता है। MICC द्वारा विनियमित नए लक्ष्य जीनों का पता लगाने और MICC के विषाणु विनियमन समारोह का अध्ययन करने के लिए, हमने साल्मोनेला एंटरिटिडिस (SE) स्ट्रेन 50336 में micC जीन का क्लोन तैयार किया, और फिर उत्परिवर्ती 50336MicC और पूरक उत्परिवर्ती 50336MicC / pmicC का निर्माण किया। क्यूआरटी-पीसीआर द्वारा नए लक्ष्य जीन की जांच की गई। चूहों और चिकन संक्रमण द्वारा 50336एमआईसी की उग्रता का पता लगाया गया था।

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	<tbody>
		<tr>
			<td>dextrose</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A610219</td>
			<td>for broth preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNA purification kit</td>
			<td>TIANGEN</td>
			<td>DP214</td>
			<td>for DNA purification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ex Taq</td>
			<td>TaKaRa</td>
			<td>RR01A</td>
			<td>PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10017608</td>
			<td>for broth preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>20032116</td>
			<td>for broth preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Arabinose</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A610071</td>
			<td>&#955;-Red recombination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini Plasmid Kit</td>
			<td>TIANGEN</td>
			<td>DP106</td>
			<td>plasmid extraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10019308</td>
			<td>for broth preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(NH4)2SO4</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent</td>
			<td>10002917</td>
			<td>for broth preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrimeScriptRRT reagent Kit with gDNA Eraser&#160;</td>
			<td>TaKaRa</td>
			<td>RR047</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBRR Premix Ex Taq II</td>
			<td>TaKaRa</td>
			<td>RR820</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 DNA Ligase</td>
			<td>NEB</td>
			<td>M0202</td>
			<td>Ligation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15596018</td>
			<td>RNA isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptone</td>
			<td>Oxoid</td>
			<td>LP0042</td>
			<td>for broth preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast extract</td>
			<td>Oxoid</td>
			<td>LP0021</td>
			<td>for broth preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5418</td>
			<td>centrifugation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrophoresis apparatus</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>164-5050</td>
			<td>Electrophoresis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Electroporation System</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>165-2100</td>
			<td>for bacterial transformation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrophotometer</td>
			<td>BioTek</td>
			<td>Epoch</td>
			<td>Absorbance detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Real-Time PCR system</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>7500 system</td>
			<td>qRT-PCR</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a non-coding small rna micc contributes to virulence in outer membrane proteins in salmonella enteritidis

एक गैर-कोडिंग छोटे आरएनए (एसआरएनए) पोस्ट-ट्रांसक्रिप्शनल स्तर पर जीन अभिव्यक्ति को विनियमित करने के लिए एक नया कारक है। एस्चेरिचिया कोलाई और साल्मोनेला टाइफिमुरियम में जाना जाने वाला एक प्रकार का एसआरएनए एमआईसीसी बाहरी झिल्ली प्रोटीन की अभिव्यक्ति को दबा सकता है। साल्मोनेला एंटरिटिडिस में माइकसी के विनियमन कार्य की आगे जांच करने के लिए, हमने साल्मोनेला एंटरिटिडिस स्ट्रेन 50336 में एमसीसी जीन का क्लोन तैयार किया, और फिर रेड-आधारित पुनर्संयोजन प्रणाली द्वारा उत्परिवर्ती 50336एमाइकसी का निर्माण किया और पूरक उत्परिवर्ती 50336यूमाइकसी / क्यूआरटी-पीसीआर परिणामों से पता चला है कि 503360 एमआईसी में ओएमपीडी का प्रतिलेखन जंगली प्रकार के तनाव की तुलना में 1.3 गुना अधिक था, जबकि 50336 में ओएमपीए और ओएमपीसी का प्रतिलेखन जंगली प्रकार के तनाव की तुलना में 2.2 गुना और 3 गुना अधिक था। इनसे संकेत मिलता है कि माइकसी ओएमपीए और ओएमपीसी की अभिव्यक्ति को दबाता है। निम्नलिखित अध्ययन में, 6 सप्ताह के बाल्ब / सी चूहों और 1 दिन की मुर्गियों दोनों को संक्रमित करके 50336एमआईसी की रोगजनकता का पता लगाया गया था। परिणाम से पता चला कि जंगली प्रकार के स्ट्रेन50336 के एलडी 50, 6 सप्ताह के बाल्ब /सी चूहों के लिए म्यूटेंट 50336एमआईसीसी और 50336यूमाइकसी / पीमाइकसी क्रमशः 12.59 सीएफयू, 5.01 सीएफयू और 19.95 सीएफयू थे। 1-दिन की मुर्गियों के लिए एलडी50 उपभेद क्रमशः 1.13 x 109 सीएफयू, 1.55 x 108 सीएफयू, और 2.54 x 108 सीएफयू थे। इसने संकेत दिया कि माइकसी को हटाने से एस की उग्रता बढ़ गई। बाहरी झिल्ली प्रोटीन की अभिव्यक्ति को विनियमित करके चूहों और मुर्गियों में एंटरिटिडिस।

उत्परिवर्ती 50336EmicC का निर्माण और पूरक तनाव 50336EmicC / pmicC मिकी जीन क्लोन परिणाम ने संकेत दिया कि यह जीन 109 बीपी से बना था जो एस के साथ 100% पहचान दिखा ?...

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A Non-Coding Small RNA MicC Contributes to Virulence in Outer Membrane Proteins in Salmonella Enteritidis

एक छोटे से गैर-कोडिंग आरएनए माइकसी के विलोपन उत्परिवर्ती बनाने के लिए एक ए-रेड-मध्यस्थता पुनर्संयोजन प्रणाली का उपयोग किया गया था।

एक गैर-कोडिंग छोटे आरएनए मिकी साल्मोनेला एंटरिटिडिस में बाहरी झिल्ली प्रोटीन में विषाणु में योगदान देता है

A non-coding small RNA (sRNA) is a new factor to regulate gene expression at the post-transcriptional level. A kind of sRNA MicC, known in Escherichia ...

इस प्रोटोकॉल का उपयोग जीन फ़ंक्शन अध्ययन और बैक्टीरिया के लिए उत्परिवर्ती को अलग करने के लिए क्रोमोसोमल जीन को निष्क्रिय करने के लिए किया जा सकता है। यह समरूप पुनर्संयोजन प्रक्रिया को सरल, तेज और अत्यधिक कुशल बनाता है। इस तकनीक का उपयोग करके, रोगज़नक़ के विषाणु संबंधी जीन को हटाकर क्षीण उत्परिवर्ती प्राप्त किया जा सकता है, जिसका उपयोग क्षीण वैक्सीन के लिए एक उम्मीदवार के रूप में किया जा सकता है।साइक्लैम्फेनिकॉल कैसेट को बढ़ाकर शुरू करें जिसमें माइक जीन के हेमोलॉजी टुकड़े होते हैं। प्लास्मिड पीकेडी 3 से क्लोरैम्फेनिकॉल कैसेट को बढ़ाने के लिए फॉरवर्ड और रिवर्स प्राइमर डिजाइन करें, जिसमें माइकसी जीन के पांच प्राइम और तीन प्राइम सिरों से 50 बेस पेयर होमोलॉजी एक्सटेंशन शामिल हैं। क्लोरैम्फेनिकॉल कैसेट को बढ़ाने के लिए टेम्पलेट के रूप में पीकेडी 3 प्लास्मिड का उपयोग करके टेक्स्ट पांडुलिपि में वर्णित पीसीआर करें।अगारोस जेल वैद्युतकणसंचलन के साथ पीसीआर उत्पाद का आकार निर्धारित करें। फिर डीएनए जेल रिकवरी किट के साथ उत्पाद को शुद्ध करें और स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा डीएनए की एकाग्रता निर्धारित करें। पीकेडी 3 प्लास्मिड द्वारा आगे पुनर्संयोजन के हस्तक्षेप को खत्म करने के लिए एक दूसरी पीसीआर प्रतिक्रिया करें।पहले पीसीआर उत्पाद को 1 से 200 के अनुपात में पतला करें और इसे द्वितीयक पीसीआर के लिए टेम्पलेट के रूप में उपयोग करें। पहले पुनः संयोजक स्ट्रेन 50336 डेल्टा माइकसी डॉट कैट का निर्माण करने के लिए, एसई 50336 सक्षम कोशिकाओं के 100 माइक्रोलीटर को पीकेडी 46 प्लास्मिड के पांच माइक्रोलीटर के साथ मिलाएं और 30 मिनट के लिए बर्फ पर इनक्यूबेट करें। 90 सेकंड के लिए 42 डिग्री सेल्सियस पर मिश्रण को गर्मी से झटका दें, और प्लास्मिड को कोशिकाओं में बदलने के लिए इसे दो मिनट के लिए बर्फ पर वापस स्थानांतरित करें।एम्पीसिलीन प्रतिरोधी प्लेट पर रात भर 30 डिग्री सेल्सियस पर कोशिकाओं की खेती करके सकारात्मक कॉलोनियों को स्क्रीन करें। अगले दिन, एसई 50336 पीकेडी 46 तरल संस्कृति में 30 मिलीलीटर अधिक एल अरबिनोज जोड़ें और हिलाते समय 30 डिग्री सेल्सियस पर एक घंटे की इनक्यूबेशन के साथ पुन: संयोजन अभिव्यक्ति को प्रेरित करें। एक इलेक्ट्रिक शॉक कप में शुद्ध पीसीआर उत्पाद के 100 नैनोग्राम और एसई 50336 पीकेडी 46 सक्षम कोशिकाओं के 40 माइक्रोलीटर मिलाएं।फिर बिजली के झटके परिवर्तन करें। इलेक्ट्रो ट्रांसफॉर्मेशन के बाद, मिश्रण को एक घंटे के लिए 150 आरपीएम और 30 डिग्री सेल्सियस पर एसओसी माध्यम और एक हिलने वाले कल्चर इनक्यूबेटर में स्थानांतरित करें। सकारात्मक कॉलोनियों के लिए स्क्रीन करने के लिए रात भर 37 डिग्री सेल्सियस पर क्लोरैम्फेनिकॉल प्रतिरोधी एलबी प्लेट और कल्चर पर मिश्रण फैलाएं।दो घंटे के लिए 42 डिग्री सेल्सियस पर सकारात्मक कॉलोनियों की संस्कृति। फिर एम्पीसिलीन के प्रति संवेदनशीलता और रात भर 37 डिग्री सेल्सियस पर क्लोरैम्फेनिकॉल के प्रतिरोध के लिए कॉलोनी को स्क्रीन करें ताकि पीकेडी 46 के बिना पहला पुनः संयोजक तनाव प्राप्त किया जा सके। पीसीआर और जेल वैद्युतकणसंचलन का उपयोग करके 50336 डेल्टा माइकसी डॉट कैट जीनोमिक डीएनए निकालने के बाद, प्लास्मिड पीसीपी 20 के 100 नैनोग्राम को 50336 डेल्टा माइकसी डॉट बिल्ली सक्षम कोशिकाओं के 40 माइक्रोलीटर में इलेक्ट्रोप्लेट करें।एम्पीसिलीन और क्लोरैम्फेनिकॉल प्रतिरोधी प्लेटों पर 30 डिग्री सेल्सियस पर सकारात्मक ट्रांसफॉर्मेंट्स स्क्रीन करें। सकारात्मक ट्रांसफॉर्मेंट्स को गैर-प्रतिरोधी एलबी तरल माध्यम में स्थानांतरित करें और उन्हें रात भर 42 डिग्री सेल्सियस पर कल्चर करें। फिर 37 डिग्री सेल्सियस पर एलबी प्लेट पर एकल कॉलोनियों को अलग करें।उस कॉलोनी का चयन करें जो एम्पीसिलीन और क्लोरैम्फेनिकॉल दोनों के प्रति संवेदनशील है। यह म्यूटेंट माइकसी विलोपन म्यूटेंट एसई 50336 डेल्टा माइकसी है। टेक्स्ट पांडुलिपि में वर्णित पीसीआर का प्रदर्शन करके 50336 डेल्टा माइकसी सत्यापित करें।इस प्रोटोकॉल का उपयोग पूरक उत्परिवर्ती 50336 डेल्टा माइकसी, पीएमआईसी में विलोपन उत्परिवर्ती 50336 डेल्टा माइकसी के निर्माण के लिए किया गया था। पहले पुनः संयोजक 50336 डेल्टा माइकसी डॉट बिल्ली को पीसीआर द्वारा जंगली प्रकार के तनाव में 279 बेस जोड़े की तुलना में क्लोरैम्फेनिकॉल सम्मिलन के साथ पीसीआर उत्पादों के लगभग 1200 बेस जोड़े के अपेक्षित बैंड आकार के साथ मान्य किया गया था। दूसरे पुनर्संयोजन में, पीसीपी 20 द्वारा क्लोरैम्फेनिकॉल कैसेट को समाप्त कर दिया गया था।अनुक्रमण के साथ संयुक्त पीसीआर परिणामों ने पुष्टि की कि इसोजेनिक माइक म्यूटेंट का सफलतापूर्वक निर्माण किया गया था। 50336, 50336 डेल्टा माइकसी और 50336 डेल्टा माइकसी पीएमआईसी उपभेदों में ओएमपीए, ओएमपीसी और ओएमपीडी जीन की अभिव्यक्ति का विश्लेषण वास्तविक मात्रात्मक पीसीआर द्वारा किया गया था। ओएमपीए और ओएमपीसी और 50336 डेल्टा माइकसी का प्रतिलेखन जंगली प्रकार के तनाव की तुलना में लगभग 2.2 गुना और तीन गुना बढ़ गया।जबकि ओएमपीडी का प्रतिलेखन केवल थोड़ा बढ़ गया। एलडी 50 परीक्षणों से पता चला है कि तीन उपभेदों में से प्रत्येक के साथ छह से आठ सप्ताह के बीएएलबी / सी चूहों को संक्रमित करने के बाद, 50336 डेल्टा माइकसी से संक्रमित अधिकांश चूहों ने संक्रमण के 48 घंटे बाद शिथिलता, अक्षमता या दस्त प्रदर्शित किया और 96 घंटे के बाद उनकी मृत्यु हो गई। वाइल्ड टाइप स्ट्रेन और 50336 डेल्टा माइकसी पीएमआईसीसी से संक्रमित चूहों ने संक्रमण के 72 घंटे बाद समान लक्षण प्रदर्शित किए और 120 घंटे के बाद उनकी मृत्यु हो गई।तीन उपभेदों के एलडी 50 ने संकेत दिया कि उत्परिवर्ती 50336 डेल्टा माइकसी की उग्रता जंगली प्रकार की तुलना में 2.5 गुना बढ़ गई। यह तकनीक शोधकर्ताओं को जीवाणु जीन के कार्य का अध्ययन करने और लक्ष्य जीन को हटाकर वांछित इंजीनियर तनाव प्राप्त करने में मदद करती है।

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Non-Coding Small RNA MicC Contributes to Virulence in Outer Membrane Proteins in Salmonella Enteritidis

An Allelotyping PCR for Identifying Salmonella enterica serovars Enteritidis, Hadar, Heidelberg, and Typhimurium

An Allelotyping PCR for Identifying Salmonella enterica serovars Enteritidis, Hadar, Heidelberg, and Typhimurium

पहचान के लिए एक Allelotyping पीसीआर साल्मोनेला enterica Serovars Enteritidis, Hadar, हीडलबर्ग, और typhimurium

Current commercial PCRs tests for identifying Salmonella target genes unique to this genus.  However, there are two species, six subspecies, and over ...

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization (LNA flow-FISH): a Method for Bacterial Small RNA Detection

Locked Nucleic Acid Flow Cytometry-fluorescence in situ Hybridization LNA flow-FISH: a Method for Bacterial Small RNA Detection

ताला न्यूक्लिक एसिड प्रवाह cytometry प्रतिदीप्ति बगल में (LNA के प्रवाह मछली) संकरण: बैक्टीरियल लघु शाही सेना जांच के लिए विधि

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a powerful technique that is used to detect and localize specific nucleic acid sequences in the cellular ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

झिल्ली Polarity, झिल्ली अखंडता, और intracellular आयन सांद्रता में निगरानी परिवर्तन<em&gt; स्ट्रैपटोकोकस निमोनिया</em&gt; फ्लोरोसेंट रंगों का उपयोग

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

Using Fluorescent Proteins to Visualize and Quantitate Chlamydia Vacuole Growth Dynamics in Living Cells

Using Fluorescent Proteins to Visualize and Quantitate Chlamydia Vacuole Growth Dynamics in Living Cells

कल्पना और quantitate फ्लोरोसेंट प्रोटीन का उपयोग<em&gt; क्लैमाइडिया</em&gt; रिक्तिका विकास की गतिशीलता जीवित कोशिकाओं में

The obligate intracellular bacterium Chlamydia elicits a great burden on global public health. C.&#160;trachomatis is the leading bacterial cause of ...

A Protocol to Infect Caenorhabditis elegans with Salmonella typhimurium

A Protocol to Infect Caenorhabditis elegans with Salmonella typhimurium

संक्रमित करने के लिए एक प्रोटोकॉल<em&gt; Caenorhabditis एलिगेंस</em&gt; साथ<em&gt; साल्मोनेला</em

In the last decade, C. elegans has emerged as an invertebrate organism to study interactions between hosts and pathogens, including the host defense ...

High-throughput Assay to Phenotype Salmonella enterica Typhimurium Association, Invasion, and Replication in Macrophages

High-throughput Assay to Phenotype Salmonella enterica Typhimurium Association, Invasion, and Replication in Macrophages

Phenotype के लिए उच्च throughput परख<em&gt; साल्मोनेला enterica</em&gt; Typhimurium एसोसिएशन, आक्रमण, और मैक्रोफेज में प्रतिकृति

Salmonella species are zoonotic pathogens and leading causes of food borne illnesses in humans and livestock1. Understanding the mechanisms underlying ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

न्युट्रोफिल अलगाव और विश्लेषण करने के लिए चिकित्सीय एजेंट लिंफोमा सेल संवेदनशीलता में उनकी भूमिका का निर्धारण करने के लिए

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Small RNA Transfection in Primary Human Th17 Cells by Next Generation Electroporation

अगली पीढ़ी Electroporation द्वारा प्राथमिक मानव Th17 कोशिकाओं में छोटे आरएनए अभिकर्मक

CD4+ T cells can differentiate into several subsets of effector T helper cells depending on the surrounding cytokine milieu. Th17 cells can be generated ...

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

अलगाव साल्मोनेला typhimurium-मैक्रोफेज से युक्त Phagosomes का

Salmonella typhimurium is a facultative intracellular bacterium that causes gastroenteritis in humans. After invasion of the lamina propria, S. ...

Identification of Coding and Non-coding RNA Classes Expressed in Swine Whole Blood

स्वाइन पूरे रक्त में व्यक्त कोडिंग और गैर कोडिंग आरएनए कक्षाओं की पहचान

The advent of innovative and increasingly powerful next generation sequencing techniques has opened new avenues into the ability to examine the underlying ...