Name: a simple dry sectioning method for obtaining whole-seed-sized resin section and its applications
Uploaded: 2021-01-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Simple Dry Sectioning Method for Obtaining Whole-Seed-Sized Resin Section and Its Applications at JoVE.com

O financiamento foi fornecido pela National Natural Science Foundation of China (32071927), pelo Projeto de Talentos da Universidade de Yangzhou e pelo Programa Acadêmico Prioritário de Desenvolvimento de Instituições de Ensino Superior de Jiangsu.

1. Preparação de sementes incorporadas à resina (Figura 1)
<ol><li>Fixar seis grãos maduros de milho em 10 mL de glutaraldeído tamponado de fosfato de 2,5% (0,1 M, pH7.2) a 4 °C por 48 h. Os pesquisadores podem escolher outras misturas fixas, concentrações fixas e condições de fixação de acordo com seus objetivos de pesquisa e tipos de tecidos.</li>
	<li>Tire os grãos e corte-os longitudinalmente ou transversalmente até 2-3 mm de espessura usando uma lâmina afiada de dupla lateridade, e fixá-los em 10 m...

<ol>
	<li>Cai, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneous+structure+and+spatial+distribution+in+endosperm+of+high-amylose+rice+starch+granules+with+different+morphologies.">Heterogeneous structure and spatial distribution in endosperm of high-amylose rice starch granules with different morphologies.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 62 (41), 10143-10152 (2014).</li><li>He, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+defective+effect+of+starch+branching+enzyme+IIb+from+weak+to+strong+induces+the+formation+of+biphasic+starch+granules+in+amylose-extender+maize+endosperm.">The defective effect of starch branching enzyme IIb from weak to strong induces the formation of biphasic starch granules in amylose-extender maize endosperm.</a> Plant Molecular Biology. 103 (3), 355-371 (2020).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gradually+decreasing+starch+branching+enzyme+expression+is+responsible+for+the+formation+of+heterogeneous+starch+granules.">Gradually decreasing starch branching enzyme expression is responsible for the formation of heterogeneous starch granules.</a> Plant Physiol. 176 (1), 582-595 (2018).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dek35+encodes+a+PPR+protein+that+affects+cis-splicing+of+mitochondrial+nad4+intron+1+and+seed+development+in+maize.">Dek35 encodes a PPR protein that affects cis-splicing of mitochondrial nad4 intron 1 and seed development in maize.</a> Molecular Plant. 10 (3), 427-441 (2017).</li><li>Hu, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seed+structure+characteristics+to+form+ultrahigh+oil+content+in+rapeseed.">Seed structure characteristics to form ultrahigh oil content in rapeseed.</a> PLoS One. 8 (4), 62099 (2013).</li><li>Huang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maize+VKS1+regulates+mitosis+and+cytokinesis+during+early+endosperm+development.">Maize VKS1 regulates mitosis and cytokinesis during early endosperm development.</a> Plant Cell. 31 (6), 1238-1256 (2019).</li><li>Xu, A., Wei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+comparison+and+applications+of+different+sections+in+investigating+the+microstructure+and+histochemistry+of+cereal+kernels.">Comprehensive comparison and applications of different sections in investigating the microstructure and histochemistry of cereal kernels.</a> Plant Methods. 16, 8 (2020).</li><li>Zhao, L., Pan, T., Cai, C., Wang, J., Wei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+whole+sections+of+mature+cereal+seeds+to+visualize+the+morphology+of+endosperm+cell+and+starch+and+the+distribution+of+storage+protein.">Application of whole sections of mature cereal seeds to visualize the morphology of endosperm cell and starch and the distribution of storage protein.</a> Journal of Cereal Science. 71, 19-27 (2016).</li><li>Zhao, L., Cai, C., Wei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+image+processing+method+for+investigating+the+morphology+of+cereal+endosperm+cells.">An image processing method for investigating the morphology of cereal endosperm cells.</a> Biotech &amp; Histochemistry. 95 (4), 249-261 (2020).</li><li>Borisjuk, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seed+architecture+shapes+embryo+metabolism+in+oilseed+rape.">Seed architecture shapes embryo metabolism in oilseed rape.</a> The Plant Cell. 25 (5), 1625-1640 (2013).</li><li>Lott, J. N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+bodies+in+seeds.">Protein bodies in seeds.</a> Nordic Journal of Botany. 1, 421-432 (1981).</li><li>Jing, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+endosperm+cells+and+starch+granules+in+common+wheat.">Development of endosperm cells and starch granules in common wheat.</a> Cereal Research Communications. 42 (3), 514-524 (2014).</li></ol>

As sementes são o recurso renovável mais importante para alimentos, forragem e matéria-prima industrial, e são ricas em materiais de armazenamento, como amido e proteína. A morfologia e a quantidade de células e o conteúdo e configuração dos materiais de armazenamento afetam o peso e a qualidade das sementes7,12. Embora a tecnologia de estereologia e análise de imagem possa medir o tamanho e a quantidade de células em uma região de tecido, elas estão...

As sementes vegetais contêm materiais de armazenamento, como amido e proteína, e fornecem energia e nutrição para as pessoas. A forma, o tamanho e a quantidade de materiais de célula e armazenamento determinam o peso e a qualidade das sementes. As células e materiais de armazenamento em diferentes regiões de sementes possuem morfologias significativamente diferentes, especialmente para algumas culturas de cereais de alta amilolose com inibição da enzima de ramificação de amido IIb1,2,3. Por isso, é muito importante investigar as morfologias das células e materiais de armazenamento em diferentes regiões de sementes.
A secção de parafina é um bom método para preparar a seção de todo o tamanho das sementes e pode exibir a estrutura tecidual das sementes e o acúmulo de material de armazenamento em diferentes regiões de sementes4,5,6. No entanto, as seções de parafina geralmente têm 6-8 μm de espessura com baixa resolução; assim, é muito difícil observar e analisar quantitativamente a morfologia dos materiais celulares e de armazenamento. As seções de resina geralmente têm 1-2 μm de espessura e alta resolução e são muito adequadas para observar e analisar a morfologia dos materiais celulares e de armazenamento7. No entanto, o método rotineiro de secção de resina tem dificuldade em preparar a seção de todo o tamanho das sementes, especialmente para sementes com grande volume e alto teor de amido; assim, não há como observar e analisar a morfologia das células e materiais de armazenamento em diferentes regiões da semente. A resina branca LR é uma resina acrílica e exibe baixa viscosidade e forte permeabilidade, levando a suas boas aplicações na preparação da seção de resina de sementes, especialmente para grãos maduros de cereais com grande volume e alto teor de amido. Além disso, a amostra embutida na resina branca LR pode ser manchada facilmente com muitos corantes químicos para exibir claramente a morfologia das células e materiais de armazenamento sob microscópio leve ou fluorescente7. Em nosso artigo anterior, relatamos um método de secção seca para preparar as seções de tamanho inteiro de grãos de cereais maduros embutidos em resina branca LR. O método também pode preparar a seção de tamanho inteiro do kernel de cereais em desenvolvimento, germinado e cozido8. A seção de todo o tamanho obtido possui muitas aplicações na observação e análise de micromorfologia, especialmente para visualização clara e análise quantitativa das diferenças de morfologia dos materiais celulares e de armazenamento em diferentes regiões da semente8,9.
Esta técnica é apropriada para pesquisadores que desejam observar a microestrutura do tecido e a forma e o tamanho das células, grânulos de amido e corpos proteicos em diferentes regiões de sementes usando microscópio leve. As imagens de seções de tamanho inteiro manchadas especificamente para exposição de células, grânulos de amido e corpos proteicos podem ser analisadas por software de análise de morfologia para medir quantitativamente os parâmetros de morfologia das células, grânulos de amido e corpos proteicos em diferentes regiões da semente. Para demonstrar a aplicabilidade técnica e as aplicações de seção de todo o tamanho das sementes, investigamos as sementes maduras do estupro de milho e oleosa e os grãos de arroz em desenvolvimento, germinados e cozidos neste estudo. O protocolo contém quatro processos. Aqui, usamos o kernel de milho maduro, que é o mais difícil na preparação das seções de todo o tamanho das sementes devido ao grande volume e alto teor de amido, como uma amostra para exibir os processos passo a passo.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A501931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact glass staining jar (5-Place)</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>E678013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coomassie brilliant blue R-250</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A100472</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>F518211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double-sided blade</td>
			<td>Gillette Shanghai Co., Ltd.</td>
			<td>74-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A500737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flattening table</td>
			<td>Leica</td>
			<td>HI1220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BX60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent brightener 28</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>910090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass strips</td>
			<td>Leica</td>
			<td>840031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde 50% solution in water</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A600875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A600232</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A500538</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A507048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BX53</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LR White resin</td>
			<td>Agar Scientific</td>
			<td>AGR1281A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oven</td>
			<td>Shanghai Jing Hong Laboratory Instrument Co.,Ltd.</td>
			<td>9023A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium iodide</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A100512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>F518101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>F519022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic dodecahydrate</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A607793</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic dihydrate</td>
			<td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td>
			<td>A502805</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultramicrotome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>EM UC7</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a simple dry sectioning method for obtaining whole-seed-sized resin section and its applications

A morfologia, o tamanho e a quantidade de células, grânulos de amido e corpos proteicos em sementes determinam o peso e a qualidade das sementes. São significativamente diferentes entre diferentes regiões de sementes. Para ver as morfologias das células, grânulos de amido e corpos proteicos de forma clara, e analisar quantitativamente seus parâmetros de morfologia com precisão, a seção do tamanho de sementes é necessária. Embora a seção de parafina de todo o tamanho de sementes possa investigar o acúmulo de materiais de armazenamento em sementes, é muito difícil analisar quantitativamente os parâmetros de morfologia das células e materiais de armazenamento devido à baixa resolução da seção espessa. A seção de resina fina tem alta resolução, mas o método de secção de resina de rotina não é adequado para preparar a seção em tamanho inteiro de sementes maduras com um grande volume e alto teor de amido. Neste estudo, apresentamos um método simples de secção seca para preparar a seção de resina de todo o tamanho das sementes. A técnica pode preparar as seções de tamanho integral transversal e longitudinal de sementes em desenvolvimento, maduras, germinadas e cozidas embutidas na resina branca LR, mesmo para sementes grandes com alto teor de amido. A seção de tamanho inteiro pode ser manchada com brilho fluorescente 28, iodo e R250 azul brilhante Coomassie para exibir especificamente a morfologia de células, grânulos de amido e corpos proteicos claramente, respectivamente. A imagem obtida também pode ser analisada quantitativamente para mostrar os parâmetros de morfologia das células, grânulos de amido e corpos proteicos em diferentes regiões de sementes.

Método simples de secção seca para obter uma seção de tamanho de sementes inteira Estabelecemos um método simples de secção seca para preparar uma seção de sementes em tamanho inteiro embutida em resina LR-branca(Figura 1). O método pode preparar seções transversais e longitudinais de todo o tamanho com espessura de 2 μm(Figura 2-5, Figura Suplementar 1-4). Por exemplo, a semente ma...

Watch this Scientific Journal Video about A Simple Dry Sectioning Method for Obtaining Whole-Seed-Sized Resin Section and Its Applications at JoVE.com

A Simple Dry Sectioning Method for Obtaining Whole-Seed-Sized Resin Section and Its Applications

Esta técnica permite a preparação rápida e simples da seção de resina de tamanho inteiro para a observação e análise de células, grânulos de amido e corpos proteicos em diferentes regiões da semente.

Um método simples de secção seca para obter seção de resina de tamanho inteiro e suas aplicações

The morphology, size and quantity of cells, starch granules&#160;and protein bodies in seed determine the weight and quality of seed. They are ...

A ciência da morfologia e a qualidade das células, grânulos de amido e os corpos proteicos no kernel determinam o peso e a qualidade das sementes. Neste estudo, apresentamos como uma população simples de um núcleo inteiro embutido na resina branca LR e estabelecemos um método simples de sucção a seco de grãos inteiros. Escolhemos a resina LR White como meio incorporado por duas razões principais.Em primeiro lugar, é baixa viscosidade e forte permeabilidade, levando a suas boas aplicações no preparo desta poderosa seção de sementes, especialmente para grãos maduros de cereais com grande volume e alto teor de amido. Em segundo lugar, a amostra embutida na resina branca LR pode ser manchada facilmente com muitos corantes químicos para exibir claramente a morfologia de amostras sob luz com microscópio fluorescente. As seções preparadas podem ser especificamente manchadas para exibir as células, grânulos de amido e corpos proteicos claramente no surgimento de todo o kernel, e os parâmetros de morfologia também podem ser analisados quantitativamente.O método contém estudos. Aqui, usamos grãos de milho maduros com maior volume e conteúdo de amido alto como amostra para exibir os processos passo a passo. Para começar, clipes kernels em uma garrafa simples.Adicione cerca de 10 milímetros de glutaraldeído tamponado de fosfato de 2,5%. mais um pH 7.2 e colocá-lo em 4 graus centígrados por 48 horas para corrigir ambos. Em seguida, tire esses grãos e corte-os longitudinalmente ou transversalmente, com espessura de dois a três milímetros.Você precisa de uma lâmina afiada de dois lados. E consertá-los por mais 48 horas. Em seguida, lave suas amostras três vezes com cerca de 10 milímetros, então 0,1 M tampão fosfato, pH 7,2 por 30 minutos todas as vezes.Para hidratar as amostras passo a passo, mergulhe-as em cerca de 10 milímetros de solução aquosa de 30% de etanol por 30 minutos primeiro, e torça-as sucessivamente em 10 milímetros, então 50%70%90% uma vez, e 100% três vezes. Para se infiltrar em uma amostra passo a passo, recupere-os sucessivamente com 10 milímetros de solução de resina LR White diluída com etanol de 25%50%75% uma vez, e 100% duas vezes a quatro graus centígrados por 12 horas todas as vezes. Antes de incorporar, precisamos preparar os pedestais para amostras.Adicione 250 microliters de resina branca LR pura em dois milímetros de tubo de centrífuga e polimerize-o a seis graus centígrados por 48 horas. Em seguida, adicione sucessivamente 500 microliters de resina branca LR pura e infiltre a amostra no tubo centrífuga com um pedestal. Depois de endireitar as amostras com agulha anatômica, coloque a resina a seis graus centígrados em um forno por 48 horas.Retire os grãos incorporados do tubo centrífuga e corte o excesso de resina em torno de uma amostra usando uma lâmina afiada. Coloque o bloco de resina no suporte de amostra de microtona e corte a resina supérflua na superfície da amostra e ao redor da amostra com a lâmina. Polir ainda mais a superfície da amostra finalmente com uma faca de vidro até que uma seção completa possa ser formada.Agora é hora de preparar esta seção incrível com dois mícrons de espessura. Antes de cortar, coloque um pequeno cobre falando cerca de dois milímetros acima da borda da lâmina para evitar que uma seção se enrole. À medida que a seção se alonga, coloque um falou sob a seção para apoiá-lo.Em seguida, adicione os 100 microliters de água no escorregador não provagido e transfira cuidadosamente a seção completa e ininterrupta para a água com os tratadores. Aqueça e seque-os a 50 graus centígrados para suavizar a seção enrugada. Por fim, duas dicas importantes precisam de atenção.Primeiro, se a seção desmoronar ou chorar, estenda o tempo para cada infiltração de resina da amostra. Em segundo lugar, se a seção tiver algumas linhas paralelas à faca, aperte firmemente o bloco de amostra. Se a seção tiver algumas linhas verticais para a faca, por favor, use uma faca nova.Para observar a morfologia das células, grânulos de amido e corpos proteicos, podemos manchar as seções com brilho fluorescente 28, solução de iodo e R250 azul brilhante Coomassie, respectivamente. Para outras manchas específicas, basee-se na pesquisa da proposta. Aqui usamos a solução de iodo para manchar grânulos de amido como exemplo.Adicione 40 microliters de solução de iodo para imergir a seção. E mantenha-o no pote por um minuto. E então cubra a amostra com uma manga de capa.E limpe a solução de agente em excesso em torno dele. Observe e fotografe a amostra imediatamente sob um microscópio iluminado equipado com uma câmera de CCTV. Podemos processar e analisar quantitativamente as imagens fotografadas para área, acesso longo ou curto, e arredondamento de células, grânulos de amido e corpos proteicos em diferentes regiões para o kernel usando software de análise de morfologia.Estabelecemos um método simples de secção seca para reter seções de tamanho de kernel inteiros na resina branca LR. O método pode preparar seções transversais e longitudinais de todo o kernel com dois mícrons. ou exemplos, toda a semente madura do estupro da oleosa pode ser seccionada transversalmente e longitudinalmente.As seções de um núcleo integral maduro de milho com maior volume também podem ser preparadas com sucesso. Além disso, o kernel em desenvolvimento, o kernel cozido e o kernel germinado também podem ser investigados usando o método. As seções preparadas de núcleos inteiros têm as aplicações abaixo.Primeiro, as seções do grão inteiro podem ser usadas para observar a estrutura tecidual das sementes. Por exemplo, as seções de embrião inteiro de estupro de oleosa manchadas com safranin podem claramente exibir que é um radical, hiper casual, interno e externo As seções de todo o kernel podem ser usadas para observar e analisar a morfologia das células. Por exemplo, as seções transversais de todo o embrião de estupro de oleosa são manchadas com brilho fluorescente 28, e os óleos celulares são manchados especificamente.A micro-morfologia das células em qualquer região de embrião inteiro pode ser exibida em alta ampliação. Os parâmetros de morfologia das células parenchímicas podem ser analisados quantitativamente usando software de análise de morfologia e mostrar algumas diferenças em diversas regiões do embrião. As seções transversais de todo o núcleo de milho manchado com brilho fluorescente 28 também podem ser exibidas como uma morfologia das células, e os parâmetros de morfologia das células são diferentes em diversas regiões do endosperma.seções de kernel inteiro podem ser manchadas com solução de iodo para exibir sua morfologia de grânulos de amido, por exemplo, as seções transversais e longitudinais de grãos de milho manchados com iodo podem exibir claramente sua morfologia de grânulos de amido. Os grânulos de amido em diversas regiões mostram morfologia, tamanho e quantidade significativamente diferentes em células endosperma. Assim, a análise quantitativa dos parâmetros morfológicos dos grânulos de amido mostra que eles são significativamente diferentes em diversas regiões para endosperma.As seções podem ser usadas para observar e analisar a morfologia dos corpos proteicos. Por exemplo, a proteína do amido é manchada de azul usando Coomassie azul brilhante R250. A distribuição espacial da proteína amido em todo o embrião de estupro de oleosa pode ser observada em sua baixa ampliação, e a micro estrutura pode ser exibida claramente em alta ampliação.Além disso, os parâmetros de erro numinese dos números dos corpos proteicos nas regiões escolhidas também podem ser analisados quantitativamente. Esta técnica fornece a primeira e simples preparação de seções de resina de grãos inteiros a partir de sementes desenvolvidas e maduras. As aplicações seccionais na estrutura tecidual de todo o kernel e, em seguida, investigando a morfologia das células, grânulos de amido, e os corpos proteicos em diferentes regiões de um núcleo inteiro.As imagens adquiridas podem ser analisadas quantitativamente para mostrar os parâmetros de morfologia das células, grânulos de amido e corpos proteicos e compará-las em diferentes regiões de todo o kernel.

Research

JoVE Journal

Biology

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyrosequencing: Um método simples para genotipagem Accurate

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

Biologia

The Ladder Rung Walking Task: A Scoring System and its Practical Application.

O Ladder Rung Walking Tarefa: um sistema de pontuação e sua aplicação prática.

Progress in the development of animal models for/stroke, spinal cord injury, and other neurodegenerative disease requires tests of high sensitivity to ...

Absolute Quantum Yield Measurement of Powder Samples

Medição Rendimento Absoluto Quantum of amostras de pó

Measurement of fluorescence quantum yield has become an important tool in the search for new solutions in the development, evaluation, quality control and ...

FSL Constructs: A Simple Method for Modifying Cell/Virion Surfaces with a Range of Biological Markers Without Affecting their Viability

FSL Constrói: Um método simples para modificar Cell / Virion superfícies com um intervalo de Marcadores Biológicos sem afectar a viabilidade

The ability to modify/visualize biological surfaces, and then study the modified cell/virion in a range of in vitro and in vivo environments is essential ...

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

A Simple Method for Imaging Arabidopsis Leaves Using Perfluorodecalin as an Infiltrative Imaging Medium

Um método simples para criação de imagens Arabidopsis Folhas Usando Perfluorodecalin como um meio de imagem infiltrativas

The problem of acquiring high-resolution images deep into biological samples is widely acknowledged1. In air-filled tissue such as the spongy mesophyll of ...

Simple Method for Fluorescence DNA In Situ Hybridization to Squashed Chromosomes

Simple Method for Fluorescence DNA In Situ Hybridization to Squashed Chromosomes

Método simples para DNA de Fluorescência<em&gt; In Situ</em&gt; A hibridação com Cromossomos Squashed

DNA in situ hybridization (DNA ISH) is a commonly used method for mapping sequences to specific chromosome regions. This approach is particularly ...

A Fast Air-dry Dropping Chromosome Preparation Method Suitable for FISH in Plants

Um cromossomo Dropping Ar seco rápido Método de Preparação Adequado para FISH em plantas

Preparation of chromosome spreads is a prerequisite for the successful performance of fluorescence in situ hybridization (FISH). Preparation of high ...

Filtration Isolation of Nucleic Acids:  A Simple and Rapid DNA Extraction Method

Isolamento de filtração de Ácidos Nucleicos: Um Método de extracção de DNA simples e rápido

FINA, filtration isolation of nucleic acids, is a novel extraction method which utilizes vertical filtration via a separation membrane and absorbent pad ...

Imaging G Protein-coupled Receptor-mediated Chemotaxis and its Signaling Events in Neutrophil-like HL60 Cells

Imagiologia G protein-coupled receptor mediada por quimiotaxia e seus eventos de sinalização em células de HL60 de Neutrófilos-like

Eukaryotic cells sense and move towards a chemoattractant gradient, a cellular process referred as chemotaxis. Chemotaxis plays critical roles in many ...

Hybrid-Cut: An Improved Sectioning Method for Recalcitrant Plant Tissue Samples

Hybrid-Cut: Um Método Seccionamento melhorado para amostras de tecidos de plantas recalcitrante

Maintaining plant section integrity is essential for studying detailed anatomical structures at the cellular, tissue, or even organ level. However, some ...