Name: a simple dry sectioning method for obtaining whole-seed-sized resin section and its applications
Uploaded: 2021-01-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Simple Dry Sectioning Method for Obtaining Whole-Seed-Sized Resin Section and Its Applications at JoVE.com

تم توفير التمويل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية الصينية (32071927)، ومشروع المواهب في جامعة يانغتشو وتطوير البرنامج الأكاديمي ذات الأولوية لمؤسسات التعليم العالي في جيانغسو.

1- إعداد بذور الراتنج المضمّنة (الشكل 1)
<ol><li>إصلاح ست حبات ناضجة الذرة في 10 مل من 2.5٪ من الغلوتارالدهيد الفوسفات المخزنة (0.1 M، pH7.2) في 4 درجة مئوية لمدة 48 ساعة. يمكن للباحثين اختيار الخلائط تثبيت أخرى، وتركيزات التثبيت، وظروف التثبيت وفقا لأهداف أبحاثهم وأنواع الأنسجة.</li>
	<li>أخرج حبات وشريحة ?...

<ol>
	<li>Cai, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneous+structure+and+spatial+distribution+in+endosperm+of+high-amylose+rice+starch+granules+with+different+morphologies.">Heterogeneous structure and spatial distribution in endosperm of high-amylose rice starch granules with different morphologies.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 62 (41), 10143-10152 (2014).</li><li>He, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+defective+effect+of+starch+branching+enzyme+IIb+from+weak+to+strong+induces+the+formation+of+biphasic+starch+granules+in+amylose-extender+maize+endosperm.">The defective effect of starch branching enzyme IIb from weak to strong induces the formation of biphasic starch granules in amylose-extender maize endosperm.</a> Plant Molecular Biology. 103 (3), 355-371 (2020).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gradually+decreasing+starch+branching+enzyme+expression+is+responsible+for+the+formation+of+heterogeneous+starch+granules.">Gradually decreasing starch branching enzyme expression is responsible for the formation of heterogeneous starch granules.</a> Plant Physiol. 176 (1), 582-595 (2018).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dek35+encodes+a+PPR+protein+that+affects+cis-splicing+of+mitochondrial+nad4+intron+1+and+seed+development+in+maize.">Dek35 encodes a PPR protein that affects cis-splicing of mitochondrial nad4 intron 1 and seed development in maize.</a> Molecular Plant. 10 (3), 427-441 (2017).</li><li>Hu, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seed+structure+characteristics+to+form+ultrahigh+oil+content+in+rapeseed.">Seed structure characteristics to form ultrahigh oil content in rapeseed.</a> PLoS One. 8 (4), 62099 (2013).</li><li>Huang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maize+VKS1+regulates+mitosis+and+cytokinesis+during+early+endosperm+development.">Maize VKS1 regulates mitosis and cytokinesis during early endosperm development.</a> Plant Cell. 31 (6), 1238-1256 (2019).</li><li>Xu, A., Wei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+comparison+and+applications+of+different+sections+in+investigating+the+microstructure+and+histochemistry+of+cereal+kernels.">Comprehensive comparison and applications of different sections in investigating the microstructure and histochemistry of cereal kernels.</a> Plant Methods. 16, 8 (2020).</li><li>Zhao, L., Pan, T., Cai, C., Wang, J., Wei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+whole+sections+of+mature+cereal+seeds+to+visualize+the+morphology+of+endosperm+cell+and+starch+and+the+distribution+of+storage+protein.">Application of whole sections of mature cereal seeds to visualize the morphology of endosperm cell and starch and the distribution of storage protein.</a> Journal of Cereal Science. 71, 19-27 (2016).</li><li>Zhao, L., Cai, C., Wei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+image+processing+method+for+investigating+the+morphology+of+cereal+endosperm+cells.">An image processing method for investigating the morphology of cereal endosperm cells.</a> Biotech &amp; Histochemistry. 95 (4), 249-261 (2020).</li><li>Borisjuk, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seed+architecture+shapes+embryo+metabolism+in+oilseed+rape.">Seed architecture shapes embryo metabolism in oilseed rape.</a> The Plant Cell. 25 (5), 1625-1640 (2013).</li><li>Lott, J. N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+bodies+in+seeds.">Protein bodies in seeds.</a> Nordic Journal of Botany. 1, 421-432 (1981).</li><li>Jing, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+endosperm+cells+and+starch+granules+in+common+wheat.">Development of endosperm cells and starch granules in common wheat.</a> Cereal Research Communications. 42 (3), 514-524 (2014).</li></ol>

والبذور هي أهم مورد متجدد للأغذية والأعلاف والمواد الخام الصناعية، وهي غنية بمواد التخزين مثل النشا والبروتين. المورفولوجيا وكمية الخلايا ومحتوى وتكوين مواد التخزين تؤثر على وزن ونوعية البذور7،12. على الرغم من أن تكنولوجيا علم المجسمات وتحليل الصور يمكن ق?...

تحتوي البذور النباتية على مواد تخزين مثل النشا والبروتين وتوفر الطاقة والتغذية للناس. يحدد شكل وحجم وكمية الخلايا ومواد التخزين وزن ونوعية البذور. الخلايا ومواد التخزين في مناطق مختلفة من البذور لها morphologies مختلفة بشكل ملحوظ، وخاصة بالنسبة لبعض المحاصيل الحبوب عالية amylose مع تثبيط النشا المتفرعة إنزيم IIb1،2،3. لذلك ، من المهم جدًا التحقق من الصفات المورفورة للخلايا ومواد التخزين في مناطق مختلفة من البذور.
البارافين هو طريقة جيدة لإعداد الجزء الكامل البذور الحجم ويمكن أن يعرض هيكل الأنسجة من البذور وتراكم مواد التخزين في مناطق مختلفة من البذور4،5،6. ومع ذلك، فإن أقسام البارافين عادة ما يكون 6-8 μm سمك مع دقة منخفضة؛ وبالتالي ، فمن الصعب جدا أن نلاحظ بوضوح وتحليل كمي مورفولوجيا من المواد الخلية والتخزين. أقسام الراتنج وعادة ما يكون 1-2 μm سمك ودقة عالية ومناسبة جدا لمراقبة وتحليل مورفولوجيا من مواد الخلية والتخزين7. ومع ذلك، فإن طريقة تقسيم الراتنجات الروتينية تواجه صعوبة في إعداد القسم الكامل بحجم البذور، وخاصة بالنسبة للبذور ذات الحجم الكبير والمحتوى العالي من النشا؛ وهكذا، لا توجد طريقة لمراقبة وتحليل مورفولوجيا الخلايا ومواد التخزين في مناطق مختلفة من البذور. LR الراتنج الأبيض هو راتنج الاكريليك والمعارض اللزوجة المنخفضة والنفاذية القوية، مما يؤدي إلى تطبيقاته جيدة في إعداد قسم الراتنج من البذور، وخاصة بالنسبة الحبوب الحبوب ناضجة حبات مع حجم كبير وارتفاع محتوى النشا. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أن تكون ملطخة العينة جزءا لا يتجزأ من الراتنج الأبيض LR بسهولة مع العديد من الأصباغ الكيميائية لعرض بوضوح مورفولوجيا من الخلايا ومواد التخزين تحت ضوء أو المجهر الفلورسنت7. في ورقتنا السابقة، أبلغنا عن طريقة اقسام جافة لإعداد الأجزاء الكاملة بحجم البذور من حبات الحبوب الناضجة المضمنة في راتنج LR White. ويمكن لهذه الطريقة أيضا إعداد الجزء الكامل من البذور الحجم من تطوير، والنباتة والمطبوخة نواة الحبوب8. تم الحصول على كامل البذور الحجم القسم لديها العديد من التطبيقات في مجال الرصد والتحليل micromorphology ، وخاصة بالنسبة للعرض بوضوح وتحليل كمي الاختلافات في مورفولوجيا الخلايا ومواد التخزين في مناطق مختلفة من البذور8،9.
هذه التقنية مناسبة للباحثين الذين يرغبون في مراقبة البنية المجهرية للأنسجة وشكل وحجم الخلايا وحبيبات النشا والهيئات البروتينية في مناطق مختلفة من البذور باستخدام المجهر الخفيف. يمكن تحليل صور الأجزاء الكاملة بحجم البذور الملطخة خصيصًا لثناء الخلايا المعرضة وحبيبات النشا والهيئات البروتينية بواسطة برنامج تحليل المورفولوجيا لقياس المعلمات المورفولوجية للخلايا وحبيبات النشا والهيئات البروتينية في مناطق مختلفة من البذور. من أجل إظهار التطبيق التقني وتطبيقات القسم الكامل الحجم بالبذور ، قمنا بالتحقيق في البذور الناضجة من الذرة والبذور النباتية والاغتصاب وزراعة ، والنبات ، والحبوب من الأرز المطبوخ في هذه الدراسة. يحتوي البروتوكول على أربع عمليات. هنا، ونحن نستخدم نواة الذرة الناضجة، والتي هي الأكثر صعوبة في إعداد أقسام البذور الحجم كله بسبب حجم كبير وارتفاع محتوى النشا، كعينة لعرض العمليات خطوة بخطوة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A501931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact glass staining jar (5-Place)</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>E678013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coomassie brilliant blue R-250</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A100472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>F518211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double-sided blade</td>
			<td>Gillette Shanghai Co., Ltd.</td>
			<td>74-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A500737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flattening table</td>
			<td>Leica</td>
			<td>HI1220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BX60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent brightener 28</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>910090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass strips</td>
			<td>Leica</td>
			<td>840031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde 50% solution in water</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A600875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A600232</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A500538</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A507048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BX53</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LR White resin</td>
			<td>Agar Scientific</td>
			<td>AGR1281A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oven</td>
			<td>Shanghai Jing Hong Laboratory Instrument Co.,Ltd.</td>
			<td>9023A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium iodide</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A100512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>F518101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>F519022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic dodecahydrate</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A607793</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic dihydrate</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A502805</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultramicrotome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>EM UC7</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a simple dry sectioning method for obtaining whole-seed-sized resin section and its applications

المورفولوجيا، وحجم وكمية من الخلايا وحبيبات النشا والهيئات البروتينية في البذور تحديد وزن ونوعية البذور. وهي تختلف اختلافا كبيرا بين مناطق مختلفة من البذور. من أجل عرض morphologies من الخلايا وحبيبات النشا والهيئات البروتين بوضوح ، وتحليل كميا المعلمات المورفولوجيا بدقة ، وهناك حاجة إلى قسم البذور كلها الحجم. على الرغم من أن قسم البارافين بالبذور الكاملة يمكن أن يحقق في تراكم مواد التخزين في البذور ، إلا أنه من الصعب جدًا تحليل بارامترات المورفولوجيا للخلايا ومواد التخزين نظرًا لدقة منخفضة للقطعة السميكة. يحتوي قسم الراتنج الرقيق على دقة عالية ، ولكن طريقة تقسيم الراتنج الروتينية ليست مناسبة لإعداد القسم الكامل بحجم البذور من البذور الناضجة مع حجم كبير ومحتوى كبير من النشا. في هذه الدراسة، نقدم طريقة بسيطة للقطع الجاف لإعداد قسم الراتنج الكامل بحجم البذور. يمكن لهذه التقنية إعداد المقاطع الشاملة الحجمة للبذور الكاملة المتقاطعة والطولية من البذور النامية والناضجة والمبتوتة والمضمروسة في راتنج LR White ، حتى بالنسبة للبذور الكبيرة ذات المحتوى العالي من النشا. يمكن أن يكون مقطع كامل بحجم البذور ملطخة مع الفلورسنت 28، اليود، وCoomassie الأزرق الرائع R250 ليعرض على وجه التحديد مورفولوجيا الخلايا وحبيبات النشا، والهيئات البروتين بوضوح، على التوالي. ويمكن أيضا أن يتم تحليل الصورة التي تم الحصول عليها كميا لإظهار المعلمات مورفولوجيا الخلايا، وحبيبات النشا، والهيئات البروتين في مناطق مختلفة من البذور.

طريقة بسيطة للقطع الجاف للحصول على قسم بذرة كاملة الحجم نحن ننشئ طريقة بسيطة للقطع الجافة لإعداد قسم بذرة كاملة الحجم من البذور المضمنة في راتنج LR-أبيض (الشكل 1). ويمكن أن الطريقة إعداد المقاطع عرضية وطولانية كاملة البذور الحجم مع سمك 2 μm(الشكل 2-<st...

Watch this Scientific Journal Video about A Simple Dry Sectioning Method for Obtaining Whole-Seed-Sized Resin Section and Its Applications at JoVE.com

A Simple Dry Sectioning Method for Obtaining Whole-Seed-Sized Resin Section and Its Applications

هذه التقنية تسمح لإعداد سريع وبسيط من قسم الراتنج كامل الحجم البذور لمراقبة وتحليل الخلايا، وحبيبات النشا، والهيئات البروتين في مناطق مختلفة من البذور.

طريقة بسيطة للقطع الجاف للحصول على قسم الراتنج الكامل الحجم للبذر وتطبيقاته

The morphology, size and quantity of cells, starch granules&#160;and protein bodies in seed determine the weight and quality of seed. They are ...

علم المورفولوجيا وجودة الخلايا وحبيبات النشا، والهيئات البروتينية في النواة تحديد الوزن وجودة البذور. في هذه الدراسة، ونحن نقدم كسكان بسيطة من نواة كاملة جزءا لا يتجزأ من الراتنج الأبيض LR وإنشاء طريقة بسيطة شفط الجافة من حبات كاملة. نختار LR الراتنج الأبيض كوسيطة جزءا لا يتجزأ لسببين رئيسيين.أولاً، إنه منخفض اللزوجة ونفاذية قوية، مما يؤدي إلى تطبيقاته الجيدة في إعداد هذه الأجزاء القوية من البذور، وخاصة بالنسبة للحبوب الناضجة مع حجم كبير ومحتوى كبير من النشا. ثانيا، يمكن أن تكون ملطخة العينة جزءا لا يتجزأ من الراتنج الأبيض LR بسهولة مع العديد من الأصباغ الكيميائية لعرض بوضوح مورفولوجيا العينات تحت الضوء مع المجهر الفلورسنت. يمكن أن تكون لطخت أقسام المعدة خصيصا لعرض الخلايا، حبيبات النشا، والهيئات البروتين بوضوح في ظهور نواة كاملة، ويمكن أيضا أن تكون المعلمات مورفولوجيا تحليلها كميا.تحتوي الطريقة على دراسات. هنا، نستخدم حبات الذرة الناضجة مع حجم أكبر ومحتوى عالي النشا كعينة لعرض العمليات خطوة بخطوة. لتبدأ، حبات مقاطع في زجاجة بسيطة.إضافة حوالي 10 ملليمتر من 2.5٪ من الغلوتارالدهيد الفوسفات المخزنة. أكثر واحد درجة 7.2 درجة الحرارة ووضعها في 4 درجة مئوية لمدة 48 ساعة لإصلاح لهم على حد سواء. ثم تأخذ بها هذه حبات وشريحة لهم طوليا أو عرضية، مع سمك 2-3 ملليمترات.تحتاج إلى شفرة حادة على الوجهين. وأصلحهم لـ 48 ساعة أخرى بعد ذلك، قم بغسل العينات ثلاث مرات بحوالي 10 ملليمترات، لذا 0.1 M الفوسفات العازلة، وhH 7.2 لمدة 30 دقيقة في كل مرة.لترطيب العينات خطوة بخطوة، نقعها في حوالي 10 ملليمترات من محلول مائي الإيثانول 30٪ لمدة 30 دقيقة أولاً، وانقعها تباعاً في 10 ملليمترات، لذلك 50٪70٪90٪مرة واحدة، و100٪33. للتسلل عينة خطوة بخطوة، استردادها تباعا مع 10 ملليمترات من حل راتنج أبيض LR المخفف مع الإيثانول من 25٪50٪75٪مرة واحدة، و 100٪ مرتين في أربع درجات مئوية لمدة 12 ساعة في كل مرة. قبل التضمين، نحن بحاجة إلى إعداد الرواد للعينات.إضافة 250 ميكرولترات من الراتنج الأبيض LR نقية في أنبوب الطرد المركزي مليمترين ميليمترات وبلمرة في ست درجات مئوية لمدة 48 ساعة. بعد ذلك، على التوالي إضافة 500 ميكرولترات من الراتنج الأبيض LR نقية والتسلل إلى العينة في أنبوب الطرد المركزي مع قاعدة. بعد استقامة العينات بإبرة تشريحية، وضع الراتنج عند ست درجات مئوية في فرن لمدة 48 ساعة.أخرج تلك الحبوب المضمنة من أنبوب الطرد المركزي وقطع الراتنج الزائد حول عينة باستخدام شفرة حادة. ضع كتلة الراتنج في حامل العينة من الميكروتون وتقليم قبالة الراتنج الزائد على سطح العينة وحول العينة مع شفرة. مزيد من تلميع سطح العينة أخيرا بسكين الزجاج حتى يمكن تشكيل مقطع كامل.الآن حان الوقت لإعداد هذا القسم المدهش مع اثنين من سمك ميكرون. قبل التقطيع، وضع النحاس صغيرة تحدث عن اثنين ملليمتر فوق حافة شفرة لمنع قسم من الشباك. كما يُمَثّل القسم، ضعَ كلمةً تحت القسم لتأييده.بعد ذلك، أضف 100 ميكرولترات من الماء على الشريحة غير هُجّت ونقل القسم الكامل وغير المنقطع بعناية إلى الماء مع المعالجين. سخنيها وجففها عند 50 درجة مئوية لتنعيم القسم المتجعد. وأخيراً، هناك جولتين هامتين تحتاجان إلى الاهتمام.أولا، إذا كان القسم ينهار أو الدموع، تمديد الوقت لكل تسلل الراتنج من العينة. ثانيا، إذا كان القسم لديه بعض خطوط موازية للسكين، المشبك كتلة العينة بإحكام. إذا كان القسم يحتوي على بعض الخطوط العمودية إلى السكين، يرجى استخدام سكين جديدة.لمراقبة مورفولوجيا الخلايا وحبيبات النشا، والهيئات البروتينية، يمكننا وصمة عار المقاطع مع الفلورسنت براينر 28، حل اليود، وCoomassie الأزرق الرائع R250 على التوالي. بالنسبة للبقع المحددة الأخرى، تستند إلى بحث الاقتراح. هنا نستخدم محلول اليود لطخة حبيبات النشا كمثال.إضافة 40 ميكرولترات من محلول اليود لتزج في القسم. و أحتفظ بها في الجرة لدقيقة واحدة ثم غطي العينة بأكمام الغلاف.ولطخة قبالة وكيل فائض حل حوله. مراقبة وتصوير العينة على الفور تحت مجهر مضاء مجهز بكاميرا الدوائر التلفزيونية المغلقة. يمكننا معالجة وتحليل كمي الصور التي تم تصويرها للمنطقة ، والوصول الطويل أو القصير ، و roundness من الخلايا ، وحبيبات النشا ، والهيئات البروتين في مناطق مختلفة للنواة باستخدام برامج تحليل مورفولوجيا.نحن ننشئ طريقة بسيطة للقطع الجافة للاحتفاظ بأقسام بحجم النواة الكاملة في راتنج LR White. يمكن أن الطريقة إعداد المقاطع العرضية والطولية للنواة كلها مع اثنين من ميكرون. أو أمثلة، يمكن أن تكون البذور كاملة ناضجة من الاغتصاب البذور الزيتية مقطعة عرضية وطولية.ويمكن أيضا أن تكون أقسام نواة كاملة ناضجة من الذرة مع حجم أكبر على استعداد بنجاح. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضا أن يتم التحقيق في النواة النامية، والنواة المطبوخة، والنواة منبت باستخدام الطريقة. تحتوي الأقسام المعدة من حبات كاملة على التطبيقات أدناه.أولا، يمكن استخدام أقسام نواة كاملة لمراقبة بنية الأنسجة من البذور. على سبيل المثال، يمكن أن تظهر أقسام الجنين كله من الاغتصاب بذرة زيتية ملطخة مع صفرانين بوضوح انها الراديكالية، عارضة فرط، الداخلية والخارجية يمكن استخدام أقسام نواة كاملة لمراقبة وتحليل مورفولوجيا الخلايا. على سبيل المثال ، تلطخ الأجزاء العرضية من جنين كامل من اغتصاب بزغ الزيتية مع الفلورسنت 28 ، وزيوت الخلايا ملطخة على وجه التحديد.يمكن عرض مورفولوجيا الخلايا الدقيقة في أي مناطق من الجنين كله في التكبير عالية. يمكن تحليل المعلمات المورفولوجيا للخلايا parenchymal ، كميا باستخدام برمجيات تحليل المورفولوجيا وتظهر بعض الاختلافات في مناطق مختلفة من الجنين. يمكن أن تظهر الأجزاء العرضية من نواة الذرة الكاملة الملطخة بمشرق الفلورسنت 28 أيضًا كتشكل من الخلايا ، وتختلف معلمات مورفولوجيا الخلايا في مناطق متنوعة من إندوسبيرم.يمكن أن تكون ملطخة أجزاء من نواة كاملة مع محلول اليود ليعرض مورفولوجيا من حبيبات النشا ، على سبيل المثال ، يمكن أن تظهر المقاطع العرضية والطولية من حبات الذرة الملطخة باليود مورفولوجيا حبيبات النشا بوضوح. تظهر حبيبات النشا في مناطق متنوعة مورفولوجيا مختلفة بشكل كبير ، وحجمها ، وكميتها في خلايا إندوسبيرم. لذا فإن التحليل الكمي للبارامترات المورفولوجية لم حبيبات النشا يبين أنها مختلفة بشكل كبير في مناطق متنوعة للاندوسبيرم.يمكن استخدام الأقسام لمراقبة وتحليل مورفولوجيا أجسام البروتين. على سبيل المثال، هو ملطخة بروتين النشا الأزرق باستخدام Coomassie الأزرق الرائع R250. يمكن ملاحظة التوزيع المكاني لبروتين النشا في الجنين بأكمله من اغتصاب الحبوب الزيتية في التكبير المنخفض ، ويمكن عرض الهيكل الصغير بوضوح في التكبير العالي.بالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضا تحليل مؤشر الأرقام خطأ والمعلمات مورفولوجيا من أجسام البروتين في المناطق المختارة كميا. هذه التقنية يوفر أول وبسهولة إعداد أقسام الراتنج من حبات كاملة من البذور النامية والناضجة. التطبيقات المقطعية في بنية الأنسجة للنواة الكاملة ومن ثم التحقيق في مورفولوجيا الخلايا وحبيبات النشا، والهيئات البروتينية في مناطق مختلفة من نواة كاملة.يمكن تحليل الصور المكتسبة كميا لإظهار المعلمات مورفولوجيا الخلايا، وحبيبات النشا، والهيئات البروتينية، وكذلك مقارنتها في مناطق مختلفة من نواة كاملة.

Research

JoVE Journal

Biology

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyrosequencing : طريقة بسيطة لالتنميط الجيني دقيقة

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

The Ladder Rung Walking Task: A Scoring System and its Practical Application.

وسلم المشي رونغ العمل : نظام تسجيل النقاط وتطبيقها العملي.

Progress in the development of animal models for/stroke, spinal cord injury, and other neurodegenerative disease requires tests of high sensitivity to ...

Absolute Quantum Yield Measurement of Powder Samples

مطلق قياس العائد الكم من عينات مسحوق

Measurement of fluorescence quantum yield has become an important tool in the search for new solutions in the development, evaluation, quality control and ...

FSL Constructs: A Simple Method for Modifying Cell/Virion Surfaces with a Range of Biological Markers Without Affecting their Viability

FSL يبني : طريقة بسيطة لتعديل خلية / الفيريون السطوح مع مجموعة من العلامات البيولوجية دون أن يؤثر ذلك صلاحيتها

The ability to modify/visualize biological surfaces, and then study the modified cell/virion in a range of in vitro and in vivo environments is essential ...

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

طريقة بسيطة للتصوير Arabidopsis يغادر طريق Perfluorodecalin كوسيط التصوير إختراقي

The problem of acquiring high-resolution images deep into biological samples is widely acknowledged1. In air-filled tissue such as the spongy mesophyll of ...

Simple Method for Fluorescence DNA In Situ Hybridization to Squashed Chromosomes

Simple Method for Fluorescence DNA In Situ Hybridization to Squashed Chromosomes

طريقة بسيطة لDNA الإسفار<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين لسحق الكروموسومات

DNA in situ hybridization (DNA ISH) is a commonly used method for mapping sequences to specific chromosome regions. This approach is particularly ...

A Fast Air-dry Dropping Chromosome Preparation Method Suitable for FISH in Plants

سريع الهواء الجاف اسقاط كروموسوم طريقة التحضير مناسبة لFISH في النباتات

Preparation of chromosome spreads is a prerequisite for the successful performance of fluorescence in situ hybridization (FISH). Preparation of high ...

Filtration Isolation of Nucleic Acids:  A Simple and Rapid DNA Extraction Method

عزل الترشيح من الأحماض النووية: وبسيطة وسريعة استخراج الحمض النووي الطريقة

FINA, filtration isolation of nucleic acids, is a novel extraction method which utilizes vertical filtration via a separation membrane and absorbent pad ...

Imaging G Protein-coupled Receptor-mediated Chemotaxis and its Signaling Events in Neutrophil-like HL60 Cells

يقترن تصوير البروتين G مستقبلات بوساطة الكيميائي والأحداث يشير في خلايا HL60 العدلات مثل

Eukaryotic cells sense and move towards a chemoattractant gradient, a cellular process referred as chemotaxis. Chemotaxis plays critical roles in many ...

Hybrid-Cut: An Improved Sectioning Method for Recalcitrant Plant Tissue Samples

الهجين قطع: طريقة محسنة باجتزاء لعينات الأنسجة النباتية المتمردة

Maintaining plant section integrity is essential for studying detailed anatomical structures at the cellular, tissue, or even organ level. However, some ...