Name: a murine model of ischemic retinal injury induced by transient bilateral common carotid artery occlusion
Uploaded: 2020-11-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Grants-in-Aid for Scientific Research (KAKENHI) (18K09424 til Toshihide Kurihara og 20K18393 til Yukihiro Miwa) fra Kunnskapsdepartementet, kultur, sport, vitenskap og teknologi (MEXT).

Alle metoder som er beskrevet her har blitt godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) av Keio University School of Medicine.
1. Fremstilling av kirurgiske instrumenter og dyr
<ol><li>Autoklav kirurgiske instrumenter og holde dem i 70% etylalkohol. Før hver nye kirurgiske prosedyre, rengjør kirurgiske instrumenter forsiktig ved hjelp av 70% etylalkohol.</li>
	<li>Forbered hann BALB/cAJc1-mus (6 uker gammel, 26-28 kg) i et spesifikt patogenfritt (SPF) rom for å opprett...

I studien har vi vist at tBCCAO, ved hjelp av enkle suturer og en klemme, kan indusere retinal iskemi og tilhørende retinal dysfunksjon. Videre har vi demonstrert vår nåværende protokoll for utvikling av en musemodell av retinal iskemi er enklere og raskere i forhold til andre tidligere protokoller for utvikling av retinal iskemisk skade modeller2,3,7.
Anatomisk kan venstre og høyre cerebrale art...

Netthinnen er et nevrosensorisk vev for visuell funksjon. Siden en betydelig mengde oksygen er nødvendig for visuell funksjon, er netthinnen kjent som en av de høyeste oksygen krevende vev i kroppen1. Netthinnen er utsatt for vaskulære sykdommer som oksygen leveres gjennom blodårene. Ulike typer vaskulære sykdommer, som diabetisk retinopati og retinal blodkar (årer eller arterier) okklusjon, kan indusere retinal iskemi. For å undersøke patologiske mekanismer av retinal iskemi anses reproduserbare og klinisk relevante eksperimentelle modeller av retinal iskemi nødvendig. Midt cerebral arterie okklusjon (MCAO) ved innsetting av en intraluminal filament er den mest generelt benyttede metoden for utvikling av in vivo gnagermodeller av eksperimentell cerebraliskemi 2,3. På grunn av nærheten til oftalmisk arterie (OpA) til MCA, brukes MCAO-modeller også samtidig til å forstå patofysiologien til retinal iskemi4,5,6. For å indusere cerebral iskemi sammen med retinal iskemi, er lange filamenter vanligvis satt inn gjennom snitt av den vanlige halspulsåren (CCA) eller den ytre halspulsåren (ECA). Disse metodene er vanskelige å utføre, krever lang tid for å fullføre operasjonen (over 60 minutter for en mus), og fører til høye variasjoner i resultatene etter operasjonen7. Det er fortsatt viktig å utvikle en bedre modell for å forbedre disse bekymringene.
I denne studien brukte vi ganske enkelt kort forbigående bilateral CCA-okklusjon (tBCCAO) med nåler og en klemme for å indusere retinal iskemi hos mus og analyserte typiske resultater av iskemiske skader i netthinnen. I denne videoen vil vi gi en demonstrasjon av tBCCAO-prosedyren.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Atipamezole hydrochloride</td>
			<td>Zenoaq</td>
			<td>Antisedan</td>
			<td>For anti-anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Applied Biosystems 7500 Fast</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>-</td>
			<td>For qPCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butorphanol tartrate</td>
			<td>Meiji Seika Pharma</td>
			<td>Vetorphale</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BZ-II Analyzer</td>
			<td>KEYENCE</td>
			<td>-</td>
			<td>For an image merge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BALB/cAJc1</td>
			<td>CLEA</td>
			<td>-</td>
			<td>Mouse strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Actin (8H10D10) Mouse mAb</td>
			<td>CST</td>
			<td>3700</td>
			<td>For western blot</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clamp Forcep</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>WPI 500451</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont forceps #5</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI solution</td>
			<td>Dojindo</td>
			<td>340-07971</td>
			<td>For IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Envisu SD-OCT system</td>
			<td>Leica</td>
			<td>R4310</td>
			<td>For OCT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-dextran</td>
			<td>Merk</td>
			<td>FD2000S</td>
			<td>For retinal blood perfusion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>KEYENCE</td>
			<td>BZ-9000</td>
			<td>For fluorescence detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gatifloxacin hydrate</td>
			<td>Senju Pharmaceutical</td>
			<td>Gachifuro</td>
			<td>For anti-bacterial infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP Monoclonal Antibody (2.2B10)</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>13-0300</td>
			<td>For IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Marukan</td>
			<td>RH-200</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HIF-1&#945; (D1S7W) XP Rabbit mAb</td>
			<td>CST</td>
			<td>36169</td>
			<td>For western blot</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageQuant LAS 4000 mini</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>-</td>
			<td>For chemiluminescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Sandoz K.K</td>
			<td>SANDOZ</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome Tissue-Tek TEC 6</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>-</td>
			<td>For sectioning</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine</td>
			<td>Orion Corporation</td>
			<td>Domitor</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Handaya</td>
			<td>HS-2307</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PuREC</td>
			<td>MAYO Corporation</td>
			<td>-</td>
			<td>For ERG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91460-11</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hyaluronate</td>
			<td>Santen Pharmaceutical</td>
			<td>Hyalein</td>
			<td>For eye lubrication</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide/Penylephrine hydrochloride</td>
			<td>Santen Pharmaceutical</td>
			<td>Mydrin-P</td>
			<td>For mydriasis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 silk suture</td>
			<td>Natsume</td>
			<td>E12-60N2</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of ischemic retinal injury induced by transient bilateral common carotid artery occlusion

Ulike vaskulære sykdommer som diabetisk retinopati, okklusjon av retinale årer eller arterier og okulært iskemisk syndrom kan føre til retinal iskemi. For å undersøke patologiske mekanismer av retinal iskemi, må relevante eksperimentelle modeller utvikles. Anatomisk, en hoved retinal blodtilførselsfartøy er oftalmisk arterie (OpA) og OpA stammer fra den indre halspulsåren i den vanlige halspulsåren (CCA). Dermed kan forstyrrelse av CCA effektivt forårsake retinal iskemi. Her etablerte vi en musemodell av retinal iskemi ved forbigående bilateral felles halspulsåren okklusjon (tBCCAO) for å knytte riktig CCA med 6-0 silkesuturer og å okkludere venstre CCA forbigående i 2 sekunder via en klemme, og viste at tBCCAO kunne indusere akutt retinal iskemi som fører til retinal dysfunksjon. Den nåværende metoden reduserer avhengigheten av kirurgiske instrumenter ved bare å bruke kirurgiske nåler og en klemme, forkorter okklusjonstid for å minimere uventet dyredød, som ofte ses i musemodeller av midtre cerebral arterie okklusjon, og opprettholder reproduserbarhet av vanlige retinale iskemiske funn. Modellen kan brukes til å undersøke patofysiologien til iskemiske retinopatier hos mus og videre kan brukes til in vivo narkotikascreening.

Etter systemisk sirkulasjon av FITC-dextran i 2 minutter ble retinale vaskulaturer i venstre og høyre netthinnen i de sham-opererte musene og tBCCAO-opererte mus undersøkt (supplerende figur 1). FITC-dextran var fullt synlig i begge netthinnen i de sham-opererte musene og venstre netthinnen i de tBCCAO-opererte musene, mens den var delvis påviselig i høyre netthinnen i de tBCCAO-opererte musene.
Etter tBCCAO ble øyelokk hengende undersøkt (figur 2</s...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion at JoVE.com

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

Her beskriver vi en musemodell av retinal iskemi ved forbigående bilateral felles halspulsåren okklusjon ved hjelp av enkle suturer og en klemme. Denne modellen kan være nyttig for å forstå de patologiske mekanismene i retinal iskemi forårsaket av kardiovaskulære abnormiteter.

En murin modell av iskemisk retinal skade indusert av forbigående bilaterale felles halspulsåren okklusjon

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

Bilateral Common Carotisar Okklusjon som en Tilstrekkelig preconditioning Stimulus å bevege Tidlig iskemisk Toleranse for Focal Cerebral iskemi

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Endotelin-1 Induced Middle Cerebral arterieokklusjon Modell for iskemisk slag med laser Doppler Flowmetry Veiledning i Rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

Adult Mouse venøs hypertensjon Modell: arteria carotis communis til ekstern jugularvenen Anastomose.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Jernklorid-indusert tromboser Mouse Model på arteria carotis og mesenterium Vessel

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Utføre Permanent Distal Middle Cerebral med arteria carotis communis okklusjon i eldre rotter å studere kortikal iskemi med vedvarende Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats

Transient Middle Cerebral arterietilstoppelsesemodell av Neonatal Stroke i P10 Rats

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature ...

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

I Vivo Genoverføring til kaninen felles arteria carotis endotelet

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

En kanin modell av slitesterk Transgene uttrykk i vena jugularis til vanlige arteria carotis Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

Fase kontrast magnetisk resonans Imaging i rotte carotis communis

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...