Name: studying the activity of neuropeptides and other regulators of the excretory system in the adult mosquito
Uploaded: 2021-08-24T13:00:00
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इस शोध को कनाडा के प्राकृतिक विज्ञान और इंजीनियरिंग अनुसंधान परिषद (NSERC) डिस्कवरी अनुदान द्वारा एडी और जे-पीपी को वित्त पोषित किया गया था। एएल और एफएस ने अपने स्नातक अनुसंधान के समर्थन में एनएसईआरसी सीजीएस-एम पुरस्कार प्राप्त किए।

1. सिलिकॉन-पंक्तिबद्ध व्यंजन बनाना
नोट: यह चरण प्रयोगों से पहले किया जाना चाहिए। इन व्यंजनों विच्छेदन के लिए परख पकवान तैयार करने के लिए किया जाएगा, और संकुचन परख प्रयोगों के लिए.
<ol><li>निर्माता...

रक्त भोजन को निगलते समय, हेमेटोफैगस कीड़े अपने हेमोलिम्फ 2 में अतिरिक्त विलेय और पानी की चुनौती का सामना करते हैं। इससे निपटने के लिए, उनके पास एक विशेष उत्सर्जन प्रणाली होती है, जिसे हार्मोनल ?...

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL syringes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14955456</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Petri dishes</td>
			<td>Corning Falcon (Fisher Scientific)</td>
			<td>C351008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosillicate glass capillary filamented tubes 
			(OD 1 mm, ID 0.58 mm, length 100 mm)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>1B100F-4</td>
			<td>used for ISME reference electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosillicate glass capillary filamented tubes 
			(OD 2 mm, ID 1.12 mm, length 102 mm)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>1B200F-4</td>
			<td>used for SIET reference electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosillicate glass capillary unfilamented tubes 
			(OD 1.5 mm, ID 1.12 mm, length 100 mm)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>TW150-4</td>
			<td>used for ISME and SIET electrodes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 pad</td>
			<td>Diamed</td>
			<td>GEN59-114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyltrimethylsilylamine solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>41716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Faraday cage</td>
			<td>Custom</td>
			<td></td>
			<td>Can be fabricated by local machine shop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferric chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>157740</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (Dumont #5)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91150-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri dish</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>08-748A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrated mineral oil</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>8042-47-5</td>
			<td>Specific brand is not important</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INFINITY1-2CB video camera</td>
			<td>Luminera</td>
			<td>INFINITY1-2CB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulators (left and right handed)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>MMJL and MMJR</td>
			<td>Specific brand is not important so long as high quality manipulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral Oil, Light</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>0121-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minutien pins (0.1 mm stainless steel)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26002-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-hardening modeling clay</td>
			<td>Sargent Art</td>
			<td></td>
			<td>Specific brand is not important</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus light microscope (FOR SIET)</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>customized system</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Pasteur (transfer) pipette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-711-7M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine solution (0.1 mg/mL)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A-005-M</td>
			<td>84 kDa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinyl chloride (PVC)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>81395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10050-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10053-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schneider&#39;s Drosophila medium</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S0146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SIET system</td>
			<td>Applicable Electronics</td>
			<td>customized system</td>
			<td>Details available at: http://www.applicableelectronics.com/overview</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver wire</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>AGW1010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium ionophore II cocktail A</td>
			<td>Fluka</td>
			<td>99357</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard polystyrene Petri (culture) dishes</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>FB012921</td>
			<td>Any size would work, but 60 mm dishes are good for both dissections and assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope with ocular micrometer</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutter P-97 Flaming Brown Pipette puller</td>
			<td>Sutter Instruments</td>
			<td>FGPN7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td>Dow Chemical Company</td>
			<td>NC9285739</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetrahydrofuran</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>401757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR advanced hotplate stirrer - aluminum</td>
			<td>VWR</td>
			<td>9578</td>
			<td>Specific brand is not important</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

studying the activity of neuropeptides and other regulators of the excretory system in the adult mosquito

कीट शरीर विज्ञान का अध्ययन, विशेष रूप से उन प्रजातियों में जो मनुष्यों और अन्य कशेरुकियों में बीमारी पैदा करने वाले रोगजनकों के वैक्टर हैं, कीट नियंत्रण के लिए उपन्यास रणनीतियों को विकसित करने के लिए नींव प्रदान करते हैं। यहां, विधियों की एक श्रृंखला का वर्णन किया गया है जो नियमित रूप से न्यूरोपेप्टाइड्स और अन्य न्यूरोनल कारकों (यानी, बायोजेनिक एमाइन्स) की कार्यात्मक भूमिकाओं को निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है, जो मच्छर के उत्सर्जन प्रणाली पर, एडीज एजिप्टी है। मालपिघियन नलिकाएं (एमटी), प्राथमिक मूत्र गठन के लिए जिम्मेदार हैं, मच्छर से हटाए जाने पर घंटों तक काम करना जारी रख सकती हैं, जिससे हार्मोन उपचार के बाद द्रव स्राव माप की अनुमति मिलती है। इस प्रकार, रामसे परख अलग-थलग एमटी से स्राव दर को मापने के लिए एक उपयोगी तकनीक है। आयन-चयनात्मक माइक्रोइलेक्ट्रोड्स (ISME) का उपयोग स्रावित तरल पदार्थ में आयन सांद्रता (यानी, Na + और K +) को मापने के लिए क्रमिक रूप से किया जा सकता है। यह परख एक निश्चित समय पर कई एमटी के माप के लिए अनुमति देता है, विभिन्न हार्मोन और दवाओं के प्रभाव का निर्धारण. स्कैनिंग आयन-चयनात्मक इलेक्ट्रोड तकनीक आईएसएमई का उपयोग आयन परिवहन अंगों की सतह से सटे अपरिवर्तित परत में आयन गतिविधि के वोल्टेज प्रतिनिधि को मापने के लिए करती है ताकि वास्तविक समय में आयनों के ट्रांसएपिथेलियल परिवहन को निर्धारित किया जा सके। इस विधि का उपयोग एपिथेलिया में आयन अवशोषण या स्राव पर हार्मोन और अन्य नियामकों की भूमिका को समझने के लिए किया जा सकता है। Hindgut संकुचन assays भी मायोएक्टिव न्यूरोपेप्टाइड्स को चिह्नित करने के लिए एक उपयोगी उपकरण है, जो अतिरिक्त तरल पदार्थ और अपशिष्ट को हटाने के लिए इस अंग की क्षमता को बढ़ा या कम कर सकता है। सामूहिक रूप से, ये विधियां इस बात की अंतर्दृष्टि प्रदान करती हैं कि वयस्क मच्छरों में उत्सर्जन प्रणाली को कैसे विनियमित किया जाता है। यह महत्वपूर्ण है क्योंकि उत्सर्जन अंगों का कार्यात्मक समन्वय चुनौतियों पर काबू पाने में महत्वपूर्ण है जैसे कि एक्लोशन के बाद तनाव को दूर करने और रक्तपात प्राप्त करने के लिए एक उपयुक्त कशेरुक मेजबान खोजने से पहले।

UNStimulated एमटी के खिलाफ DH31 के आवेदन के परिणामस्वरूप द्रव स्राव दर में महत्वपूर्ण वृद्धि होती है, जो एडीज मच्छरों में मूत्रवर्धक हार्मोन के रूप में अपनी भूमिका की पुष्टि करती है (चित्रा 1 ए)?...

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Studying the Activity of Neuropeptides and Other Regulators of the Excretory System in the Adult Mosquito

इस प्रोटोकॉल Ramsay परख, आयन चयनात्मक microelectrodes, स्कैनिंग आयन चयनात्मक इलेक्ट्रोड तकनीक (SIET) और इन विट्रो संकुचन assays के पीछे के तरीकों को रेखांकित करता है, वयस्क मच्छर उत्सर्जन प्रणाली का अध्ययन करने के लिए लागू किया जाता है, जिसमें मालपिगियन नलिकाएं और हिंडगट शामिल हैं, सामूहिक रूप से आयन और द्रव स्राव दर, संकुचनशील गतिविधि, और ट्रांसएपिथेलियल आयन परिवहन को मापने के लिए।

वयस्क मच्छर में न्यूरोपेप्टाइड्स और उत्सर्जन प्रणाली के अन्य नियामकों की गतिविधि का अध्ययन करना

Studies of insect physiology, particularly in those species that are vectors of pathogens causing disease in humans and other vertebrates, provide the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish में Intraperitoneal इंजेक्शन

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans

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विकास और वयस्क स्टेज में स्थिर माध्यमिक मेटाबोलिक फ्लक्स के समस्थानिक रूपरेखा Caenorhabditis एलिगेंस</em

Stable isotopic profiling has long permitted sensitive investigations of the metabolic consequences of genetic mutations and/or pharmacologic therapies in ...

Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks

Cryopreserved नमूने की वसूली के लिए डिवाइस - यह खुद गलती क्रायोजेनिक भंडारण टैंक में गिरा

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The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

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The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

An Experimental and Bioinformatics Protocol for RNA-seq Analyses of Photoperiodic Diapause in the Asian Tiger Mosquito, Aedes albopictus

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एशियाई टाइगर मच्छर में Photoperiodic diapause की शाही सेना seq के विश्लेषण के लिए एक प्रयोगात्मक और जैव सूचना विज्ञान प्रोटोकॉल,<em&gt; एडीज albopictus</em

Photoperiodic diapause is an important adaptation that allows individuals to escape harsh seasonal environments via a series of physiological changes, ...

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शारीरिक रिकॉर्डिंग और पीले बुखार मच्छर के स्वाद उपांग की शाही सेना अनुक्रमण<em&gt; एडीज एजिप्टी</em

Electrophysiological recording of action potentials from sensory neurons of mosquitoes provides investigators a glimpse into the chemical perception of ...

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