Name: a murine model of ischemic retinal injury induced by transient bilateral common carotid artery occlusion
Uploaded: 2020-11-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion at JoVE.com

इस काम को शिक्षा, संस्कृति, खेल, विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय (MEXT) से वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए अनुदान-सहायता (KAKENHI) (18K09424 to Toshihide Kurihara और 20K18393 Yukihiro Miwa) द्वारा समर्थित किया गया था ।

यहां वर्णित सभी तरीकों को कीओ यूनिवर्सिटी स्कूल ऑफ मेडिसिन की इंस्टीट्यूशनल एनिमल केयर एंड यूज कमेटी (आईएसीयूसी) ने मंजूरी दे दी है ।
1. सर्जिकल उपकरणों और जानवरों की तैयारी
<ol><li>ऑटोक्लेव सर्?...

अध्ययन में, हमने दिखाया है कि tBCCAO, सरल टांके और एक क्लैंप का उपयोग कर, रेटिना इस्केमिया और रेटिना रोग के साथ प्रेरित कर सकता है । इसके अलावा, हमने रेटिना इस्केमिया के माउस मॉडल के विकास के लिए अपने वर्तमान ?...

रेटिना दृश्य समारोह के लिए एक न्यूरोसेंसरी ऊतक है। चूंकि दृश्य कार्य के लिए पर्याप्त मात्रा में ऑक्सीजन की आवश्यकता होती है, इसलिए रेटिना को शरीर में उच्चतम ऑक्सीजन की मांग करने वाले ऊतकों में से एक के रूप में जाना जाता है1। रेटिना संवहनी रोगों के लिए अतिसंवेदनशील होता है क्योंकि ऑक्सीजन रक्त वाहिकाओं के माध्यम से वितरित की जाती है। विभिन्न प्रकार के संवहनी रोग, जैसे मधुमेह रेटिनोपैथी और रेटिना रक्त वाहिका (नसों या धमनियों) ऑक्लूजन, रेटिना इस्केमिया को प्रेरित कर सकते हैं। रेटिना इस्केमिया के रोग तंत्र की जांच करने के लिए, रेटिना इस्केमिया के प्रजनन योग्य और चिकित्सकीय प्रासंगिक प्रयोगात्मक मॉडल आवश्यक माने जाते हैं। इंट्राल्यूमिनल फिलामेंट के सम्मिलन द्वारा मध्य मस्तिष्क धमनी ऑक्क्लुस (एमसीएओ) प्रयोगात्मक सेरेब्रल इस्केमिया2,3के वीवो कृंतक मॉडल के विकास के लिए सबसे आम तौर पर उपयोग की जाने वाली विधि है। एमसीए के लिए नेत्र धमनी (ओपा) की निकटता के कारण, एमसीएओ मॉडल का उपयोग रेटिना इस्केमिया4, 5, 6के रोगविज्ञान को समझने के लिए भी एक साथ कियाजाताहै। रेटिना इस्केमिया के साथ सेरेब्रल इस्केमिया को प्रेरित करने के लिए, लंबे तंतुओं को आम कैरोटिड धमनी (सीसीए) या बाहरी कैरोटिड धमनी (ईसीए) के चीरा के माध्यम से आम तौर पर डाला जाता है। इन तरीकों को प्रदर्शन करना मुश्किल है, सर्जरी (एक माउस के लिए 60 मिनट से अधिक) को पूरा करने के लिए लंबे समय की आवश्यकता होती है, और सर्जरी7के बाद परिणामों में उच्च वेरिबिलिटीओं का कारण बनती है। इन चिंताओं को बेहतर बनाने के लिए एक बेहतर मॉडल विकसित करना महत्वपूर्ण रहता है ।
इस अध्ययन में, हमने चूहों में रेटिना इस्केमिया को प्रेरित करने के लिए सुइयों और एक क्लैंप के साथ लघु क्षणिक द्विपक्षीय सीसीए ऑक्क्यूज़ेशन (tBCCAO) का उपयोग किया और रेटिना में इस्कीमिक चोटों के विशिष्ट परिणामों का विश्लेषण किया। इस वीडियो में हम टीबीसीएओ प्रक्रिया का प्रदर्शन देंगे।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Atipamezole hydrochloride</td>
			<td>Zenoaq</td>
			<td>Antisedan</td>
			<td>For anti-anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Applied Biosystems 7500 Fast</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>-</td>
			<td>For qPCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butorphanol tartrate</td>
			<td>Meiji Seika Pharma</td>
			<td>Vetorphale</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BZ-II Analyzer</td>
			<td>KEYENCE</td>
			<td>-</td>
			<td>For an image merge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BALB/cAJc1</td>
			<td>CLEA</td>
			<td>-</td>
			<td>Mouse strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Actin (8H10D10) Mouse mAb</td>
			<td>CST</td>
			<td>3700</td>
			<td>For western blot</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clamp Forcep</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>WPI 500451</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont forceps #5</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI solution</td>
			<td>Dojindo</td>
			<td>340-07971</td>
			<td>For IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Envisu SD-OCT system</td>
			<td>Leica</td>
			<td>R4310</td>
			<td>For OCT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-dextran</td>
			<td>Merk</td>
			<td>FD2000S</td>
			<td>For retinal blood perfusion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>KEYENCE</td>
			<td>BZ-9000</td>
			<td>For fluorescence detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gatifloxacin hydrate</td>
			<td>Senju Pharmaceutical</td>
			<td>Gachifuro</td>
			<td>For anti-bacterial infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP Monoclonal Antibody (2.2B10)</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>13-0300</td>
			<td>For IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Marukan</td>
			<td>RH-200</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HIF-1&#945; (D1S7W) XP Rabbit mAb</td>
			<td>CST</td>
			<td>36169</td>
			<td>For western blot</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageQuant LAS 4000 mini</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>-</td>
			<td>For chemiluminescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Sandoz K.K</td>
			<td>SANDOZ</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome Tissue-Tek TEC 6</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>-</td>
			<td>For sectioning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine</td>
			<td>Orion Corporation</td>
			<td>Domitor</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Handaya</td>
			<td>HS-2307</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PuREC</td>
			<td>MAYO Corporation</td>
			<td>-</td>
			<td>For ERG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91460-11</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hyaluronate</td>
			<td>Santen Pharmaceutical</td>
			<td>Hyalein</td>
			<td>For eye lubrication</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide/Penylephrine hydrochloride</td>
			<td>Santen Pharmaceutical</td>
			<td>Mydrin-P</td>
			<td>For mydriasis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 silk suture</td>
			<td>Natsume</td>
			<td>E12-60N2</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of ischemic retinal injury induced by transient bilateral common carotid artery occlusion

मधुमेह रेटिनोपैथी, रेटिना नसों या धमनियों के ऑक्सक्यूशन और नेत्र इस्केमिक सिंड्रोम जैसे विविध संवहनी रोग रेटिना इस्केमिया का कारण बन सकते हैं। रेटिना इस्केमिया के रोग तंत्र की जांच करने के लिए, प्रासंगिक प्रयोगात्मक मॉडल विकसित करने की आवश्यकता है। शारीरिक रूप से, एक मुख्य रेटिना रक्त आपूर्ति पोत नेत्र धमनी (ओपीए) है और ओपीए आम कैरोटिड धमनी (सीसीए) की आंतरिक कैरोटिड धमनी से निकलती है। इस प्रकार, सीसीए के व्यवधान प्रभावी रूप से रेटिना इस्केमिया का कारण बन सकता है । यहां, हमने क्षणिक द्विपक्षीय आम कैरोटिड धमनी ऑक्क्लूज़ियन (tBCCAO) द्वारा रेटिना इस्केमिया का एक माउस मॉडल स्थापित किया ताकि 6-0 रेशम टांके के साथ सही सीसीए को बांधा जा सके और बाएं सीसीए को एक क्लैंप के माध्यम से 2 सेकंड के लिए क्षणिक रूप से occlude किया जा सके, और पता चला कि tBCCAO तीव्र रेटिना इस्केमिया को प्रेरित कर सकता है जिससे रेटिन बेकार हो सकता है। वर्तमान विधि केवल शल्य सुई और एक क्लैंप का उपयोग करके सर्जिकल उपकरणों पर निर्भरता को कम करती है, अप्रत्याशित पशु मृत्यु को कम करने के लिए ऑक्सीक्लयूजन समय को छोटा करती है, जो अक्सर मध्य मस्तिष्क धमनी ऑक्सीलसेशन के माउस मॉडल में देखा जाता है, और आम रेटिना इस्कीमिक निष्कर्षों की प्रजनन क्षमता बनाए रखता है। मॉडल का उपयोग चूहों में इस्कीमिक रेटिनोपैथी के रोगविज्ञान की जांच करने के लिए किया जा सकता है और आगे वीवो दवा स्क्रीनिंग में इसका उपयोग किया जा सकता है।

2 मिनट के लिए फिटसी-डेक्सट्रान के प्रणालीगत परिसंचरण के बाद, नकली संचालित चूहों और टीबीसीसीएओ संचालित चूहों में बाएं और दाएं रेटिना के रेटिना वैक्यूल्चर की जांच की गई(अनुपूरक चित्रा 1)। फिटसी-डेक...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion at JoVE.com

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

यहां, हम सरल टांके और एक क्लैंप का उपयोग करके क्षणिक द्विपक्षीय आम कैरोटिड धमनी ऑक्क्लुज़ेशन द्वारा रेटिना इस्केमिया के माउस मॉडल का वर्णन करते हैं। यह मॉडल हृदय असामान्यताओं के कारण रेटिना इस्केमिया के रोग तंत्र को समझने के लिए उपयोगी हो सकता है।

क्षणिक द्विपक्षीय आम कैरोटिड धमनी Occlusion द्वारा प्रेरित इस्कीमिक रेटिना चोट का एक मुरीन मॉडल

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

आंशिक Ligation द्वारा अशांत प्रवाह प्रेरित माउस मन्या धमनी में Atherosclerosis और मन्या endothelium से एक शाही सेना के अलगाव की सरल विधि का एक माडल

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

फोकल मस्तिष्क ischemia के लिए प्रारंभिक इस्केमिक सहिष्णुता पैदा करने के लिए एक पर्याप्त शर्त प्रोत्साहन के रूप में द्विपक्षीय आम मन्या धमनी आड़

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Endothelin-1 प्रेरित मध्य चूहा में लेजर डॉपलर flowmetry मार्गदर्शन के साथ ischemic स्ट्रोक के लिए मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

वयस्क माउस शिरापरक उच्च रक्तचाप आदर्श: बाहरी गले नस सम्मिलन के लिए आम मन्या धमनी।

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Ferric क्लोराइड प्रेरित कैरोटिड धमनी और अन्त्रपेशी पोत पर घनास्त्रता माउस मॉडल

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

आयु वर्ग के चूहों में आम मन्या धमनी आड़ साथ स्थायी दूरस्थ मध्य मस्तिष्क प्रदर्शन का अध्ययन करने के लिए निरंतर विकलांगता के साथ cortical Ischemia

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats

P10 चूहे में नवजात स्ट्रोक के क्षणिक मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature ...

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

Vivo में खरगोश को जीन हस्तांतरण आम मन्या धमनी Endothelium

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

आम मन्या धमनी के लिए Jugular नस में टिकाऊ Transgene अभिव्यक्ति का एक खरगोश मॉडल भ्रष्टाचार

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

चरण कन्ट्रास्ट चूहे में चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग आम मन्या धमनी

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...